聚酰胺—胺型纳米载体的研究进展

聚酰胺－胺型纳米载体是一种高分子多聚物，商品名为superfect^TM，因为其形状及表面胺基团的设置精细，故有“人工球状蛋白”之称。它的表面主要为胺基团，具有结合、浓缩药物或DNA的能力，并将它们高效导入各种细胞，通过适当的修饰可以靶向定位，体外显示无明显的细胞毒性，因而可以在医学研究包括药物控释系统充当基因治疗中的基因转移载体，在诊断、监测中都可以起到重大的作用，目前是各学科中的研究热点之一。     

聚酰胺-胺型纳米载体在肿瘤治疗中的研究现状

近年来 ,纳米技术、生物技术等学科飞速发展 ,肿瘤的治疗也有明显进步。作为一种新型人工合成的纳米材料 ,聚酰胺 胺型树枝状高聚物 (PAMAM D)具有颗粒直径小、易制备纯化、载药量高、可生物降解、特殊的树枝状结构及表面电荷、无免疫原性及遗传毒性等特点 ,使得其作为药物载体和基因载体成为肿瘤靶向治疗的新热点。该文对聚酰胺 胺型纳米作为药物载体及基因载体对肿瘤的靶向治疗作简要介绍。     

聚酰胺-胺型纳米载体在肿瘤治疗中的研究现状

近年来，纳米技术、生物技术等学科飞速发展，肿瘤的治疗也有明显进步。作为一种新型人工合成的纳米材料，聚酰胺-胺型树枝状高聚物(PAMAM—D)具有颗粒直径小、易制备纯化、载药量高、可生物降解、特殊的树枝状结构及表面电荷、无免疫原性及遗传毒性等特点，使得其作为药物载体和基因载体成为肿瘤靶向治疗的新热点。该文对聚酰胺-胺型纳米作为药物载体及基因载体对肿瘤的靶向治疗作简要介绍。     

去铁胺联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡作用的实验研究

目的：探讨铁螯合剂联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡的作用。方法：实验分为5组：空白对照组、去铁胺组、阿糖胞苷组、去铁胺+ 阿糖胞苷组、去铁胺+阿糖胞苷+三氯化铁组。上述各组与HL-60细胞共同培养6,12,24,4 8 h。通过测定细胞活力、形态学变化、流式细胞仪检测和DNA凝胶电泳等观察细胞凋亡等方法观察诱导HL-60细胞的作用。结果：去铁胺+阿糖胞苷可协同降低HL-60 细胞活力、抑制HL-60细胞增殖、诱导HL-60细胞凋亡,其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：铁螯合剂协同阿糖胞苷具有增强诱导HL-60细胞凋亡 的作用。     

膀胱粘膜下层无细胞基质作为细胞载体的可行性研究

目的 探讨膀胱粘膜下层无细胞基质作为组织工程学细胞载体的可行性。方法 采用胶原酶自膀胱组织分离出平滑肌细胞,在DMEM(含10％胎牛血清)中培养、传代。自膀胱显微解剖出膀胱粘膜下层,以0.5％SDS、双蒸水彻底洗涤后形成无细胞基质。平滑肌细胞以5.0×10~6/cm~2密度种植于膀胱无细胞基质,分别于1周、2周、3周、4周时取标本,HE染色、扫描电镜等观察细胞生长情况。结果 平滑肌细胞可在膀胱粘膜下层无细胞基质上粘附。1周时,平滑肌细胞主要位于膀胱粘膜下层无细胞基质的表面。第2、3周,细胞数量明显增多,并可见细胞向膀胱粘膜下层无细胞基质的中间部位侵入。第4周细胞数量减少。结论 膀胱粘膜下层无细胞基质可以作为细胞载体应用于组织工程学研究。该细胞-载体复合物的回植时间应在3周前。     

诱导性多能干细胞在儿童神经系统疾病中的应用

诱导性多能干细胞( induced pluripotent stem cell,iPS)是类似胚胎干细胞的一种细胞类型,可以通过对多种终末分化的体细胞外源性重编程诱导分化而成,其具有多能分化的潜能,进一步诱导生成神经细胞,为研究神经发育疾病、药物筛选及个体化治疗提供了种子细胞。该文对iPS细胞的研究进展及其在儿童神经系统疾病中的应用作一综述。     

去铁胺和缺氧缺血性脑损伤

去铁胺是一种铁离子螯合剂,具有神经保护作用,能通过螯合铁离子阻断羟自由基的形成,减轻脂质过氧化损伤,减少细胞凋亡.近年研究表明,去铁胺主要通过稳定缺氧诱导因子1α的表达及诱导其靶基因的转录对缺氧缺血性脑损伤后细胞的修复起到积极作用;此外去铁胺还能阻止中性粒细胞介导的细胞损伤.目前去铁胺对缺氧缺血性脑损伤的治疗研究尚处于动物实验阶段,在损伤前或损伤后给予去铁胺均能对脑组织起到保护作用,为临床应用去铁胺提供了实验依据.现对去铁胺的作用机制及应用进展予以综述.     

多胺与早期生长发育

多胺是在生物体内广泛存在的一类多价正离子性脂肪族胺,包括精眯、精胺、腐胺和尸胺。近年来的研究发现体内多胺的变化反映了细胞动力学方面的改变,反映了细胞和组织生长发育的情况。通过检测孕妇血、尿、羊水及胎儿或新生儿血和/或尿中多胺,可评估胎儿或新生儿个体或各系统脏器早期生长发育的情况。     

卡介苗HSP70基因转染HL-60细胞瘤苗制备及抗瘤机制的研究

目的构建卡介苗(BCG)热休克蛋白70(HSP70)的真核表达载体,通过基因转染表达HL-60细胞表面,研究其抗瘤作用和机制。方法利用多聚酶链反应(PCR)方法扩增HSP70基因,与真核表达载体pDisplay连接,构建重组载体pDisplay-HSP70,并利用脂质体2000将其转染HL-60细胞。HL-60细胞分为未转染的HL60-wt组、转染空载体pDisplay的HL60-pDisplay组、转染重组载体pDisplay-HSP70的HL60-HSP70组,分别与外周血T淋巴细胞培养72 h,羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记和流式细胞术测定淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测IFN-γ水平;各组HL-60细胞与T淋巴细胞混合培养6 d后获细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应细胞,加入HL-60靶细胞以不同效靶比共培育12 h,LDH释放改良法检测CTL细胞杀伤活性。结果扩增获得的HSP70基因大小与理论值一致,重组载体pDisplay-HSP70构建正确。HSP70表达在转染后的HL-60细胞表面。转染后的HL-60细胞,即HL60-HSP70组能明显促进异体T细胞扩增,该组CFSE阳性率、IFN-γ含量、CTL杀伤率均高于HL60-wt和HL60-pDisplay组,差异均有统计学意义(P0.05);后两组间差异则无统计学意义(P0.05);随效靶比增大,HL60-HSP70组CTL细胞杀伤活性逐渐增强,差异有统计学意义(P0.05)。结论成功构建真核表达载体pDisplay-HSP70,并制备膜表面表达BCG HSP70的HL-60细胞瘤苗,HSP70基因转染后能明显增强HL-60细胞的免疫原性。     

去铁胺诱导HL—60细胞凋亡及对c—myc基因表达的影响

目的 探讨去铁胺（DFO）对HL－60细胞凋亡的诱导作用及对c-myc基因表达的影响。方法 HL－60细胞与不同浓度的去铁胺培养6、12、24、48h。分别测定细胞活力,观察形态学变化,用流式细胞学检测和DNA凝胶电泳等观察细胞凋亡及免疫组化方法检测c-myc基因表达等指标。结果 DFO可降低HL－60细胞活力、抑制HL－60细胞增殖、诱导其凋亡,并使c-myc基因表达增加,其作用随培养时间延长及DFO浓度增加而明显。结论 DFO可影响HL－60细胞DNA的合成,诱导其凋亡,c-myc的表达增加可能是铁剥夺诱导HL－60细胞凋亡的机制之一。DFO可作为治疗或辅助治疗白血病的药物用于临床,将有重要的临床实用价值。     

铁剥夺诱导HL-60细胞凋亡及对化疗药物诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的 探讨铁剥夺对HL－60细胞凋亡及对化疗药物诱导HL－60细胞凋亡的影响。方法 HL－60细胞与不同浓度的铁螯合剂－去铁胺（DFO）、DFO加化疗药物、化疗药物、DFO加化疗药物及三氯化铁、三氯化铁共同培养6h、12h、24h、48h。通过测定细胞活力,观察细胞形态学变化,应用流式细胞仪检测和DNA凝胶电泳等方法观察细胞凋亡;通过亲和免疫组化方法检测c-myc基因表达,从而确定DFO及DFO与化疗药物联合应用对HL－60细胞的作用。结果 DFO单用可降低HL－60细胞活力、抑制HL－60细胞增殖、诱导HL－60凋亡,并可使c-myc基因表达增加,其作用强度随培养时间延长及DFO浓度增加而增加。DFO与化疗药物联合时,可增加化疗药物诱导HL－60细胞凋亡的作用。该作用可被等摩尔的三氯化铁抵消。结论 铁剥夺可影响HL－60细胞DNA的合成,诱导其凋亡,并提高HL－60细胞对化疗药物的敏感性。因此,铁剥夺可作为临床上白血病治疗或辅助治疗的方法之一,不适当补铁或升高血红蛋白将影响化疗疗效。     

儿童免疫相关性疾病临床实用热点问题专家建议系列之六——环磷酰胺在中国儿童免疫相关疾病中的应用建议

正环磷酰胺(cyclophosphamide,CYC)是一种氮芥类烷化剂,1958年首次由人工合成。CYC属于细胞周期非特异性细胞毒药物,在肝脏经细胞色素P450氧化为4-羟基环磷酰胺,再开环分解成活性很强的磷酰胺氮芥和丙烯醛[1],能抑制DNA合成及RNA转录、翻译,对各期细胞均具有杀伤作用,对DNA合成后期(G2期)更强。CYC发挥免疫抑制作用机制为:(1)使T及B淋巴细胞绝对数减少;(2)抑制B淋巴细胞功能,降低免疫球蛋白水平;     

程序性死亡因子1在病毒感染性疾病中的作用

目前对于程序性死亡因子1（PD1）在感染性疾病中对免疫调节的作用主要集中在慢性病毒感染相关的研究,而在急性病毒感染中研究较少。在慢性病毒感染中,PD1高表达于CD8+T细胞表面,这是CD8+T细胞耗竭的标志之一。最近研究显示,在慢性病毒感染中,也存在高表达于调节性T细胞表面的PD1,与耗竭CD8+T细胞表面PD1配体1（PD-L1）结合导致对CD8+T细胞免疫产生更强的抑制效应。阻断耗竭CD8+T细胞与调节性T细胞之间的PD1/PD-L1信号通路可以明显逆转耗竭CD8+T细胞功能,并极大改善耗竭CD8+T细胞抗病毒效应。然而,在急性病毒感染中,PD1/PD-L1信号通路的作用并不明确。本文主要概括了关于PD1在感染性疾病中最新的研究,并论述其在急性、慢性病毒感染中的作用。     

Ⅰ型葡萄糖载体缺陷综合征

Ⅰ型葡萄糖载体缺陷综合征是一种新认识的、可以治疗的神经系统遗传代谢病。它以婴儿期癫癎发作、生长发育迟缓、小头畸形和持续性脑脊液低葡萄糖含量为主要的临床特征，其病因为大脑微血管内皮细胞膜上的Ⅰ型葡萄糖载体缺陷。临床抗癫癎药物治疗无效。生酮饮食（即高脂饮食）是目前唯一有效的治疗办法。     

急性淋巴细胞白血病最新治疗策略(中)

3单克隆抗体白血病细胞表达的家系相关性抗原正日益成为单克隆抗体治疗的靶点,单克隆抗体可以非结合方式用药,也可与抗白血病药物、免疫毒素或放射性分子结合后用药。抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞的相关研究不断发展,从而大大拓展了家系相关性抗原在细胞免疫治疗中的重要性。单     

I型葡萄糖载体缺陷综合征

I型葡萄糖载体缺陷综合征是一种新认识的、可以治疗的神经系统遗传代谢病.它以婴儿期癫癎发作、生长发育迟缓、小头畸形和持续性脑脊液低葡萄糖含量为主要的临床特征,其病因为大脑微血管内皮细胞膜上的I型葡萄糖载体缺陷.临床抗癫癎药物治疗无效.生酮饮食(即高脂饮食)是目前唯一有效的治疗办法.     

整合素与血管生成的研究进展

血管生成是人体许多生理病理过程的基础,细胞表面受体整合素家族是调节血管生成的关键因子,与细胞外基质蛋白、免疫球蛋白超家族等配体结合后,传导细胞内外双向信号,从而在血管内皮细胞增殖与移行中发挥重要作用。以整合素为靶点的治疗策略成为血管增殖性疾病防治的研究热点。现就整合素家族在血管形成中的作用及其临床应用前景作一综述。     

I型葡萄糖载体缺陷综合征

I型葡萄糖载体缺陷综合征是一种新认识的、可以治疗的神经系统遗传代谢病。它以婴儿期癫痫发作、生长发育迟缓、小头畸形和持续性脑脊液低葡萄糖含量为主要的临床特征，其病因为大脑微血管内皮细胞膜上的I型葡萄糖载体缺陷。临床抗癫痫药物治疗无效。生酮饮食（即高饮食）是目前唯一有效的治疗办法。     

雷公藤、盐酸小檗碱及柔红霉素在MOLT-4细胞中的药物作用及不同噻唑蓝法比较

目的研究雷公藤多甙、盐酸小檗碱及柔红霉素(DNR)对急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT-4细胞的细胞毒性作用,比较传统MTT法及改良MTT法在检测药物对悬浮细胞细胞毒性方面差异。方法分别用传统MTT法、改良MTT法检测不同药物浓度作用时MOLT-4细胞的存活率。结果改良MTT法组内变异指数在0~0.2,而传统MTT法在0.2~0.6,改良法同组内差异明显小于传统法;药物作用24h后细胞存活率:单独DNR(1mg/L)为36.36%,DNR与雷公藤(10mg/L)合用时为14.81%,DNR与盐酸小檗碱(10mg/L)合用时为21.56%。雷公藤单独作用时为95.32%,盐酸小檗碱单独作用时为61.56%。结论改良MTT法在研究悬浮细胞增殖及药物毒性方面明显优于传统方法。DNR和盐酸小檗碱均对MOLT-4细胞增殖有抑制作用,雷公藤、盐酸小檗碱可以增强DNR抗肿瘤作用。     

RNA干扰介导新生大鼠星形胶质细胞水通道蛋白-4基因沉默

目的 研究RNA干扰（RNA interference，RNAi)表达载体对原代培养星形胶质细胞水通道蛋白4（aquaporin-4，AQP4)基因的抑制作用。方法 构建AQP4 RNA干扰的表达载体和无意对照载体。采用实时荧光定量PCR和Western blot分别测定AQP4 mRNA和蛋白表达，用[3H]标记的葡萄糖测定细胞体积。结果 AQP4 RNAi 表达载体抑制了星形胶质细胞AQP4 mRNA和蛋白表达,在该载体转染后48 h，AQP4 mRNA和蛋白表达的抑制率分别大约为77% and 85%，而且AQP4基因沉默星形胶质细胞在低渗液中水渗透性明显减轻。结论 RNAi 表达载体能有效抑制星形胶质细胞AQP4基因的表达，而且AQP4可能是星形胶质细胞水转运的主要调控因素。