GS无醛固定液与甲醛固定液对免疫组化染色结果的影响

目的探讨GS无醛固定液与传统甲醛固定液对不同类型组织的固定效果及抗原性的保存能力。方法临床送检的活体组织标本115例,正常乳腺组织10例、乳腺癌50例、结肠癌20例、肺癌10例、卵巢癌10例、淋巴瘤10例及前列腺癌5例。同一组织,各取2块,分成2组,一组采用GS无醛固定液处理组织;另一组用传统甲醛固定组织,然后对2组所制切片同时进行免疫组化染色,比较两种制片方法对免疫组化染色结果的影响。结果两种固定法所制切片免疫组化染色效果基本相同,阳性结果定位清晰、准确。结论 GS无醛固定液对组织的形态及组织内的抗原成分保存良好,它可以替代传统甲醛作为病理科常规组织固定液使用。     

提高肝组织中HBsAg、HBcAg阳性率的体会

常规石蜡切片标本 ,一般均用甲醛固定 ,而经甲醛固定的组织 ,其抗原蛋白的氨基与固定液中的醛基交联形成羧甲基而封闭了抗原决定簇 ,使其免疫组化标记的敏感性明显降低 ,且背景着色明显。免疫组化染色的成功与否 ,组织内源性过氧化物酶清除以及抗原决定族的保存和暴露是一个重要的环节。在日常工作中 ,我们发现同一肝穿组织采用不同的预处理方法 ,明显影响ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ的检出率。1　材料与方法1 1　材料来源　所检肝组织取自 2 0 0 1 2— 2 0 0 2 1我院临床送检标本 ,经肝活检证实为乙肝阳性患者有 5 6例 ,同时血清ＨＢＶ标志物…     

抗原修复对端粒酶逆转录酶免疫组化染色效果的影响

常规石蜡切片标本 ,一般均用甲醛固定 ,而经甲醛固定的组织 ,其抗原蛋白的氨基与固定液中的醛基交联形成羧甲基而封闭了抗原决定簇 ,使其免疫组化标记的敏感性明显降低。免疫组化染色的成功与否 ,抗原决定簇的保存和暴露是其中一个重要的环节。要充分暴露抗原决定簇 ,目前常用的抗原修复法有微波、高压和酶消化等 ,它们对大多数抗体的标记是有益的 ,但是 ,有些抗体经抗原修复后不再发生反应或阳性率降低。端粒酶逆转录酶蛋白 (ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ ｓｃｒｉｐｔａｓｅ,ＴＲＴ)是决定端粒酶活性的最主要成分 ,在肿瘤…     

冷冻切片免疫组化染色最佳固定条件探讨

目的分析不同固定液及固定时间对冷冻切片免疫组化染色的影响,寻找冷冻切片免疫组化染色最佳固定条件。方法收集新鲜送检的乳腺、肺、甲状腺手术切除标本共15例,冷冻切片后分别置于4种不同固定液(冷丙酮、95%乙醇、4%中性甲醛液、AAF液)中固定5 min和2 h,并对经4%中性甲醛液和AAF液固定的各2张切片进行热修复,根据组织含有的特定抗原进行相应抗体的免疫组化染色。结果采用4种不同固定液固定冷冻切片,均可满足快速病理诊断的需要,但染色细节存在差异;从5个方面综合分析,AAF液的染色效果优于其他3种固定液,其次为95%乙醇、4%中性甲醛、冷丙酮;就阳性强度而言,冷丙酮最强,其次为AAF液、4%中性甲醛、95%乙醇;冷冻切片固定5 min和2 h,除固定2 h阳性强度略强于固定5 min外,其他方面均无明显差异;4%中性甲醛液固定的切片经热修复后与未修复相比组织脱片破损严重,组织结构不清晰,但细胞恢复正常大小;AAF液固定的切片经热修复后与未修复相比有轻微脱片,其他方面无明显差异。结论冷冻切片进行免疫组化染色,AAF液的固定效果优于其他3种固定液;采用AAF液对冷冻切片固定5 min且不修复,整体操作时间短、染色效果好,是冷冻切片免疫组化染色非常理想的固定条件。     

不同固定剂对冰冻切片免疫组化结果的影响

目的分析不同固定剂对冰冻切片免疫组化的影响,寻找出最佳的冰冻切片免疫组化的固定剂。方法取常见的组织或肿瘤6种,冰冻切片后,置于6种不同冰冻固定液,95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮、EAF(配方为无水乙醇85mL、冰醋酸5mL、40%甲醛10mL)、AAF(配方为丙酮85mL、冰醋酸5mL、40%甲醛10mL),固定5min,根据组织含有的特定抗原进行相应抗体的免疫组化染色,结果采用中国病理学工作者委员会免疫组化质控中心推荐的免疫组化质控评分标准进行评分。结果不同的固定剂可直接影响到冰冻切片免疫组化染色的成败和质量的高低,甚至会造成假阴性;混合固定液EAF优于其它固定液,其它五种固定液的染色效果依次为AAF、95%酒精、4%甲醛、甲醇、丙酮。结论用冰冻切片做免疫组化染色,对于大多数抗体而言,EAF固定液的效果优于其他5种固定液。     

抗原修复条件的变化对Ki-67免疫组化染色的影响

组织在固定过程中,由于甲醛、加热、有机溶剂的处理,使抗原发生交联、变性等,致使在免疫组化染色过程中无法与抗体结合。但这一变化是可逆的,可通过抗原修复重新暴露抗原决定簇,增加抗原抗体结合的机会,从而提高免疫组化染色效果[1,2]。本工作从影响蛋白构象的温度、pH、表面     

bFGF与ki-67双重免疫组化染色法

双重免疫组化染色是同在一张切片上显示两种不同抗原的免疫组化法 ,能同时观察细胞及组织中两种不同抗原的分布情况 ,对于研究它们之间的关系具有重要意义。本实验成功地在一张切片上显示卵巢肿瘤组织中碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)与增殖细胞核抗原 (Ｋｉ 6 7) ,用以观察ｂＦＧＦ表达的细胞是否为增殖细胞 ,介绍如下。1　材料与方法1 1　标本　 45例卵巢肿瘤组织 ,常规 10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋 ,5ｍｍ厚切片。1 2　试剂　ｂＦＧＦ多克隆抗体 (ＳａｎｔａＣｒｕｓ公司产品 ) ,Ｋｉ 6 7单克隆抗体 (ＭａｘｉｎＢｉｏ公司产品 ) ,双…     

组织芯片在免疫组织化学质量控制中的应用

目的 应用组织芯片技术改善和提高免疫组化染色的质量，使免疫组化结果更具有可信性和可比性。方法 根据所测试抗体的不同，选用北京友谊医院病理科23例中性甲醛固定、石蜡包埋的组织标本（包括正常及病变的组织）。用组织芯片制作仪挖取直径为2mm的组织芯，构建3个组织芯片蜡块，分别用来测试CD20、EMA和PR。然后进行常规切片，厚度4μm，烤片后将组织芯片分发给参加免疫组化质控的单位。各单位按自已实验室的实际情况进行免疫组化染色。结果 经免疫组化染色后，53家单位寄回组织芯片157张。载玻片上的组织芯排列整齐，无移位脱失现象。显微镜下观察，所取组织芯均为有效组织，可完全代表其原组织。经过免疫组化研究中心5位评委对参加者测试片进行集体评审，免疫组化染色总体优良率70．7％。结论 在此次免疫组化染色测试中，组织芯片显示了其信息含量多、可比性强及省时、省力等优点，使得大规模的免疫组化质量控制不仅成为了可能而且变得简便易行。免疫组化染色的总体质量较好，但仍有1／3切片染色不佳，存在的主要问题是抗原修复不足，需要改进。     

抗原修复液的种类、温度及作用时间对抗原修复的影响

抗原修复是免疫组化染色中的常用手段 ,但使用哪种修复液却有不同看法〔1～ 4〕。为此本实验对抗原修复液中的离子种类、离子浓度、ｐＨ值、温度及作用时间分别做了实验 ,旨在探讨这些因素对抗原修复的影响。1　材料与方法1 1　材料　选择每种已知抗体阳性的标本 5例 ,抗体ＥＲ、ＰＲ、Ｂａｘ、ｃｙｃｌｉｎＤ1、Ｋｉ 6 7、ｃ ｍｙｃ及ＳＰ试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司 ,修复液所用试剂为秦皇岛化学试剂厂及石家庄化工厂生产 ,均为分析纯。ＭＰＩＡＳ 5 0 0多媒体彩色病理图文分析仪由同济医科大学清平影像工程公司提供。用ＰＨＳ …     

不同方式进行的EDTA抗原热修复对免疫组化结果的影响

<正>免疫组化染色技术已成为现代病理诊断中不可或缺的检测手段,特别是在判断肿瘤组织的起源、分类以及良、恶性肿瘤的鉴别等方面发挥着非常重要的作用。由于甲醛固定使标本的氨基酸残基分子之间或分子之间形成醛键,抗原决定簇被掩盖或破坏,使部分抗原-抗体反应不能顺利进行~([5])。因此,充分的抗原修复是染色效果好坏的重要环节。各单位都