脑缺血与COX-2研究进展

脑缺血冉灌流后损伤，涉及到一系列复杂的机制，炎症反应在缺血性继发性脑损伤与保护中起着重要的作用。环氧化酶-2(COX-2)及其代谢产物可通过对脉管系统、血脑屏障和神经元本身的损伤，参与脑缺血再灌流后损伤的机制。本文就COX-2在脑缺血再灌流损伤中的作用及其作用机制作一综述。     

脑梗死患者COX-1及COX-2基因多态性与阿司匹林抵抗的相关性分析

目的分析脑梗死患者COX-1-1676A G、C50T、-A842G及COX-2-765G/C位点基因多态性与阿司匹林抵抗(AR)关系。方法选取首次发作急性脑梗死,规律服用阿司匹林(ASP) 7 d进行血栓弹力图(TEG)检测,分为阿司匹林抵抗组(AR,25例)和阿司匹林敏感组(AS,45例);对两组患者COX-1及COX-2基因共4个功能多态性位点测序,比较其基因型差异;完善患者生化指标、危险因素等临床资料,规律服用ASP并进行半年临床随访。结果 70例患者中AS组为64. 3%,AR组为35. 7%;两组一般临床特征无差异(P 0. 05); COX-1 C50T、-A842G位点未见多态性,两组COX-1基因-1676A G位点及COX-2基因-765G/C位点的基因型频率比较无差异(P 0. 05);半年随访,终点事件发生率AR组脑梗死复发率较AS组增高(P 0. 05); COX-2-765G/C及COX-1-1676A G基因型与临床主要终点事件脑梗死复发进行比较无差异(P 0. 05)。结论 AR组脑梗死复发率高; AR组和AS组COX-1基因-A842G、C50T均未发现突变; COX-1-1676A G与COX-2-765G/C基因型与AR、主要终点事件脑梗死复发间比较未发现明显相关性。     

COX-2基因表达与星形胶质瘤相关性研究

星形胶质瘤（astrocytic tumours，ATs）是最常见的神经上皮性肿瘤，其发病率占颅内肿瘤的13．0％～26．0％，占胶质瘤的21．2％～51．6％。环氧合酶（Cyclooxygenase，COX）是一种膜结合蛋白，是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，其诱导型同工酶COX-2被认为与肿瘤的发生密切相关。本研究应用免疫组化技术和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测星形胶质瘤组织及非肿瘤组织中COX-2蛋白和mRNA的表达水平，探讨COX-2的表达与星形胶质瘤发生、发展的关系，为星形胶质瘤的早期基因诊断及治疗提供必要的理论依据。     

抑郁症治疗的新靶点：COX-2

抑郁症（Depression）是全球性精神问题,目前对抑郁症的发病机制从最早的单胺假说逐渐转向神经内分泌-免疫系统的研究,大量资料证明抑郁症的发生与免疫激活导致细胞因子分泌增多有关。近年来对抑郁症炎症应答系统激活的研究表明：在炎性反应过程中,前列腺素（Prostaglandins,PG）是与大脑进行信息交流的信号分子,抑郁症患者脑内前列腺素E2（prostaglandinE2,PGE2）水平升高,环氧酶-2（Cycl00xygenase2,COX-2）表达增加。临床和动物实验研究结果证明,COX-2抑制剂对抑郁症有良好的治疗作用,其机制包括调节Th1／Th2平衡,保护神经可塑性等方面。     

COX-2在脑缺血再灌注后的表达

目的确定COX-2免疫组化的空间分布特点,以及mRNART-PCR产物表达的时间分布特征并测序。方法采用石蜡包埋的免疫组化技术,脑组织中RNA提取、RT-PCR技术及测序分析。结果局灶性脑缺血再灌注后COX-2阳性神经元多位于梗死边缘区,另外血脑屏障也可见COX-2免疫反应阳性。COX-2mRNART-PCR的PCR产物相对量,在脑缺血再灌注后15~24h明显增高(P<0.01)。结论COX-2介导着脑缺血再灌注后半暗带和血脑屏障的存活和死亡,在恰当的时间窗内针对COX-2的治疗可能对脑保护是有效的。     

高血糖大鼠脑出血后脑水肿及COX-2的变化

目的 观察高血糖对脑出血后脑水肿及COX-2表达的影响,探讨胰岛素是否具有神经保护作用.方法 采用STZ法诱导高血糖模型,立体定向技术制作大鼠脑出血模型,干湿重法测量脑组织含水量和免疫组化法测定脑组织COX-2的表达.结果 与正常血糖组模型大鼠比较,高血糖组大鼠脑组织含水量明显增加(P<0.05),血肿周围COX-2阳性细胞表达明显增高(P<0.05);而胰岛素干预使上述各项指标降低至正常血糖组水平.结论 COX-2参与了大鼠血肿周围脑组织损伤的病理生理过程,高血糖可加重脑组织损伤,胰岛素则对神经有保护作用.     

Neuroinflammation, COX-2, and ALS--a dual role?

Although the root cause of many neurodegenerative diseases is unknown, neuroinflammation may play a key role in these types of disease, including amyotrophic lateral sclerosis (ALS). In the context of neurodegeneration, it is unclear if the disease is propagated through inflammation, or whether in contrast, evidence of inflammation reflects an attempt to protect against further cellular injury. Inflammatory pathways involving the cyclooxygenase (COX) enzymes and subsequent generation of prostaglandins are potential target sites for treatments to halt the progression of ALS. In the CNS, COX enzymes are localized to neurons, astrocytes, and microglia and can be induced under various conditions. In addition, there appears to be a dual role for the prostaglandin products of COX enzymes in the nervous system. Some prostaglandins promote the survival of neurons, while others promote apoptosis. In this review, the pathways of COX activity and prostaglandin production form the center of the debate regarding the dual nature of neuroinflammation. We will also discuss how this duality may affect future treatments for neurodegenerative diseases such as ALS.     

COX-2在大鼠脑出血损伤机制中的实验研究

目的观察大鼠脑出血后环氧合酶2(COX-2)蛋白动态表达情况与血肿周围脑组织含水量的相互关系,及COX-2抑制剂对ICH大鼠脑水肿和神经功能的影响,探讨COX-2在ICH损伤机制中的作用。方法应用立体定向技术将自体血注入大鼠壳尾核制备脑出血模型,160雄性SD大鼠分为正常对照组、假手术组、脑出血组和尼美舒利治疗组。后3组每组50只,分6h、12h、24h、72h、7d五个时间点进行神经功能障碍评分,测定血肿周边脑组织含水量,免疫组织化学染色观察COX-2蛋白动态表达。结果脑出血组COX-2表达高于正常对照组(P<0.05),治疗组COX-2表达明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组脑组织含水量明显低于ICH组(P<0.05)。治疗组各时间点神经功能评分明显高于ICH组(P<0.05)。ICH组COX-2蛋白表达与血肿周围脑组织含水量相关(r=0.911,P<0.001)。结论ICH后COX-2蛋白表达升高促进脑水肿形成,加重神经功能缺失。尼美舒利能抑制COX-2蛋白表达,减轻脑水肿,改善ICH后大鼠神经功能。     

实验性大鼠脑出血COX-2与MAP-2表达及作用

目的探讨实验性大鼠脑出血后脑组织COX-2和MAP-2的表达和两者之间的关系,及对脑组织神经元损伤的作用。方法用体重200³00 g健康的大鼠制作脑出血动物模型,将大鼠随机分为出血组和对照组;出血组分为自体血组和盐水对照组,自体血组按不同时间分为3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d、14 d、28 d、10个亚组,每组7只,盐水组为6 h组7只;正常对照组7只。用HE动态观察组织病理学改变,用免疫组织化学染色显示出血灶周围COX-2和MAP-2在脑组织内的表达。结果大鼠脑出血后脑组织COX-2于出血灶周围阳性细胞数于3 h增多,出血3 d达高峰,阳性细胞见于病变侧额顶部大脑皮质。脑出血组各时间点COX-2表达高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);MAP-2表达于出血3 h开始减少,3 d下降到最低。脑出血3 h以后,紧邻血肿周围区MAP-2阳性细胞大量消失。3 d后虽有所增加但与对照组的差异仍有统计学意义(P<0.05)。结论COX-2主要在血肿周围的神经元表达,其高表达可能与血肿后继发性神经元损伤有关,脑出血后COX-2高表达促进了神经元的损伤,使MAP-2表达明显减少。     

COX-2基因多态性与帕金森病发病风险的相关性研究

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)基因多态性与帕金森病(PD)发病风险的相关性。方法采用病例-对照研究方法,选取PD患者126例(PD组)和健康志愿者101例(对照组)。采用PCR-RFLP法检测两组COX-2基因rs20417、rs689466、rs689465及rs5275位点的多态性。结果与对照组比较,PD组rs20417等位基因G和C、rs689466等位基因G和A以及rs5275等位基因T和C分布频率,差异有统计学意义(P=0.012,P0.001,P=0.005)。携带rs20417等位基因C、rs689466等位基因G或rs5275等位基因C者患PD风险可能更高(显性模型OR=2.47,95%CI:1.33~4.59,P=0.004;OR=0.38,95%CI:0.16~0.88,P=0.025;OR=3.09,95%CI:1.47~6.48,P=0.003)。分层分析结果显示,早发PD组和晚发PD组rs689466基因型分布与对照组比较,差异有统计学意义(加性模型和隐性模型P0.05);rs20417和rs5275基因型分布在晚发PD组与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.016和P=0.006)。结论江苏省南京地区汉族人群中COX-2基因rs20417、rs689466及rs5275位点多态性与PD发病风险具有一定相关性。     

姜黄素通过COX-2抑制人脑胶质瘤细胞趋化运动和侵袭

目的探讨姜黄素对人脑胶质瘤U251细胞趋化运动、侵袭能力的影响及其机制。方法 U251细胞置于含10%牛血清白蛋白的RPM1640培养液中培养,用不同浓度姜黄素作用U251细胞,用免疫组化染色并在激光共聚焦显微镜下观察U251细胞环氧化酶2(COX-2)蛋白表达,Transwell小室实验判断姜黄素对U251细胞运动、侵袭能力的影响。结果姜黄素对U251细胞的生长具有抑制作用,而且呈浓度-时间依赖性(P0.05)。姜黄素对U251细胞COX-2蛋白表达具有明显抑制作用(P0.05),姜黄素对U251细胞运动、侵袭能力具有明显抑制作用(P0.05)。结论姜黄素可能通过抑制U251细胞COX-2蛋白表达从而抑制细胞的趋化运动及侵袭能力;并呈时间-浓度依赖性。     

阿司匹林抵抗与COX-1基因C50T单核苷酸多态性临床研究

目的 探讨脑梗死患者二级预防中阿司匹林抵抗(aspirin resistance,AR)现象及其与环氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)基因C50T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的相关性.方法 选取入住我科的急性脑梗死患者126例、同期住院的有卒中高危因素的非脑卒中患者80例及健康志愿者30例,分别以花生四烯酸(arachidonic acid,AA)和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)作为诱导剂,采用比浊法测定血小板聚集率;3组均以多聚酶链式反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法,检测COX-1基因C50T单核苷酸多态性.结果 126例脑梗死患者中有39例存在阿司匹林抵抗(约28％),13例存在阿司匹林半抵抗(约9％),74例对阿司匹林敏感(约63％).非脑梗死组及健康对照组未发现阿司匹林抵抗现象的存在.且阿司匹林抵抗和半抵抗患者中,高龄、女性、糖尿病、高血脂患者发生率高,均较阿司匹林敏感组有明显的统计学差异(P＜0.05);3组患者的COX-1基因C50T单核苷酸多态性的基因型均为纯合体CC,未见基因突变类型.结论 高龄女性、糖尿病、高血脂是阿司匹林抵抗的高危因素;国人COX-1基因C50T单核苷酸多态性尚属罕见,其与阿司匹林抵抗的发生无明显相关.     

COX-2和VEGF在垂体腺瘤血管生成中的作用研究进展

实体肿瘤的生长、浸润和转移有赖于新生血管的形成。血管形成是血管内皮细胞增殖刺激因子和抑制因子之间精细平衡作用的结果，多种因素可能影响垂体腺瘤的血管形成。     

利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2 mRNA表达的影响

目的探讨利舒康对兔颈动脉斑块中COX-2mRNA表达的影响。方法选取32只雄性新西兰大白兔,其中正常对照组8只(A组),24只硅橡胶圈兔颈动脉粥样斑块的动物模型。将模型兔随机分为颈动脉斑块无干预组(B组)、小剂量利舒康治疗组(50mg/kg,C组),大剂量利舒康治疗组(400mg/kg,D组),每组8只。治疗4周后取双侧颈动脉并分为平等2段,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测A、B、C、D组COX-2mRNA的相对表达量。结果与A组比较,B组颈动脉粥样硬化模型兔的斑块COX-2mRNA表达增高,差异有统计学意义(P0.05);与B组比较,C、D组颈动脉斑块COX-2mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论利舒康的干预下兔颈动脉粥样斑块的COX-2mRNA下调,有可能具有抗动脉粥样硬化的炎性反应作用。     

2-BFI对EAE小鼠iNOS和COX-2 mRNA表达的影响

目的探讨咪唑啉2受体(I2R)高选择性高亲和力配体2-BFI对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)mRNA表达的影响。方法使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)抗原诱导EAE小鼠模型。采用临床症状评分、病理学检查和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察完全福氏佐剂(CFA)对照组、EAE组和2-BFI干预组小鼠行为学、中枢炎性细胞浸润及iNOS和COX-2mRNA表达变化。结果 2-BFI干预组较EAE组临床症状明显减轻(P<0.01),中枢炎性细胞浸润显著减少(P<0.01),iNOS和COX-2的mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论 I2R高选择性配体2-BFI对EAE小鼠具有一定保护作用,其作用机制可能与降低iNOS和COX-2 mRNA表达有关。     

尼莫地平对帕金森病模型小鼠黑质iNOS和COX-2表达的抑制作用

目的研究尼莫地平对1-甲基-4-苯基-1、2、3、6四氢吡啶(MPTP)所诱导的帕金森病(PD)模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法雄性健康C57BL/6N小鼠随机分为对照组,腹腔注射生理盐水;模型组,腹腔注射MPTP(25 mg/kg);尼莫地平治疗组,每次注射MPTP前3 h灌胃给予尼莫地平(15 mg/kg)。观察各组小鼠行为学变化,免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,i NOS)和环氧化酶-2(Cyclooxygenase,COX-2)的表达变化。结果与对照组小鼠比较,MPTP模型组小鼠出现典型的PD症状,中脑黑质TH阳性神经元大量丢失,i NOS和COX-2阳性细胞显著增多,蛋白水平明显升高;经尼莫地平处理后,上述情况得到明显改善。结论在此PD小鼠模型中,尼莫地平通过抑制炎症因子i NOS和COX-2的表达,可对多巴胺能神经元起到一定的保护作用。     

内侧颞叶癫痫不同时期S100B、RAGE和COX-2的动态表达

目的探究内侧颞叶癫痫(MTLE)不同时期S100B、RAGE和COX-2的动态表达变化及其临床意义。方法 120只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组,模型组小鼠右背海马注射50nl海人酸(KA,1μg·μL~(-1)),对照组小鼠则注射等体积的PBS溶液。分别于癫痫诱发成功后6h(急性期)、7d(潜伏期)、40d(慢性期)取各组鼠脑行后续实验。采用免疫组化检测个各组小鼠不同时期海马组织中RAGE和S100B的表达水平;采用Western blot检测各组小鼠不同时期海马组织中COX-2的表达水平。结果对照组小鼠未见任何癫痫发作表现。模型组小鼠KA注射1h后出现面部肌肉抽搐并逐渐加重至全身痉挛,脑电图(EEG)监测到明显的癫痫样放电;7d后癫痫发作基本消失,进入潜伏期;30d后小鼠开始出现慢性、反复性癫痫发作。免疫组化显示,急性期小鼠海马组织中RAGE和S100B蛋白表达较对照组显著增加(P <0.05);与急性期比较,潜伏期和慢性期小鼠RAGE和S100B表达逐渐降低,差异有统计学意义(P <0.05)。Western blot结果显示,急性期小鼠海马组织中COX-2的蛋白表达较对照组显著增加(P <0.05);潜伏期和慢性期小鼠海马组织中COX-2的表达较急性期显著下降,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 RAGE、S100B和COX-2的表达在MTLE小鼠急性期、慢性期和潜伏期显著增加,有望为MTLE的临床治疗提供新的靶点。     

高脂血症对脑缺血再灌注大鼠脑组织中MMP-9和COX-2表达的影响

目的:观察高脂血症对脑缺血/再灌注(I/R)大鼠脑组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9),环氧化物酶-2(COX-2)表达的影响,探讨高脂血症在I/R损伤中的作用.方法:雄性健康Wister大鼠35只,随机分为非高脂血症组和高脂血症组(制备高脂血症模型).成模后再随机分为3组:假手术组;正常血脂缺血再灌注组(nI/R组...     

COX-2和VEGF在人脑膜瘤中的表达以及其与血管生成的关系

目的 观察人脑膜瘤组织中环氧化酶-2(COX-2)的表达,探讨其对血管生成的影响.方法 应用免疫组织化学方法对72例人脑膜瘤和20例非肿瘤脑组织的COX-2、血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)值进行测定,COX-2和VEGF的表达用评分表衡量.结果 COX-2在人脑膜瘤巾的中度及以上表达(50/72,69.4%)、VEGF在人脑膜瘤中的中度阳性表达(37/72,51.4%),显著高于其在非肿瘤组织中的表达(分别为2/20,10%及1/20,5%),并随肿瘤恶性程度增高而增高,具有明显的相关性.结论 COX-2的过度表达可能在人脑膜瘤的发生、发展中起到重要作用,对肿瘤的血管生成有重要的促进作用.