口腔鳞状细胞癌中血管内皮生长因子-C的表达及其与血管、淋巴管生成、淋巴结转移的关系

目的探讨血管内皮生长因子-C（VEGF-C）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达情况及其与血管、淋巴管生成、淋巴结转移之间的关系。方法调查拥有完整临床病理资料的67例口腔鳞癌患者的手术切除标本,采用SP免疫组化技术检测VEGF-C的表达情况并分析其与微血管密度（MVD）、淋巴管密度（LVD）及其他临床病理指标的关系。结果晚期病例、淋巴结转移阳性病例的VEGF-C表达明显升高（P值分别为0.015和<0.001）,而VEGF-C表达与患者性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度无关（P>0.05）。VEGF-C高表达组的LVD明显高于VEGF-C低表达组（P=0.001）,但两组间MVD无统计学差异（P=0.125）。此外,淋巴结转移阳性组的LVD明显高于淋巴结转移阴性组（P=0.026）。结论VEGF-C可能主要通过参与诱导口腔鳞癌淋巴管生成促进淋巴结转移。     

VEGF-C的表达与口腔鳞癌淋巴结转移的关系

目的:观察口腔鳞癌中D2-40及VEGF-C的表达特点,探讨VEGF-C在肿瘤淋巴管生成及淋巴结转移中的作用。方法:将43例口腔鳞癌分为淋巴结转移组和无淋巴结转移组,应用免疫组织化学SP法检测D2-40及VEGF-C的表达情况。结果:口腔鳞癌中的淋巴管主要分布在肿瘤边缘区(肿瘤间质)。癌组织中淋巴管密度及VEGF-C的阳性表达率显著高于正常组织(P<0.05),淋巴结转移组癌灶中淋巴管密度及VEGF-C的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(P<0.05)。结论:口腔鳞癌肿瘤边缘区淋巴管与淋巴结转移相关,VEGF-C可能参与口腔鳞癌淋巴管的形成。     

Regional difference in intratumoral lymphangiogenesis of oral squamous cell carcinomas evaluated by immunohistochemistry using D2-40 and podoplanin antibody: an analysis in comparison with angiogenesis

BACKGROUND: Whether tumor cells induce lymphangiogenesis intratumorally or permeate pre-existing lymphatic vessels in the peritumoral area still remains unclear. In this study, we investigated in detail the intratumoral lymphangiogenesis of oral squamous cell carcinomas (SCC) in comparison with tumor angiogenesis. METHODS: Immunohistochemistry with D2-40, podoplanin antibody, and CD34 antibody were used to evaluate the lymphatic vessel density (LVD) and blood microvessel density (MVD). Vascular endothelial growth factor (VEGF) and VEGF-C expressions of oral SCC were also assessed by immunohistochemistry. RESULTS: LVD significantly increased in the superficial area of tumor tissue compared with normal mucosa, whereas it decreased in the deep area of intratumoral tissue near the invasion front, in sharp contrast to MVD, which significantly increased throughout tumor tissue. Consistent with the decreased intratumoral LVD and increased intratumoral MVD, VEGF-C expression of tumor cells was down-regulated in the deep area of tumor tissue, while VEGF expression of tumor cells was up-regulated throughout the tumor tissue. CONCLUSIONS: Lymphangiogenesis in oral SCC varies depending on the region within the tumor tissue. It is not induced in the genuine tumor stroma near the invasion front, probably due to the down-regulation of VEGF-C expression of tumor cells, which is different from VEGF-mediated induction of intratumoral angiogenesis.     

Podoplanin在口腔鳞状细胞癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的:采用淋巴管特异性标志物podoplanin标记口腔鳞癌组织和正常口腔组织中的淋巴管,并计数淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)值,探讨口腔鳞癌及癌周淋巴管密度与淋巴结转移的相关性及可能机制。方法:采用免疫组织化学方法检测21例正常口腔黏膜组织和88例口腔鳞癌患者组织的podoplanin表达;用podoplanin标记淋巴管,并计数口腔鳞癌和癌周组织的淋巴管密度。采用SPSS13.0软件包对数据进行t检验,分析正常组织和癌组织、淋巴结转移组和未转移组的淋巴管密度(癌周、癌内)。结果:口腔鳞癌及癌周组织的淋巴管密度均高于正常口腔黏膜组织,有显著差异(P<0.05)。癌组织内淋巴管小而闭锁,癌组织周围的淋巴管大而扩张;淋巴结转移组的癌周淋巴管密度(14.270±4.610)显著高于无转移组(9.450±2.411),差异具有显著性(P<0.05),癌组织淋巴管密度在2组间无显著差异。结论:口腔鳞癌患者癌周淋巴管的生成可能是影响区域淋巴结转移的重要因素。     

口腔鳞癌中血管内皮生长因子C、受体3和抑癌基因nm23-H1的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子C（vascular endothelial growth factor C，VEGF-C）、受体3（vascular endothelial growth factor receptor-3，VEGFR-3）和抑癌基因nm23-H1的表达在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）淋巴转移中的作用。方法对经病理证实的OSCC60例切片采用免疫组化SP法检测VEGF-C、VEGFR-3和nm23-H1的表达，计数肿瘤淋巴管密度（lymphatic vessels density，LVD），结合临床病理因素进行分析。结果OSCC中VEGF-C蛋白阳性率为58．3％，LVD为（8．43±2．64）个／高倍镜下和nm23-H。阳性表达，三者均明显差异于癌前病变和良性病变（P〈0．05），VEGF-C表达和LVD、淋巴结转移相关（P〈0．01）；nm23-H1表达与淋巴结转移、临床分期和组织学分级相关（P〈0．05）。结论在OSCC淋巴转移中VEGF-C、VEGFR-3高表达和nm23-H1蛋白缺失起重要作用，三者的检测结果对深入探讨肿瘤淋巴转移机制有参考价值。     

口腔鳞癌中促血管生成素-2的表达与临床病理学特征及血管生成的关系

目的 :研究口腔鳞癌中促血管生成素 2 (Angiopoietin 2 ,Ang 2 )的表达及其与临床病理学特征和微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)间的关系。 方法 :用免疫组化SABC法检测口腔鳞癌标本 41例 (有淋巴结转移者13例 )及 3 0例癌旁正常组织和 10例正常口腔黏膜组织中的Ang 2和CD3 4表达并计数微血管密度 (MVD )。结果 :Ang 2表达主要定位于肿瘤细胞胞浆 ;Ang 2在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织 (P <0 .0 5 )和正常口腔黏膜组织 (P <0 .0 1) ;Ang 2表达与肿瘤的淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 1) ,而与病人的性别、年龄和TNM分期及肿瘤分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ;Ang 2表达阳性组中MVD显著高于Ang 2表达阴性组 (P <0 .0 5 ) ;Ang 2的表达与MVD呈正相关 (P <0 .0 1)。结论 :Ang 2在口腔鳞癌组织中的高表达可能在口腔鳞癌的发展中起重要作用 ,并与肿瘤的淋巴结转移和血管生成有关。     

舌鳞癌淋巴管生成与颈淋巴结转移的关系

目的：研究舌鳞癌淋巴管生成及淋巴管密度／淋巴管相对面积（LVD／LVA）与颈淋巴结转移的关系，为术前准确判断颈淋巴结状况提供参考。方法：口腔颌面外科接受舌癌切除及颈淋巴清扫术的标本63例：对HE染色阴性的淋巴结，应用细胞角蛋白CK（AE1／AE3）标记检测微转移，以免疫组织化学检测结果判断淋巴结转移；以LYVE—1作为淋巴管内皮标志物，研究舌癌淋巴管生成参数——淋巴管密度（LVD）和淋巴管面积（LVA）与颈淋巴结转移及其他临床病理变量（年龄、性别、T分类、病理分级、浸润方式）之间的关系。应用SPSS10．0统计软件包对所得数据进行Mann-whitney U检验。结果：应用细胞角蛋白CK（AE1／AE3）标记免疫组化法检测微转移，提高了淋巴结转移的检出率；舌癌实质内未见到LYVE—1^＋的脉管结构，LYVE—1^＋脉管多位于癌周，癌周LVD、LVA与颈淋巴结转移及其他临床病理变量均无关。结论：舌癌癌周淋巴管密度（LVD）、淋巴管面积（LVA）与颈淋巴结转移及其他临床病理变量均无关，不宜作为术前评估淋巴结状况的指标。     

舌癌组织中COX-2的表达及与肿瘤血管生成的关系

目的:通过观察环氧化酶-2(COX-2)在舌癌组织中的表达,研究COX-2与肿瘤微血管形成的关系。方法:采用S-P免疫组化的方法观察了46例舌鳞状细胞癌组织及颈部转移淋巴结中COX-2和CD34的表达,并以正常口腔黏膜作为对照。结果:COX-2在舌癌组织中呈强阳性表达(82.61%),而在正常口腔黏膜均为阴性表达。两者之间存在显著差异(P=0.000)。COX-2表达强度同舌癌组织中微血管密度值(MVD)呈正相关(rs=0.495,P=0.001);在阴、阳性淋巴结的两组舌癌组织中,COX-2的表达差异有显著性意义(P=0.002)。结论:COX-2在舌鳞癌组织中呈强阳性表达,其与舌鳞状细胞癌的生物学行为密切相关,但其在肿瘤发生中的作用机制有待于进一步探讨。     

中期因子与口腔鳞癌血管新生及预后的关系

目的:探讨中期因子(Midkine,MK)与口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)临床病理及其预后的关系,并研究其与微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测63例OSCC中MK的表达;用CD34标记肿瘤血管内皮细胞计数肿瘤MVD,并对所有病例进行随访.结果:MK在OSCC组织中的表达显著高于正常口腔黏膜组织(P＜0.05);MK的表达与颈淋巴结转移存在相关性(P＜0.05),而与病人的性别、年龄及病理分化程度无关(P＞0.05);MK表达阳性组的MVD高于MK表达阴性组(P＜0.05);MK的表达与MVD呈正相关(P＜0.05).生存分析显示MK阴性组的5年生存率高于MK阳性组.术后复发组和无复发组的MK表达阳性率间无明显差异(P＞0.05).结论:MK的表达是OSCC的不良预后因子,OSCC中MK的高表达与血管生成密切相关,研究MK与肿瘤血管形成的关系可为抗血管生成治疗提供理论依据.     

血管内皮生长因子C 对舌鳞癌癌周淋巴管的促增殖作用

目的研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)对舌鳞癌癌周淋巴管的促增殖作用.方法将VEGF-C高表达的舌鳞癌细胞株(A组)接种于发育至第6～8天的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM),设立空白质粒转染组(B组)和空白对照组(C组),5′-核苷酸酶(5′-Nase)染色观察瘤周淋巴管,淋巴管形态学测量统计分析淋巴管数密度(LVD)、截面面积以及周长的变化.结果 3组在CAM上均能成瘤,肿瘤组织对周围CAM的侵袭较弱,瘤体组织内未见淋巴管的生成;瘤周淋巴管形态学测量分析发现A组癌周淋巴管的LVD、截面面积和周长均高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.01);B、C组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 CAM是研究淋巴管的较理想的模型;VEGF-C能够诱导癌周淋巴管扩张,这可能是VEGF-C增加舌鳞癌颈淋巴转移的机制之一.     

口腔癌淋巴管密度检测及其临床意义

目的探讨口腔癌组织中淋巴管密度（LVD）与颈淋巴结转移及其它临床病理参数之间的关系。方法选择56例口腔鳞状细胞癌石蜡组织标本，采用免疫组化方法检测淋巴管内皮标志物D2-40及淋巴管内皮透明质酸受体-1（LYVE-1）在口腔癌中的表达，计算口腔癌中的LVD，并进行统计学分析，观察LVD与颈淋巴结转移及其它临床病理参数（性别、年龄、发病部位、T分期、病理分级、浸润方式）之间的关系。结果LYVE-1染色显示，癌内LVD在淋巴结转移组明显高于无转移组（P〈0．05）。LYVE-1染色和D2-40染色均显示癌内LVD与病理分级呈正相关（P〈0．017）。LVD与性别、年龄、发病部位、T分期及浸润方式均无关。结论对于口腔癌来说，癌内淋巴管在肿瘤的浸润和转移中发挥重要作用。     

Computer‐assisted morphometric analysis of lymphatic vessel changes in hamster tongue carcinogenesis

J Oral Pathol Med (2010) 39 : 518–524 Background: To characterize lymphangiogenesis in early‐stage hamster tongue carcinoma development, morphological features and spatial relationships of lymphatic vessels. Methods: Lymphatic vessels were examined histochemically, using 5′‐Nase‐ALPase enzyme and combined light and electron microscopy to measure lymphatic vessel area (LVA) and lymphatic vessel density (LVD). Results: In atypical hyperplastic tissues, LVA was found to be 1429.97 and LVD was found to be 39, in carcinoma in situ LVA was 2538.33 and LVD was 48, and in micro‐invasive carcinoma LVA was 5733.74 and LVD was 59. Increased lymphangiogenesis was seen in pre‐neoplastic states and in early‐stage oral squamous cell carcinoma (OSCC). Small regular lymphatic vessels predominated in atypical hyperplasia, and large, irregular lymphatic vessels in early‐stage OSCC. Lymphatic endothelial vessels were stretched and porous over large areas. Conclusions: Newly formed lymphatics and patulous intercellular junctions may be optimally suited for tumor cell metastasis through lymphatic channels in early‐ and middle‐phase carcinogenesis. Lymphatic capillary LVA and LVD became enlarged, and positively correlated, with malignancy, but show no correlation with 7,12‐dimethylbenz[a]anthracene‐induced time.     

CD31、CD34和CD105在舌鳞癌微血管中的表达及其与颈淋巴结转移的关系

目的探讨CD31、CD34和CD105在舌鳞癌微血管中的表达及其与颈淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法对40例舌鳞癌组织标本进行标记染色，按Weidner法计算CD31、CD34和CD105标记的肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果CD31、CD34和CD105在舌癌组织区的表达明显高于正常区组织（P<0.01），CD31与CD34标记的MVD值相比较差异无统计学意义（P>0.05），而它们与CD105之间差异有统计学意义（P<0.01）。不同血管标记物标记的舌癌组织MVD值在男、女患者之间差异无统计学意义（P>0.05），CD31、CD34标记的MVD值在不同的病理分级、临床分期之间差异没有统计学意义（P>0.05），CD105标记的MVD值在不同的病理分级、临床分期之间差异有统计学意义（P<0.05）。不同血管标记物标记的舌癌组织MVD值在有或无淋巴结转移之间差异具有统计学意义（P<0.05），而CD105组差异更为显著（P<0.01）。结论CD105是一种更为理想的血管内皮细胞标记物，它能够更为准确地提示患者发生转移的可能性，可能与舌癌的发生发展有密切的关系。     

舌癌组织中淋巴管密度与淋巴道转移关系的研究

目的：研究舌癌组织中淋巴管密度（lymphatic vessel density,LVD）和舌鳞状细胞癌患者淋巴道转移的相关性。方法：舌癌样本来自138例实施舌癌切除术的患者。利用单克隆抗体D2-40进行免疫组织化学染色。对照正常组织和肿瘤组织中LVD的差异。利用Spearman相关分析评估舌癌患者的LVD和临床病理因素的联系。结果：舌癌组织中LVD明显高于正常组织（P〈0.01）。已发生转移的肿瘤组织中LVD明显高于未转移肿瘤组织（P〈0.01）。LVD与舌癌患者T分期、分级、淋巴结状态和临床分期（r=0.229,0.221,0.794,0.740）具有紧密联系。结论：LVD有规律的增长可能是舌癌发展的一个重要特征,有助于预测舌癌患者早期的淋巴转移。     

中期因子和微血管密度在涎腺腺样囊性癌组织中的表达

目的探讨中期因子（MK）、微血管密度（MVD）在涎腺腺样囊性癌（SACC）组织中的表达和意义,以及两者之间表达的相关性。方法 采用免疫组织化学方法（SP法）检测60例SACC组织及26例正常涎腺组织中MK、MVD的表达状况及两者之间的相关性。结果 MK在SACC组织中高表达,阳性表达率为70.0%（42/60）,正常组织中未见MK表达,二者间差异有统计学意义（P<0.05）。SACC中MVD计数为38.73±8.96,正常涎腺组织中MVD计数为11.15±3.33,二者间差异有统计学意义（P<0.05）。MK、MVD的表达与年龄、性别、分型无关（P>0.05）;与肿瘤的大小、淋巴结转移、TNM分期有关（P<0.05）。MK和MVD在SACC中的表达具有正相关性（r=0.560,P<0.05）。结论MK蛋白的表达、MVD计数的增加与SACC的发生有关,可能是SACC早期诊断指标之一。     

口腔鳞癌间质微血管的特征及意义

目的观察口腔鳞癌间质微血管的空间分布和形态学特征，分析它们与临床病理学参数间的关系，探讨抗血管生成治疗在口腔鳞癌治疗中的作用。方法应用双标免疫组织化学及计算机图像分析技术，检测和分析62例口腔鳞癌及30例癌旁正常组织和10例正常口腔黏膜的微血管分布及形态。结果口腔鳞癌间质微血管与癌旁和正常口腔黏膜微血管相比，前者具有血管密度高、不成熟、形态不规则、血管周长较小的特点（P〈0．01）；口腔鳞癌癌灶边缘的血管与癌灶内血管相比，血管密度更高（P〈0．01）、更不成熟（P〈0．05）；微血管密度与肿瘤的淋巴结转移有关（P〈0．01）。结论口腔鳞癌间质微血管与正常口腔组织血管比较，差异有统计学意义，该差异有利于抗血管生成治疗的应用。癌灶边缘可能是抗血管生成治疗的重要靶区。微血管密度可望成为判断肿瘤恶性程度的一项指标。     

口腔鳞癌组织中Survivin的表达与血管生成的关系

目的 :观察口腔鳞癌组织中Survivin的表达及其与微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)的关系 ,探讨Survivin对口腔鳞癌血管生成的作用及意义。方法 :收集口腔鳞癌标本 42例 ,其中有淋巴结转移者 14例 ,正常口腔黏膜组织 10例 ,用免疫组化染色法探测Survivin和CD3 4 的表达情况并计数微血管密度 (MVD)。结果 :正常口腔黏膜均未见Survivin表达 ,口腔鳞癌中Survivin表达阳性率为 80 .95 % ( 3 4/4 2 )。口腔鳞癌中MVD显著高于正常组织 ,且随病理分化不良而增高 (P <0 .0 5 ) ,有淋巴结转移组MVD显著高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 ) ,Survivin表达阳性组中MVD明显高于Survivin表达阴性组 (P <0 .0 5 ) ,Survivin的表达与MVD呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :Survivin在口腔鳞癌组织中的高度表达在口腔鳞癌发生发展中起重要作用 ,并与其血管生成和淋巴结转移有关     

口腔癌血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的初步观察

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)与口腔癌癌灶微血管密度改变的关系及其在口腔癌发生发展中的作用。方法:化学研究选择抗VEGF单克隆抗体及抗CD34单克隆抗体为第一抗体,对60例口腔癌组织切片标本行免疫组织化学研究。VEGF及CD34的免疫组化方法采用S-P组化染色法。结果:在60例口腔癌中Ñ、Ò、Ó、Ô期 VEGF阳性表达率无显著性差异。颈淋巴结转移组与无颈淋巴结转移组的VEGF表达,经统计学分析有显著性差异。Ô期病例的微血管密度(IMVD)与Ñ、Ò期病例有显著性差异。随着IMVD的提高,其VEGF阳性级别也随之升高,IMVDÑ级与IMVDÔ级的VEGF阳性表达程度有显著性差异(P<0105)。结论:口腔癌中血管内皮细胞生长因子的改变是导致口腔癌癌灶内微血管密度改变的原因之一。     

乙酰肝素酶在口腔鳞癌发生发展中的表达和功能

目的:研究乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)在口腔鳞癌(oral squamous-cellcarcinoma,OSCC)中的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,从而了解Hpa在OSCC血管生成、浸润和转移中的作用。方法:选用人正常口腔黏膜组织10例,口腔白斑15例,OSCC标本48例,采用免疫组化方法和原位杂交技术检测Hpa的表达,用CD31抗体进行血管内皮的免疫组化染色,计数MVD。结果:在口腔白斑组织中Hpa蛋白、Hpa mRNA的阳性表达率均显著高于它们在正常口腔黏膜组织中的表达(P均<0.05),并显著低于它们在OSCC中的表达(P均<0.05)。有淋巴结转移组和肌层浸润组的OSCC组织Hpa蛋白和mRNA的阳性表达显著高于无淋巴结转移组和黏膜及黏膜下层浸润组(P均<0.05)。Hpa蛋白、Hpa mRNA阳性表达的OSCC组织中MVD显著高于阴性表达组(P均<0.05)。结论:Hpa在OSCC中呈高表达,与血管生成密切相关,对OSCC的生长、浸润和转移有促进作用。     

VEGF-C和CD34在涎腺腺样囊性癌中的表达

目的 研究VEGF-C和CD34在涎腺腺样囊性癌（SACC）中表达及其与临床病理的关系，探讨ACC转移机理。方法 采用免疫组化SP法，检测42例ACC中VEGF-C和CD34表达情况，并计算微血管密度（MVD），采用SPSS软件行统计学分析。结果VEGF-C的表达和MVD与ACC组织类型有关（P=0．000；P=0．001）；MVD和VEGF-C表达间无相关性（P=0．165）。结论VEGF-C和MVD可作为ACC分化的指标之一；VEGF-C可能与ACC淋巴结转移有关。