热休克蛋白70表达对未成熟心肌和心肌间质的保护作用

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的保护作用.方法 健康新生长耳大白兔30只随机分为5组.对照组:腹腔注射生理盐水0.4 ml 24 h后取离体心脏,建立Langendorff离体心脏灌注模型;E4h、E12h、E24h、E48h组,腹腔注射去甲肾上腺素,4、12、24、48 h后分别取离体心脏,方法同对照组.测定心肌细胞中HSPT0含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构.结果 E24h组与其他各组比较,HSPT0含量明显增高(P＜0.01),MWC(72.48±1.36)低于其他各组(P＜0.05),ATP含量(11.64±1.87)、SOD活性(235.83±12.30)、心肌线粒体Ca2+-AT-Pase活性(18.46±1.95)、[ATP]m(106.26±9.42),HP含量(6.45±1.53)优于其他各组(P＜0.01),MDA含量(1.17±0.12)、CK(57.38±4.75),LDH漏出率(37.28±3.26)、心肌细胞内Ca2+含量(2.54±0.34)、心肌线粒体Ca2+含量(38.37±3.61)、ET含量(76.84±10.37)低于其他各组(P＜0.01),心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻.结论 腹腔注射去甲肾上腺素24 h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达,一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌和心肌间质的缺血再灌注损伤.     

大鼠血红素加氧酶-1基因转染对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的 观察重组腺相关病毒介导大鼠血红素加氧酶-1基因转染对大鼠离体心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠30只随机分成3组,对照组(C组,n=6),缺血再灌注组(I/R组,n=12),腺相关病毒介导血红索加氧酶-1基因组(A-r组,n=12).基因转染3个月后,建立大鼠离体心脏Langendorff灌流模型,C组持续灌注100 min,其他各组均平衡15 rain,停灌40min与再灌注45 min,记录冠脉流量(CF),测定冠脉流出液肌酸激酶(CK)活性,测定再灌注后45 min时的心肌心肌组织超氧化物岐化酶(SOD)活性活性及丙二醛(MDA)含量,同时取每组大鼠心肌检测梗死面积、心肌细胞凋亡率以及心肌组织bax、bcl-2蛋白表达量.结果 离体心肌Langendorff灌注后,与I/R组比较,A-r组在复灌后冠脉流出液CK活性降低(P＜0.01),复灌后45min后心肌MDA含量降低(P＜0.01),SOD活性增高(P＜0.01),梗死面积较小(P＜0.01),心肌组织bax表达量、心肌细胞凋亡率均显著下降,心肌组织bel-2表达量明显增加(P＜0.01).结论 重组腺相关病毒血红素加氧酶1基因转染心肌后,可抑制离体缺血再灌注心肌细胞凋亡和增强心肌抗氧化能力,对大鼠离体心肌缺血再灌注损伤有显著保护作用.     

大鼠心肌组织中热休克蛋白70水平与NO、NO合酶表达以及心肌细胞凋亡的关系

目的 探讨离体大鼠心肌组织中热休克蛋白70(HSP70)水平与NO、NO合酶(NOS)表达以及心肌细胞凋亡的关系.方法 将Wistar大鼠分为2组,实验组腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素,24 h后取离体心脏,灌注Histidine-trytophan-ketoglurate(HTK)液,置于4℃HTK液中保存3 h,然后以Krebs-Henseleit(K-H)液行Langendorff灌流2 h;对照组腹腔注射蒸馏水0.5 ml,24 h后取离体心脏,冷保存和Langendorff灌流同实验组.灌流结束后,取心肌组织,测定其HSP70、NO和NOS的含量以及心肌细胞凋亡指数.结果 实验组心肌组织中HSP70、NO和NOS的含量分别为(17.8±1.8)%、(8.7±1.7)μmol/g组织和(0.91±0.18)IU/mg组织,均明显高于对照组(P<0.01),而心肌细胞凋亡指数为(5.6±1.0)%,明显低于对照组(P<0.01).HSP70含量与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.946,P<0.01),与NO含量(r=0.087,P<0.01)和NOS含量(r=0.953,P<0.01)呈正相关.结论 心肌组织中HSP70与NO和NOS的表达呈正相关,而与心肌细胞的凋亡呈负相关,促进HSP70的表达可能有利于抑制心肌细胞凋亡.     

热休克蛋白70表达对未成熟心肌保护作用的实验研究

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在未成熟心肌中的表达规律和对未成熟心肌的影响。方法健康新生长耳大白兔30只随机分为5组。对照组：腹腔注射生理盐水0．4ml 24h后取离体心脏，建立Langendorff离体心脏灌注模型；E4h、E12h、E24h、E48h组，腹腔注射去甲肾上腺素，4、12，24、48h后分别取离体心脏，方法同对照组。测定心肌细胞中HSP70含量、血流动力学指标、生化指标，并观察心肌超微结构。结果HSP70含量如。组明显高于其他各组，血流动力学、生化指标均优于其他各组（P〈0．01），心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻。结论腹腔注射去甲肾上腺素24h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达，一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌缺血再灌注损伤。     

缺血预处理对大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制

目的 观察心肌细胞凋亡及其机制在大鼠心肌缺血再灌注损伤和缺血预处理中的作用.方法 将40只大鼠随机分成4组:对照组(A组)、60min缺血再灌注组(B组)、120min缺血再灌注组(C组)、缺血预适应组(D组);应用TUNEL法检测心肌组织的凋亡;心脏病理改变用光学和电子显微镜观察;检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、bcl-2和bax因子.结果 D组心肌细胞凋亡指数(11.36±4.23)%明显优于B组(18.14±7.69)%和C组(15.59±6.31)%,D组TNF-α、bel-2和bax的表达也明显优于B、C二组.结论 缺血预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞的凋亡;TNF-α、bcl-2和bax表达的抑制与缺血预处理保护机制有关.     

金属硫蛋白对未成熟心肌的保护作用

目的探讨金属硫蛋白(MT)在未成熟心肌中的表达对未成熟心肌的影响。方法采用Langendorff兔离体心脏灌注模型,分为4组:对照组(C),腹腔注射蒸馏水0.3ml,注射后24h取离体心脏,灌注KH液15min转为工作心15min,全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;E12h组、E24h组、E48h组分别腹腔注射3.6%ZnSO412、24和48h后取离体心脏,常规建立Langendorff灌注模型,方法同C组。检测心肌细胞中MT含量、血流动力学指标、生化指标和心肌超微结构。结果MT含量在E24h(49.42±2.63)、E48h组(47.86±2.54)与C(25.76±1.20)、E12h组(28.77±1.45)比较明显增高(P<0.01);E24h、E48h组血流动力学指标恢复优于C组和E12h组(P<0.05),生化指标优于C组和E12h组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组和E12h组明显减轻。结论MT的表达可减轻未成熟心肌的缺血再灌注损伤。     

受体诱导一氧化碳经PI3 K/Akt信号途径抑制冷缺血再灌注诱导的移植心细胞凋亡

目的 观察受体诱导一氧化碳(CO)对移植心冷缺血再灌注(I/R)损伤中细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 以BALB/C小鼠建立同系移植心冷I/R损伤模型.受体麻醉前3 h以二氯甲烷(MC)500 mg/kg灌胃诱导CO(MC组,n=12),或橄榄油灌胃(IR组,n=12);在MC组的基础上受体在移植心恢复血供前1 h腹腔注射PI3K抑制剂LY294002(40 mg/kg,LY组,n=10)或二甲亚砜(DMSO组,n=10);检测移植后3、24 h移植心细胞凋亡指数(AI)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白、bcl-2与bax蛋白表达比值;设正常对照组(N组,n=5).结果 受体以MC灌胃后血液中碳氧血红蛋白(COHb)浓度与心肌组织CO含量均在3 h达到峰值,分别为(9.82±0.84)%和(2.25±0.08)pmol/mg;与IR组比较,MC组明显降低移植心AI[3 h:(8.65±2.01)%比(19.28±4.94)%,P＜0.01;24 h:(5.82±2.36)%比(10.54±3.66)%,P＜0.05]、激活Akt蛋白(3 h:P＜0.01;24 h:P＜0.05)、上调bcl-2/bax比值(3 h:1.97±0.16比0.46±0.07,P＜0.01;24 h:1.89±0.10比0.51±0.04,P＜0.01);与MC组比较,LY组明显增加AI[3 h:(17.95±4.92)%,P＜0.01;24 h:(9.75±3.14)%;P＜0.01]、抑制Akt蛋白激活(P＜0.01)、下调bcl-2/bax比值(3 h:0.47±0.06,P＜0.01;24 h:0.52±0.03,P＜0.01);DMSO组与MC组的各个指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 受体诱导C0能明显抑制冷I/R诱导的移植心细胞凋亡,其机制可能与通过PI3K/Akt信号途径上调bcl-2/bax比值有关.     

灯盏细辛对大鼠肾冷缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的 观察中药灯盏细辛对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤(IRI)中肾脏细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法 封闭群SD大鼠36只,随机分为3组,每组12只.假手术组(A组),对照组(B组),实验组(C组).药物应用:C组术前15 min,灯盏细辛注射液按1.2 ml/100 g通过尾静脉注射,A、B组按相应剂量注射生理盐水.动物手术:A组,切除右肾.B、C组采用的是冷IRI模型,3组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测.透射电镜检查肾组织形态学,免疫组织化学检测凋亡相关的基因bcl-2与bax的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果 (1)超微结构检查(透射电镜):A组结构正常;B组细胞呈损伤形态:线粒体肿胀,微绒毛减少,胞质内空泡形成,部分细胞核可见凋亡迹象.C组病变较B组显著减轻.(2)免疫组织化学蛋白阳性染色指数(PI):缺血再灌注后B、C组的bcl-2表达分别为(21.21±1.18)％和(35.52±1.94)％,较A组(4.95±0.77)％均增多(P＜0.05),B组低于C组(P＜0.05).B、C组的bax表达分别为(58.55±2.90)％和(45.90±3.14)％,较A组(4.67±0.67)％增多(P＜0.05),而且B组高于C组(P＜0.05).A组的蛋白阳性染色指数的比值bcl-2/bax为(1.06±0.07)高于B组(0.35±0.03)和C组(0.78±0.07,P＜0.05),而且C组高于B组(P＜0.05).(3)细胞凋亡检测(TUNEL):细胞凋亡指数B组(28.57±3.58)％和C组(19.99±3.37)％均显著大于A组(2.33±0.42)％(P＜0.01),C 组小于B组(P＜0.01).结论 灯盏细辛减少大鼠肾脏冷IRI诱导的肾脏细胞的凋亡,与调节凋亡相关基因bcl-2与bax表达有关.     

金属硫蛋白对供心细胞凋亡的影响

目的探讨金属硫蛋白(MT)对供心细胞凋亡和凋亡蛋白表达的影响.方法 Wistar大鼠16只,按腹腔注射的药物不同分为2组,每组各8只.对照组:腹腔注射蒸馏水0.5ml,24小时后取离体心脏,灌注HTK心脏停搏液,4℃保存3小时后建立Langendorff灌注模型,灌注重碳酸盐缓冲液(KH)2小时;实验组:腹腔注射3.6% ZnSO4(1.5ml/kg),其余处理同对照组.测定心肌MT含量、心肌细胞凋亡率、琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯、B淋巴细胞瘤/白血病2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2家族Bax蛋白和Fas蛋白的表达.结果实验组与对照组比较,MT含量明显增高(P＜0.01),心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.01),琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段梯光密度明显减弱(P<0.01),Bcl-2表达明显增高,Bax和Fas表达明显减弱(P＜0.01).结论心肌MT可通过调节Bcl-2、Bax和Fas蛋白的表达降低供心心肌细胞凋亡率.     

热休克蛋白70-2基因沉默诱导大鼠精原细胞凋亡及其机制

目的 探讨热休克蛋白(HSP)70-2基因沉默对精原细胞的影响及其机制.方法 构建HSP70-2特异的短发夹RNA(shRNA)质粒载体,并转染大鼠精原细胞;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP70-2 mRNA表达,Western blot检测HSP70-2、Cyclin DI、bcl-2和box蛋白表达,应用流式细胞术分析细胞周期和凋亡.结果 HSP70-2基因沉默组的HSP70-2蛋白表达量为0.93±0.13,明显低于阴性对照组1.31±0.10(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,与转染Scrambled的阴性对照组比较,转染pGenesil-1-HSP70-2重组质粒组的PC3细胞在G1期出现明显细胞周期阻滞和细胞凋亡,G1期阻滞细胞比例为(80.09±2.37)%,凋亡率为(7.44±2.41)%,而阴性对照组分别为(61.85±2.31)%和(1.09±0.57)%(P<0.05).与阴性对照组比较,转染后细胞bcl-2、Cyclin D1表达水平显著降低,而bax表达水平升高.结论 HSP70-2基因沉默能诱导精原细胞凋亡,其机制可能是通过Cyclin D1蛋白调节细胞周期并通过上调box蛋白表达促进细胞凋亡.     

Preclinical evaluation of coronary vascular function after cardioplegia with HTK and different antioxidant additives.

OBJECTIVE: Due to limited resources, improvement of preservation solutions is still of great importance in cardiac transplant surgery. New additives with antioxidant properties were tested with respect to coronary function of isolated rat hearts. METHODS: Bretschneider HTK solution containing none or an antioxidant additive (deferoxamine, trolox or LK 616) was used for 8h cold cardioplegia. After reperfusion with Krebs-Henseleit buffer (KHB), we assessed vascular dilator capacity (bradykinin, adenosine triphosphate, reactive hyperemia), myocardial function (left ventricular developed pressure, heart rate, oxygen consumption) and release of biochemical markers (aspartate aminotransferase, creatine kinase, lactate dehydrogenase, troponin, adenosine). RESULTS: Bradykinin- and adenosine triphosphate-induced vasodilations were largely reduced in hearts stored 8h in traditional HTK as compared to unstored controls. Storage in HTK+LK 616 significantly improved bradykinin-induced vasodilation. Vasodilation toward ATP was best preserved in hearts stored in HTK+deferoxamine. Deferoxamine and trolox, both improved reactive hyperaemic response during reperfusion. Left ventricular pressure development was significantly reduced after 8h cardioplegia, but no difference existed between different cardioplegia groups. Release of biochemical markers of tissue injury was similar in all cardioplegia groups. After storage in HTK+LK 616 (100 microM), however, heart marker release was slightly augmented as compared to HTK. CONCLUSIONS: Despite similar myocardial function and marker release, coronary vascular function after cardioplegic storage may profit by addition of iron chelators (or antioxidants) to traditional HTK solution.     

含钾通道开放剂的HTK液对大鼠心功能以及线粒体结构和功能的影响

目的 观察含钾通道开放剂的供心保存液对心功能以及能量代谢、线粒体呼吸酶活性及超微结构的影响.方法 将SD大鼠分为HTK组、Pi组、5HD组、1098组和5HD+1098组.切取SD大鼠心脏,建立Langendorff灌注模型,平衡10 min,然后按分组进行如下处理:HTK组心脏以Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate液(HTK液)停搏;Pi组心脏以含0.5 mmol/L吡那地尔(Pi)的HTK液停搏;1098组心脏以含0.5 mmol/L Pi和100 μmol/L HMR1098的HTK液停搏;5HD组心脏以含0.5 mmol/L Pi和100 μmol/L五羟葵酸(5HD)的HTK液停搏;5HD+1098组心脏以含0.5 μmol/L Pi、100 μmol/L 5HD和100μmol/L HMR1098的HTK液停搏.停搏后,将心脏置于各组相应的液体(4℃)中保存8 h,然后用含氧的37℃克-亨液(K-H液)再灌注60 min.观察各组平衡末、保存末、再灌注末时的心功能、线粒体呼吸酶活性、心肌ATP含量及心肌细胞线粒体超微结构的改变.结果 Pi组保存末、再灌注末的心功能(心率、左心室舒张末压、左心室发展压和冠状动脉流量)、心肌线粒体呼吸酶(NADH氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶)活性及ATP含量均优于其他各组(P<0.01或P<0.05),同时线粒体的结构改变也最轻.结论 含Pi的HTK液能改善大鼠心脏保存效果;Pi对能量状态的维持以及对线粒体结构与功能的保护可能是其心肌保护的重要机制.     

Histidine‐Tryptophan‐Ketoglutarate Solution With Added Ebselen Augments Myocardial Protection in Neonatal Porcine Hearts Undergoing Ischemia/Reperfusion

Whether modified histidine‐tryptophan‐ketoglutarate (HTK) solution offers myocardial protection to newborn heart has not been documented. The purpose of this study was to compare myocardial protection using HTK added by ebselen with HTK in a piglet model of cardiopulmonary bypass (CPB). Fifteen piglets were randomly assigned to three groups: the control group (C group, n = 5), HTK solution group (HTK group, n = 5), and HTK added by 10 nM ebselen group (HTK+E group, n = 5). Animals in the two experimental groups were placed on hypothermic CPB, after which the ascending aorta had been clamped for 2 h. The control animals underwent normothermic CPB without cardiac arrest. Myocardial antioxidant activities, myocytes apoptosis and mitochondrial structures, as well as the release of cytochrome c and the expression of Bax, Bcl‐2, and HSP72 protein in myocardium were measured. Increased myocardial superoxide dismutase (SOD) and Mn‐SOD activities, decreased TUNEL‐positive cells, and reduced release of cytochrome c were noted in the HTK+E group compared with those in the HTK group (P = 0.021, P = 0.020, P = 0.045, and P = 0.010, respectively). The Bax/Bcl‐2 ratio in the HTK group was significantly higher than that in the C group (P = 0.024). The expression of HSP72 protein and mRNA in the HTK+E group was higher than that in the HTK group (P = 0.039 and P = 0.035, respectively). Mitochondrial score under electron microscope in the HTK+E group was lower than that in the HTK group (P = 0.047). Improved antioxidant defense, reduced myocytes apoptosis, and better preserved mitochondrial structure were observed in the HTK+E group. Ebselen added to HTK provides better myocardioprotection to HTK solution for the neonatal heart.     

持续低流量灌注对离体鼠心的保护作用

目的 比较低温静置保存和持续低流量灌注对离体鼠心的保护作用.方法 将24只SD雄性大鼠随机分成4组(n=6),根据保存技术和保存液的不同分为H1、H2、F1、F2组.4℃条件下,F1、H1组心脏分别浸于FWM液(阜外改良液)和HTK液中保存8 h;F2、H2组心脏以10cm H2O的压力分别持续灌注FWM液和HTK液8 h.比较复灌后各组心功能恢复率、心肌含水量、心肌酶漏出量及光镜心肌结构.结果 复灌后,F1组心脏均未复跳,心肌含水量和肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量分别为(84.1±1.2)%、(16.2±7.4)IU/L、(86.1±10.6)IU/L,明显高于其余3组(P＜0.01).H2组心率、左室发展压、心率室内压乘积、冠脉流量恢复率为(80.2±5.3)%、(77.7±3.4)%、(63.8±3.1)%、(54.6±6.0)%,心肌含水量及心肌酶漏出量要低于其余各组(P＜0.05).结论 持续低流量灌注技术对心肌的保护作用优于低温静置保存技术;HTK液对心肌的保护作用优于FWM液.     

含吡那地尔的心脏保存液对大鼠离体心脏线粒体呼吸功能的影响

目的 探讨含吡那地尔的心脏保存液(HTK液)对大鼠离体心脏线粒体呼吸功能的影响.方法 健康清洁级SD大鼠120只,建立离体心脏Langendorff灌注模型,随机分为5组,HTK组(Ⅰ组)、吡那地尔+HTK液组(Ⅱ组)、吡那地尔+HTK液+5-羟葵酸(5-HD)组(Ⅲ组)、吡那地尔+HTK液+HMR-1098组(Ⅳ组)、吡那地尔+HTK液+HMR-1098+5-HD组(Ⅴ组).K-H液平衡灌注10 min后灌注心脏停搏液:Ⅰ组灌注HTK液;Ⅱ组灌注含吡那地尔0.5 mmol/L的HTK液;Ⅲ组灌注含吡那地尔0.5 mmol/L和5-HD 100μmol/L的HTK液;Ⅳ组灌注含吡那地尔0.5 mmol/L和HMR-1098 100μmol/L的HTK液;Ⅴ组灌注含吡那地尔0.5 mmol/L、5-HD 100μmol/L和HMR-1098 100 μmol/L的HTK液.停搏后取心脏保存于4℃各组相应液体中8 h,然后用37 ℃含氧K-H液再灌注60 min.于平衡灌注10 min(T1)、保存8 h(T2)、复灌60 min(T3)时测定线粒体呼吸功能[3态呼吸(S3)和4态呼吸(S4)的耗氧速率、呼吸控制率(RCR)及磷氧比(P/O)].于T1和T3时收集冠脉流出液测定心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度、肌酸激酶同功酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)的活性.电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组～Ⅳ组RCR、P/O、S3耗氧速率升高,cTnI、CK-MB和LDH的水平降低(P＜0.05).与Ⅱ组比较,Ⅲ组～Ⅴ组RCR、P/O、S3耗氧速率降低,cTnI、CK-MB和LDH的水平升高(P＜0.05).与Ⅲ组比较,Ⅳ组RCR、P/O、S3耗氧速率升高,cTnI、CK-MB和LDH的水平降低,Ⅴ组RCR、P/O、S3耗氧速率降低,cTnI、CK-MB和LDH的水平升高(P＜0.05).与Ⅳ组比较,V组RCR、P/O、S3耗氧速率降低,cTnI、CK-MB和LDH水平升高(P＜0.05).各时点S4耗氧速率组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅱ组心肌细胞损伤较轻,Ⅲ组和Ⅳ组损伤程度相近但重于Ⅱ组,Ⅰ组和Ⅴ组损伤最重.结论 含吡那地尔的HTK液可改善心脏线粒体呼吸功能,减轻心肌损伤,提高心脏保存效果,线粒体ATP敏感性钾通道和细胞膜ATP敏感性钾通道均参与了吡那地尔的心肌保护效应,且线粒体ATP敏感性钾通道发挥主导作用.     

过表达B细胞淋巴瘤/白血病-2对重度创伤性脑损伤大鼠的治疗作用及其机制

目的:观察过表达B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)对重度创伤性脑损伤大鼠神经保护作用。方法:2018年1月至2019年9月,60只SD大鼠采用随机数字法分为对照组、模型组和bcl-2组。对照组和模型组大鼠经脑室注射对照腺相关病毒1×10 11 v.g/只,bcl-2组经脑室注射bcl-2过表达腺相关病毒...