小鼠子宫平滑肌的肾上腺素受体性质与性功能状态的关系(摘要)

用拟交感胺药物肾上腺素(EPI)、去甲肾上腺素(NE)、苯肾上腺素(PE)及异丙基肾上腺素(ISO)为肾上腺素α与β受体激动剂,酚妥拉明与心得安分别为肾上腺素α与β受体阻断剂,分析在不同性功能状态下(雌激素处理、早孕、晚孕及产后)的小鼠子宫肾上腺素受体的性质,并对性功能状态与受体关系作了研究。 经雌激素处理的早孕小鼠子宫,用心得安0.1mM可阻断ISO的抑制效应;也使EPI、NE及PE     

N－（5－甲氧基－3－吲哚乙基）－4一取代苯基哌嗪－1－乙酰胺类α1－受体拮抗剂的合成及其生物活性

目的：研究5-甲氧基色胺苯基哌嗪衍生物的合成及其α1-受体拮抗活性。方法：由取代苯胺通过环合、取代和胺解等反应合成目的物;测定目的物体外α1-受体拮抗活性。结果：合成了14个新化合物,其结构经IR-^1HNMR和ESI-MS质谱确证;化合物WBI-2、WBI-3、WBI-4、WBI-8、WBI-9和WBI-14对大鼠肛尾肌动脉环有一定的抑制作用(抑制率大于50％)。结论：初步生物活性测试表明,所合成的化合物活性(pA2)低于阳性对照药哌唑嗪。     

TMEP对肾上腺素受体的阻断作用

采用离体和在体标本研究新化合物TMEP即(1-(萘满酮-5-氧基)-3-[2-(2-甲氧基苯氧基)乙胺基]-2-丙醇盐酸盐)对肾上腺素受体的阻断作用.结果发现,TMEP可使激动剂的量效曲线平行右移,最大反应不降低.阻断α1受体的PA2为7.46±0.20(n=8);阻断β1受体的PA2值为7.11±0.27(n=8).可呈剂量依赖性地使异丙肾上腺素诱发家兔心率加快的量效曲线右移,同时降低血压.证明TMEP是一竞争性α1和β1肾上腺素受体的阻断剂.     

N-(3,4-二甲氧基苯乙基)-4-取代苯基哌嗪-1-乙酰胺类α1-受体拮抗剂的合成及其生物活性

目的:研究3,4-二甲氧基苯乙胺苯基哌嗪衍生物的合成及其α1-受体拮抗活性.方法:由取代苯胺通过环合、取代和胺解反应合成目的物;测定目的物体外α1-受体拮抗活性.结果:设计、合成了14个新化合物(WBⅡ-1～14),其结构均经IR、1HNMR、ESI-MS确证.化合物WBⅡ-6、WBⅡ-7、WBⅡ-10和WBⅡ-12对大鼠肛尾肌动脉环有一定的抑制作用,抑制率高于50%.结论:初步生物活性测试表明,所合成的化合物活性(pA2)低于阳性对照药哌唑嗪.     

肾上腺素能受体及其亚型在海马调节机体细胞免疫功能中的作用

用 MTT法测定 Con A刺激脾淋巴细胞的增殖活性 ,研究了在大鼠海马中微量注射去甲肾上腺素 (NE)对细胞免疫功能的影响 ,探讨了α及β受体在此影响中的作用。发现 :1海马内微量注射 NE对 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应产生抑制效应 ,此效应能被 α及 β受体阻断剂酚妥拉明、心得安所阻断。 2 β、β1 及 β2 受体激动剂异丙基肾上腺素 (ISO)、Dobutam ine、Metaproterenol均能抑制 Con A刺激的脾淋巴细胞增殖反应。心得安可阻断 β2 受体激动剂的免疫抑制效应。提示 :海马内的 NE对大鼠细胞免疫功能有抑制效应 ,此效应由肾上腺素能 α及 β受体共同介导。     

新型PPARγ激动剂的设计与合成

目的 设计并合成新型的过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂.方法 根据过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂的结合特征和药效团分布,设计了一系列新型的过氧化物酶体增殖因子活化受体激动剂.以对羟基苯甲醛、1,2-二溴乙烷、酚、乙内酰脲和2-硫代乙内酰脲为原料合成相应的目标化合物.结果 经成醚和脑文格反应合成12个目标化合物.结论 利用本方法可以在温和的条件下获得较高产率的目标化合物,所设计的目标化合物经核磁共振谱和质谱确证结构.     

N-(5-甲氧基-3-吲哚乙基)-4-取代苯基哌嗪-1-乙酰胺类α1-受体拮抗剂的合成及其生物活性

目的 :研究 5 甲氧基色胺苯基哌嗪衍生物的合成及其α1 受体拮抗活性。方法 :由取代苯胺通过环合、取代和胺解等反应合成目的物 ;测定目的物体外α1 受体拮抗活性。结果 :合成了 14个新化合物 ,其结构经IR ,1HNMR和ESI MS质谱确证 ;化合物WBⅠ 2、WBⅠ 3、WBⅠ 4、WBⅠ 8、WBⅠ 9和WBⅠ 14对大鼠肛尾肌动脉环有一定的抑制作用 (抑制率大于 5 0 % )。结论 :初步生物活性测试表明 ,所合成的化合物活性 (pA2 )低于阳性对照药哌唑嗪。     

大脑皮层肾上腺素能神经元应答的药理学:兴奋性α—和抑制性β—受体的证据

以前曾报告,单个皮层神经元对去甲肾上腺素可有兴奋性和抑制性两种应答反应。但还没有按经典的α-和β-受体来阐明其特性。故本文用微电泳给药法来对比各种肾上腺素能受体激动剂(agonist)对单个皮层神经元发放频率(firing rate)的影响,频率增加为兴奋,频率减少为抑制,结果如下:应用α-受体激动剂新福林(Phenylephrine)或甲氧胺(Methoxamine)后,单个皮层神经元发放频率增加(即兴奋表现);而用β-受体激动剂舒喘灵(Salbutamol)后,     

α2-肾上腺素受体激动剂右旋美托嘧啶对缺血性脑血管病的保护作用

缺血性脑血管病是常见病、多发病,其致残率和死亡率均高,严重影响着人类的身体健康和生活质量。当脑缺血缺氧时,神经元会出现损伤和死亡。现有大量研究证明α2-肾上腺素受体激动剂能保护大脑神经元免受缺血／再灌注的损伤,但其发挥神经保护作用的确切机制尚不完全清楚,可能与α2-肾上腺素受体的激活有关。右旋美托嘧啶（dexmedetomidine）是一种高选择性的α2-肾上腺素受体激动剂,具有一定的神经保护作用。本文就缺血性脑血管病病理生理演变过程、右旋美托嘧啶的分子药理学及其发挥神经保护作用的机制作一综述。     

肾上腺素能药物对点燃大鼠海马CA1区群集锋电位的影响

在马桑内酯点燃早期和点燃达标7天后的大鼠海马CA1区,用玻璃微电极记录该区锥体细胞群集锋电位(PS),并观察滴加肾上腺素能受体激动剂至胞体层对PS的影响。实验结果表明:去甲肾上腺素(NE)5μmol/L使PS增高,NE50μmol/L使PS稍降低。使PS增高和降低的作用能分别被β和α受体拮抗剂阻断。α受体激动剂苯肾上腺素(PE)能使PS降低,β受体激动剂异丙肾上腺素(ISO)使PS增高。在点燃早期大鼠的海马脑片上,ISO5μmol/L仅使PS轻微增高,此效应明显低于对照组,提示β肾上腺素能受体激动后使PS增高的效应降低,可能有助于点燃的建立。     

正常和移植颌下腺分泌功能的研究

角结膜干燥症（干眼）是眼科常见病,严重影响患者的生活质量。对于重症患者,传统治疗方法效果不佳。1999年以来,北京大学口腔医院与北京同仁医院眼科合作,采用血管化自体颌下腺移植治疗重症角结膜干燥症105例（108侧）。其中95侧（88％）移植腺体成活,导管通畅,手术治疗成功。患者畏光怕风症状缓解,眼干症状消失或明显减轻,可停用人工泪液,泪膜破裂时间延长,角膜荧光着色减少,部分患者视力有不同程度提高。血管化自体颌下腺移植已成为目前治疗重症角结膜干燥症行之有效的方法。     

Gene transfer of a β2-adrenergic receptor kinase inhibitor up-regulates the level of β2-adrenergic receptor and cAMP in the asthmatic murine lung

Objective: To investigate the effects of gene transfer of a β-adrenergic receptor(β-AR) kinase inhibitor(β ARKct)on pulmonary β2-adrenergic receptor and cAMP following β2-AR agonist treatment in asthmatic mice, and to analyze the relationship between the routes of gene delivery and the changes of β2AR and cAMP. Methods: BALB/c mice were sensitized and challenged by ovalbumin to establish the asthmatic model treated with βAR agonist ( salbutamol injected intramuscularly). The plasmid with the expression of βARKct was constructed and βARKct gene transfer was performed through intravenous injection or intratracheal instillation in asthmatic mice.The gene expression was measured with Western blot analysis, and the changes of pulmonary β-AR and cAMP evaluated by Radioimmunoassay. Results: The expression of tranfered βARKct gene was detectable in lungs and it was expressed more in the lungs of the mice receiving intratracheally plasmid than those receiving intravenously. The levels of βAR and cAMP were upregulated after using plasmid-βARKct to the asthmatic mice treated with β AR agonist. Conclusion: Our results indicated that there were down-regulation of βAR and cAMP in asthmatic mice treated with βAR agonist. Gene transfer of βARKct could inhibit the extent of the down-regulation of βAR and cAMP. The route of gene delivery could also affect the degree of up-regulation of βAR and cAMP. Gene transfer βARKct may provide a novel approach to the therapeutic strategy for asthma.     

醛糖还原酶影响转化生长因子β1诱导的大鼠系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达及其机制的研究

目的探讨醛糖还原酶(AR)对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的大鼠系膜细胞(MsC)细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和IV型胶原(ColIV)蛋白表达的影响及其可能涉及的信号传导通路。方法经亚克隆构建AR真核表达质粒pCDNA3AR,经脂质体介导及G418筛选后,将pCDNA3AR稳定转染至大鼠MsC中。应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Western印迹法和免疫荧光法检测转染MsC表达AR情况;以Western印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC,应用醛糖还原酶抑制剂(ARI)Sorbinil和Zopolrestat分别孵育的MsC:在TGFβ1刺激前后的FN、ColIV以及MAPK/phosphoMAPK表达变化。结果与正常MsC相比,两种ARI———Sorbinil和Zopolrestat均可下调MsC的FN和ColIV蛋白表达,而AR转基因MsC中FN和ColIV表达均升高(均P<0.05);TGFβ1作用后,MsC的FN和ColIV蛋白表达升高,预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,二者表达均下降,而AR转基因MsC中二者表达进一步增高(均P<0.05)。各组细胞在TGFβ1刺激前后总ERK、JNK和p38表达均无明显变化。正常MsC在TGFβ1刺激后phosphoERK、phosphoJNK、phosphop38表达升高,与之相比,若预先使用Sorbinil或Zopolrestat孵育后,则phosphoJNK、phosphop38表达下降,AR转基因MsC中phosphoJNK表达更为升高(P<0.05)。结论AR基因作为TGFβ1反应性基因之一,可能参与TGFβ1诱导的FN和ColIV表达的调控,且AR的作用有可能与TGFβ1刺激后的JNKMAPK和p38MAPK信号通路的活化有关。AR可能参与了非糖尿病导致的肾小球纤维化、硬化的病理发展过程。     

低氧诱导因子-1α对毛囊细胞的作用

目的探讨外源性人低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在成纤维细胞中表达的可行性及其对毛囊周围细胞活性的影响。方法通过脂质体将含有HIF-1αcDNA的真核表达载体pcDNA3.0稳定转染成纤维细胞,应用RT-PCR及Westernblot方法检测HIF-1α在成纤维细胞中的表达,ELISA法检测转染细胞上清液中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达,RT-PCR方法检测转染后细胞中成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达。将该上清加入成纤维细胞及真皮鞘细胞中,MTT法检测加入上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。结果RT-PCR及Westernblot可检测出转染后细胞中HIF-1α的表达,MTT检测加入转染上清后成纤维细胞及真皮鞘细胞活性增强（P〈0.05）,并且该上清液VEGF的表达显著高于未转染组（P〈0.01）。转染后成纤维细胞的bFGF的mRNA表达显著高于未转染组（P〈0.01）。结论应用脂质体能够成功地将外源性人HIF-1α基因转染成纤维细胞,并进行有效表达,其表达的HIF-1α可增强细胞活性且可诱导转染细胞上清液中VEGF的表达,并增加bFGF的mRNA表达,且转染细胞上清可增强成纤维细胞及真皮鞘细胞活性。推测HIF-1α通过其下游因子VEGF及bFGF促进毛囊相关细胞的活性,为HIF-1α对毛囊作用的进一步研究打下了基础。     

Growth inhibiting effects of terazosin on androgen-independent prostate cancer cell lines

Objective To study the effects of an α1-adrenoceptor antagonist, terazosin on the androgen-independent prostate cancer cell lines PC-3 and DU145.Methods Two androgen independent cell lines, PC-3 and DU145, were used to determine cell viability, colony-forming ability, as well as cell cycle distribution, after exposure to terazosin. Western blot analysis was used to determine the expression of p21 WAF1 and p27KIP1.Results This study shows that terazosin inhibits not only prostate cancer cell growth but also its colony forming ability, both of which are main targets of clinical treatment. In addition, terazosin is shown to inhibit cell growth through G1 phase cell cycle arrest and the up-regulation of p27KIP1.Conclusion This study provides evidence that the α1-adrenoceptor antagonist terazosin may have therapeutic potential in the treatment of advanced hormone refractory prostate cancer.     

雄激素受体对IgG蛋白表达及前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究前列腺癌细胞中雄激素受体(AR)对免疫球蛋白lgG表达的影响,及对前列腺癌细胞增殖、迁移的作用.方法 (1)Western blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCap与去势抵抗性前列腺癌细胞株PC-3中AR、IgG蛋白的表达;(2)AR基因(pCDNA3.1+)转染PC-3构建AR过表达的PC-3-AR细胞,沉默LNCap中AR基因表达构建LNCap-siAR细胞;Westernblot检测AR及IgG表达量;Q-PCR检测细胞株中IgG mRNA表达量;四氮甲基唑氮、细胞划痕方法检测细胞的增殖及迁移能力.结果 LNCap细胞与PC-3细胞相比较,AR高表达,IgG低表达(P＜0.05).PC-3-AR细胞lgG降低表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力减弱;LNCap-siAR细胞IgG增高表达(P＜0.01),细胞增殖及迁移能力增强.结论 AR调控IgG蛋白表达呈负相关并与前列腺癌细胞增殖、迁移能力相关.     

选择性β肾上腺素受体激动剂对人滑膜细胞增殖能力的影响

目的：观察β-肾上腺素受体( AR)激动药对人成纤维样滑膜细胞( FLS)增殖的作用,探讨β-AR信号对人FLS功能的影响。方法组织块培养法培养人FLS;使用肿瘤坏死因子α( TNF-α)作为刺激剂,MTT法分别检测β1-AR选择性激动剂多巴酚丁胺和β2-AR选择性激动剂沙丁胺醇对人FLS增殖作用的影响,并计算增殖抑制率;使用沙丁胺醇+β2-AR选择性拮抗剂ICI 118551观察其对FLS增殖功能的影响;Western blot法检测人FLSβ-AR、G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)和β抑制蛋白2(β-arrestin2)胞膜蛋白的表达水平。结果 TNF-α可以显著促进人FLS的增殖;β2-AR激动剂沙丁胺醇能明显抑制FLS的增殖,其拮抗剂ICI 118551能显著拮抗沙丁胺醇的作用;β1-AR选择性激动剂多巴酚丁胺对FLS的增殖无显著影响;TNF-α和沙丁胺醇均能显著降低β2-AR胞膜表达,上调 GRK2、β-arrestin2的胞膜表达。结论β2-AR信号的激活可以抑制FLS增殖;TNF-α和沙丁胺醇可以使GRK2、β-arrestin2的胞膜表达增加,β2-AR胸膜表达下降。     

含不同启动子的腺病毒载体介导的人β2肾上腺素能受体基因在心肌细胞的表达

目的观察不同的启动子cmv、mlc-2v对腺病毒载体介导的人β     

Mechanism of inhibition on activator protein-1 activity by all-trans retinoic acid in gastric cancer cells

Objective To determine the mechanism of all-trans retinoic acid (ATRA) on growth inhibiti on in human gastric cancer cells.Methods Gastric cancer cell lines: MGC80-3, BGC-823, SGC-7901 and MKN-45. CAT assay , Northern blot, Western blot, gene transfection and MTT assay. Results ATRA can inhibit the activator protein-1 (AP-1) activity in ATRA-sensitiv e cell lines, but not in ATRA-resistant cell line, and the anti-AP-1 activity of ATRA is mediated by its receptor, retinoic acid receptor α (RARα). ATRA c an al so inhibit the expression of cJun and cFos. One of the mechanisms for ATRA to i nhibit the growth of gastric cancer cells may be through its inhibitory effect o n the AP-1 activity and its influence on up-regulation of RARα expression. T he inhibition of cJun and cFos expressions by ATRA may also contribute to the an ti-AP-1 activity. Conclusions ATRA inhibits the growth of gastric cancer cells through the regulation of AP-1 activity. This action is mediated by RARα.     

兔慢性缺氧心肌细胞β_2-肾上腺素受体表达的变化及其机制

目的探讨慢性缺氧心肌细胞β2-肾上腺素受体（β2-AR）表达的变化及其机制。方法成年雄性新西兰兔随机分成正常组、假手术组和紫绀组,其中紫绀组行肺动脉分支与左心耳侧侧吻合术,建立紫绀型心脏病动物模型。术后5周,监测动脉血氧分压（PO2）、动脉血氧饱和度（SaO2）;Langendorff逆向灌注酶法分离心肌细胞,测定心肌细胞存活率;Western blot检测心肌细胞β2-AR、caspase-3、p-Akt蛋白表达水平。结果术后第5周,与正常组、假手术组相比,紫绀组PO2、SaO2显著降低,心肌细胞存活率显著下降,β2-AR、p-Akt蛋白表达明显低下,而caspase-3表达显著升高（分别P〈0.01或〈0.05）。结论兔紫绀型心脏病动物模型慢性缺氧心肌细胞β2-AR蛋白表达降低,可能是通过PI3K/Akt调节caspase-3的表达促进凋亡。