盐酸水解橄榄苦苷粗提物制备羟基酪醇

目的:建立测定羟基酪醇含量的高效液相色谱法,考察盐酸水解橄榄苦苷粗提物制备羟基酪醇。方法:采用正交实验,对橄榄苦苷粗提物的水解工艺条件进行考察;以HPLC检测羟基酪醇的含量。结果:最佳水解工艺为:盐酸浓度0.5 mol/L,水解时间15 min,水解温度105℃,料液比1/30,水解后相对于橄榄苦苷的转化率为56.3%,大样经粗提取后羟基酪醇纯度4.6%。结论:该法工艺简单,经济实用,为进一步提高羟基酪醇纯度奠定基础,并为工业化生产羟基酪醇开辟了一条新途径。     

女贞子中橄榄苦苷与羟基酪醇在大鼠血浆中的药动学差异

目的比较女贞子中橄榄苦苷与羟基酪醇在大鼠血浆中的药动学差异。方法大鼠灌胃0.4 mmol/kg橄榄苦苷与羟基酪醇,于给药前后不同时间点(0.083、0.167、0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8、10 h)眼眶采血,液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定两者血药浓度,绘制血药浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果橄榄苦苷与羟基酪醇分别在10~1 000 ng/m L(R~2=0.999 0)和200~30 000 ng/m L(R~2=0.999 6)范围内线性关系良好,平均加样回收率均大于95%,RSD均小于8%。两者Tmax分别为(1.7±0.3)h和(0.2±0.0)h,t1/2z分别为(1.7±0.2)h和(3.0±0.1)h,Cmax分别为(356.4±45.0)ng/m L和(24 170.0±3 458.4)ng/m L,AUC0~10 h分别为(1 223.1±107.4)ng/(m L·h)和(30 535.4±5 636.5)ng/(m L·h),药动学行为均符合二室模型特征。结论等剂量下橄榄苦苷与羟基酪醇的药动学行为有显著差异,后者较前者更有利于机体吸收。女贞子酒蒸后药效加强,可能与蒸制过程中橄榄苦苷水解生成羟基酪醇有关。     

特女贞苷与红景天苷的大鼠在体胃肠吸收比较

特女贞苷与红景天苷是女贞子炮制前后含量变化较大的2种活性成分。为探讨女贞子炮制增效机制,该实验采用大鼠在体胃肠灌流模型,用HPLC测定给药后不同时间点大鼠胃与小肠灌流流出液中特女贞苷与红景天苷含量并计算吸收速率常数和吸收百分率,结果在特女贞苷的胃肠灌流流出液中均可检出其次级苷红景天苷。特女贞苷与红景天苷在小肠中的吸收速率常数分别为0.055 3,0.144 2 h^-1,4 h累计吸收率分别为24.46%,60.14%,在胃中吸收速率常数分别为5.70,8.26 h^-1,4 h累计吸收率分别为34.21%,47.23%。实验证明特女贞苷在大鼠胃与小肠内均可被代谢为红景天苷,红景天苷较特女贞苷更利于胃肠吸收。结果提示女贞子炮制后补肝肾药效增强与特女贞苷转化为红景天苷后更利于机体吸收有关。     

碱水解橄榄苦苷制备羟基酪醇及其抗氧化活性研究

目的 以橄榄苦苷粗制品为原料,在强碱作用下水解制备羟基酪醇,并对其进行体外抗氧化活性研究.方法 选取4个因素,即水解温度、NaOH浓度、水解时间和料液比进行单因素试验;在其基础上进行L9(34)正交试验设计优化;利用HPLC-MS对羟基酪醇进行定性分析,同时在相同条件下进行酸水解对比试验和对羟基酪醇清除DPPH抗氧化活性评价.结果 选取的4个因素均极显著,主次因素顺序为水解温度＞ NaOH浓度＞水解时间＞料液比,优化水平组合为水解温度90℃,NaOH浓度0.2 mol/L,水解时间45 min,料液比1∶15;羟基酪醇的色谱保留时间约为10.3 min,且质谱条件下产生的碎片离子相对分子质量为134.8.通过酸与碱水解对比试验发现,橄榄苦苷在碱性条件下水解制备羟基酪醇的效率更高;与2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)对比,羟基酪醇清除DPPH能力是BHT的2.45倍.结论 羟基酪醇的制备在碱性条件下产率较高,且具有较好的抗氧化活性.     

女贞苷G13、oleonuezhenide与红景天苷的大鼠在体胃肠吸收比较

目的:比较女贞子酒蒸前后质变与量变特征化合物(女贞苷G13、oleonuezhenide、红景天苷)的大鼠在体胃肠吸收差异。方法:采用大鼠在体胃肠吸收模型,以HPLC法测定给药后不同时间点大鼠胃和小肠灌注流出液中3种化合物的质量浓度,通过计算吸收速率常数和4 h累计吸收率比较三者在大鼠胃和小肠的吸收差异。结果:女贞苷G13、oleonuezhenide与红景天苷在胃和小肠中的吸收速率常数及4 h累计吸收率的顺序为:红景天苷oleonuezhenide女贞苷G13。结论:红景天苷较女贞苷G13、oleonuezhenide更利于胃肠吸收。研究结果为阐明女贞子酒蒸增效机理提供了科学依据。     

HPLC同时测定丁香叶中丁香苦苷和羟基酪醇含量

目的:建立一种同时测定丁香叶中丁香苦苷和羟基酪醇含量的方法。方法:采用HPLC梯度洗脱法,色谱柱为Dikma Technologies C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水溶液,检测波长为221nm。结果:丁香叶中丁香苦苷和羟基酪醇分别在25.81~826.00μg/m L和3.01~96.40μg/m L内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.8%和98.6%;RSD为1.8%和2.1%。结论:本方法简便快速、准确可靠,可用于丁香叶药材及其制剂的质量评价。     

丁香苦苷大鼠在体肠吸收动力学研究

目的:研究中药单体丁香苦苷的在体肠吸收机制。方法:运用单向灌流模型、采用HPLC对药物的质量浓度进行检测,分别研究吸收部位、药物质量浓度、pH以P-糖蛋白抑制剂对丁香苦苷吸收的影响。结果:丁香苦苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率常数分别为0.002 55,0.006 30,0.009 00,0.007 99 min-1;不同的药物质量浓度0.090,0.180,0.360g·L-1在小肠的吸收速率常数分别为0.003 70,0.007 08,0.006 94 min-1;不同的pH 7.4,6.8,5.0时在小肠的吸收速率常数分别为0.007 33,0.007 47,0.003 62 min-1。P-糖蛋白抑制剂对丁香苦苷肠吸收具有显著性影响(P<0.05)。结论:丁香苦苷在肠道下部吸收较好;药物浓度低时,吸收速率常数小,中、高浓度时,吸收速率常数增大;在pH 5.0～7.4,pH 5.0吸收速率常数较小,pH 6.8,7.4吸收速率常数增大,丁香苦苷为P-糖蛋白底物。     

白芍总苷大鼠在体胃肠吸收动力学研究

目的:研究白芍总苷在大鼠体内胃、肠道吸收的动力学特征。方法:采用HPLC色谱法,以芍药苷和芍药内酯苷为指标,测定白芍总苷分别在1 mg/ml、2 mg/ml、4 mg/ml 3个浓度下在体胃吸收情况,白芍总苷3个浓度(其中芍药苷浓度分别为40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml,芍药内酯苷浓度14.275μg/ml、28.55μg/ml、42.817μg/ml)的肠循环液在小肠整个肠段的吸收情况,白芍总苷溶液(芍药苷浓度80μg/ml,芍药内酯苷浓度28.55μg/ml)在十二指肠、空肠、回肠、结肠等各肠段的吸收情况。结果:3个浓度白芍总苷在胃内吸收量与药物浓度成正比。白芍总苷3个浓度在小肠内吸收量与药物浓度呈正比,3个浓度吸收速率常数值基本一致。白芍总苷在十二指肠、空肠的吸收量较回肠、结肠大,在十二指肠、空肠吸收速率常数值较回肠、结肠大,在十二指肠、空肠吸收半衰期较回肠、结肠短,经SPSS11.5软件统计分析显示均有显著差异。结论:白芍总苷在胃内吸收可能为被动扩散机制,十二指肠可能为白芍总苷在肠段内吸收主要部位。     

二苯乙烯苷大鼠在体胃肠吸收动力学研究

目的建立同时测定胃灌注液及肠循环液中二苯乙烯苷及酚红质量浓度的HPLC/DAD法,并研究二苯乙烯苷在大鼠胃、肠的吸收特性。方法采用大鼠在体胃、肠吸收模型,以HPLC/DAD法测定胃灌注液及肠循环液中药物的量,色谱条件为Dikma Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);柱温30℃;流动相为乙腈-甲醇-0.2%磷酸(35∶15∶50),体积流量1 mL/min;检测波长320 nm(二苯乙烯苷)和430 nm(酚红);进样量20μL。结果二苯乙烯苷及酚红的线性关系良好,线性范围分别为3.5～140μg/mL和1～40μg/mL,日内、日间精密度(RSD)均小于3.1%,方法回收率均在99.48%～102.2%。不同质量浓度(2.5、5、10 mg/mL)的二苯乙烯苷在大鼠胃部的每小时吸收率分别为72.7%,67.7%和56.6%;不同质量浓度(30、60、120μg/mL)的二苯乙烯苷在肠道内的吸收速率常数(Ka)分别为0.047 7、0.051 4、0.056 3 h-1,三者之间无显著性差异(P>0.05)。结论本实验首次建立了HPLC/DAD法同时测定胃灌注液及肠循环液中二苯乙烯苷及酚红的质量浓度,该法操作简便、结果准确、灵敏度高。二苯乙烯苷在肠道内吸收较差,主要吸收部位是胃,为延长药物在胃内的停留时间,改善生物利用度,适合制成胃漂浮片。     

胡黄连苦苷Ⅰ大鼠在体肠吸收动力学研究

目的：研究胡黄连苦苷Ⅰ在大鼠肠道各区段的吸收动力学特征、吸收部位,为其开发利用提供生物药剂学依据。方法：采用大鼠在体肠循环灌流实验,用HPLC对循环液中的胡黄连苦苷Ⅰ进行分析,研究其吸收部位和吸收动力学特征。结果：胡黄连苦苷Ⅰ在肠道各部位的吸收速率常数ka（h-1）和表观渗透系数Papp（10-7）按照空肠、十二指肠、回肠的顺序依次下降。结论：胡黄连苦苷Ⅰ在肠道内无明显的特异吸收部位,药物在肠道内的吸收呈现一级吸收动力学特征。     

酒制对女贞子饮片主要化学成分含量的影响

目的:分析酒制对女贞子饮片中主要化学成分含量的影响,为完善女贞子及酒女贞子饮片的质量标准提供实验依据。方法:采用HPLC,流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长224 nm,柱温35℃,对女贞子及酒女贞子饮片中主要化学成分进行定量分析。结果:与相同企业或同一企业同一批次女贞子饮片比较,酒女贞子饮片中特女贞苷和橄榄苦苷的含量均明显降低,红景天苷、酪醇和羟基酪醇的含量有不同程度的升高;其中红景天苷、酪醇及羟基酪醇的质量分数分别升高了200%,5%,40%以上。结论:酒制后女贞子饮片化学成分含量的变化主要是由于特女贞苷在高温及水蒸气的作用下会水解生成红景天苷,红景天苷进一步水解生成酪醇;橄榄苦苷在高温下不稳定,同样发生水解,生成羟基酪醇;从而导致特女贞苷和橄榄苦苷的含量显著降低,红景天苷、酪醇和羟基酪醇的含量增高。     

女贞子对实验性非酒精性脂肪肝大鼠防治作用△

目的：复制大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,观察女贞子对此模型的影响。方法：高脂饮食同时皮下注射小剂量四氯化碳复制大鼠非酒精性脂肪肝模型,在给予高脂饮食同时以女贞子对其进行干预,与正常饮食组对照。喂养4周后检测血清肝脏酶学（ALT、AST）、血脂肝脂（TG、TC、LDLC、HDLC）水平;肝组织切片染色,显微镜观察肝组织病理变化;并进行统计学分析。结果：与正常组相比,模型组血清的肝功能和脂质水平上升,肝细胞形态明显改变,肝索消失或不清晰;与模型组相比,女贞子干预组血清肝功能指标和脂质水平均显著下降,肝细胞气球样变较少,无明显肝细胞坏死。结论：女贞子对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝有一定防治效果,能减轻脂肪沉积、改善血脂紊乱、纠正肝功能,保肝作用明显。     

淫羊藿-女贞子抗维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用机制探讨

目的:研究淫羊藿女贞子水煎剂及其有效成分提取物防治维甲酸(RA)致大鼠骨质疏松症(OP)的作用机制。方法:SPF级雄性Wistar大鼠36只,随机分为6组,即正常组、模型组、淫羊藿-女贞子水煎剂组、淫羊藿-女贞子提取物低、中、高剂量组,RA(70 mg·kg-1)ig造模,造模的同时给药,给药组分别给予淫羊藿-女贞子水煎剂(9.5 g·kg-1)及药对有效成分提取物低、中、高3个剂量(50,100,200 mg·kg-1)ig治疗2周,免疫组化法检测骨组织中凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),p53的蛋白表达;实时RT-q PCR法检测骨组织中转化生长因子-β1(TGF-β1),果蝇MAD类似基因2(Smad2),Smad3,Smad7 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠骨组织Bcl-2蛋白表达明显降低,而p53蛋白表达显著升高,骨组织TGF-β1及Smad2,Smad3 mRNA相对表达量均明显下降,Smad7 mRNA相对表达量明显升高,均具有统计学差异(P0.05,P0.01);与模型组比较,各给药组可不同程度上调Bcl-2以及TGF-β1,Smad2,Smad3的表达水平,下调p53,Smad7的表达水平,均具有明显统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:淫羊藿-女贞子抗OP的作用机制可能与其维持凋亡与抗凋亡间的平衡,抑制骨组织细胞凋亡以及调控TGF-β/Smads通路信号转导有关。     

女贞子药材中甘露醇的含量测定

目的:建立女贞子中甘露醇的含量测定方法。方法:采用比色法测定。结果:用本法测定甘露醇在(12.5~75.0)μg范围内线性关系良好,相关系数r为0.9994;其平均回收率为97.06%,RSD为0.662%。结论:采用该法对女贞子中甘露醇含量进行测定精密度和重复性良好,更具有普遍性及简便性。     

女贞子降血糖作用的研究

用女贞子水煎剂15,30g/kg给小鼠灌胃10日,可以降低正常小鼠的血糖,对四氧嘧啶引起的小鼠糖尿病有预防及治疗作用,并可对抗肾上腺素或葡萄糖引起的血糖升高。     

女贞子的药理作用研究状况

从十个方面概述女贞子药理作用实验研究状况。     

女贞子及其炮制品中的微量元素分析

通过对女贞子及其炮制品中的微量元素测定表明,女贞子中含有11种微量元素,其中4种为人体宏量元素,5种为人体必需微量元素。实验还表明炮制对女贞子中的微量元素有明显影响。     

女贞子酒制工艺响应曲面法的优化

目的:探讨利用响应曲面法优化女贞子酒制工艺条件。方法:在单因素实验的基础上,选取黄酒用量、闷润时间和蒸制时间为自变量,以齐墩果酸含量为响应值,应用中心组合设计实验方法,研究各自变量及其交互作用对齐墩果酸含量的影响,建立二次多项回归方程的数学模型。结果:最终优选的女贞子酒制工艺为:黄酒用量25.19%,闷润时间3.06 h,蒸制时间5.16 h,在此条件下,齐墩果酸含量的理论值为1.650 35%。结论:响应曲面法建立的数学模型和实验观察数据相符,优化的女贞子炮制工艺方法简便,有效成分含量高。     

女贞子对脊髓损伤大鼠HSP70的表达及自由基的影响

目的：探讨女贞子对脊髓损伤大鼠的神经保护作用。方法：采用改良Allen法造模,随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组30只。在造模成功后6个时间点（1h、6h、24h、3天、6天、14天）取出脊髓标本,检测脊髓组织中热休克蛋白70（HSP70）的表达,造模后6h测定脊髓组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。结果：治疗组脊髓组织HSP7。的表达在所有时间点较模型组明显增强（P〈0．05）,且表达高峰提前至1天;治疗组于损伤后6h,SOD高于模型组,MDA低于模型组,与模型组比较,差异均有显著性意义（P〈0．05）。结论：女贞子在脊髓损伤旱期有效清除自由基,显著增强损伤部位HSP70的表达,保护脊髓神经组织。     

女贞子酒蒸过程中5种苯乙醇类成分的变化规律

目的:探讨女贞子酒蒸过程中5种苯乙醇类成分的动态变化规律。方法:采用HPLC同时测定女贞子生品及酒蒸不同时间(4,8,12,16,20,24 h)炮制品中松果菊苷、毛蕊花糖苷、红景天苷、酪醇及羟基酪醇的含量。结果:在24 h内,随着酒蒸时间的延长,松果菊苷含量逐渐降低,红景天苷含量逐渐增加,酪醇、羟基酪醇含量均先逐渐升高后达到稳定状态,而毛蕊花糖苷含量呈先升高后降低的趋势,以红景天苷含量变化最为显著。结论:炮制对女贞子中苯乙醇类成分含量具有显著影响;女贞子酒蒸后,松果菊苷、毛蕊花糖苷产生质变,红景天苷、酪醇、羟基酪醇发生量变。为揭示女贞子的炮制机制与女贞子饮片的规范化炮制及研发提供了实验依据。