不同月龄自发性高血压大鼠杏仁中央核nNOS免疫阳性神经元的变化

OBJECTIVE: To observe the changes of neuronal nitric oxide synthase (nNOS)-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus of spontaneously hypertensive rats (SHRs). METHODS: Thirty SHRs and 30 Wistar-Koyto rats (WKYs) were sacrificed at the ages of 90, 180, and 360 days respectively to observe the changes of nNOS-immunopositive neurons with ABC immunocytochemical assay. RESULTS: No significant changes were observed in the blood pressure of WKY rats at the specified time points, when SHRs maintained significantly higher blood pressures from 20.8+/-1.1 and 26.3+/-1.0 kPa (P<0.05), gradually increasing during the development of hypertension. The nNOS-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus were of moderate sizes with long intersected nerve fibers. No significant changes were found in WKY rats. The number of the positive neurons decreased with age in SHRs, especially obvious at 360 days (P<0.05), which was significantly different from that in the WKYs (P<0.05). CONCLUSION: The reduction of nNOS-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus of SHRs might accelerate the development of hypertension by modulating the cardiovascular function and sensory transmission.     

大鼠黑质内一氧化氮合酶阳性神经元向杏仁中央核的投射

目的　观察大鼠黑质内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元向杏仁中央核 (CeA)的投射 ,为进一步阐明一氧化氮 (NO)在黑质与CeA的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法　用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)法结合辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪技术 ,观察大鼠黑质内NOS阳性神经元向CeA的投射。结果　同侧黑质内有NOS/HRP双标记阳性神经元 ,主要分布在黑质致密部。结论　黑质内有NOS阳性神经元向CeA投射     

ABC法显示大鼠脑内nNOS免疫阳性神经元

目的　为进一步研究脑内神经源型NO合酶 (nNOS)免疫阳性神经元的表达提供可靠的实验方法。方法　ABC免疫细胞化学方法。结果　大鼠大脑皮质、尾壳核、海马、中脑、延髓、小脑等中枢神经系统的各个部位均有nNOS免疫阳性神经元和神经末梢出现 ,nNOS免疫阳性神经元胞体呈棕褐色 ,细胞核处颜色浅淡 ,突起有一个或多个 ;nNOS免疫阳性神经纤维呈棕色串珠状 ,且交错分布。结论　ABC法是显示NOS亚型nNOS表达的可靠方法 ,但一抗浓度不宜过高 ,而且需延长抗体孵育的时间。     

糖尿病大鼠下丘脑室旁核nNOS免疫阳性神经元的变化

OBJECTIVE: To explore the role of nitric oxide in the development of diabetes mellitus by observing the changes of neuronal nitric oxide synthase (nNOS)-immunoreactive (nNOS-ir) neurons in the paraventricular hypothalamic nucleus (PVN) of diabetic rats. METHODS: Diabetic rat models were established by means of intraperitoneal streptozotocin injections. At the end of 2, 7 and 12 weeks after model establishment, tissue sampling was performed and the number of nNOS-ir neurons in PVN were counted and quantitatively analyzed. RESULTS: The number of nNOS-ir neurons in PVN of diabetic rats remained normal 2 weeks after model establishment (P >0.05) but was significantly increased by the time of 7 weeks (P <0.05); at the 12th weeks, the number of nNOS-ir neurons of diabetic group was still greater than that of the control group (P <0.05). CONCLUSION: The number of nNOS-ir neurons in PVN increases significantly in middle and advanced stages of diabetes, suggesting the possible relations between the nNOS activity changes in PVN and the changes in cerebral neuroendocrine and adrenal activity in diabetic condition.     

自发性高血压大鼠不同时期肾脏中一氧化氮合酶的变化

目的；观察自发性高血压大鼠（SHR）高血压产生不同时期一氧化氮合酶（NOS）各亚型在肾脏中的分布及变化，方法：应用免疫组织化学方法用NOS亚型的3种特异抗体（NOS1，NOS2和NOS3）分别对SHR高血压产生各时期肾脏NOS各亚型（bNOS,eNOS,iNOS)的表达进行检测。结果：在正常对照组Wistar Kyoto(WKY)中，NOS1主要在球旁斑细胞中有强阳性反应，而在其它部位如内髓收集管，内髓升支粗段，肾小球和血管中未发现阳性反应，在第4周，第9周和第14周染色无明显变化，与WKY比较，SHR在第4周时bNOS表达明显增多，第9周bNOS阳性细胞数集依然增多，但不如第4周时明显，在第14周时WKY与SHR未见明显区别，而两种大鼠肾脏中eNOS和iNOS的变化无显著差异，结论：SHR不同时期一氧化氮合酶（NOS）各亚型在肾脏中的分布及变化可能参与高血压发病机制，球旁斑细胞内生成的NO参与调节球旁区的血管舒张反应。     

糖尿病大鼠下丘脑室旁核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的观察糖尿病大鼠下丘脑室旁核(PVN)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元数目的变化,探讨PVN内NO在糖尿病发展中的作用机制。方法建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,于第2、7、12周末取脑组织进行ABC免疫细胞化学法染色,定量分析PVN内nNOS免疫阳性神经元数目变化。结果2周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目与对照组相比无显著差异(P>0.05);7、12周时糖尿病组大鼠PVN内nNOS免疫阳性神经元数目显著高于对照组(P<0.05)。结论PVN内nNOS免疫阳性神经元数目在糖尿病中、后期明显升高,糖尿病状态下PVN内nNOS活性改变可能与糖尿病神经内分泌及肾上腺素能途径改变有关。     

雌性大鼠动情周期杏仁基底核内nNOS阳性神经元的变化

目的研究雌性大鼠动情周期杏仁基底核内神经元性一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的表达变化。方法成年雌性大鼠32只被分成动情间期、动情前期、动情期和动情后期4组,冰冻切取脑片进行SABC免疫组织化学染色,并结合图像分析技术比较各组间杏仁基底核内nNOS阳性神经元的表达变化。结果①在杏仁核内,杏仁前区、杏仁基底核、杏仁外侧核及皮质内侧核是nNOS阳性细胞表达的主要区域,此外杏仁中央核及杏仁皮层核也有一定数量的nNOS阳性细胞表达。②杏仁基底核上的nNOS阳性细胞数在不同动情周期有明显变化:动情前期和动情后期明显多于动情期及动情间期。结论体内雌激素水平可能影响杏仁核内部分核团的nNOS阳性细胞的表达。     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向中央杏仁核的投射

目的：观察大鼠中缝背核（DR）内一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元向中央杏仁核（CeA)的投射，为进一步阐明一氧化氮（NO）参与情绪，疼痛，内脏心血管活动的中枢调节机制提供形态学资料。方法：用黄递酶（NADPH-d）组织化学染色结合辣根过氧化酶（HRP）逆和追踪技术，观察大鼠DR内向CeA投射的NOS阳性神经元的分布与形态，结果：DR内有一定数目的NOS／HRP双标阳性神经元，主要分布在外侧部与背．正中部。结论：DR内有部分NOS阳性神经元向CeA投射，提示NO在DR至CeA上行感觉传导通路中起重要的神经递质作用。     

非洛地平对自发性高血压大鼠一氧化氮及诱导性一氧化氮合酶的影响

目的　观察非洛地平 (Felodipine)对自发性高血压大鼠一氧化氮 (NO)及诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的影响。方法　取自发性高血压大鼠 2 2只 ,随机分为生理盐水组、Felodipine正常剂量组及其低剂量组 ,每天灌胃一次 ,连续 15天 ,末次给药后摘眼球取血以及取动物脏器 ,分别测定血清NO和iNOS的含量。结果　灌胃 15天后 ,Felodipine正常剂量组的NO含量为 (12 7± 7 5 ) μmol/L ,与生理盐水组 (10 2 3± 4 6 ) μmol/L相比 ,差异有明显显著性 (P <0 0 1) ;Felodipine低剂量组NO含量为 (119± 8 3) μmol/L ,与生理盐水组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,Felodipine正常剂量组的组织iNOS活性降低 ,为 1 17± 0 2 3,与生理盐水组 (2 2 5± 0 94 )相比 ,差异显著 (P <0 0 5 ) ,与Felodipine低剂量组 (1 76± 0 5 7)相比 ,差异亦显著 (P <0 0 5 )。结论　Felodipine组可有效地在降低血压的同时 ,提高血清NO的含量 ,并且对抗血压增高所造成的iNOS的活性增强 (或二者互为因果 )。     

自发性高血压大鼠室周灰质中NOS阳性神经元的形态学观察

【目的】探讨自发性高血压大鼠(SHR)脑室与中脑水管周围灰质中一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化及其与高血压病的可能关系。【方法】选10月龄成年SHR大鼠12只,同龄正常血压对照大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)12只,灌注固定后取脑和脑干作冠状位冰冻切片,行NADPH-d组织化学方法染色,光镜观察和图象分析。【结果】(1)NOS阳性神经元主要分布在中脑水管周围灰质(PAG)的背外侧部,下丘脑第三脑室(3V)室周灰质,以及第四脑室(4V)室底灰质中;在3V周围,NOS阳性神经元散在分布,并可区分为室管膜下(远位)、膜内和膜上3种;左、右侧脑室周围未见阳性神经元分布。(2)SHR组上述部位的NOS阳性神经元数量较少,且平均灰度值增加(染色变浅),两组间比较具有统计学意义(P<0.05)。【结论】SHR室周灰质中NOS阳性神经元数量减少、NOS水平下降,NO合成减少,可能参与了高血压病的发病过程。     

大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶神经元的分布和超微结构特征

目的 观察大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的分布以及阳性神经元的超微结构特征.方法 取健康成年SD大鼠,ABC法显示nNOS免疫阳性神经元,包埋前染色方法对阳性细胞进行免疫电镜观察.结果 光镜下,nNOS免疫阳性细胞呈棕褐色,胞体及突起清晰,纹状体外侧区阳性细胞较多,内侧区较少.各区内阳性细胞以中、小型细胞为主,且大多数为中型细胞,小型细胞次之,大型细胞最少.透射电镜观察nNOS阳性神经元核大,胞浆少,呈中间神经元的特征;阳性颗粒呈黑色斑块样,在胞体内,可见小的阳性物质分布于胞核周围或者细胞膜内侧均无膜样结构包裹,大的团块样阳性物质主要存在于胞浆,有清晰的单层膜样结构包裹,亦可见部分无膜样结构包裹的大的阳性物质;在树突和轴突集中的部位亦可见免疫阳性物质,但并不在突起终末的囊泡内;脑组织内微血管壁旁的免疫阳性终末较多见,其突起毗邻血管外膜.结论 大鼠纹状体nNOS免疫阳性神经元以中、小型细胞为主,符合中间神经元的特征,nNOS阳性物质分布于胞质和突起,大块物质多有膜性结构包裹,小块和部分大块阳性物质以及位于轴树突内的无膜性结构包裹,这可能与其功能状态有关.     

代谢综合征大鼠下丘脑室旁核神经元型一氧化氮合酶的表达

目的:观察代谢综合征大鼠下丘脑室旁核(para-ventricular hypothalamic nucleus,PVN)内神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达的变化,探讨PVN内一氧化氮(nitric oxide,NO)在代谢综合征发病中的作用机制。方法:高脂高糖诱导大鼠代谢综合征24周,应用免疫组织化学染色方法观察代谢综合征大鼠PVN内nNOS的表达。结果:与对照组相比较,模型组PVN内nNOS表达明显增加(P<0.01)。结论:PVN内nNOS的表达在代谢综合征大鼠中明显升高,nNOS活性改变可能与代谢综合征神经内分泌改变有关。     

大鼠中缝背核内一氧化氮合酶阳性神经元向伏隔核的投射

目的:观察大鼠中缝背核内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元向伏隔核的投射,为阐明一氧化氮(NO)在中缝背核与伏隔核的纤维联系中的作用提供有价值的形态学依据。方法:用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH d)法结合辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法,观察大鼠中缝背核内NOS阳性神经元向伏隔核的投射。结果:在中缝背核内观察到HRP/NOS双标记神经元,所占比例为5%。结论:中缝背核内有NOS阳性神经元向伏隔核投射。     

剥夺性弱视大鼠视中枢一氧化氮合酶阳性神经元分布与数量的变化

研究单眼剥夺下大鼠视中枢呈氧化氮合酶阳性神经元的变化。方法：用２周龄大鼠缝合其单侧眼睑一月后，造成剥夺弱视动物模型。冠状切取外侧膝状体及这高皮质１７区，工片行尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶组织化学染色，以间接研究ＮＯＳ阳性神经元的变化。结论：生后早期单剥夺可造成大鼠外侧膝状体和视皮质１７区相应层的ＮＯＳ阳性神经元数量下降，活性降低。     

高血压大鼠肾内一氧化氮合酶活性

目的　观察自发性高血压大鼠肾脏内一氧化氮合酶(NOS)活性变化 ,以探讨高血压病的发病机制 .方法　采用 3H-精氨酸转变成 3H-胍氨酸方法测定 NOS活性 .结果　自发性高血压大鼠 (SHR)肾蛋白内神经型 NOS(n NOS)活性(2 1.9± 7.4) k Bq· g- 1明显低于 Wistar Kyoto(WKY)大鼠(4 .32± 9.3) k Bq·g- 1 ,P<0 .0 5 .在乙酰胆碱 (Ach)刺激后 ,SHR肾内内皮型 NOS(e NOS)活性为 (6 7.3± 14.6 ) k Bq·g- 1 ,而 WKY肾内 e NOS则为 (85 .7± 2 3.8) k Bq· g- 1 ,SHR也显著低于 WKY(P<0 .0 5 ) .结论　n NOS和 e NOS活性不足在高血压病的发生和发展过程中可能起一定作用     

芝麻素对自发性高血压大鼠的降压作用及机制

目的:观察芝麻素(Ses)对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并探讨其可能机制。方法:SHR 35只,随机分为SHR模型组、Ses160、80、40 mg/(kg·d)、卡托普利(Cap)30 mg/(kg·d),另设WKY正常对照组,于给药16周后,颈总动脉插管测收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及平均血压(MBP),Griess Reagent法测主动脉中一氧化氮(NO)含量,化学比色法测主动脉中过氧化氢(H2O2)含量,RT-PCR观察主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p22phox及p47phoxmRNA表达。结果:与SHR组相比,Ses160、80 mg/kg组SBP、DBP、MAP均显著降低(P<0.01,P<0.05),主动脉中NO含量显著提高(P<0.01),eNOS mRNA表达显著增加(P<0.01,P<0.05),p22phox、p47phoxmRNA表达显著减少(P<0.01,P<0.05)。Ses各剂量组H2O2含量显著降低(P<0.01)。结论:芝麻素通过上调SHR主动脉中eNOS mRNA的表达,使内皮细胞合成和释放NO增多;下调主动脉NADPH氧化酶p22phox和p47phoxmRNA的表达,使NO活性恢复,发挥降血压的作用。