乳腺癌转移相关基因表达蛋白组织微阵列的研究

[目的]分析c鄄erbB2、p53和cyclinE在乳腺癌组织中的表达以及这些蛋白表达之间的相关性及与患者预后的关系。[方法]有淋巴结转移的乳腺癌病例100例,制作成组织芯片,进行c鄄erbB2、p53和cyclinE免疫组化染色,根据染色指数对乳腺癌原发灶和转移灶进行统计学分析,分析这些指标间相关性及与患者预后的关系。[结果]100例乳腺癌标本中,转移灶c鄄erbB2、p53和cyclinE的表达均高于原发灶肿瘤组织的表达(P<0.05)。这三者之间染色指数,统计学分析显示彼此之间具有相关性。c鄄erbB2、p53和cyclinE与患者之间的预后之间没有明确的相关性。[结论]c鄄erbB2、p53和cyclinE相关基因在调控乳腺癌转移上具有协同作用,c鄄erbB2、p53和cyclinE蛋白增加,促进了肿瘤的转移和浸润。     

BSP在原发性乳腺癌组织中的表达对预测术后骨转移的临床意义

目的:探讨BSP在原发性乳腺癌组织中的表达对预测术后骨转移的临床意义.方法:用免疫组织化学SP法测定70例原发性乳腺癌石蜡标本中BSP的表达,及ER、PR、C-erb-B2表达情况.结果:1)BSP在骨转移组表达明显高于无骨转移组(无转移组 骨外转移组)(P＜0.01),且强阳性表达高于后者(P＜0.05);同时,骨转移组与无转移组和骨外转移组之间阳性表达均有差别(P＜0.05;P＜0.01),而后两组间阳性表达无统计学差异(P＞0.05).2)BSP的表达在Ⅱ期及Ⅲ期患者组间有差异(P＜0.05),但与患者年龄及ER、PR、C-erb-B2状态,肿块大小,病理类型及淋巴结转移数目均无相关(P＞0.05).结论:在原发性乳腺癌组织水平上,BSP是早期预测术后骨转移的良好标志物.     

32基因联合临床病理数据预测淋巴结阴性乳腺癌术后转移风险

目的探讨基因表达谱结合临床病理数据预测淋巴结阴性乳腺癌术后转移风险的方法。方法搜索GEO芯片数据库中乳腺癌根治术后、原发肿瘤≤5 cm、淋巴结阴性、未接受术前新辅助治疗的样本,将所有标本按照2∶1的比例随机分成训练组和验证组,选取训练组与无远处转移生存期（distant metastasis free survival,DMFS）密切相关的基因,以患者年龄、病理类型、肿瘤大小、内分泌治疗方式为变量拟合Cox回归模型,预测验证组患者远处转移风险,Kaplan-Meier法计算生存率和绘制生存曲线并行Log rank检验。结果本研究共纳入367例样本的6 214个基因的表达谱,训练组单基因生存分析表明32个基因探针的表达水平与淋巴结阴性乳腺癌术后DMFS密切相关（P<0.001）,根据32基因联合临床病理数据拟合的Cox比例风险模型计算验证组122例患者的预后指数,预后指数＞0.833为高风险组,中位DMFS为(4 026±382)天;预后指数≤0.833为低风险组,中位DMFS为(7 237±382)天,两组生存曲线的比较差异有统计学意义（χ²=5.900,P=0.015）。结论32基因表达联合临床病理数据进行淋巴结阴性乳腺癌术后转移风险的预测是可行且有效的。     

利用微阵列技术初步分析肺鳞癌组织中的基因表达谱

目的：初步了解肺鳞癌及癌旁组织的基因表达谱的改变并探讨cDNA微阵列表达分析滤膜在肿瘤研究中的应用价值。方法：提取鳞癌及癌旁组织总 RNA，逆转录成α-^32 P-dATP标记的cDNA探针，与含有588个肿瘤要关基因的Atlas^TM Human Cancer cDNA Expression Array杂交。放射自显影后利用扫描杂交信号灰度的强弱在专用的AtlasImage^TM软件分析后得出结果。结果：肺鳞癌组织中，肿瘤坏死因子受体（ TNFR）等16个基因表达上调，白介素－13前体等8个基因表达下调。结果：肺鳞癌组织中，肿瘤坏死因子受体（TNFR）等16个基因表达上调，白介素－13前体等8个基因表达下调。结论：肺鳞癌恶性表型是由其发生过程中多个基因表达的复杂变化决定的。Atasa微陈列表达分析滤膜是研究基因表达谱的较好方法。     

基因芯片在肾癌相关基因研究中的应用

目的：通过研究人肾癌组织和癌旁正常组织中差异表达的基因，寻找肾癌相关基因以用于诊断和治疗。方法：以包含8000个cDNA基因表达谱芯片研究1组肾癌组织样本的基因表达谱。按一步法抽提肾癌和对照组癌旁正常组织的总RNA并纯化mRNA；将等量的对照组织和肾癌组织mRNA分别逆转录合成荧光分子掺入的cDNA-链做探针，混合后杂交上述基因芯片。经严格洗片后用ScanArray3000扫描仪扫描芯片荧光信号图像，计算分析后比较2种组织中差异表达的基因。结果：共筛选出差异表达基因95条，其中未知基因44条。结论：基因芯片在筛选肾癌相关基因的改变具有快速、高通量、灵敏的特点，肾癌在细胞代谢、信号转录、蛋白合成的相关基因方面有异常表达。     

乳腺癌转移相关基因表达蛋白组织微阵列的初步研究

目的:通过MMP2、P27Kipl、纤维连接蛋白(fibronectin)、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,分析上述不同蛋白在乳腺癌组织中的表达,探讨乳腺癌转移相关分子生物学机制.方法:收集具有淋巴结转移的乳腺癌病例100例,制作成组织芯片,进行MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1免疫组化染色,根据染色指数(staining index,阳性细胞百分数×染色强度)对乳腺癌原发灶和转移灶进行统计学处理,分析上述不同指标在乳腺癌转移中的作用.结果:100例乳腺癌标本中,转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1的表达均高于原发灶肿瘤组织的表达,其中转移灶MMP2、P27Kipl、fibronectin、P21WAF1的表达与原发灶的差别具有统计学意义,P＜0.05.结论:MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1表达相关基因可能参与乳腺癌转移,肿瘤细胞表达MMP2、P27Kipl、fibronectin、MDM2、P21WAF1蛋白增加,可能更易于其转移和浸润.从另外一个侧面说明:在乳腺癌演进的过程中,肿瘤细胞获得侵袭能力可能不是由单个基因进行调控的,而是多个基因相互协调作用的结果.     

Medical Treatment of Breast Cancer Bone Metastasis: From Bisphosphonates to Targeted Drugs

Breast cancer bone metastasis causing severe morbidity is commonly encountered in daily clinical practice.It causes pain, pathologic fractures, spinal cord and other nerve compression syndromes and life threateninghypercalcemia. Breast cancer metastasizes to bone through complicated steps in which numerous molecules playroles. Metastatic cells disrupt normal bone turnover and create a vicious cycle to which treatment efforts shouldbe directed. Bisphosphonates have been used safely for more than two decades. As a group they delay time to firstskeletal related event and reduce pain, but do not prevent development of bone metastasis in patients with nobone metastasis, and also do not prolong survival. The receptor activator for nuclear factor kB ligand inhibitordenosumab delays time to first skeletal related event and reduces the skeletal morbidity rate. Radionuclides areanother treatment option for bone pain. New targeted therapies and radionuclides are still under investigation.In this review we will focus on mechanisms of bone metastasis and its medical treatment in breast cancer patients.     

乳腺癌骨转移若干影响因素的分析

目的:探讨乳腺癌骨转移的有关影响因素。方法:对重庆医科大学附属第一医院1990年1月至2005年4月连续收治的136例乳腺癌骨转移患者的临床资料,进行回顾性分析和研究。结果:1)本组骨转移病例均经X线平片、CT、MRI、ECT等诊断,其中大多数病例(2/3)经上述两种以上方法确诊。2)发生骨转移后,随访时间2个月至15年5个月,平均27.2个月(中位值)。3)本组骨转移的发生率为9.9%,平均发生于术后34.0个月。4)骨转移的发生与临床分期高、病理分型差、腋淋巴结转移多及随访时间长呈正相关。5)本组29.4%的骨转移者发生于腋淋巴结阴性患者,其转移迁延时间长并有若干特点。6)骨转移合并其他内脏及软组织转移者死亡率为80.4%(45/56),单纯骨转移者死亡率为20.0%(16/77)(χ²=45.38,P<0.001)。结论:乳腺癌骨转移的影响因素,主要有临床分期、病理分型、腋淋巴结转移及随访时间。腋淋巴结无转移者仍有相当比例可经血行发生骨转移,提示全身治疗(如化疗等)在乳腺癌骨转移预防及治疗中的重要性。     

Alteration of Gene Expression Profile and Signal Pathway Induced by Methylseleninic Acid in Human Lung Cancer Cell Lines

Objective and Methods Lung cancer has a fastest growing rate of morbidity and mortality among malignant tumors and poses a great threat to the human health. Chemotherapy, as one of     

乳腺癌外周血中分子检测标记的筛选

目的 对乳腺癌患者和健康者血液样本的基因表达谱进行分析,从中发现检测乳腺癌的分子标记。 方法 以公共数据库GEO中表达谱数据GSE11545作为训练集,利用BRB-ArrayTools软件提取乳腺癌/正常血液样本的差异表达基因作为候选基因,选取两组间差异水平小于0.001的基因,通过复合变量预测、对角线线性判别分析、最邻近算法和支持向量机四种不同的方法对验证集GSE27562中的样本进行分类预测,留一法交叉验证计算错误分类率,ROC曲线评估预测结果。结果 训练集中乳腺癌与正常血液样本的显著差异基因为61个,从中筛选出39个基因作为分类器,四种不同的方法对验证集进行的分类预测准确率都基本达到甚至超过80%,ROC曲线下面积达到0.925,表明分类预测效果良好。结论 基因芯片分析可以筛选出外周血中乳腺癌的分子标记,有望为乳腺癌的早期临床检测提供一种新的方法。     

纤维粘连蛋白在乳腺癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的　研究纤维粘连蛋白 (FN)在乳腺浸润性癌中的表达及其与同侧腋窝淋巴结转移的关系。方法　应用免疫组化 (SP)法检测 5 0例浸润性癌中基底膜及间质FN的表达。结果　癌巢周围基底膜FN的表达与癌细胞分化程度及淋巴结转移有关 ,而间质FN的表达与以上二者均无关。结论　癌巢周围基底膜FN的表达对乳腺癌预后评估有意义。     

应用基因芯片技术研究骨巨细胞瘤的基因表达

目的运用基因芯片技术研究骨巨细胞瘤差异性基因表达。方法提取手术切除新鲜GCTB标本8例及4例正常骨痂的细胞总RNA,应用含有8064个人类基因点的cDNA表达谱芯片基因芯片筛选差异性表达基因,Amersham Pharmacia GenⅢ扫描杂交信号,用Image Quant软件分析实验结果。结果8例骨巨细胞瘤患者与正常人群相比较基因表达差异的比例约占总数的26％,两者间的基因表达差异具有统计学意义（P〈0．01）,表达差异五倍以上的基因47个,其中25个基因表达明显上调,22个基因表达明显下调,以细胞外基质调节基因、肿瘤相关基因、细胞因子类基因为主要类别。结论基因芯片技术对骨巨细胞瘤分子水平病理机制研究有重要意义,为其诊断治疗进一步提供了线索。     

Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3KCA) Oncogene Mutation Analysis and Gene Expression Profiling in Primary Breast Cancer Patients

Background: The phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) pathway plays a significant role in apoptosis, cellularproliferation and motility. The aim of the present study was to analyze mutations and gene expression profilesof the PI3KCA gene to determine any role in breast carcinomas. Materials and Methods: We analyzed 38 breastcancers for mutations in the two PIK3CA hotspots in exons 9 and 20 by direct sequencing of DNA obtainedfrom biopsy samples. We have also analyzed expression of the PI3KCA gene in 38 breast carcinoma tumor andcorresponding control tissue samples at the mRNA level by RT-PCR. The Fisher’s exact test (252 only) wasperformed using MedCalc software for to examine associations with mRNA levels. Results: In the present study atotal of 13 cases demonstrated somatic mutations. In 9/13 cases 1633 G>A (E545K) were found in exon 9, whereasin exon 20, 4/13 cases had 3140A>G mutation. Our combined analysis showed PI3KCA mutations present in34% of human breast cancer patients. In our study, we have also clearly found significantly higher expressionin breast cancer tissues in comparison with control tissues (p=0.001). Conclusions: PIK3CA mutation is anemerging tumor marker that, in the future, might be used in the process of choosing a treatment. The detectionof PI3KCA mutation might have important clinical implications for diagnosis, progression and therapy.     

希罗达治疗晚期乳腺癌和结直肠癌24例

目的：探讨希罗达治疗晚期乳腺癌、结直肠癌的疗效及不良反应。方法：单药22例口服希罗达每日2500mg/m^2，分早晚各1次，连服14天，3周为一周期。联合治疗2例，口服希罗达每日1250mg/m^2，分早晚各1次，连服14天；奥沙利铂120mg/m^2第1天静脉点滴，3周为一周期，3周期后评价疗效。结果：20例可评价疗效：PR3例．有效率15％，其中乳腺癌1例，结直肠癌2例；SD12例占60％；PD5例占25％。肿瘤标记物(CEA)明显下降1例．治疗后生活质量明显提高2例。希罗达不良反应轻，主要为手足综合征，发生率为46％(11／24)，较有关报道为高．多为Ⅰ～Ⅱ度，均为可逆。结论：希罗达通过独特的酶激活途径在肿瘤组织内转化为抗肿瘤药5-FU，提高肿瘤组织内的药物浓度，提高细胞毒作用的选择性，口服给药方便简单，无需住院。对经阿霉素、紫杉醇治疗失败的乳腺癌及复发转移的结直肠癌患者均有一定疗效。且能提高生活质量，不良反应轻，适合老年及体弱多脏器病变患者服用。     

乳腺癌组织cystatin M基因的表达及其临床病理意义

背景与目的探讨cystatin M基因在人乳腺癌组织中的表达及生物学意义。材料与方法采用半定量RT-PCR方法和免疫组织化学法检测50例乳腺癌组织和配对癌旁乳腺组织半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatin M mRNA和蛋白表达及其与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织cystatin M mRNA表达阳性率为62%(31/50),其配对癌旁乳腺组织为94%(47/50),在乳腺癌细胞系MDA-MB-435S中未见其表达。乳腺癌组织cystatin M mRNA的表达指数为0.412±0.021,明显低于配对的癌旁乳腺组织(0.541±0.020),二者差异有统计学意义(P<0.01)。cystatin M蛋白在乳腺癌及癌旁组织表达阳性率分别为58%(29/50)和92%(46/50);其平均光密度值为0.318±0.058,显著低于癌旁乳腺组织(0.428±0.064,P<0.01);cystatin M表达下调与乳腺癌淋巴结转移和临床TNM分期显著相关(P<0.05),而与肿瘤的大小、病理分级、ER和PR状况无关(P>0.05)。结论人乳腺癌组织存在cystatin M基因表达显著下调且与肿瘤的浸润和转移有关。     

Hypermethylation of TET1 Promoter Is a New Diagnosic Marker for Breast Cancer Metastasis

Breast cancer metastasis is a major cause of cancer-related death in women. However, markers for diagnosisof breast cancer metastasis are rare. Here, we reported that TET1, a tumor suppressor gene, was downregulatedand hypermethylated in highly metastatic breast cancer cell lines. Moreover, silencing of TET1 in breast cancercells increased the migration and spreading of breast cancer cells. In breast cancer clinical samples, TET1expression was reduced in LN metastases compared with primary tissues. Besides, the methylation level ofthe TET1 promoter was increased significantly in LN metastases. Taken together, these findings indicate thatpromoter hypermethylation may contribute to the downregulation of TET1 and could be used as a promisingmarker for diagnosis in patients with breast cancer metastasis.     

胃癌术后36例骨转移的分析

目的：探讨胃癌术后骨转移的特点，从而得到早期诊断和治疗。方法：1996年11月至1999年11月在我科进行全身骨核素显像的254例胃癌术后患者中的36例有骨转移者，从病理、有无淋巴结转移、有否其它脏器转移、骨转移部位、胃癌术后距骨转移时间及骨转移后生存情况进行探讨和分析。结果：36例胃癌术后骨转移中以低分化腺癌为多，各站淋巴结转移无明显差异。凡有骨转移者几乎同时伴有其他脏器转移，骨转移部位以脊柱为多，多发骨转移者占骨转移的47.2%。胃癌术后发生骨转移的时间最短2个月，最长14年，平均38个月。36例胃癌骨转移中，27例均在发生骨转移后2个月至13个月死亡。结论：胃癌较少转移至骨，一旦发生骨转移，表明病变已属晚期。胃癌患者应定期进行骨核素显像，以早期发现骨转移，为早期治疗提供可靠的诊断依据。