子宫内膜息肉与子宫内膜癌中Ki-ras 基因表达及临床意义

 目的　探讨 Ki-ras基因激活与子宫内膜癌中的发生发展关系及子宫内膜息肉与子宫内膜癌的关系。方法　对子宫内膜癌及癌前病变组织进行 Ki- ras蛋白免疫组化测定 ,并利用 PCR技术检测 Ki-ras基因第一外显子 1 2密码子突变。结果　 Ki- ras蛋白广泛存在于子宫内膜癌和癌前病变组织中 ,癌前病变 Ki- ras表达为 1 1 .9% ,癌组为 62 .96% ,P<0 .0 5。Ki-ras表达与细胞恶性程度呈正相关。 PCR-RFLP检测与免疫组化结果类似。结论　 1 .Ki-ras基因激活可导致细胞周期增殖失控 ,是内膜癌发生发展的一个重要环节 ;2 .动态观测子宫内膜息肉中的 p21 ras表达阳性者 ,对子宫内膜癌的早期发现可能有积极意义。     

子宫内膜腺癌中凋亡指数的观察

在常规染色的组织学切片中，应用光学显微镜检测２９例子宫内膜腺癌的细胞凋亡情况，观察凋亡指数与肿瘤分级之间的关系。Ⅰ级５例，Ⅱ级１８例和Ⅲ级６例腺癌的平均凋亡指数分别为１．９％、２．８９％和３．１５％。分析表明，凋亡指数在Ⅰ级与Ⅱ级之间和Ⅱ级与Ⅲ级之间的差异没有统计学意义，但Ⅰ级与Ⅲ级之间有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。     

子宫内膜息肉及子宫内膜癌组织中雌激素受体β的甲基化与表达研究

目的检测正常子宫内膜、子宫内膜息肉及子宫内膜癌中雌激素受体β（estrogenreceptor—β,ER—β）基因启动子区CpG岛的甲基化状态及ER—β蛋白的表达,同时分析ER—β启动子甲基化与ER—β的表达间的关系,以探讨子宫内膜息肉的发病机制。方法采用免疫组化ELIVISON二步法检测40例正常子宫内膜、40例子宫内膜息肉及26例子宫内膜癌组织中ER—β蛋白的表达,同时运用甲基化特异性PCR（MSP）检测上述组织中ER—β的甲基化情况。结果正常子宫内膜中ER—β的表达较子宫内膜息肉及子宫内膜癌显著增高（均P〈0．01）,子宫内膜息肉与子宫内膜癌则无显著差异（P〉0．05）。正常子宫内膜及子宫内膜息肉组织中ER-β基因甲基化率较子宫内膜癌显著降低（均P〈0．05）。正常子宫内膜、子宫内膜息肉及子宫内膜癌组织中ER—β的阳性表达与ER—β基因启动子甲基化状态均呈负相关。结论子宫内膜组织中ER-β的基因甲基化可能与子宫内膜息肉乃至子宫内膜癌的发生和复发密切相关。     

rHuEpo对子宫内膜异位症异位子宫内膜细胞生物学行为的影响

目的:观察rHuEpo对原代培养的子宫内膜异位症异位子宫内膜细胞生物学行为的影响.方法:培养原代子宫内膜异位症异位子宫内膜细胞及正常子宫内膜细胞,分为4组:异位内膜细胞缺氧组、正常内膜细胞缺氧组、异位内膜细胞rHuEpo干预组(浓度50mIU/ml)、异位内膜细胞对照组.观察各组细胞生长活性,Epo - ELISA检测各组细胞上清液中Epo浓度,流式细胞仪检测细胞凋亡比率,超微结构观察.结果:rHuEpo干预组细胞生长趋势好于单纯缺氧组细胞,凋亡比率较低(5.3％).缺氧处理后,异位子宫内膜细胞产生较高浓度的Epo( 14.2±1.7) mIU/rnl,明显高于正常子宫内膜细胞(9.1±1.5mIU/ml,q=13.48,P＜0.01).结论:rHuEpo可以抑制缺氧诱导的异位子宫内膜细胞的凋亡;缺氧可以诱导子宫内膜细胞Epo表达增高.     

子宫内膜B细胞淋巴瘤1例

患者,女性,48岁,因阴道不规则出血2年,进行性面苍乏力1个月,于2004年5月21日入院。患者于2年前无诱因出现不规则阴道出血,按更年期综合征予以对症处理,并辅以清宫后症状好转,其后曾反复出现类似症状,均予以相同的处理,后未进行进一步检查。近1个月以来出现间断阴道出血并进行性面苍、乏力,于2004年5月20日再次予以清官并送病理检查,术后病理诊断为恶性淋巴瘤,遂转入血液科住院治疗。     

子宫腺肌症患者的子宫内膜病理特征分析

目的观察分析子宫腺肌症患者的子宫内膜病理特征。方法选取100例子宫腺肌症患者,对患者内膜的病变情况进行分析。结果 25例患者同时患有子宫内膜异位症,45例患者同时患有子宫肌瘤。临床症状表现为痛经44例,表现为月经量过多46例,表现为子宫发生增大现象10例。100例患者中33例患者为子宫内膜增生过长的病变,43例患者为子宫内膜息肉病变,2例患者为子宫内膜癌,其他22例患者为正常子宫内膜。结论子宫腺肌症患者临床症状的改变和子宫内膜病理特征的改变有密切关系。     

子宫内膜增殖症癌胚抗原的免疫组化研究

 分析癌胚抗原在各型子宫内膜增殖症中标记的结果，以佐证内膜增殖症在癌前病变上的意义。用ABC免疫组化方法检测验102例子宫内膜增殖症组织中癌胚抗原。可见从防癌的角度看，内膜增殖症的分型是有必要的，而癌胚抗原的标记对内膜增殖症的分型有意义，且支持CAH型为癌前病变。对SAH型的处理亦应慎重。     

胶质瘤细胞端粒酶基因表达对其增殖及凋亡影响的研究

背景与目的：端粒酶逆转录酶（hTERT）和端粒酶相关蛋白1（hTP1）是人端粒酶的重要组成部分。已知胶质瘤细胞有端粒酶异常再活化，而hTERT和hTP1基因表达是否也相应增加，尚不清楚。本研究是为了探讨胶质瘤细胞hTERT和hTP1基因表达、增殖活性及凋亡程度变化的相互关系及其在胶质瘤发生、发展中的作用。方法：采用mRNA原位杂交、免疫组织化学染色及原位细胞凋亡检测（TUNEL）等方法观察了70例不同级别的人胶质瘤组织标本。结果：本组70例胶质瘤hTERT mRNA和蛋白的阳性表达率分别为88．6％和82．9％．WHO Ⅰ～Ⅱ级组、Ⅲ级组及Ⅳ级组间比较二者的阳性表达率均无显著性差异（P〉0．05），hTP1 mRNA和蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的阳性表达率均为100％。以上五种阳性肿瘤细胞的密度彼此间均呈显著性正相关（r=0．589～0．882，P〈0．0005），并均随肿瘤级别升高而相应增加，不同级别组间比较差异均有显著性（P〈0．05～0．01）。凋亡肿瘤细胞的检出率也为100％，但凋亡肿瘤细胞密度随肿瘤级别升高而相应减少，不同级别组间比较差异均有显著性（P〈0．01），且与前五种阳性肿瘤细胞密度间均呈显著性负相关（r=-0．551 ～-0．775，P〈0．0005）。结论：以上指标对评价胶质瘤的生物学行为均有重要参考价值，胶质瘤细胞hTERT和hTP1基因异常表达是其端粒酶再活化的先头条件，后者通过抑制肿瘤细胞衰老凋亡和促进其增殖在胶质瘤的发生、发展过程中均起重要作用。     

子宫内膜异位症Treg细胞上调的机制研究

目的 研究子宫内膜异位症Treg细胞上调的原因.方法 选41例子宫内膜异位症患者,其中16例术前经过GnRH-a治疗的为治疗组,另25例术前未经治疗的为未治疗组,同时选25例子宫肌瘤患者为对照组,通过采血、腹腔液取样,用化学发光、流式细胞和ELISA方法检查化验,观察治疗组、未治疗组和对照组的基础雌二醇水平、腹腔液Tr...     

环磷酰胺诱导小鼠HAC肝癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的 探讨环磷酰胺对荷瘤鼠ＨＡＣ肝癌细胞凋亡和增殖的影响。方法 建立小鼠ＨＡＣ肝癌荷瘤模型,用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法检测环磷酰胺作用下,ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡和ＰＣＮＡ表达的变化。结果 １５ｍｇ／ｋｇ环磷酰胺的抑瘤率４３％。ＨＡＣ肝癌细胞的凋亡指数１．９３％,较荷瘤对照组１．１１％明显升高（Ｐ〈０．０５）。增殖指数３５．７５％,较荷瘤对照组５６．３８％明显下降（Ｐ〈０．０１）。结论 环磷酰胺有诱导     

Effect of Celecoxib on Apoptosis of Endometrial Carcinoma Cell

Objective:To investigate the effect of Celecoxib on proliferation and apoptosis of the endometrial carcinoma cell HEC-1B and the effect on the expression of Fas and Survivin mRNA.Methods:The inhibition on the growth of human endometrial carcinoma cell HEC-1B was investigated by cell culture and MTT experiment when treated with different concentrations of Celecoxib.The cell apoptosis was detected by flow cytometry and DNA Ladder Electrophoresis.The change of the expression of Fas and Survivin mRNA after the treatment of Celecoxib was detected With RT-PCR.Results:Celecoxib could effectively inhibit the growth of HEC-1B cells and induce apoptosis.Survivin mRNA expression was decreased and Fas mRNA expression was increased after treating with Celecoxib.Conclusion:Celecoxib could inhibit HEC-1B cell proliferation and induce its apoptosis.     

肺腺癌组织中RGC32基因的表达及其对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

 目的　检测RGC32基因在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法　实时荧光定量PCR检测36例肺腺癌及相应癌旁组织中RGC32基因的表达;应用RNA干扰技术抑制A549细胞中RGC32基因的表达,实时荧光定量PCR检测抑制效果,MTT法测定A549细胞生长抑制率,流式细胞术检测A549细胞凋亡。结果　RGC32基因在肺腺癌组织中表达明显上调,为癌旁组织表达量的2.2736倍（t＝-29.185,P＝0.001）。RNA干扰能够显著抑制A549细胞中RGC32基因的表达。RGC32基因表达降低后,A549细胞的凋亡率由（2.47±0.17）%提高至（4.65±0.26）%（t＝-202.868,P＝0.000）,生长抑制率由2.9 %提高至45.4 %（t＝-37.915,P＝0.001）,细胞增殖活力明显降低。结论　RGC32基因在肺腺癌组织中的表达明显上调,RGC32基因表达降低能够促进A549细胞的凋亡并抑制细胞增殖。     

miRNA-618对急性单核细胞白血病THP-1细胞增殖和凋亡调控的研究

目的探讨miRNA-618(miR-618)对急性单核细胞白血病THP-1细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-618在THP-1细胞和健康人外周血分离的单核细胞中的相对表达量。构建过表达miR-618质粒载体,以空载体作为阴性对照,将二者分别转染THP-1细胞,设定为miR-618过表达组和阴性对照组。采用CCK-8法和流式细胞术分别检测各组THP-1细胞增殖和凋亡情况。采用TargetScan软件预测miR-618靶基因,通过荧光素酶报告基因实验对其进行验证。采用蛋白质印迹法检测miR-618过表达组或阴性对照组的THP-1细胞和健康人外周血单核细胞中预测的miR-618靶基因蛋白表达的水平。结果PCR结果显示,与健康人外周血分离的单核细胞相比,THP-1细胞中miR-618表达量低(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,与阴性对照组比较,miR-618过表达组THP-1细胞增殖能力降低(转染0、24、48、72 h细胞吸光度值:0.20±0.03比0.20±0.03、0.28±0.02比0.35±0.03、0.34±0.03比0.43±0.04、0.39±0.02比0.53±0.05,均P<0.05),细胞晚期凋亡率升高[(27.1±0.1)%比(14.9±0.1)%,t=2.13,P=0.03]。TargetScan软件预测miR-618靶基因为ARPP19。荧光素酶报告基因实验结果显示,转染野生型ARPP19基因质粒+miR-618基因质粒组的THP-1细胞相对荧光素酶活性均高于空白对照组和转染野生型ARPP19基因质粒+miR-618空载质粒组(0.170±0.003比0.100±0.004、0.100±0.001,均P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,miR-618过表达组THP-1细胞ARPP19蛋白表达水平低于阴性对照组,而两组健康人外周血单核细胞中ARPP19蛋白表达水平相近。结论miR-618可能通过抑制急性单核细胞白血病THP-1细胞ARPP19的表达而抑制细胞增殖、促进细胞凋亡。     

苦参碱对人类肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响

 目的　探讨苦参碱（MT）对人类肝癌细胞株HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　用不同质量浓度的MT（0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g／L）对培养的HepG2细胞作用不同时间（24、48、72 h）,用四氮噻唑蓝（MTT） 比色法检测MT对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测MT对HepG2细胞周期及凋亡的影响。结果　质量浓度≥0.1 g／L的MT有抑制HepG2细胞增殖的作用,且作用随药物质量浓度的增加及时间的延长而加强（P＜0.01）。FCM检测分析显示,0.8 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G1期[（75.3±6.5）%对（64.1±6.3）%]（P＜0.05）,1.6 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G2期[（29.1±9.1）%对（11.6±2.1）%]（P＜0.01）。0.4、0.8、1.6 g／L MT作用12、24、48 h对HepG2细胞都有诱导凋亡作用,且作用随药物质量浓度的增加及作用时间的延长而加强（P＜0.01）。结论　MT能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并影响其细胞周期,呈时间和剂量依赖性。MT抗肝癌的机制可能与影响肝癌细胞周期、抑制细胞增殖及诱导凋亡有关。     

骨肉瘤MG-63细胞中Survivin的表达及其反义寡核苷酸对细胞增殖与凋亡的作用

目的 探讨Survivin在骨肉瘤细胞中的表达及Survivin反义寡核苷酸（ASODN）对骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响。方法 设计针对Survivin的ASODN和正义核苷酸（SODN）序列,制备脂质体-寡核苷酸复合物并转染MG-63细胞,分为空脂质体（Lip）组、脂质体介导的SODN（Lip-SODN）组和脂质体介导的ASODN（Lip-ASODN）组。采用免疫细胞染色法检测MG-63细胞中Survivin的表达情况,Western blotting检测各组转染48h后的Survivin蛋白水平,MTT法检测转染24、48和72h后MG-63细胞的增殖情况,流式细胞仪检测转染48h后MG-63细胞的凋亡情况。结果 Survivin主要表达于MG-63细胞的胞核。Lip-ASODN组的Survivin蛋白水平均低于Lip-SODN组和Lip组。不同浓度Survivin ASODN对MG-63细胞的增殖抑制程度不同,Lip-ASODN组的细胞增殖抑制率高于Lip组,且呈浓度依赖性;而Lip-SODN组的增殖抑制率与Lip组的差异无统计学意义（P＞0.05）。Lip-ASODN组的凋亡率为（88.47±0.79）％,高于Lip组的（10.01±0.90）％和Lip-SODN组的（4.12±0.25）％,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 靶向Survivin的ASODN可以显著抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖能力,并促进其凋亡。     

乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖的原位观察

目的 通过原位观察乳腺癌及其癌前病变中细胞凋亡与细胞增殖的表达,探讨其在乳腺组织恶性转化进行中的作用。方法 利用原位ＤＮＡ断裂点的３－羟基末端标记（ＴＵＮＥＬ）技术,增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）免疫组织化学染色原位观察３１例乳腺癌,２０例乳腺不典型增生,２０例乳腺单纯性增生中的细胞凋亡与细胞增殖,以８例正常乳腺组织为对照。     

Toll样受体8在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达及其激动剂对HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察Toll样受体8(TLR8)在人官颈癌细胞株HeLa中的表达,探讨TLR8激动剂CL075对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测13种肿瘤细胞系中TLR8 mRNA和经CL075作用后HeLa细胞中环氧化酶2(COX-2)、Bcl-2和血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达水平;采用免疫荧光技术对HeLa细胞中TLR8蛋白的表达进行定位观察;采用流式细胞术检测不同浓度CL075作用下HeLa细胞的细胞周期和凋亡的变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测HeLa细胞的增殖状态。结果 与其他肿瘤细胞株相比,HeLa细胞中TLR8mRNA的表达水平最高,达703.7±20.6。TLR8蛋白主要定位于HeLa细胞的胞浆中。0.1、0.5和1.0 μg/ml的CL075分别作用于HeLa细胞48 h后,G2/M+S期细胞所占的比例逐渐增高,其中1.0μg/ml CL075作用组G2/M+S期细胞所占的比例最高,达(57.67±1.73)％,明显高于空白对照组[(39.02±2.33)％,P＜0.01]。经不同浓度的CL075处理后,HeLa细胞的凋亡水平与空白对照组相比,无明显改变(P＞0.05);但经顺铂处理后,凋亡细胞明显增多(P＜0.01)。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,CL075作用于HeLa细胞48和72 h后,HeLa细胞的增殖能力明显增强(P＜0.01)。CI075作用于官颈癌HeLa细胞24和48 h后,COX-2、Bcl-2和VEGF mRNA的表达水平明显升高(P＜0.05)。结论宫颈癌HeLa细胞中TLR8的表达水平及其与配体相互作用的信号,可能是肿瘤发生和发展的重要因素之一。TLR8可能是宫颈癌治疗的一个潜在靶点。     

塞来昔布对子宫内膜癌细胞增生和COX-2 mRNA表达的影响

 【目的 探讨塞来昔布对子宫内膜癌细胞HEC-1-B的作用及对COX-2 mRNA表达的影响。方法 采用细胞培养、MTT试验研究不同浓度的塞来昔布对人类子宫内膜癌细胞HEC-1-B生长的抑制作用，通过RT-PCR法检测塞来昔布作用后COX-2 mRNA表达的变化。结果 塞来昔布能够有效地抑制HEC-1-B细胞的生长，并呈一定的剂量和时间依赖关系，同时能够抑制其COX-2 mRNA表达，20 μmol／L和50 μmol／L塞来昔布对COX-2 mRNA表达的抑制率分别为25.92 ％和50.81％。结论 塞来昔布可能是通过降低COX-2 mRNA的表达而抑制子宫内膜癌细胞的生长。     

消癌平对肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响

 目的　研究不同质量浓度、不同作用时间消癌平注射液（XAP）对肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响。方法　以低、中、高剂量（10、20、30 mg／ml）的XAP作用肝癌细胞Hepa1-6 24、48、72 h,采用MTT比色法观察XAP对肝癌细胞Hepa1-6生长的抑制作用,HE染色光镜下观察细胞结构的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果　XAP对肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,且具有时间、剂量依赖关系（P＜0.01）,光学显微镜下可见细胞形态趋向良性分化,流式细胞术检测,低、中、高剂量组XAP作用Hepa1-6细胞48 h后,均出现凋亡峰,凋亡率分别为（7.65±0.40）％、（11.26±1.09）％和（26.71±0.85）％,与对照组的（2.88±0.30）％相比,细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）。结论　XAP对肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖性,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关。