△Np63、p21~(WAF1)及MDM2基因蛋白在鼻咽癌组织表达的研究

目的 :探讨鼻咽癌组织中△Np6 3、p2 1WAF1 和MDM2蛋白的表达及意义。方法 :采用免疫组化方法研究△Np6 3、p2 1WAF1 和MDM2蛋白在 6 0例鼻咽癌活检组织的表达 ,6 0例鼻咽癌的组织类型包括角化性鳞癌 3例 ;非角化性癌 5 7例 ,其中含未分化癌 12例。结果 :6 0例鼻咽癌抗△Np6 3染色成不同程度阳性反应 ,表现为细胞核棕黄色。其中角化性鳞癌呈弱阳性表达 ,癌巢周边基底样细胞阳性略呈环状分布 ,或弥散分布 ;非角化性癌多呈强阳性反应 ,染色深 ,呈弥漫或片状分布 ,癌旁粘膜及正常鼻咽粘膜仅基底层和上基层细胞呈阳性表达。p2 1WAF1 在鼻咽癌、癌旁上皮及正常粘膜上皮的阳性率分别为 2 6 %、15 %、7% ,在三组的表达无显著性差异 ;MDM2在鼻咽癌、癌旁上皮及正常粘膜上皮的阳性率分别为 19%、5 %、4 % ,在癌组和非癌组表达有显著性差异。结论 :△Np6 3蛋白在鼻咽非角化性癌中高表达 ,表明与细胞恶性增生密切相关 ,可能在癌细胞多相性退分化中起作用 ,是鼻咽非角化性癌有价值的诊断指标。MDM2在鼻咽癌组的表达显著高于对照组 ,起癌基因作用。△Np6 3和MDM2均抑制p5 3转录活性 ,使NPC中p5 3虽然无突变却缺乏失活。p5 3活性低则不能上调p2 1WAF1 ,G1 关卡失去功能 ,形同虚设。△Np6 3及MDM2高表达和p2 1WAF1 低表     

MDM2、p53和p21WAF1/CIP1蛋白在胃癌中的表达及意义

目的：探讨MDM2在胃癌中的表达情况以及MDM2、p53和p21^WAF1/CIP1在胃癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组化SABC法检测94例胃癌MDM2、p53和p21^WAF1/CIP1蛋白的表达情况，并对三者之间的关系及其与胃癌临床病理特征的关系进行统计分析。结果：94例胃癌中未发现有MDM2的表达。p53及p21^WAF1/CIP1的阳性表达率分别为56.38%（53／94）和41.49%（39／94），阳性表达位于癌细胞核。在癌旁不典型增生灶中，p53有3例，p21^WAF1/CIP1有5例阳生，癌旁正常黏膜均为阴性。p53和p21^WAF1/CIP1两者的阳性表达率之间无显著相关性。在性别、年龄、部位、浸润深度、局产淋巴结转移及组织学类型等临床病理指标中，p53或p21^WAF1/CIP1的阳性表达率的差异均无统计学意义。结论：MDM2在胃癌的发展中不起重要作用，而在胃癌发展中起主要作用的是抑癌基因p53的突变。p21^WAF1/CIP、在胃癌中可能是以不依赖p53的途径增高，说明癌细胞增生已不受G1期检查点的控制。     

骨肉瘤p21^WAF1／CIP1基因DNA序列分析及其mRNA、p21蛋白表达

【目的】通过检测骨肉瘤组织中p21^WAF1/CIP1基因的表达及其DNA序列变化，探讨它们与骨肉瘤生物学特性之间的关系及其对预后的评价。【方法】采用原位杂交及免疫组化法检测45例人骨肉瘤p21^WAF1/CIP1基因mRNA及p21蛋白的表达。采用PCR-SSCP方法检测骨肉瘤p21^WAF1/CIP1基因DNA变化。采用双脱氧核苷酸末端终止法进行DNA的直接测序。【结果】①p21蛋白表达阳性率在骨肉瘤中为18％(8／45)；②p21^WAF1/CIP1基因mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为42％(19／45)；③DNA序列分析结果显示，骨肉瘤中p21^WAF1/CIP1基因第三外显子(exon3)的cDNA全长序列的609位碱基处发生C→T改变，发生率为47％(17／36)。exon2a的cDNA全长序列的187位、303位碱基处发生p T改变，发生率为6％(2／36)。exon2b的cDNA全长序列的522位碱基处发生G→A改变，发生率为2．7％(1／36)。【结论】①随着骨肿瘤恶性度的升高，p21^WAF1/CIP1基因mRNA及p21蛋白的表达下降。②p21^WAF1/CIP1基因mRNA在骨肉瘤中的表达对预后有影响。③本实验对中国人群骨肉瘤p21^WAF1/CIP1基因DNA多态性位点进行了新的定位，这些位点可能会对今后对该基因的研究提供有意义的参考。     

p21^WAF1蛋白在乳腺癌的表达及意义

目的：了解乳腺癌中p21^WAF1蛋白表达及其意义。方法：应用免疫组化SP法检测82例乳腺癌及其配对癌旁乳腺组织、8例正常乳腺组织中p21^WAF1蛋白的表达，并分析其与病理特征、ER和PR的关系。结果：p21^WAF1蛋白乳腺癌的表达（41．5％）明显高于癌组织（2．4％）和正常乳腺组织（12．5％）（P＜0．05），无淋巴结转移组（54．5％）明显高于有淋巴结转移组（32．7％）（P＜0．05），与肿瘤组织学分级、ER和PR无相关（P＞0．05）。结论：p21^WAF1蛋白可作为判断肿瘤生物学行为的重要指标。     

膀胱移行细胞癌组织△Np63和MDM2蛋白表达及意义

目的 探讨缺乏酸性N端反式激活区的截短型p63（ΔNp63）和MDM2蛋白在膀胱移行细胞癌（TCC）组织中的表达及其临床意义。方法 用免疫组织化学法,检测35例石蜡包埋TCC组织标本中ΔNp63和MDM2的表达,以38例正常膀胱黏膜作为对照。结果 膀胱癌组30例（83.3%）ΔNp63蛋白呈阳性表达,膀胱黏膜组7例（18.4%）呈阳性表达,两组比较差异有显著性（uc=5.75,P〈0.01）。膀胱癌组15例（42.9%）MDM2蛋白呈阳性表达,膀胱黏膜组3例（7.9%）呈阳性表达,两组差异有显著性（χ^2=11.99,P〈0.01）。在不同病理分级、临床分期TCC中,ΔNp63表达差异有显著性（H=21.09、14.99,P〈0.01）。随着TCC病理分级、临床分期升高,ΔNp63表达明显增强,呈显著正相关（r=0.64、0.51,P〈0.01）。在不同病理分级、临床分期TCC中,MDM2表达差异有显著性（χ^2=16.63,P〈0.01;χ2=6.72,P〈0.05）。30例ΔNp63蛋白阳性表达TCC组织中MDM2蛋白阳性表达10例（33.3%）,两者呈显著相关性（χ^2=7.78,P〈0.05）。ΔNp63阳性表达主要集中在低分化、浸润性TCC中,而MDM2则主要表达在高分化、浅表TCC中。结论 ΔNp63和MDM2与膀胱肿瘤的发生发展密切相关,可作为膀胱肿瘤早期诊断和判断恶性程度的参考指标。     

ΔNp63蛋白在骨肉瘤中表达的意义

目的: 研究ΔNp63蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用 .方法: 应用免疫组化S-P法检测28例骨肉瘤石蜡标本中ΔNp63蛋白的表达情况.结果: 在28例骨肉瘤中仅有1例高分化骨肉瘤出现弱阳性反应,还有1例骨肉瘤ΔNp63表达为阴性,二者癌旁组织呈阳性反应(+).对照组的15例骨软骨瘤中,共有3例阳性,其中2例为(+),另1例为强阳性(+ + +).结论: ΔNp63在骨软骨瘤和骨肉瘤的癌旁正常组织中呈阳性或强阳性反应,推测p63可能具有肿瘤抑制基因功能.     

ΔNp63 mRNA在膀胱癌组织中的表达及意义

目的 探讨ΔNp63 mRNA在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达及意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测48例TCCB患者肿瘤组织、10例对照膀胱组织ΔNp63 mRNA的表达,并分析ΔNp63 mRNA表达与TCCB临床分期、病理分级等的关系.结果 48例TCCB组织中ΔNp63 mRNA表达阳性率为75.0%(36/48),对照组膀胱组织中ΔNp63蛋白表达阳性率为0.0%(0/10), TCCB组ΔNp63 mRNA表达阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).不同临床分期肿瘤组织中ΔNp63 mRNA表达阳性率、各组间ΔNp63 mRNA表达阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).不同病理分级肿瘤组织中ΔNp63 mRNA表达阳性率、各组间ΔNp63mRNA表达阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TCCB组ΔNp63 mRNA表达水平均明显高于对照组,提示ΔNp63与TCCB的发生密切相关,其可能为TCCB发生的重要促进因素,ΔNp63 mRNA表达水平和TCCB的临床分期、病理分级没有相关性,故ΔNp63在TCCB进展中的作用有待进一步研究.     

鼻咽癌细胞中MDM2基因的表达及其与p53蛋白表达的联系

目的：明确ＭＤＭ２基因在鼻咽癌（ＮＰＣ）组织中的表达情况及其与Ｐ５３蛋白表达的联系。方法：运用非同位素原位杂交和免疫组化技术对４６例ＮＰＣ,１２例慢性鼻咽炎症粘膜（ＣＩＮＥ）进行了ＭＤＭ２ ｍＲＮＡ,ＭＤＭ２蛋白表达的检测结果：１４例ＮＰＣ为Ｐ５３蛋白的高表达相联系（Ｐ〈０．０５）。结论：ＭＤＭ２蛋白可能通过与Ｐ５３蛋白结合及相互作用而在ＮＰＣ的发生过程中起着重要作用。     

p73在人脑胶质瘤表达及与p53、p21表达的相关性

目的 研究p73、p53和p21^WAF1/CIP1蛋白在人脑胶质瘤组织的表达，并对p73与p53、p21^WAF1/CIP1蛋白表达的相关性进行研究，探讨其在人脑胶质瘤发生、发展和恶性变中的可能作用。方法 应用免疫组织化学ABC法检测随机抽取的胶质瘤组织Ⅰ～Ⅲ级20例，Ⅲ、Ⅳ级各20例及正常脑组织11例(对照组)，检测p73蛋白表达；同时应用免疫组织化学SP法检测标本p53和p21^WAF1/CIP1蛋白表达。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclin E和p21^WAF1蛋白表达观察的体会

目的：探讨使用组织芯片技术，观察细胞周期的调控因子cyclin E和p21^WAF1在胃癌组织中的表达的方法。方法：以124例为观察研究对象，自制组织芯片，使用S-P法观察单克隆抗体cyclin E(MAB-0019)、p21^WAF1(MAB-0235)在胃癌组织中的表达情况。对其中11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色。结果：制成组织芯片2块，各合63块组织芯片，所制切片质量较满意，制片组织块完好率为95．2％～98．4％。所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色，与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比，阳性率、阳性表达强度结果基本一致。结论：使用自制组织芯片进行cyclin E、p21^WAF1免疫组化染色分析，效果良好，显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景。     

P-gp和p53蛋白在大肠癌细胞中的表达及其临床意义

目的探讨大肠癌细胞中P-糖蛋白(P-gp)和p53蛋白的表达情况及其临床意义。方法采用SP免疫组织化学法对64例大肠癌标本进行检测。结果64例中有44例大肠癌标本的P-gp和p53蛋白表达一致,二者的表达有相关性;其中19例二者均为阳性表达,25例均为阴性表达,并且P-gp和p53蛋白在（Ⅲ加Ⅳ）组的阳性率显著高于（Ⅰ加Ⅱ）组。结论大肠癌中P-gp和p53蛋白的表达密切相关,二者共同表达提示患者预后不良。     

P21^wafl、MDM2和P53蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨P21waf1、MDM2、P53蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其对于HCC诊断的意义.方法应用免疫组织化学SP法检测61例原发性肝细胞癌及59例相应癌旁肝组织中P21waf1、MDM2和P53蛋白的表达,并对它们之间的关系及其与肝癌的临床病理特征的关系进行统计学分析.结果P21waf1、MDM2和P53蛋白在HCC中的阳性表达率分别为31.15%(19/61)、26.23% (16/61)和57.38% (35/61),明显高于癌旁肝组织(P＜0.001).HCC中P21waf1与MDM、P53蛋白表达无明显相关性(P＞0.05).这三种蛋白的表达与肝硬化及不典型增生无关(P＞0.05).结论 P21waf1、MDM2和P53高表达均在HCC的发生中起作用,但不是早期事件;HCC中存在不依赖wt-P53途径的P21waf1的表达,HCC 中P21waf1的表达不能反映p53的基因状态.     

脑胶质瘤MDM2、p14^ARF和p21^WAF1的表达及其意义

目的 探讨MDM2、p14ARF和p21WAF1蛋白在不同级别脑胶质瘤组织中的表达及其在胶质瘤发生、发展中的生物学意义.方法 应用免疫组化SP法检测Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤组织中MDM2、p14和p21WAF1蛋白的表达,并分析其与胶质瘤组织学分级之间的关系.结果 Ⅱ级和Ⅳ级胶质瘤中,MDM2蛋白的阳性表达率分别为24.00%(6/25)及56.52%(13/23)(χ2=5.298.P=0.021),其阳性表达率随胶质瘤恶性程度的增加而升高,Spearman等级相关分析显示MDM2的表达与胶质瘤分级呈正相关(P<0.05);p14ARF的阳性表达率分别为76.00%(19/25)及34.78%(8/23)(χ2=8.270,P=0.004),p21WAF1的阳性表达率分别为76.00%(19/25)及39.13%(9/23)(χ2=6.700,P=0.010),二者阳性表达率均随胶质瘤恶性程度的增加而降低,Spearman等级相关分析显示,p14ARF、p21WAF1的表达与胶质瘤分级呈负相关(P<0.05).结论 脑胶质瘤组织中,MDM2蛋白呈不同程度的过度表达,且随胶质瘤恶性程度的增加表达水平增高;而p14ARF、p21WAF1随恶性程度的增加而表达水平降低.MDM2蛋白的过表达以及p14ARF、p21WAF1蛋白的低表达,可促进胶质瘤的发生、发展.     

p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤分化和预后的关系

目的分析p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤分化和预后的关系.方法应用免疫组化LSAB法对42例星形细胞瘤中p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2的表达进行观察,对其中25例有随访资料的肿瘤患者存活因素进行分析.结果p53的表达与肿瘤分化和预后密切相关(P<0.01),高表达者预后差.p16、p21WAF1在分化好的星形细胞瘤中表达较强,预后较好;c-erbB-2在分化差的星形细胞瘤中表达较强,预后差.结论p53能客观反映肿瘤的增殖速度、分化和恶性程度,可以作为判断肿瘤预后有价值的参考指标.星形细胞瘤也存在p21WAF1、p16、c-erbB?2基因异常,对分析肿瘤的形成和判断预后有一定价值.     

胃癌组织中p53蛋白、p21^WAF1／CIP1／SDI1表达的意义

采用S-P免疫组化技术，检测40例原发胃癌组织中p53与p21^WAF1/CIP1/SDI1蛋白的表达，应用PCR-SSCP技术对40例胃癌组织中p21^WAF1/CIP1/SDI1基因状态进行分析，对照10例正常胃组织标本，与胃癌临床生物学指标进行相关性分析。结果：p53、p21蛋白异常表研究室仅在胃癌组织中出现；p53与p21蛋白异常表达与胃癌患者肿瘤发生部位、浸润深度、淋巴结转移移、远处转移及组织分化程度等指标无统计学相关性（P＞0.05）；胃癌组织中，p53蛋白与p21蛋白表达间关系密切（P＜0.05)；40例胃癌组织中，p21基因PCR扩增片段进行单链构象多态性分析（SSCP），未发现异常条带。提示：p53与p21蛋白异常表达与胃癌发生有关，但与胃癌临床生物学行为之间未发现相关性；胃癌中，p21蛋白表达以依赖p53途径为主；40例胃癌标本PCR-SSCP检测，未发现p21基因突变；基因状态的完整，也为利用可激活p21基因的药物治疗p53蛋白失活的胃癌提供了重要的理论依据。     

P^16mRNA及其蛋白在胃癌中的表达和临床意义

目的 探讨P^16mRNA及其蛋白产物在胃癌、癌旁及正常胃粘膜中的表达和临床意义。方法 采用原位杂交和免疫组化技术检测33例胃癌、17例癌旁和13例正常胃粘膜中P^16mRNA及蛋白的表达。结果 胃癌P^16mRNA和蛋白阳性表达率均高于正常胃粘膜（P＜0．05）。伴淋巴结转移胃癌阳性细胞密度明显高于未转移者（P＜0．05）。P^16mRNA及其蛋白表达与胃癌的其它病理学特征无相关性,二者在不同胃组织中表达呈正相关。结论 P^16基因异常可能参与胃癌的发生与发展,并有促进胃肿瘤转移的效应,可作为胃癌预后的一个参考指标。     

p53p21MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及意义

目的通过检测p53、p21、MDM2蛋白在正常子宫内膜、卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症组织中的表达,探讨p53、p21、MDM2基因和细胞凋亡在子宫内膜异位症发生发展中的作用,为临床诊治提供理论依据。方法应用免疫组化染色法(S-P法)检测29例正常子宫内膜、30例卵巢子宫内膜异位症和29例子宫腺肌症组织标本的p53、p21、MDM2表达情况,对p53、p21、MDM2的表达及细胞凋亡之间的关系进行分析。结果 p53蛋白在正常子宫内膜组中分泌期表达高于增生期(P0.05),在卵巢子宫内膜异位症组织和子宫腺肌症组织中增生期与分泌期表达差异无统计学意义(P0.05)。正常子宫内膜组p53蛋白表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p53蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。P21蛋白在正常子宫内膜组的表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p21蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。MDM2蛋白在正常子宫内膜组织的表达率分别低于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05)。卵巢子宫内膜异位症组与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。在卵巢子宫内膜异位症组中p53与p21呈正相关(r=0.611,P0.01),p53与MDM2呈负相关(r=-0.541,P0.01),p21与MDM2在卵巢子宫内膜异位症组中表达无相关性(r=0.404,P0.05)。结论细胞凋亡调控蛋白p53、p21、MDM2与子宫内膜异位症和子宫腺肌症的发生发展相关,子宫内膜异位症和子宫腺肌症发病机制可能存在相同之处。     

皮肤鳞癌中Survivin蛋白及p63蛋白的表达及其临床意义

目的 研究皮肤鳞癌组织中Survivin蛋白和p63蛋白的表达及其意义。方法 采用免疫组化法检测60例皮肤鳞癌组织中Survivin蛋白和p63蛋白的表达，探讨两者与鳞癌组织分化程度的关系。结果 (1)Survivin蛋白在皮肤鳞癌组织中阳性表达率为73．3％，组织分化程度越低，阳性表达率越高，但与表达强度无相关性。(2)p63在高分化鳞癌中呈环状分布于癌巢周围，低分化鳞癌中阳性细胞增多，分布紊乱，不同分化程度的鳞癌p63表达有显著性差异(分化程度越低，表达强度越高)。结论 皮肤鳞癌中Survivin蛋白的阳性表达率与分化程度有密切关系，其高表达提示肿瘤预后不良，也可能成为治疗皮肤鳞癌的重要新靶点。p63过度表达的癌细胞是获得了更具增殖、侵袭和间变能力的细胞。     

ATX-LPA和MAPK 信号通路与类风湿性关节炎临床征象的关系研究

目的 探讨自分泌运动因子-溶血磷脂酸(ATX-LPA)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 信号通路与类风湿性关节炎(RA)临床征象的关系。方法 以RA患者72例为RA组,同期30例膝骨关节炎患者(OA)为OA组和30例健康查体志愿者为健康组。ELISA法检测三组血清ATX、LPA、MAPK、类风湿因子(RF)表达水平。分析RA组疾病活动度、疼痛程度等临床征象。比较RA组病情高度活动患者(DAS28评分>5.1分)和病情低中度活动(DAS28评分≤5.1分)患者血清ATX、LPA、MAPK、RF水平以及VAS评分,并分析RA组患者血清ATX、LPA、MAPK水平与血清RF水平、DAS28评分以及VAS评分的关系。结果 与健康组比较,RA组血清ATX、LPA、MAPK、RF水平均升高(P<0.05)。与OA组比较,RA组血清ATX、LPA、RF水平均升高(P<0.05)。RA组和OA组血清MAPK水平无明显差异,OA组与健康组血清ATX、LPA、RF水平亦无明显差异(P>0.05)。OA组血清MAPK水平高于健康组(P<0.05)。与RA组病情低中度活动患者比较,其病情高度活动患者血清ATX、LPA、MAPK、RF水平以及VAS评分均升高(P<0.05)。Pearson线性相关分析结果显示,RA组血清ATX、LPA、MAPK水平与血清RF水平、DAS28评分以及VAS评分均呈正相关(P<0.05)。结论 ATX-LPA和MAPK 信号通路与RA疾病活动度、疼痛程度等临床征象以及血清病情评估指标均密切相关,可能为RA防治提供新靶点。