以核酸作为青霉素发酵参数的探讨

抗生素发酵生产的提高及其过程的连续化、自动化必须以发酵动力学作为理论根据,而菌体(干重)浓度是发酵动力学的重要参数。在抗生素发酵中,由于复合培养基中往往含有固体物质,菌体干重难以测准,无法了解发酵过程中实际的菌体浓度,妨碍了发酵动力学在抗生素发酵生产中的应用,不利于发酵生产的提高和发展。这是一个长期存在面迄今仍未完全获得解决的问题。 近年来,Aiba,S.等在研究大环内酯类抗生素分批发酵动力学的过程中,通过测定复合培养基发酵中的菌体核酸浓度,再用从合成培养基发酵测得的菌体核酸浓度与菌体(干重)浓度的比值,将前者换算为菌体(干重)浓度,以解决复合培养基发酵中菌体(干重)浓度的测定问题。Martin,J.F.等在多烯类抗生素分批发酵动力学研究中也指出:在营养期,随着菌体生长DNA急剧增加;在生产期,菌体(干重)增加而DNA维持     

高效液相色谱法测定青霉素G发酵液中菌体浓度

介绍一种用效液相色谱法测定发酵液中菌体浓度的方法，所测菌体浓度为发酵液中菌体所占体积的比例。该方法测定速度快，数据上观给出发酵工艺控制和产量率计划算提供依据。     

产腺苷甲硫氨酸酿酒酵母半胱氨酸补料工艺的研究

对酿酒酵母生物合成腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)发酵过程进行工艺优化,研究了半胱氨酸添加量、半胱氨酸添加时间、碳源对菌体浓度和SAM产量的影响。结果表明,在10 L发酵罐中,发酵16 h时,补加半胱氨酸至浓度2 mmol/L,发酵36 h时菌体(DCW)和SAM浓度分别达到15.40 g/L和4.11 g/L;在此基础上,更换糖蜜为碳源,并在还原糖浓度低于5 g/L时,流加糖蜜,相当于还原糖的流加速率为0.8 g/L.h,发酵36 h时菌体浓度和SAM产量分别为15.50 g/L和5.02 g/L;经过发酵工艺优化,发酵液中SAM浓度提高了43.8%。     

金黄色破囊壶菌发酵生产DHA的研究

研究碳源、谷氨酸钠、盐浓度、培养温度等对金黄色破囊壶菌Thraustochytrium aureum H0细胞生长和DHA产量的影响,测定了发酵过程菌体生长曲线。结果表明,葡萄糖是金黄色破囊壶菌发酵生产DHA的最佳碳源,培养基中葡萄糖、谷氨酸钠最适浓度为30g·L-1和5g·L-1,培养基最适盐浓度为自然海水盐浓度的1/2。金黄色破囊壶菌在优化培养基中发酵4d,菌体量和DHA产量分别达到6.2g·L-1、0.51g·L-1。     

环孢菌素A产生菌发酵条件的优化研究

利用“单因素多浓度”和“均匀设计法”对环抱菌素生产菌株茄病镰刀菌的发酵条件和发酵培养基组分进行优化．并在5000L发酵罐上对菌株的发酵动力学规律作了初步的探索。实验结果表明。5．5％玉米粉,0．5％葡萄糖,0．5％干酪素．0．05％KCl,0．05％MgSO4,0．015％KH2PO4和0．3％CaCO3为最佳摇瓶发酵培养基组成;5000L发酵罐的发酵动力学规律表明,菌体浓度发酵培养至80h左右达到最大．产素水平在116h左右达到最大。     

青霉素发酵中还原糖浓度的测定

青霉素的发醇工艺是通过一系列工艺参数来实现的，这些参数中包括物理参数，即温度，压力等，二是化学控制系数，即PH，糖的浓度，其中糖的浓度是控制发酵过程中的重要参数之一，由于碳源对于发酵过程菌体生长及青霉素合成都有较大影响，因此，测知发酵过程中还原糖浓度变化，对青霉素发酵控制有重要的指导意义，在现行生产工艺中，主要用菲林法和比色法来测定还源糖。     

双歧杆菌BB12发酵乳的润肠通便功效研究

本实验研究了双歧杆菌BB12发酵乳、发酵上清液、菌体破碎物和活菌体对小鼠的润肠通便的功效.采用复方地芬诺酯建立便秘模型,通过测定小鼠体重、小肠推进率、排便时间、排便粒教和排便重量等指标,研究了双歧杆菌BB12发酵乳各受试物对小鼠的影响.结果表明,双歧杆菌BB12菌株的四种受试物均具有一定的润肠通便功效,其中发酵上清液组和菌体破碎物组功效显著(P＜0.05).由此可见,双歧杆菌BB12发酵乳在防治和治疗机体便秘方面将有很大的应用潜力.     

固定化细胞新技术用于转化甾体化合物的研究

甾体化合物是临床上用途很广的一类药物,制备时常须借助微生物的羟化酶或脱氢酶引入羟基或双键以提高其生理活性。传统方法是将菌体培养好后再投入底物进行微生物转化,发酵设备庞大,生产周期长,每批需培养菌体。目前在生物工程中出现固定化细胞新技术,该法已用于氨基酸、乙醇等的工业生产,取得很好的经济效果。与传统的发酵     

磷酸盐对西索米星发酵过程的影响作用研究

考察了无机磷酸盐对西索米星产生菌伊尼奥小单孢菌诱变菌株F0 0 3的菌体生长和产物合成的影响作用。研究结果表明 ,发酵培养基中较高的磷酸盐浓度 (3 .2～ 5 .3mmol/L)虽有助于菌体的生长 ,却抑制西索米星产物的合成 ,这与发酵过程中菌体胞内碱性磷酸酯酶和胞外淀粉酶活力受磷酸盐的调节作用有关。     

基于响应面法对红色诺卡氏菌发酵条件的优化及其发酵动力学研究

采用响应面法(RSM)对抗肿瘤药物注射用红色诺卡氏菌细胞壁骨架生产菌——红色诺卡氏菌在5 L发酵罐中的发酵条件(搅拌转速、通气量、接种量)进行优化。当搅拌转速、通气量、接种量分别为307 r/min,3.1 L/min,9.2%时,预测的菌体最大生物量为79.91 g,实际生物量为80.22 g。结果表明,在红色诺卡氏菌5 L罐发酵条件优化方面,响应面法是可行的。在此基础上,对红色诺卡氏菌分批发酵的动力学进行了研究,用Logistic和Boltamann函数建立了红色诺卡氏菌发酵过程中菌体生长、底物消耗随时间变化的数学模型,并用Origin 8.0软件对实验值和模型拟合值进行比较,两者能较好的吻合。说明所建动力学模型能较好反映红色诺卡氏菌的分批发酵过程,这为工业补料-分批发酵及其放大提供了理论依据。     

人胰岛素原在基因工程菌中的高效表达

目的　构建RRhPI-pQE4. 0E .coliM15表达系统 ,以高效表达 (His) 6 -Arg -Arg -人胰岛素原。方法　正交法优化发酵条件 ,通过湿菌体收率、包涵体收率及发酵液A60. 0 的测定对优化结果进行评估 ,并进一步分析发酵过程中主要因素对高密度发酵和高效表达的影响。结果　发酵条件优化后 ,每升发酵培养基可得湿菌体约 4 3g ,包涵体约 14g(湿重 )。结论　优化发酵条件可使湿菌体及包涵体的收率提高。     

盐酸环丙沙星的正常人药代动力学研究

八例男性健康志愿者交叉口服二个厂家生产的盐酸环丙沙星作药代动力学研究。用高效液相色谱法和微生物法测定血、尿标本。结果两种盐酸环丙沙星都于服药后1小时达到高峰浓度,其中HPLC测定浓度分别为1.995、1.759mg/L;微生物测定浓度为2.332、2.121mg/L。盐酸环丙沙星在体内代谢药一时曲线符合二房室模型。半衰期为5.7小时。肾清除率占总体消除率的40％～50％,24小时内两种产品原型药物在尿中的回收率分别为52.5％、40.2％。该药的肾清除率为25L/h,两种环丙沙星药代动力学特征基本相似,统计学处理无显著性差异(P>0.05)。     

HPLC测定乙酸在控制G-CSF工程菌高密度发酵质量中的应用研究

采用ＨＰＬＣ和ＧＤＡＳ分析测定Ｇ－ＣＳＦ基因工程菌在发酵罐高密度发酵培养过程中菌体产生积累乙酸的含量,分析确定了乙酸含量与产物表达的量化关系,验证了乙酸抑制产物表达的作用。建立了快速测定菌体培养过程中乙酸积累含量检测和动态菌体产物表达量测定的方法。     

瑞士乳酸杆菌摇瓶发酵条件及产酶条件优化

以Lactobacillus helveticus ATCC8018为出发菌株，对其液体发酵工艺进行了优化。实验考察了培养液初始pH值，摇床速度，发酵温度，接种量，发酵时间对菌体生长的影响；同时考察了用超声波破碎菌体的条件。实验确定了摇瓶发酵培养的最佳条件：初始pH值6．85，摇床速度115r／min，发酵温度40℃，接种量5％，发酵40h后菌体达到稳定生长期；菌体的破碎条件为超声波输出功率为360W、细胞浓度为20％，超声波每次辐射时间为4S、间隙时间为6S，累计辐射时间10min的效果比较理想。     

溶氧浓度对rhG-CSF工程菌高密度发酵的影响

目的确定rhG-CSF工程菌高密度发酵的最佳溶氧浓度。方法通过通入纯氧,高密度发酵的溶氧值可以精确控制。考察不同溶氧浓度对工程菌的生长、质粒丢失率、乙酸积累情况以及rhG-CSF表达的影响,来确定溶氧的最佳控制范围。结果工程菌生长阶段溶氧控制在25%,诱导后控制在35%,最有利于菌体生长和外源蛋白表达,最终菌体密度为(79.6±2.1)g/L,表达量为(40.2±1.2)%。结论溶氧对工程菌rhG-CSF高密度发酵有显著影响。     

生物肥料生产的工业性试验

介绍５０Ｌ气升式发酵罐用于生物肥料发酵生产的工业性试验。采用菌体光密度、活菌数等指标对细菌的生长情况进行了测定,并用溶氧电极法对该设备的传质性能进行测定。证明用５０Ｌ气升式发酵罐发酵生产生物肥工业化是可行的。     

健康人单次口服国产氟罗沙星的药物动力学研究

健康人单次口服国产氟罗沙星的药物动力学研究李可欣，孙春华，刘蕾，付得兴，缪竞智（北京医院，北京１００７３０）１０例健康志愿者单次口服４０Ｏｍｇ氟罗沙星后的药物动力学。其血清及尿中的氟罗沙星浓度均采用微生物及ＨＰＬＣ两种方法进行测定。药物浓度数据采用３...     

环丙沙星的正常人体药代动力学研究

8例男性健康志愿者交叉口服2片(200mg/片)不同厂家生产的盐酸环丙沙星进行药代动力学研究。血、尿标本均经高效液相色谱法和微生物法两种方法测定。结果表明,两厂生产的盐酸环丙沙星都于服药后1小时达到高峰浓度,其浓度分别为1.995、1.759mg/L(HPLC法),2.332、2.121mg/L(微生物法)药—时曲线表明盐酸环丙沙星在体内的代谢符合二房室模型。HPLC测     

微生物酶法合成辅酶A工艺简介

辅酶A是人体中乙酰化反应的辅酶,调节醣、脂肪及蛋白质代谢的重要因子,特别是它能促进乙酰胆碱的合成,降低血中胆固醇,增加肝醣元的积存,因而临床上已广泛应用于治疗心肌梗塞、冠状动脉硬化、血小板减少性紫癜及各种肝炎等疾病。是一种重要的生化药物。辅酶A广泛存在于各种动物的组织和微生物菌体中。多年来,辅酶A多从微生物细胞,特别是酵母细胞提取制得,亦有用有机合成方法制取。近年来,国外研究用微生物直接发酵生产     

雅致枝霉TE7-15发酵生产γ-亚麻酸的实验研究

目的 :开发生产γ 亚麻酸 (GLA)新的微生物资源。方法 :研究温度、时间、碳源和氮源对雅致枝霉(Thamnidiumelegans)诱变株TE7 15的菌体生长、油脂积累及GLA合成的影响。结果 :确定了TE7 15菌株适宜的摇瓶发酵培养条件 ,其菌体生物量达到 19.0 4g/L ,GLA产量达到 10 79.95mg/L。 结论 :该菌株可以满足工业化生产的要求