兔实验性膝骨性关节炎的组织病理学及发病机理

目的：探讨骨性关节炎发生的病理学基础。方法：40只健康雄性家兔随机分为对照组和模型组。模型组用Hulth法复制出实验性膝骨性关节炎模型。对照组不作任何处理。1月后处死家兔并切取家兔股骨内髁关节软骨作光镜及透射电镜观察,光镜所见依据Mankin's评分标准评分,测定血清中红细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性并作统计学处理。结果：模型组家兔膝关节滑膜均存在不同程度增生、肥厚、水肿,光镜及电镜下见模型组关节软骨呈明显退行性变,Mankin's评分结果模型组得分显著高于对照组（P＜0．05）,模型组SOD活性显著低于对照组（P＜0．05）。结论：滑膜组织的炎症、骨内压的增高以及自由基的改变是导致骨性关节炎发生的病理学基础,如何阻断这些病理环节是防治骨性关节炎的关键。     

消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中AMPK/mTOR信号通路影响的实验研究

目的观察消肿止痛合剂对大鼠膝骨性关节炎软骨中LC3、Beclin1、caspase-9、单磷酸腺苷活化蛋白激酶(p-AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响,探讨消肿止痛合剂干预膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)形成的作用机制。方法将80只Wistar大鼠随机分为4组:观察组(消肿止痛合剂组)、对照组(硫酸氨基葡萄糖片组)、模型组、假手术组,每组20只,除假手术外,其余3组通过改良Hulth法行膝骨关节炎造模。药物连续干预8周后,取各组大鼠膝关节软骨,采用ELISA方法检测血清中白细胞介素-6 (IL-6)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、环氧化酶-2(COX-2)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组软骨中LC3、Beclin1、caspase-9 mRNA的表达情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组软骨细胞中pAMPK、mTOR蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组IL-6、MMP-3、COX-2水平明显升高,下调LC3、Beclin1、p-AMPK的表达量,上调caspase-9、mTOR的表达量,差异有统计学意义(P0. 05);与模型组比较,观察组、对照组降低IL-6、MMP-3、COX-2水平,显著上调LC3、Beclin1、p-AMPK的表达量,下调caspase-9、mTOR的表达量,差异有统计学意义(P0. 05);其中观察组优于对照组,差异有统计学意义(P0. 05)。结论消肿止痛合剂对KOA关节软骨损伤的保护可能与AMPK/mTOR信号通路相关。     

川芎嗪对膝骨性关节炎大鼠软骨VEGF表达的影响

目的观察川芎嗪治疗膝骨关节炎大鼠(KOA)模型关节软骨中VEGF蛋白表达的变化,并探讨川芎嗪治疗KOA的作用机制。方法制作大鼠膝关节炎模型,将建模成功的大鼠纳入模型对照组,常规饲养,川芎嗪高剂量组、川芎嗪低剂量组、阳性对照组分别行川芎嗪和塞来昔布灌胃干预,正常组和模型组行等量生理盐水,予以干预6周,实验结束后,分别行各组大鼠HE切片软骨Mankin评分、Western Blot检测软骨组织VEGF表达的变化。结果软骨Mankin评分中,川芎嗪各剂量组和阳性对照组均高于正常组、且均低于模型组(P0.05),而阳性对照组评分低于川芎嗪低剂量组,但高于川芎嗪高剂量组(P0.05)。正常组、川芎嗪各剂量组及阳性对照组中软骨VEGF相对表达量均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);与阳性对照组相比,川芎嗪高剂量组VEGF表达量明显低于阳性对照组(P0.05)、而川芎嗪低剂量组其表达则高于阳性对照组。结论川芎嗪对可能通过下调早期KOA大鼠VEGF的表达,抑制早期软骨血管新生而减轻炎症,这可能是在某种程度上减轻关节软骨退变、修复软骨损伤的作用机制之一。     

中医药治疗骨性关节炎的实验研究概况

骨性关节炎(osteoarthritis，OA)是骨科临床的常见病。以关节软骨退变为主，并伴有关节内滑膜、关节周围软组织的病理改变，是中老年人的常见病多发病。随着社会人口老龄化的发展，OA的患病率和发病人数不断增高，为患者、家属和社会带来了巨大的痛苦和沉重的经济负担。有报道认为在我国50岁以上的人口中，其发病率为5％，膝关节OA的发病率为9．56％；60岁以上的人口中，其发病率为20％，膝关节OA的发病率高达78．5％^[1]。     

右归丸对骨性关节炎模型大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的分析右归丸对骨性关节炎大鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响。方法将64只成年SD大鼠利用随机数字表法分为4组,每组15只。正常组不做任何处理;模型组、右归丸组、抑制剂组采用经典的Hulth法建立膝骨性关节炎模型,造模6周后,右归丸组灌服20 g/(kg·d)的右归丸;抑制剂组腹腔注射100μg/(kg·d)的TGF-β1/Smads信号通路抑制剂SB431542,同时灌服20 g/(kg·d)的右归丸;模型组灌服等剂量的生理盐水,连续给药8周。末次给药24 h后取关节软骨组织,制作病理切片观察软骨病理改变,采用ELISA法检测软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平,免疫组化染色观察软骨组织中Ⅱ型胶原蛋白与基质金属蛋白酶13(MMP-13)阳性表达,采用RT-PCR法检测软骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达,采用Western blot检测软骨组织中TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结果与模型组比较,抑制剂组软骨组织Mankin评分降低(P0.05),软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平降低(P0.05),Ⅱ型胶原蛋白阳性表达升高(P0.05),MMP-13阳性表达降低(P0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达升高(P0.05),TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达升高(P0.05)。与抑制剂组比较,右归丸组软骨组织Mankin评分降低(P0.05),软骨组织中肿瘤坏死因子α与白细胞介素1β水平降低(P0.05),Ⅱ型胶原蛋白阳性表达升高(P0.05),MMP-13阳性表达降低(P0.05),TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达升高(P0.05),TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达升高(P0.05)。结论右归丸对骨性关节炎大鼠软骨组织具有保护作用,其作用机制可能与TGF-β1/Smads信号通路有关。     

降钙素对骨性关节炎中软骨作用的研究进展

骨性关节炎的特征表现是关节软骨的进行性退变。实验研究和临床观察证实，完整的关节软骨形态取决于软骨下骨的转化、正常的软骨细胞功能和基本的生物力学刺激㈦。鉴于软骨下骨和关节软骨的关系十分密切，理论上理想的治疗药物应该着眼于生物力学刺激的干预和如何调整骨和软骨的代谢活性。     

骨性关节炎与骨质疏松症相关性研究

目的 通过对骨性关节炎(OA)和骨质疏松症(OP)的影响因素的观察,探讨这两种疾病是否存在相关性.方法 流行病学研究194名城市妇女,年龄从36岁至75岁,平均年龄52±12岁.获得基本资料.临床X线检查颈椎、腰椎、双膝、双手关节.按Kellgren标准诊断OA.骨密度检查按国际标准确定骨质疏松;并根据X线、骨密度检查结果将符合研究标准的被研究人分为四组:正常人组、OA组、OP组、OA+OP组.以四组分组为标准,分别在流行病学资料水平、骨密度值水平、雌激素进行组间比较,分析OA与OP之间相关性.结果 在流行病学水平,OA、OP有共同的影响因素:年龄、接受过高等教育、全身性疾病、运动、体重指数.在骨密度水平,骨密度值降低加重了OA的程度,OA随OP的加重而加重,OA和OP是相关的.雌激素,OA组雌激素含量与正常人组的一致,OP组雌激素含量明显降低.结论 OA和OP这两种疾病相互促进、发展,具有正相关的相关性.     

关节镜下联合持续冲洗对骨性关节炎的康复影响

目的 研究关节液中NO水平的变化,探讨关节镜下联合持续冲洗对膝关节骨性关节炎的康复影响.方法 将确诊为膝关节骨性关节炎的32例随机分成两组,每组16例.一组在膝关节镜手术后用3000 ml的生理盐水持续6 h冲洗关节腔:一组不行关节腔冲洗;于术前、术后24 h,1、2、4周分别抽取2 ml的膝关节液,检测NO相应浓度.于不同时段对其疗效进行评分.结果 持续冲洗组与非持续冲洗组均能使关节液中的NO浓度水平下降.术后2周内,持续冲洗组和非持续冲洗组的NO检测结果有显著不同.前者优于后者.术后4周,持续冲洗组和非持续冲洗组的NO检测结果不再有显著差异.疗效评分:术后2周持续冲洗组优于非持续冲洗组;术后4周评分比较两组无明显差异.但两组患者术前和术后4周比较有明显差异.结论 关节镜下联合持续冲洗可在较短时间内使关节液中NO的水平下降,迅速有效地改善症状,对膝关节骨性关节炎的康复有积极影响.     

体外冲击波延缓兔膝骨性关节炎退变的实验研究

[目的]前期研究发现体外冲击波(extracorporeal shock wave,ESW)干预骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)动物模型后,可缓解关节疼痛并能改善肢体功能.然而,ESW对OA软骨退变的影响未深入探讨.[方法]30只新西兰大白兔随机分为三组:对照组(n=6);ACLT组(n=12)和ESWT+ ACLT组(n=12).ESWT干预4、8周后,采用大体观察和组织学评价对兔膝OA的影响.[结果]ACLT组4、8周后表现出典型的OA病理变化.而ESWT+ACLT组4周兔膝关节软骨尚光滑,局部有轻微磨损,软骨分层结构尚可;8周后可见局部有较大磨损,软骨变薄,表面覆盖少量疏松的纤维组织,软骨表面部分修复,裂隙达到移形层,潮线不完整.ESWT+ ACLT组在4周和8周Moran评分和Markin评分同相应时期ACLT组相比有统计学差异(P＜0.05).[结论]ESWT具有延缓OA退行性改变的作用,可作为防治OA的新方法,具有重要的临床意义.然而,在临床应用ESWT治疗OA患者,还需评估ESWT的安全性,确定ESWT最佳能量参数和治疗时机以及其作用机制等问题.     

骨生注射液对实验性骨性关节炎家兔血浆SOD和MDA的影响

目的：探讨骨生注射液对骨性关节炎的治疗作用。方法：用日本大耳白兔造成骨性关节炎模型并分组治疗，观察各组动物的组织学变化并将血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)作为观测指标。结果：光镜下显示模型组胫骨侧软骨坏死脱落，骨质裸露，SOD下降，MDA上升。经骨生注射液治疗，可见蓝绿色胶原保留达1/2以上，血中SOD明显升高，MDA下降。结论：骨生注射液能有效对抗关节炎软骨退变，增强机体清除自由基的能力，治疗骨性关节炎。     

雌激素对大鼠胰腺癌前病变及K—ras基因突变影响的实验研究

目的 建立大鼠胰腺腺泡细胞癌癌前病变的动物模型,了解雌激素对该癌前病变及K-ras基因突变的影响.方法 雄性Wistar大鼠单次腹腔注射重氮乙酰丝氨酸30mg/kg,部分大鼠2个月后开始肌肉汪射戊酸雌二醇0.18mg/100g×2周,4个月后,常规取胰腺组织行光镜和电镜检查,并应用PCR-SSCP法检测K-ras基因突变情况.结果 单纯给予重氮乙酰丝氨酸的大鼠胰腺腺泡细胞癌癌前病变发生率100%,K-ras基因突变率42.1%;经雌激素处理的大鼠胰腺腺泡细胞癌癌前病变发生率92.4%,K-ras基因突变率25.6%.结论 重氮乙酰丝氨酸可成功诱导大鼠胰腺腺泡细胞癌癌前病变,K-ras基因突变在此过程中属早期事件.雌激素一定程度上可抑制该癌癌前病变的发生发展.     

还原型谷胱甘肽对大鼠随意皮瓣成活影响的实验研究

目的通过经大鼠腹腔注射还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH),观察其对大鼠随意皮瓣成活的影响,并初步探讨GSH影响皮瓣成活的作用机制。方法选择健康200~250gSD大鼠20只,于背部双侧肩胛下角连线设计制备面积为8cm×2cm随意皮瓣,原位回植。随机分成两组(n=10),实验组于皮瓣术后即刻及1、2d,腹腔注射GSH(250mg/kg),对照组腹腔注射等量生理盐水。术后7d测定皮瓣成活率,取大鼠皮瓣中轴距蒂部3cm处组织,检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malonyldialdehyde,MDA)含量,对皮瓣远、中及近段进行组织学观察。结果术后7d,实验组皮瓣成活率为56.77%±10.67%,高于对照组的40.16%±7.12%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组SOD含量为306.06±84.87U/mgprot,高于对照组的224.79±27.12U/mgprot;而MDA含量为3.835±0.457nmol/mgprot,低于对照组的6.127±0.837nmol/mgprot,差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学观察:实验组近、中及远段中性粒细胞浸润较对照组明显减轻,其血管、成纤维细胞、毛囊及附属腺体增生均明显优于对照组。结论腹腔注射GSH对大鼠随意皮瓣成活有明显促进作用,作用机制可能与清除自由基、降低脂质过氧化反应及减轻中性粒细胞浸润有关。     

透明质酸钠治疗膝骨性关节炎的临床效果及分析

目的　观察透明质酸钠 (sodium hyaluronate,SH)关节腔内注射治疗膝骨性关节炎 (osteoarthritis,OA)的临床效果及治疗前后关节液中自由基和炎性介质含量的变化。　方法　 92例 (111膝 ) OA患者 ,其中男 30例 ,女6 2例 ;年龄 2 1～ 71岁 ,平均 4 7.5岁。分轻度组 5 1膝 ,中度组 35膝 ,重度组 2 5膝。关节内每周注射 SH2 0 mg一次 ,共 5次 ,按 L ysholm膝关节功能评分比较治疗前后关节症状和功能的改善情况 ,并测定第 1、2和 5周 SH注射前和注射后 3个月抽取的关节液中一氧化氮 (nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)、丙二醛 (malonicdialodehyde,MDA)和白细胞介素 1β(interlukin1β,IL- 1β)、肿瘤坏死因子 α(tumour necrosis factorα,TNF- α)的含量。　结果　随访 3个月 ,治疗效果优 4 2膝 ,良 38膝 ,可 2 1膝 ,差 10膝 ,优良率 72 .1%。病情越轻 ,治疗见效越早 ,疗效越好。SH治疗后轻、中度组患者关节液中 ,氧自由基含量和 IL- 1β、TNF- α含量明显下降 (P<0 .0 5 ) ,重度组变化不显著 (P>0 .0 5 ) ;SH对 NO含量影响较小 ,只有轻度组治疗后 3个月较治疗前明显减少 (P<0 .0 5 ) ,中、重度组变化不大 (P>0 .0 5 )。　结论　 SH关节腔内注射治疗膝 OA,可缓解临床症状 ,改善     

降钙素对骨性关节炎关节软骨的作用

目的 综述降钙素(calcitonin,CT)对骨性关节炎关节软骨、软骨下骨的作用. 方法广泛查阅近年来有关CT对骨性关节炎作用的国内外文献,并进行总结与分析. 结果 CT能促进软骨蛋白多糖、II型胶原等重要软骨基质的合成,并能促进软骨及软骨下骨再生. 结论 CT通过促进软骨合成及抑制软骨降解发挥保护关节软骨的作用.     

大鼠臂丛神经放射性神经病的实验研究

目的模拟乳癌放疗方案,观察实验大鼠臂丛神经受照射后的形态组织学变化及相应脊髓前角运动神经元细胞的变化,明确是否产生损伤、损伤的发展规律及是否存在神经元可逆性转变。方法选用健康成年SD大鼠20只,左侧为照射侧,右侧为对照侧。采用剂量分割照射方案,建立大鼠臂丛神经放射性损伤动物模型。照射侧日照射2Gy/次,每周5次深部X线照射,累计剂量达30Gy,观察动物的步态变化、有无展爪反射等行为异常。对照侧不作任何处理。分别于末次照射后3、5、7和9周取材,各4只。分别测定大鼠上臂臂围、肱二头肌湿重、肱二头肌复合运动动作电位,以及该电位的潜伏期,并行HE染色、嗜银染色及甲苯胺蓝染色,观察肱二头肌、脊髓前角运动神经元形态和数目变化。结果照射后3周,大鼠照射侧开始呈跛行步态,出现展爪反射。照射后3、5、7和9周,照射侧臂围和肱二头肌湿重均显著降低,肌电潜伏期明显延长,肌电动作电位降低,与对照侧比较差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学检查显示,照射侧肌皮神经有髓神经纤维数目减少,神经纤维分布不均,密度减低,髓鞘变薄,神经结构破坏,胶原纤维增生;肱二头肌肌肉变性,肌纤维断裂、炎细胞浸润;脊髓存活神经元数目随时间延长而明显减少,与对照侧比较差异均有统计学意义(P<0.05);神经元胞体皱缩,细胞核溶解。结论大剂量X线照射可使大鼠臂丛神经损伤及脊髓前角运动神经元存活数目明显减少,步态和展爪反射异常,肱二头肌萎缩,肌电图异常;神经元细胞发生病变,轴索变性,神经纤维髓鞘变性。     

5-氟尿嘧啶硅橡胶囊控释植入剂治疗Wistar大鼠肝癌的实验研究

在Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝左叶被膜下接种Ｗａｌｋｅｒ－２５６系肝癌组织６天后，将５－氟尿嘧啶硅橡胶囊控释植入剂（５－ＦｕＣＩ）植入肿瘤所在的肝左叶，观察其抑瘤率及带瘤大鼠生存时间，并与对照组及５－ＦｕＣＩ放置于肝右叶组相比较。结果表明：３组动物３０天生存率分别为１００％、３３．３％及５０％。实验组动物抑瘤率为９６．３％，且动物生存时间较其它两组明显延长（Ｐ＜０．０５），光镜下可见大量癌细胞坏死。     

人精子雌激素结合位点的研究

用电镜放射自显影技术对人射出精子17β-雌二醇结合位点进行定位研究,结果表明此位点位于精子细胞膜上,分布在顶体区、赤道区、顶体后区、尾部中段等不同部位。用放射配体受体法对正常生育男性射出精子雌激素结合位点进行定量测定,其最佳实验条件为:(1)精子与氚标雌二醇在0℃～4℃保温18～20小时,细胞与激素才能达到充分的结合。(2)精子悬液浓度为80-130×10_6/ml时,细胞与加入的~3H-E_2比例适当,可有良好的结合。(3)精子活动率低时能与~3H-E_2发生特异性结合的精子少,本实验所测的精子活动率在40％以上。实验结果表明人精子雌激索结合位点的含量为0.75±0.38×10~(-3)pmole/10~7精子,但此位点尚不能认为是雌激素受体。     

骨性关节炎水通道蛋白1的表达与软骨细胞凋亡相关性研究

目的水通道蛋白1(aquaporins 1,AQP-1)表达变化可能与细胞凋亡相关。通过观察软骨组织中AQP-1和半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达,探讨AQP-1表达与软骨细胞凋亡的相关性,为进一步研究骨性关节炎(os teoarthritis,OA)的发病机制提供实验依据。方法取8周龄清洁级雄性SD大鼠72只,体重286～320 g,平均300 g;随机分为手术组、假手术组和对照组,每组24只。手术组采用切断前交叉韧带及内侧副韧带、部分切除内侧半月板方法制备大鼠双膝OA模型;假手术组仅暴露关节腔;对照组不作处理。造模后观察大鼠一般情况,于1、2、4、8周处死大鼠取膝关节标本行大体、组织学观察;采用实时荧光定量PCR检测AQP-1和Caspase-3 mRNA的表达情况;使用酶标仪检测Caspase-3蛋白酶活性;并对AQP-1 mRNA表达与Caspase-3 mRNA的表达及蛋白酶活性的相关性进行分析。结果术后共6只大鼠死亡,均给予补充;其余大鼠均存活至实验完成。各时间点对照组及假手术组膝关节软骨外观及结构均正常;随时间延长手术组关节软骨表面粗糙且有裂隙,可见大量赘生物,软骨表层纤维化,细胞排列紊乱。参照Mankin评分标准,造模后1周各组组织学评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);2、4、8周时手术组与对照组、假手术组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后1周,手术组AQP-1、Caspase-3 mRNA表达和Caspase-3蛋白酶活性与假手术组及对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而2、4、8周时手术组以上指标均明显高于对照组和假手术组(P<0.05),且随时间延长呈增高趋势。AQP-1 mRNA和Caspase-3 mRNA表达成正相关(r=0.817,P=0.000),回归方程为y=0.426 7x2+0.051 5x;AQP-1 mRNA表达和Caspase-3蛋白酶活性亦成正相关(r=0.945,P=0.000),回归方程为y=15.423 0x+4.392 8。结论 AQP-1的表达上调可能与软骨细胞凋亡相关,在OA发病过程中AQP-1表达的变化可能参与了OA的发生、发展。     

阿仑膦酸钠对骨关节炎关节软骨保护作用的研究进展

目的综述阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨保护作用的研究进展。方法广泛查阅近年国内外相关文献,并进行综合分析。结果 ALN能改善OA关节软骨代谢微环境,抑制软骨下骨骨重塑,对关节软骨有潜在保护作用。结论 ALN有望成为一种OA疾病改善药物,但OA治疗尚缺乏统一的基础与临床评价标准,制定统一标准并获取临床数据对ALN的开发和应用有指导性意义。     

大鼠脊髓圆锥损伤后膀胱逼尿肌及其神经肌肉接头形态学变化的研究

目的初步探讨大鼠脊髓圆锥损伤后膀胱逼尿肌及其神经肌肉接头（neuromuscular junction,NMJ）组织形态学的变化规律。方法成年SD大鼠48只随机分为六组,每组8只。分别为正常对照组,脊髓圆锥损伤术后4、6、8、10及12周组,依次记作A~F组。采用L4、5平面锐性横断性脊髓圆锥损伤的动物模型。分别于术后相应时间点取材,先作膀胱逼尿肌HE染色,以观测肌纤维截面积的变化规律;同时制作电镜标本,观察膀胱逼尿肌及其NMJ超微结构的变化规律;最后将逼尿肌行Masson三色染色,计算平滑肌及结缔组织所占的百分比。结果HE染色观察,大鼠逼尿肌肌纤维截面积在E、F组与A组间差异有统计学意义（P〈0.05）;透射电镜观察,B~F组逼尿肌细胞外形、大小不一致,分布不均匀,排列走行紊乱;间质中大量排列紊乱的胶原纤维,粗面内质网明显扩张,线粒体水肿,且程度逐渐加重。逼尿肌NMJ透射电镜观察,B、C及D组可见其形态结构类似于A组,但线粒体及突触小泡的数量略少;E组可见明显退变的NMJ,突触小泡含量明显减少,伴有线粒体等细胞器减少;F组NMJ进一步退变,突触小泡含量进一步减少甚至缺如,细胞器减少或消失,并可见退变小体。Masson三色染色可见逼尿肌中结缔组织所占的比例在E、F组与A组间差异有统计学意义（P〈0.05）;且E、F组间差异亦有统计学意义（P〈0.05）。结论大鼠圆锥脊髓损伤术后10周可作为逼尿肌及其NMJ发生变化的时间节点,神经修复手术宜在此前完成。