少突胶质谱系细胞的生物学特性

目的研究少突胶质谱系细胞定向分化过程中的增殖及形态学的变化,为进一步研究脑室周围白质软化的临床治疗奠定基础。方法依据各种胶质细胞黏附性及生长时间的差异,通过机械振荡法和差速贴壁法从原代培养中获得纯化的O-2A祖细胞,接种于含有血小板源性生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的培养液观察其增殖情况,再以三碘甲状腺原氨酸和睫状神经营养因子定向诱导分化,并观察分化过程中细胞的形态学变化,免疫细胞化学鉴定。结果纯化的O-2A祖细胞接种后指数式增殖呈团,细胞界限不清,表达NG2,至第4天细胞不再增多进入分裂终期;进入分化过程的少突胶质谱系细胞突起逐渐分级、交互,免疫化学鉴定依次表达O4、Gal C及MBP。结论 O-2A祖细胞具有良好的增殖能力,沿着少突胶质谱系细胞定向分化伴随形态学及表面表达抗原的变化。     

Neuregulin对少突胶质细胞的作用

少突胶质细胞是中枢神经系统的髓鞘形成细胞（myelin-forming cell），神经纤维髓鞘的形成是中枢神经系统（Central Nervous System，CNS）发育成熟的标志之一。     

显示小胶质细胞和少突胶质细胞镀银法的改良

在中枢神经系统的神经胶质细胞中,小胶质细胞和少突胶质细胞无论在正常的生理活动或损伤的修复过程,均有重要的作用。目前尚有一些未定论的问题需待解决。因此,对这两种细胞的研究也就显得尤为重要。虽然显示小胶质细胞和少突胶质细胞的方法较多,但这些方法在具体应用时常有一些不尽人意之处。为了满足教学和科研的要求,我们对多种显示方法进行了摸索和对比,并选定Penfield氏改进的Del Rio-Hor-lega氏法进行了重要的研究和改进。(1)在进入碳酸银溶液之前,用DAB(3.3’-diaminobenzidine)和H_2O_2处理;(2)增加碳酸银配方中碳酸钠的浓度至饱和;(3)将原法中碳酸银作用的时间和温度延长和提高。经过改良后的方法,稳定,显出率和成功率高,是显示小胶     

少突胶质细胞增殖和分化的研究进展

少突胶质细胞 ( oligodendrocyte,简称少突胶质 )是中枢神经的成髓鞘神经胶质细胞 ,它包绕神经纤维的轴突而形成髓鞘 ,对轴突正常快速电传导等功能具有重要作用 [1 ]。无论是病理性的髓鞘结构完整性受到破坏 ( demyelination) ,如外伤、多发性硬化症 ( multiple sclerosis) ,还是少突胶质发育紊乱导致髓鞘形成不良 ( dysmyelination) ,如先天性小脑症( congenital microcephaly)和婴儿孤独症 ( infantile autism)等[2 ,3 ] ,都可引起严重的中枢神经系统病变。因而对少突胶质细胞增殖和分化的研究在发育生物学中有重大意义。1.　不同发育时期…     

少(寡)突胶质细胞迁移研究进展

少 (寡 )突胶质细胞是中枢神经系统的髓鞘形成细胞。作为绝缘层的髓磷脂包卷神经元轴突有利于轴突的正常快速电传导 [1 ]。它在胚胎早期起源于室层 ( ventricular zone,VZ)和室下层 ( subventricular zone,SVZ) [2 - 4 ]。在脊髓 ,少突胶质细胞由神经管腹侧的室层产生 ,然后向两侧及背侧迁移 [5 - 7]。在胚胎晚期和新生儿早期 ,少突胶质细胞前体经一定距离的迁移后形成有髓神经纤维的髓鞘。近年来在多发性硬化、脑白质发育不良等脱髓鞘疾病或髓鞘形成障碍治疗的研究中 ,细胞移植已成为一大热点 [8- 1 0 ]。而移植入受体的少突胶质细胞或其…     

蛋白脂蛋白在两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达

目的:探讨蛋白脂蛋白(PLP)在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达。方法:用激光共聚焦双重免疫荧光标记技术检测PLP在分化成熟的两型星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达情况。结果:在O-2A谱系来源的成熟2型星形胶质细胞和少突胶质细胞中PLP抗体标记为阳性,而在T1A谱系来源的成熟1型星形胶质细胞中则未检测到PLP的表达,从而在蛋白质水平验证本室研究两型星形胶质细胞基因表达谱差异基因芯片结果中PLP mRNA在T2A中高表达,而在T1A中低表达的现象。结论:PLP等脂代谢相关基因可能在O-2A谱系发生和分化过程中起重要作用,O-2A谱系与神经髓鞘发生以及脑内脂质代谢内在机制密切相关。     

SOX蛋白与少突胶质细胞的发育

SOX蛋白是一类在动物中发现的转录因子,它们属于高移动组分(h igh mob ility group,HMG)超家族的DNA结合蛋白。它们参与性别决定、骨组织发育、神经系统发育及晶状体发育等多种胚胎发育过程。近年发现,在脊髓中形成髓鞘的少突胶质细胞表达SOX E家族的成员SOX8,SOX9和SOX10。这3个转录因子与少突胶质细胞的发育关系密切:SOX9参与少突胶质细胞的早期定向;SOX10主要影响少突胶质细胞的终末分化和髓鞘形成;SOX8与SOX9、SOX10有协同作用,既参与早期定向又参与终末分化,但作用较弱。     

大鼠少突胶质细胞的纯化培养与鉴定

目的探讨新生2dSprague—Dawley（SD）大鼠脑少突胶质细胞的分离方法和生长条件，为少突胶质细胞损伤后髓鞘形成障碍或脱髓鞘疾病的研究奠定基础。方法根据星形胶质细胞和少突胶质细胞的生长时间差异、细胞生长方式及细胞对培养层粘附等特性的不同，采用两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养获取并鉴定高纯度的大鼠少突胶质细胞。结果培养出突起有如蜘蛛网状的成熟少突胶质细胞，半乳糖脑苷脂（Galactocerebroside，Gal）阳性。结论两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养可获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。     

新生大鼠少突胶质前体细胞的培养

体外培养少突胶质细胞已证明其细胞学特征与在体的发育相近,而且改变了以前对少突胶质细胞突起较少的错误认识。少突胶质细胞的形态、功能、发育以及与神经元的相互联系逐渐被神经科学工作者所重视,而其前体细胞的增殖和纯化是进一步研究的基础。少突胶质前体细胞的连续发育过程报道也较少。本室在既往研究的基础上对少突胶质前体细胞的体外培养方法进行改良,然后对少突胶质细胞系部分发育阶段进行了形态学观察,以期为深入了解少突胶质细胞系的细胞生物学特性及探索发育神经生物学的规律提供帮助。     

少突胶质细胞发生过程中S-100β表达的变化

目的:探讨少突胶质细胞发生过程中3个主要不同阶段S-100β的表达.方法:采用振荡法和差速贴壁法,获得纯化的O-2A祖细胞;双重免疫荧光细胞化学显色法观察S-100β在少突胶质细胞发生过程中的表达情况.结果:O-2A祖细胞在含有碱性成纤维细胞因子(10 ng/ml)和血小板源性生长因子(10 ng/ml)培养液中培养48 h,不表达S-100β;换成含有3'碘甲状腺原氨酸(30 ng/ml)培养液继续培养24 h,S-100β免疫反应呈现阳性.前少突胶质细胞、少突胶质细胞中表达S-100β.结论:少突胶质细胞发生过程中S-100β的表达始于O-2A祖细胞过渡到前少突胶质细胞之间,可能与其从多潜能分化阶段过渡到形态学上的分化阶段有关.     

少突胶质细胞应用的研究与思维方法

少突胶质细胞是中枢神经系统的成髓鞘胶质细胞,但传统认为其抑制中枢神经系统损伤后的再生。直到最近利用神经干细胞分化、纯化、培养少突胶质细胞方法的出现,才使人们对其应用的研究产生了兴趣并在某些方面取得了成功。科学在于创新、在于突破,实践-认识-再实践-再认识的思维方法对指     

新生大鼠脊髓少突胶质细胞体外培养与鉴定

本研究探索利用新生大鼠脊髓培养和纯化少突胶质细胞的方法。取新生大鼠全脊髓,胰酶消化并吹打分散细胞,用含20％胎牛血清的DMEM培养液原代混合细胞培养,细胞铺满瓶底后传代培养。用抗半乳糖脑苷脂抗体和抗胶质原纤维酸性蛋白抗体进行细胞分类免疫组化鉴定。结果显示:少突胶质细胞纯度可达98％以上,表明新生大鼠脊髓是少突胶质细胞体外培养的理想取材部位。本操作简单易行,可以在短时间内获得足量的纯化的少突胶质细胞。     

细胞移植和脱髓鞘疾病

<正>脱髓鞘疾病是以神经髓鞘脱失为主要或始发病变而轴索、胞体和神经胶质受损相对较轻的神经系统疾病,可发生于中枢神经系统(central nervous system,CNS)或周围神经系统(peripheral nervous system,PNS)。前者较具代表性的特发性炎性脱髓鞘疾病有多发性硬化(multiple sclerosis,MS),后     

死亡受体6负性调控少突胶质细胞的存活、成熟和髓鞘形成

少突胶质细胞(oligodendrocyte)的存活和分化对发育过程中中枢神经系统(central nervous system,CNS)轴突髓鞘的形成和CNS脱髓鞘疾病(如多发性硬化)中髓鞘的修复均有至关重要的作用。Mi等的研究发现,死亡受体6(death receptor 6,     

儿童抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白IgG相关疾病的MRI征象分析

目的 探讨儿童抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白IgG相关疾病（MOGAD）的MRI特征。方法 病例系列报告。纳入2018年1月—2021年12月聊城市人民医院确诊MOGAD的10例患儿,其中男6例、女4例,年龄2~9（5.9±2.4）岁。10例患儿治疗前行颅脑MR常规扫描,9例行全脊柱MR常规扫描,4例行眼眶MR常规扫描。观察指标：（1）记录MRI对MOGAD颅脑、脊髓和视神经病变的检出情况;（2）总结颅脑MOGAD病变分布位置、形态及信号特点;（3）观察脊髓MOGAD病变部位、脊髓有无肿胀,统计长节段脊髓MOGAD病变的患儿数量;（4）观察视神经病变部位、视神经有无肿胀;（5）将患儿末次随访时复查MRI与治疗前进行对比,观察病变转归情况。结果 治疗前MRI显示：（1）颅脑病变10例,脊髓病变5例,视神经病变2例。（2）10例MOGAD颅脑病变均为多发,9例双侧、1例单侧。4例仅累及幕上,1例仅累及幕下,5例同时累及幕上和幕下。幕上病变位于皮层下白质7例,脑室周围白质7例,丘脑5例,基底节区4例,胼胝体2例,单侧皮质1例;幕下病变位于桥脑6例,同时累及小脑4例、中脑2例。病变均为非对称性。MOGAD病变形态均表现为无定形斑片状、斑点状,其中2例同时出现斑块样改变;2例病变DWI序列显示弥散受限。（3）MOGAD脊髓病变5例,均为单发、累及胸段脊髓的长节段脊髓病变,其中4例同时累及颈段脊髓,未发现腰段脊髓受累;2例出现脊髓肿胀。（4）MOGAD视神经病变2例,均为双侧,其中1例视神经全程受累、1例视神经前部受累,视交叉及视束均无受累。2例视神经均无肿胀。（5）10例患儿经治疗后均好转出院,出院后随访8~29（12.9±5.8）个月。随访期间患儿定期复查MRI,均未见复发。末次随访MRI显示,2例患儿颅脑病变完全消失,1例脊髓病变完全消失,其余7例患儿颅脑、脊髓或视神经MOGAD病变范围均减小或病灶数均减少。结论 儿童MOGAD中,颅脑病变最常见,其次为脊髓和视神经;不同部位的MOGAD MRI表现具有一定特征性,认识这些影像学特征,可以提高临床医生诊断儿童MOGAD的准确率,为早期治疗提供重要参考。     

少突胶质细胞与2型星形胶质细胞中S-100 β表达差异性的研究

目的研究少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)与2型星形胶质细胞(type-2astrocyte,T2A)中S-100的表达。方法根据各种胶质细胞的生长时间的差异及细胞的黏附性不同,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的O-2A祖细胞;免疫细胞化学染色法观察S-100β在O-2A谱系细胞中的表达情况。结果O-2A祖细胞在含有PDGF、bFGF的培养液中培养3d,分化成T2A,培养5d分化成OL;OL中S-100β免疫反应呈现阳性,T2A中不表达S-100β。结论O-2A谱系细胞中的S-100β的表达与O-2A祖细胞向OL分化有关。     

少突胶质细胞体外培养、纯化、鉴定及缺氧模型建立

目的观察体外培养少突胶质细胞的增殖、分化及其生物学特性;探讨获得细胞纯度较高的实验方法及如何建立少突胶质细胞的缺氧培养模型。方法1．取新生SD大鼠脑皮质进行体外培养,采用两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养,倒置显微镜结合免疫荧光染色法鉴定细胞种类并分析纯度。2．缺氧联合低糖培养建立细胞体外缺氧培养模型,相差显微镜观察细胞的形态学变化。结果1．获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。少突胶质前体细胞祖细胞A285荧光标记阳性,成熟少突胶质细胞半乳糖脑苷脂阳性。2．缺氧培养2小时细胞变化不明显,但缺氧培养6小时,细胞存活率明显下降,并且随着缺氧时间延长存活细胞更少,凋亡细胞更多,至缺氧培养10小时,大多数细胞破碎。结论1．两次恒温摇床振荡分离纯化法和条件限定培养基培养可获取高纯度的大鼠少突胶质细胞。2．低糖联合缺氧培养模型可以建立可行的少突胶质细胞体外缺氧模型。     

新生大鼠大脑皮层少突胶质细胞/Ⅱ型星形胶质祖细胞原代培养及形态

目的:研究不同诱导条件对大鼠大脑皮层O2A祖细胞生长活性的影响。方法:采用两次恒温摇床振荡培养法,倒置显微镜结合免疫荧光染色法鉴定细胞种类并判断纯度,透射电镜观察细胞超微结构。结果:O2A祖细胞胞体呈圆形,常有单极或双极突起.形成克隆球,A285标记阳性,免疫荧光鉴定细胞纯度可达90%以上。O2A祖细胞具有双向分化的能力,在不同诱导条件下可分化为星形胶质细胞或少突胶质细胞。电镜观察O2A祖细胞呈圆形或椭圆形,核仁可见,胞质内细胞器少,核周见成束胞质丝。结论:选择合适的培养基对O2A祖细胞纯化培养及诱导分化极其重要。     

大鼠皮质少突胶质细胞培养条件的优化

BACKGROUND: Oligodendrocytes are mostly differentiated from oligodendrocyte precursor cells. A suitable medium and cell seeding density have a significant impact on the process of the isolation of oligodendrocyte precursor cells to obtain oligodendrocytes. OBJECTIVE: To explore the optimization of oligodendrocyte culture conditions. METHODS: Oligodendrocyte precursor cells isolated from the newborn rats 48 hours after birth were cultured in DMEM/high glucose medium or DMEM/F12 medium using seeding densities of 2×104 cells/cm2, 4×104 cells/cm2, 8×104 cells/cm2, 16×104 cells/cm2, 32×104 cells/cm2, and 64×104 cells/cm2, respectively. Oligodendrocyte precursor cells were induced to differentiate into oligodendrocytes at 72 hours after cell adhesion. Morphology of differentiated oligodendrocyte precursor cells were observed under a light microscope, and the differentiation results were identified by immunofluorescence staining after 7-day induced differentiation. RESULTS AND CONCLUSION: Morphology of oligodendrocyte precursor cells were recognized when cultured in DMEM/high glucose medium or DMEM/F12 medium using seeding densities of 2×104 cells/cm2, 4×104 cells/cm2, and 8×104 cells/cm2, respectively. Immunofluorescence staining showed that myelin basic protein-positive cells were found after 7-day induced differentiation, and the positive cell number were 16.40±3.30, 49.95±2.33, and 76.95±4.86 in DMEM/F12 medium, and 12.65±2.53, 32.10±1.17, and 54.05±1.56 in DMEM/high glucose medium (P < 0.05). These findings indicate that DMEM/F12 medium is more suitable for culturing oligodendrocyte precursor cells compared with DMEM/high glucose medium to some extent. The number of differentiated oligodendrocytes was gradually increased with the enhanced seeding density of oligodendrocyte precursor cells, and the seeding densities from 4×104 to 8×104 cells/cm2 were appropriate for the observation of cell morphology. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

大鼠大脑皮质损伤后神经毡与少突胶质细胞反应的年龄性差异

针刺不同年龄大鼠大脑皮质后，于不同时间点观察神经毡及少突胶质细胞的反应。光镜与电镜下均发现，三个年龄组在针刺后早期都有神经毡的水肿，晚期逐渐恢复，但水肿的出现和消退均以幼年大鼠最早、最显著，同时伴有明显的成髓现象，少突胶质细胞肥大、核仁增大、细胞器和游离核糖体增多等。此外，变性区内仍保持结构正常的突触多见于成年及老年大鼠。上述结果表明，幼年大鼠神经组织对针刺损伤反应较敏感，其恢复速度却较快，而较老动物的胞突间连接比幼年者稳定。