miR-142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义

目的 观察微小microRNA 142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义。方法 通过组织原位杂交,检测结直肠癌患者组织中miR-142-3p的表达。结果 miR-142-3p主要定位于细胞的胞浆,在癌组织和癌旁组织中miR-142-3p的表达存在差异。结论 miR-142-3p在陕北地区结直肠癌组织与癌旁组织中呈差异表达,有望成为结直肠癌诊断和治疗的潜在靶点。     

miR-495-3p在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:检测miR-495-3p在结直肠癌(CRC)组织和细胞中的表达,探讨miR-495-3p对CRC细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法:采用RT-qPCR检测22对CRC及其癌旁组织和CRC细胞以及正常结肠上皮细胞中miR-495-3p的表达,选取其中差异表达最明显的两组细胞株转染miR-495-3p mimic、miR-495-3p inhibitor以及各自对照组。CCK-8和EdU实验检测细胞增殖能力、Transwell检测细胞迁移能力、流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:CRC组织和细胞中miR-495-3p表达降低(P<0.01)。与对照组相比,转染miR-495-3p mimic后细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05),凋亡细胞增多(P<0.05);转染miR-495-3p inhibitor后细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05),凋亡细胞减少(P<0.05)。结论:miR-495-3p在CRC组织和细胞中低表达,上调miR-495-3p表达后能降低细胞增殖、迁移能力,增加细胞凋亡率,在CRC中扮演着抑癌基因的作用。     

miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法采集行手术治疗的52例结直肠癌患者的癌组织及癌旁正常黏膜组织,实时定量PCR法检测两种组织中miR-30c-1-3p的表达水平并作比较;进一步分析结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者临床特征的关系。结果结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平明显低于癌旁正常黏膜组织（P＜0.05）。结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平与患者有无淋巴结转移及临床分期有关,有淋巴结转移、临床分期Ⅲ~Ⅳ期的患者结直肠癌组织中miR-30c-1-3p表达水平均较低（均P＜0.05）;而与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置、分化程度、浸润深度等均无关（均P＞0.05）。结论miR-30c-1-3p在人结直肠癌组织中表达下调,与有无淋巴结转移、临床分期有关,提示miR-30c-1-3p可能与结直肠癌的转移侵袭相关。     

VEGF-C及VEGFR-3在结直肠癌组织中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组织化学法,检测63例结直肠癌患者(病例组)及20例良性腺瘤及周围正常结肠组织(对照组)中微淋巴管密度(LMVD)及VEGF-C、VEGFR-3的表达;分析LMVD、VEGF-C和VEGFR-3表达与临床各病理参数之间的关系。结果病例组LMVD高于对照组(14.82±4.41 vs 9.56±2.32.P<0.01),病例组中LMVD在有淋巴结转移、TNM分期较高、VEGF-C和VEGFR-3阳性表达的结直肠癌组织中表达较高,差异有统计学意义(P<0.01),而不同性别、年龄、组织分型和分化程度的患者中差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF-C和VEGFR-3在病例组的表达均高于对照组(分别为60.32%vs 35.00%和71.43%vs 40.00%,均为P<0·01),病例组VEGF-C和VEGFR-3的表达在有淋巴结转移和TNM分期较高的患者中明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),而在不同性别、年龄、组织分型和分化程度的患者中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGFC和VEGFR-3与结直肠癌的发展及转移密切相关,其阳性表达率高于结直肠良性肿瘤及其周围正常组织,有可能为结直肠癌的治疗提供新的靶点。     

Graves病患者外周血单个核细胞中 microRNA-142-3p的表达水平及其意义

目的 比较微小RNA-142-3p(microRNA-142-3p,miR-142-3p)在Graves病(Graves′ disease,GD)患者和正常健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的表达水平变化,探讨miR-142-3p在Graves病发生、发展中的可能作用和机制。方法 用密度梯度离心法分别提取37例Graves病患者与15例正常健康志愿者的PBMC,用RT-qPCR分别检测两组PBMC中miR-142-3p的表达水平。分析miR-142-3p水平与TT₃、TT₄和TRAb的相关性。结果miR-142-3p在GD患者PBMC中表达水平(0.378±0.199)较正常健康对照组(1.104±0.421)明显下调,差异有统计学意义(P=0.003)。miR-142-3p与TRAb、TT4 、TT₃呈负相关(r=-0.364,P=0.027;r=-0.437,P=0.007;r=-0.337,P=0.042)。同时,通过分析受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线发现:miR-142-3p对Graves病有一定的诊断价值,ROC曲线下面积(AUC)=0.917(95% CI:0.806～1.028)。结论 miR-142-3p表达下调与Graves病相关,在疾病的发生、发展中可能起到重要作用。     

Plin 5和miR-486-3p在结直肠癌组织中的表达及与患者临床病理特征的关系

目的 探究脂滴包被蛋白5(Plin5)、miR-486-3p在结直肠癌(CRC)组织中的表达及与患者临床病理特征的关系。方法 以2015年1月-2016年12月上海交通大学医学院附属新华医院崇明分院收治的60例经病理确诊的CRC患者为研究对象,选取手术切除的肿瘤组织为CRC组,距癌组织>5 cm的癌旁组织为癌旁组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测Plin5 mRNA和miR-486-3p表达量,采用免疫组化法检测Plin5蛋白。Pearson相关性分析Plin5 mRNA和miR-486-3p水平的关系,采用Kaplan-Meier法分析Plin5、miR-486-3p与患者预后的关系,COX回归分析影响CRC预后的独立危险因素。结果 与癌旁组比较,CRC组患者Plin5 m RNA[(1.03±0.17)vs.(0.53±0.08)]水平降低,miR-486-3p[(1.05±0.19)vs.(2.39±0.42)]水平上升,差异均有统计学意义(t=20.614、22.517,P均<0.001)。CRC组Plin5阳性表达率为38.33%,显著低于癌旁组68...     

miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平及其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 检测miR-1915-3p在胃癌细胞中的表达水平,探讨其对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞MGC-803、SGC-7901、MKN-45和永生化胃上皮细胞GES-1中miR-1915-3p的相对表达水平;转染实验将miR-1915-3p质粒和对照质粒（miR-NC）转染至MGC-803和SGC-7901中,分别设置MGC-803细胞miR-1915-3p组和miR-NC组及SGC-7901细胞miR-1915-3p组和miR-NC组;细胞增殖实验和凋亡实验分别检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的光密度（OD）值和凋亡率;蛋白免疫印迹（Western blot）实验检测miR-1915-3p组和miR-NC组细胞的Bcl-2蛋白表达情况。结果 MGC-803、SGC-7901、MKN-45细胞中miR-1915-3p的相对表达水平分别为（0.46±0.06）、（0.42±0.05）、（0.33±0.04）,均低于GES-1细胞中miR-1915-3p的相对表达水平（P<0.05）。MGC-803细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）;SGC-7901细胞中,miR-1915-3p组与miR-NC组相比,OD值降低、细胞凋亡率增加、Bcl-2蛋白表达减弱（P均<0.05）。结论 miR-1915-3p在胃癌细胞系中表达降低,上调miR-1915-3p的表达可抑制胃癌细胞增殖,减弱Bcl-2蛋白表达以促进细胞凋亡。     

结直肠癌细胞源性外泌体中miR-17-5p的表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响及其机制

目的：分析结直肠癌细胞源性外泌体(Exo)中微小RNA-17-5p (miR-17-5p)表达对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响,阐明其可能的作用机制。方法：实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测人结直肠癌HCT116细胞、CT26细胞、LoVo细胞、HT29细胞、SW620细胞、SW480细胞和人正常结肠直肠黏膜上皮HIEC细胞中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、miR-NC inhibitor组和miR-17-5p inhibitor组,提取各组细胞Exo,透射电子显微镜观察Exo形态表现,纳米粒子跟踪分析法检测粒径分布情况,Western blotting法检测Exo中标志蛋白CD9、CD63、凋亡诱导因子6互作蛋白(Alix)和肿瘤易感基因101 (TSG101)蛋白表达水平,RT-qPCR法检测Exo中miR-17-5p表达水平。CT26细胞分为对照组、Exo组、Exo-miR-NC inhibitor组和Exo-miR-17-5p inhibitor组,分别以不同转染组CT26细胞源性Exo处理CT26细胞,Exo绿色荧光标记PKH67染料示踪法观察各组...     

尿沉渣2种miRNA检测在膀胱癌诊断中的应用价值

目的：研究膀胱癌患者尿沉渣中miR-142-3p和miR-145-5p差异性表达,为临床寻找早期膀胱癌肿瘤标志物提供依据。方法搜集51例未接受经尿道肿瘤切除术的早期膀胱癌患者和38例健康对照者的清晨中后段尿液,从尿沉渣中提取RNA,采用miRNA特异性茎环逆转录荧光定量PCR检测目标miRNA表达水平,分析两组的受试者工作曲线（ROC）,比较miR-142-3p和miR-145-5p及其组合在膀胱癌早期诊断中的价值。结果 miRNA-142-3p在早期膀胱癌患者尿沉渣中显著升高（FC=3.93, P=0.0002,AUC=0.736）。组合测定miR-145-5p/miR-142-3p比值在膀胱癌患者与健康对照者间有统计学差异（P=0.00004, AUC=0.755）。结论测定尿沉渣中的miR-142-3p能有效发现早期膀胱癌,而检测miR-145-5p/miR-142-3p比值的诊断价值更高。     

miR-454-3p在结肠癌中的表达及其对结肠癌增殖、侵袭及肝转移能力的影响

目的研究miR-454-3p在结肠癌中的表达及其对结肠癌增殖、侵袭及肝转移能力的影响。方法收集20例结直肠癌患者 的肿瘤组织,癌旁组织作为正常对照。应用原位杂交检测结肠癌组织和正常结肠组织中miR-454-3p的表达水平。在结肠癌细 胞株SW480中,运用慢病毒转染技术过表达miR-454-3p。应用Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 和细胞克隆形成实验检测结肠癌 细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测结肠癌细胞侵袭能力的变化。脾脏注射结肠癌细胞构建小鼠结肠癌肝转移模型,研究 过表达miR-454-3p对结肠癌肝转移的影响。结果原位杂交结果显示miR-454-3p在结肠癌组织中的表达水平显著高于正常结 肠组织,差异有统计学意义（P<0.05）;在人结肠癌细胞SW480中上调miR-454-3p表达能够显著促进肿瘤细胞的增殖和侵袭（P< 0.05）。小鼠过表达miR-454-3p组中肝转移结节较对照组显著增多（P<0.05）。结论miR-454-3p在结直肠癌患者肿瘤组织中表 达显著上调,miR-454-3p 可能通过促进结肠癌细胞增殖和侵袭进而促进肿瘤的肝脏转移,从而参与了结直肠癌的发展进程。 miR-454-3p有望成为结直肠癌诊断和预后评估的一个新的潜在标志物。     

miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p在ICU血液净化AKI患者中的表达及对疗效的评估价值分析

目的 分析miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p在ICU血液净化急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)患者中的表达及对疗效的评估价值。方法 选取我院ICU收治的行血液净化治疗的AKI患者132例作为AKI组,同期选取于我院行健康体检的健康志愿者80例作为健康组。检测miR-142-3p、miR-216a、miR-107-5p表达量,分析其在ICU血液净化AKI患者中的表达,所有患者均行血液净化治疗,对比患者治疗前后及不同疗效下上述指标表达量,分析三者对疗效的评估价值。结果 与健康组相比,AKI组miR-142-3p、miR-107-5p表达升高,miR-216a表达降低(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后AKI组患者miR-142-3p、miR-107-5p表达升高,miR-216a表达降低(P<0.05)。根据治疗是否有效分为治疗有效组110例,治疗无效组22例。与治疗有效组相比,miR-142-3p、miR-107-5p在治疗无效组表达升高,miR-216a在治疗无效组中表达降低(P<0.05)。与存活患者相比,mi...     

MiR-96和miR-424-5p在结直肠癌患者血清中的表达水平及临床意义

  目的  分析血清miR-96和miR-424-5p表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系,探究两者联合检测对结直肠癌的诊断价值。  方法  收集2015年1—12月河南省人民医院收治的120例结直肠癌患者、40例结直肠腺瘤患者及40例健康受试者血清,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测血清miR-96和miR-424-5p的表达水平,分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系,构建受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-96和miR-424-5p的诊断效能。  结果  MiR-96和miR-424-5p在结直肠癌患者血清中的表达水平显著高于结直肠腺瘤患者和健康受试者,差异有统计学意义(均P < 0.05);TNM分期Ⅲ/Ⅳ期、低分化和有远处转移患者血清miR-96表达水平显著高于TNM分期Ⅰ/Ⅱ期、高中分化和无远处转移患者(均P < 0.01);TNM分期Ⅲ/Ⅳ期患者血清miR-424-5p表达水平显著高于TNM分期Ⅰ/Ⅱ期患者(均P < 0.01)。血清miR-96和miR-424-5p高表达患者的5年生存率及平均生存时间均低于血清miR-96和miR-424-5p低表达患者(均P < 0.01)。MiR-96和miR-424-5p诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)分别为0.727和0.720,特异性分别为71.2%和86.2%,两者联合检测的AUC和特异性分别为0.780和93.7%,均大于两者单独诊断(均P < 0.05)。  结论  血清miR-96和miR-424-5p表达水平升高与结直肠癌的发生、发展及预后不良相关,联合检测血清miR-96和miR-424-5p对于结直肠癌的诊断具有一定的参考价值。      

RBM25在结直肠癌中的表达及其对细胞增殖的影响

目的 探究RNA结合基序蛋白25(RBM25)在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞功能的影响.方法 利用TCGA数据库分析RBM25在结直肠癌和正常结肠组织中的表达差异及RBM25表达水平与患者预后之间的关系;分别采用qRT-PCR和Western blot检测结直肠癌组织中RBM25在mRNA和蛋白水平的表达情况.将RBM25-siR-NAs转染结直肠癌细胞系HCT 116,采用CCK-8实验、克隆形成实验检测RBM25敲低对结直肠癌细胞生长、增殖的影响;利用TCGA数据库分析RBM25 mRNA表达水平与结直肠癌患者预后之间的相关性.结果 对TCGA数据库分析显示,RBM25 mRNA在结直肠癌与正常组织的表达差异无统计学意义(P＞0.05),但RBM25 mRNA水平与患者的预后呈负相关(P＜0.05);qRT-PCR结果显示RBM25 mRNA在结直肠癌患者癌组织中高表达,但差异无统计学意义(P＞0.05),Western blot结果显示RBM25蛋白在结直肠癌组织中高表达(P＜0.05);RBM25-siRNAs敲低导致HCT 116细胞生长、增殖能力下降(P＜0.05).结论 RBM25蛋白在结直肠癌组织中高表达,并促进结肠癌细胞的生长、增殖,提示RBM25可能与结直肠癌的发生、发展相关.     

miR-30-5p在食管癌中的表达及对食管癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨miR-30-5p对食管癌细胞增殖和迁移的影响及分子机制。方法:选取开封市中心医院心胸血管外科和河南省人民医院胸外科2014年6月到2019年6月收集的食管癌和癌旁组织样本各120例,采用荧光定量PCR测定miR-30-5p mRNA表达水平。采用慢病毒建立食管癌细胞系EC109中建立miR-30-5p过表达稳定细胞系(miR-30-5p组)和对照细胞系(miR-control组)。采用EdU染色分析2组细胞的增殖情况;采用Transwell分析2组细胞的迁移情况;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-30-5p的靶基因;在miR-30-5p组和miR-control组过表达靶基因对细胞增殖和迁移的影响。结果:与癌旁组织比较,食管癌组织中miR-30-5p mRNA表达水平明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-control组比较,miR-30-5p组细胞增殖能力和细胞迁移能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示BCL-9是miR-30-5p的靶基因。在miR-control组细胞中过表达BCL-9...     

miR-195在食管癌中的表达及其对食管癌细胞株增殖的影响

目的:探讨microRNA-195 (miR-195) 在食管癌中的表达及其对食管鳞癌细胞Eca109增殖的影响?方法: 采用Taqman 探针实时定量PCR方法检测10对外科手术食管鳞癌标本miR-195的表达,用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-195类似物转染入Eca109细胞,Cell Counting Kit-8 (CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测蛋白表达水平?结果:与正常食管上皮相比,食管鳞癌组织miR-195表达明显降低(P < 0.05)?在48?72?96 h,miR-195转染组细胞吸光值明显低于对照组(P < 0.05),且miR-195转染组处于G0/G1期细胞的百分数明显高于对照组(P < 0.05)?Western blot结果显示miR-195转染组Cdc42蛋白水平明显低于对照组(P < 0.05)?结论:miR-195可阻滞Eca109细胞从G1期进入S期,抑制其增殖?