祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠TRPV1 通道相关蛋白的影响

目的 探讨祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠瞬时受体电位香草酸亚型 1（TRPV1）通道相关蛋白的作用，以期探讨其疗效机制。 方法 48 只 SPF 级豚鼠分为正常组（给予生理盐水）、模型组、西药组、中药组，每组 12 只，除正常组外，其余 3 组采用卵蛋白致敏的方法建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型，模型组给予生理盐水，西药组给予辣椒平，中药组给予祛风宣肺方，干预 1 周后采用 ELISA 法测定血清中 IL-6、IL-20 水平、支气管肺泡灌洗液（BALF） 中 TRPV1、P 物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP） 蛋白水平，WesternBlot 法测定肺组织中 TRPV1、神经激肽-1 受体（NK-1R）、CGRP 蛋白表达。 结果 与正常组比较，模型组血清 IL-6、IL-20、BALF 中 TRPV1、SP、CGRP 及肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 水平升高（P<0.01）；与模型组比较，西药组及中药组血清 IL-6、IL-20、BALF 中 TRPV1、SP、CGRP 水平降低（P<0.01），但中药组SP 水平与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与西药组比较，中药组 BALF 中 TRPV1、SP、CGRP水平升高（P<0.05， P<0.01）。 与模型组比较，西药组、中药组肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 蛋白表达下降（P<0.05， P <0.01）；与西药组比较，中药组肺组织中 TRPV1、NK-1R、CGRP 表达升高（ P <0.01）。结论 抑制 TRPV1 通道进而降低气道神经源性炎症可能是祛风宣肺方的重要疗效机制之一。     

祛风宣肺方通过背根神经反射降低咳嗽敏感性的作用机制研究

目的：探讨祛风宣肺方对咳嗽敏感性增高豚鼠背根神经节中瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）、P物质（SP）、降钙素基因相关肽（CGRP）蛋白及基因的作用，进一步研究祛风宣肺方在慢性咳嗽中的作用机制。方法：将48只SPF级雄性健康豚鼠随机分为正常对照组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、西药组（Capsazepine）、中药组（祛风宣肺方），采用卵蛋白致敏的方法建立咳嗽敏感性增高豚鼠模型。药物干预1周后辣椒素雾化法测定各组豚鼠的咳嗽次数，实时PCR法测定背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA水平，蛋白印迹法测定背根节中TRPV1、NK1-R、CGRP蛋白表达。结果：与正常对照组比较，模型组咳嗽次数增加，背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达增加，TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达升高（均P<0.01）。与模型组比较，西药组、中药组咳嗽次数降低（P<0.05），背根节中TRPV1、SP、CGRP mRNA表达下降（P<0.01），西药组背根节中TRPV1、NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），中药组背根节中NK-1R、CGRP蛋白表达下降（P<0.05），TRPV1蛋白表达与模型组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：抑制TRPV1通道，抑制背根神经反射进而降低气道神经源性炎症可能是祛风宣肺方的重要疗效机制之一。     

苏黄止咳胶囊对豚鼠咳嗽高敏模型的抗炎止咳作用研究

目的:探讨苏黄止咳胶囊对豚鼠咳嗽高敏模型的止咳及抗炎作用。方法:白化豚鼠36只,采用随机分组的方式分为空白对照组、模型组、可待因组以及苏黄止咳胶囊低、中、高剂量组。建立咳嗽高敏豚鼠模型,造模后每日给予相应药物,连续14 d。予0.4 mol/L柠檬酸进行咳嗽激发,检测咳嗽次数及潜伏期;对肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞进行分类计数;HE染色观察气道和肺组织的病理改变;ELISA检测BALF中炎症因子白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、神经肽P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平。结果:与模型组相比,苏黄止咳胶囊中、高剂量组可降低豚鼠的咳嗽次数(P<0.01),延长咳嗽潜伏期(P<0.01),降低BALF中白细胞及中性粒细胞计数(P<0.01),下调BALF中IL-1β、TNF-α、SP、CGRP水平(P<0.01),改善气道、肺组织病理学改变。结论:苏黄止咳胶囊可显著降低豚鼠咳嗽高敏模型的咳嗽敏感性,改善气道和肺组织炎症,发挥止咳抗炎作用。     

芩百清肺浓缩丸对感染后咳嗽大鼠SP、CGRP、NEP的影响

目的:观察芩百清肺浓缩丸(芩百)对感染后咳嗽(PIC)大鼠肺泡灌洗液和血清SP、CGRP及NEP含量及肺组织SP及NEP表达的影响,探讨芩百清肺浓缩丸对感染后咳嗽气道神经源性炎症的干预作用。方法:40只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组(孟鲁司特)和中药芩百组。采用烟熏加内毒素(LPS)滴鼻以及辣椒素雾化吸入法建立PIC大鼠模型。各组大鼠给予相应处理10 d,观察大鼠3 min咳嗽次数变化,ELISA法检测BALF、血清中SP、CGRP和NEP含量,免疫组化检测肺组织SP、NEP蛋白表达并进行半定量评分,HE染色光镜观察支气管和肺组织病理改变。结果:1)咳嗽次数比较:阳性对照组和中药组咳嗽次数低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),两药物组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。2)SP、CGRP及NEP含量比较:中药组BALF、血清中SP和CGRP含量均低于模型组和阳性对照组,差异有统计学意义(P0.05);中药组BALF中NEP含量接近正常组水平,高于模型组和阳性对照组,差异有统计学意义(P0.05);各组血清中NEP含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。3)肺组织SP与NEP免疫组化检测结果显示:与模型组比较,中药组SP表达明显减弱、NEP表达增强,差异有统计学意义(P0.05);阳性对照组与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:芩百清肺浓缩丸能够降低感染后咳嗽大鼠血清及BALF中SP、CGRP的含量及肺组织SP的表达,提升BALF中NEP的含量及表达至接近正常水平。芩百清肺浓缩丸能够且不仅仅是通过NEP-SP途径来降低感染后咳嗽的气道神经源性炎症。     

督灸对哮喘小鼠效应及TRPV1相关神经-免疫炎症的影响

目的:观察督灸对哮喘小鼠效应及TRPV1相关神经-免疫炎症的影响。方法:将80只雌性Balb/c小鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、地塞米松组、督灸治疗组,每组20只。复制卵蛋白(OVA)致敏及激发小鼠哮喘模型。检测各组小鼠气道反应性,观察各组小鼠肺组织病理学改变,外周血嗜酸性粒细胞数(EOS),支气管肺泡灌洗液(BALF)中各类炎症细胞百分比的水平。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-13,P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织TRPV1蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织病理显示支气管及支气管管壁周围有大量炎症细胞浸润,支气管上皮细胞变性坏死,支气管黏膜水肿、增厚;给予浓度为12.5、25、50 mg/mL乙酰甲胆碱吸入后RI值明显上升(P<0.01);外周血EOS计数及BALF中EOS、淋巴细胞百分比明显升高(P<0.05);BALF中IL-4、IL-13、SP和CGRP表达水平明显升高(P<0.01);肺组织中TRPV1的表达增加。与模型组比较,...     

清喉利咽颗粒联合养阴清肺糖浆止咳作用机制研究

目的探讨清喉利咽颗粒联合养阴清肺糖浆的止咳作用机制。方法将实验SD大鼠随机等分为6组,即对照组、模型组、甘草合剂组、养阴清肺糖浆组、清喉利咽颗粒组、联合组,除对照组外均造感染后咳嗽模型,造模成功后给予相应药物灌胃,空白组给予等体积0.9%氯化钠注射液灌胃。检测相关指标:通过氨水诱咳测大鼠咳嗽潜伏时间和3 min内咳嗽次数;通过HE染色法观察肺组织病理改变;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测BALF中细胞因子[白介素-4(IL-4)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、神经肽P物质(SP)及降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。结果甘草合剂组、养阴清肺糖浆组、清喉利咽颗粒组以及联合组大鼠咳嗽次数均明显减少,BALF中SP,CGRP,IL-4,IL-8,TNF-α水平显著降低(P0.05),其作用效果由高到低依次是:养阴清肺糖浆联合清喉利咽颗粒、清喉利咽颗粒、养阴肺糖浆、甘草合剂。结论养阴清肺糖浆联合清喉利咽颗粒能够明显抑制感染后咳嗽,其机制与减轻肺组织局部炎症反应有关。     

厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症及TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响

目的:探讨厚朴麻黄汤对哮喘小鼠气道炎症的效应及对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1),TRPV1 mRNA与蛋白表达的影响。方法:将60只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,分别为空白组、模型组、厚朴麻黄汤低、中、高(7,14,28 g·kg^-1)剂量组和地塞米松组(0.0024 g·kg^-1),每组10只。复制卵蛋白(OVA)致敏及激发小鼠哮喘模型。检测各组小鼠气道反应性,以不同浓度氯化乙酰胆碱(ACh)雾化吸入激发后增强呼气间歇(Penh)值表示,观察各组小鼠肺组织病理学改变,外周血嗜酸性粒细胞数(EOS),支气管肺泡灌洗液(BALF)中EOS百分比的变化。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4,IL-13,前列腺素D2(PGD2),P物质(SP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达。结果:与正常组比较,给予质量浓度为12.5,25,50 g·L-1ACh雾化吸入后,模型组小鼠Penh明显上升(P<0.05,P<0.01);肺病理显示支气管及管壁周围有大量炎症细胞浸润,支气管黏膜水肿、增厚,黏液分泌增多;外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比明显升高(P<0.01)。BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组Penh明显降低(P<0.05,P<0.01),肺组织病理损伤改善,外周血中EOS数量及BALF中EOS百分比显著降低(P<0.01);BALF中IL-4,IL-13,PGD2和SP水平以及肺组织中TRPA1,TRPV1 mRNA与蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:厚朴麻黄汤可以改善哮喘小鼠气道炎症、降低气道反应性,其机制除降低Th2相关的细胞因子水平外,可能也与调控TRPA1,TRPV1mRNA与蛋白表达及降低相关神经因子水平有关。     

麻杏石甘汤及拆方对RSV加重型哮喘气道炎症的保护作用及调控TRPV1的机制研究北大核心CSCD

探讨麻杏石甘汤及拆方干预呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)加重型哮喘气道炎症的效应及对瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid-1, TRPV1)的调控作用。采用卵清蛋白复合RSV复制加重型哮喘小鼠模型(雌性C57BL/6小鼠),麻杏石甘汤及拆方进行干预。观察各组外周血嗜酸性粒细胞(eosinophil, EOS)和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中炎细胞水平、呼吸间歇(Penh)值变化、肺病理损伤,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法测定BALF中白细胞介素(interleukin, IL)-4、IL-13、P物质(substance P,SP)、前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)等水平变化,定量实时聚合酶连锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction, qPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织中TRPV1 mRNA和蛋白表达。体外以IL-4联合RSV刺激16HBE细胞,观察麻杏石甘汤及拆方含药血清干预后TRPV1表达及经TRPV1激动剂刺激后的胞内Ca2+水平变化。结果显示,与空白组相比,模型组小鼠出现明显的哮喘表型,外周血和BALF中各类炎细胞水平、Penh值显著升高(P<0.05,P<0.01),肺组织损伤严重。与模型组相比,全方组、石膏组及麻杏草组外周血和BALF中EOS水平显著下降(P<0.01,P<0.05);全方组和石膏组可显著降低BALF中白细胞、中性粒细胞水平(P<0.01),麻杏草组可下降中性粒细胞水平(P<0.05);全方对外周血和BALF中炎细胞水平的改善作用优于拆方组(P<0.05,P<0.01);50 mg·mL-1氯化乙酰胆碱激发后,全方组和麻杏草组Penh值显著降低(P<0.01),石膏组Penh值下降(P<0.05);麻杏石甘汤及拆方可不同程度减轻肺组织病理损伤;全方组可显著降低BLAF中IL-4、IL-13、PGE2、SP水平(P<0.05,P<0.01),石膏组可下降BLAF中IL-13、PGE2、SP水平(P<0.05,P<0.01),麻杏草组可下降BALF中IL-13、PGE2水平(P<0.05,P<0.01);全方可下调肺组织中TRPV1的蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。麻杏石甘汤及拆方含药血清干预可下调经IL-4联合RSV刺激的16HBE细胞中TRPV1表达,抑制TRPV1激动剂引起的Ca2+内流,全方组显著优于拆方组(P<0.05)。体内、外实验结果表明,麻杏石甘汤及拆方对RSV加重型哮喘气道炎症具有保护作用,全方药物协同增效,干预作用优于拆方部分,不同组方部分在改善气道高反应性、抗过敏、抗炎方面各有贡献,其机制与调控TRPV1通道和相关炎症介质水平有关。     

刘氏小儿推拿“推胸背法”对咳嗽变异性哮喘模型大鼠IL-4/STAT6信号通路的影响

目的:探讨刘氏小儿推拿"推胸背法"对咳嗽变异性哮喘模型大鼠IL-4/STAT6信号通路的影响。方法:采用卵清蛋白和氢氧化铝致敏及雾化激发的方法造模,分别采用孟鲁司特钠咀嚼片、"推胸背法"和推药结合法干预。采用WB法检测肺组织中p-STAT6的表达;采用ELISA法检测血清中IL-4含量和肺泡灌洗液中IL-4R含量。结果:模型组、西药组、推拿组和推药结合组的喷嚏、搔鼻次数与空白组比较,差异有统计学意义(P0.01),说明造模成功。推拿组、西药组和推药结合组喷嚏、搔鼻次数比模型组明显减少(P0.05);推拿组和西药组血清IL-4水平、肺泡灌洗液IL-4R水平和肺组织p-STAT6含量均低于模型组(P0.05);推药结合组以上指标均低于推拿组和西药组(P0.05)。结论:刘氏小儿推拿可能通过IL-4/STAT6信号通路调节咳嗽变异性哮喘大鼠的气道变应性炎症,同时能提高孟鲁司特钠咀嚼片的临床疗效。     

疏肝饮对内脏高敏感性大鼠结肠组织中TRPV1和CGRP表达的影响

目的观察疏肝饮对内脏高敏感性大鼠结肠组织中辣椒素受体(TRPV1)和降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响。方法将48只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、疏肝饮组和得舒特组,采用慢性避水应激法造模10天。从造模第4天起,各给药组大鼠于造模前1小时分别给予相应的药物灌胃,连续7天,第10天造模结束后,采用结直肠气囊扩张引起的腹壁撤回反射来评估内脏敏感性;取出结肠组织,采用免疫组化法分别检测TRPV1和CGRP含量。结果与正常组比较,模型组的压力阈值降低(P<0.01),说明模型组大鼠存在内脏敏感性增高;与模型组比较,疏肝饮组和得舒特组的压力阈值明显增高(P<0.05)。与正常组比较,模型组结肠中TRPV1的表达及CGRP的含量显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,疏肝饮组和得舒特组大鼠结肠组织中TRPV1和CGRP含量均明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论疏肝饮通过调节结肠组织中TRPV1和CGRP的表达,从而降低内脏高敏感性。     

对叶百部总生物碱对辣椒素致豚鼠咳嗽的影响

研究对叶百部总生物碱对辣椒素致豚鼠咳嗽的影响。方法豚鼠灌胃给予对叶百部总生物碱(5、10、20 mg/kg)或磷酸可待因(10 mg/kg)3 d后,采用辣椒素喷雾复制咳嗽模型,记录咳嗽次数和咳嗽潜伏期。ELISA法检测空腹血清和肺组织中P物质(SP)水平,HE染色观察气管和肺组织的病理变化。结果与正常组比较,模型组豚鼠血清和肺组织SP水平增加(P0.01),气管和肺组织均出现不同程度损伤,气管黏膜增厚和肿胀,肺泡萎陷;与模型组比较,对叶百部总生物碱组豚鼠咳嗽潜伏期延长,咳嗽次数减少(P0.01),血清和肺组织SP水平降低(P0.01),气管和肺组织病理损伤明显减轻。结论对叶百部总生物碱可拮抗辣椒素所致豚鼠咳嗽反应,其机制可能与该成分可减轻辣椒素对呼吸系统的损伤、抑制神经肽SP表达有关。     

芩百清肺浓缩丸对MP感染小鼠SP、NK-1R表达的影响

目的:探讨芩百清肺浓缩丸(芩百)对MP感染BALB/c小鼠肺组织SP、NK-1R表达的影响。方法:SPF级雌性BALB/c小鼠40只,随机分为正常组、MP模型组、罗红霉素组及芩百高、低剂量组,每组8只。滴鼻法复制MP感染模型,给予药物,给药后7天,脱颈椎处死小鼠,留取肺组织,ELISA方法检测SP分泌量、荧光实时定量PCR法检测NK-1R mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,MP模型组BALF中SP分泌量增加、肺组织NK-1R mRNA相对表达量有升高的趋势;与模型组比较,芩百组均可降低SP分泌量、并有下调NK-1R mRNA相对表达量的趋势。结论:芩百抗MP的作用机制可能与调节肺组织SP及NK-1R mRNA相对表达量有关。     

玉屏风散及过敏煎合止嗽散对PM2.5致Th17/Treg失衡诱发肺损伤大鼠的影响

目的观察PM2.5致辅助性T细胞17(TH17)与调节性T细胞(Treg)失衡诱发的大鼠肺损伤及不同中药治法的干预作用。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药1组和中药2组。采用气道滴注方法建立PM2.5致肺损伤模型,模型组和正常组予生理盐水灌胃,中药1组和及中药2组分别予玉屏风散及过敏煎合止嗽散灌胃。ELISA检测各组肺泡灌洗液(BALF)及血清白细胞介素(IL)-17、IL-10、IL-8、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、黏蛋白(MUC)5AC含量;免疫组化检测肺组织Foxp3、IL-17的表达。结果与正常组比较,模型组血清和BALF IL-8、IL-17、NE、MUCAC含量显著升高,IL-10含量明显降低(P0.05,P0.01),肺组织IL-17蛋白表达明显增加、Foxp3蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,中药1组及中药2组血清和BALF IL-8、IL-17、NE含量明显降低,BALF IL-10明显升高,中药2组血清IL-10明显升高(P0.05),肺组织IL-17蛋白表达明显降低、Foxp3蛋白表达明显增加(P0.01),病理学变化明显改善。结论 PM2.5可通过引起Th17/Treg失衡诱发肺损伤,玉屏风散及过敏煎合止嗽散均可明显改善PM2.5致大鼠肺组织病理损害,并可改善PM2.5导致的TH17/Treg失衡。     

针刺合募配穴对肠易激综合征大鼠结肠内脏高敏相关因子的影响

目的:观察针刺合募配穴对肠易激综合征(IBS)大鼠结肠组织中类胰蛋白酶(Try)、蛋白酶活化受体2(PAR-2)、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV 1)、P物质(SP)和降钙素基因相关肽(CGRP)表达的影响,探讨针刺合募配穴治疗IBS的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、药物组和合募针刺组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。合募针刺组针刺"上巨虚""天枢"穴,30min/d,药物组予匹维溴胺(15mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,均治疗14d。观察大鼠体质量,检测大鼠结直肠扩张(CRD)容量阈值和腹壁回撤反射(AWR)评分,甲苯胺兰染色法观察结肠组织肥大细胞(MC)计数,免疫组化法检测结肠组织Try表达水平,Western blot法检测结肠组织中PAR-2、TRVP 1、SP、CGRP的表达水平。结果:与空白组相比,模型组大鼠体质量显著降低(P0.01),在CRD检测中腹部抬高和臀部抬高容量阈值明显降低(P0.01),AWR评分、结肠组织MC计数及Try、PAR-2、TRVP 1、SP、CGRP表达水平均显著升高(P0.01)。与模型组比较,药物组、合募针刺组大鼠体质量显著升高(P0.01,P0.05),在CRD检测中腹部抬高和臀部抬高容量阈值明显升高(P0.05,P0.01),AWR评分、结肠组织MC计数及Try、PAR-2、TRVP 1、SP、CGRP表达水平均显著降低(P0.01)。合募针刺组结肠组织PAR-2、TRVP 1、SP、CGRP表达水平较药物组降低更显著(P0.05)。结论:针刺合募配穴可降低IBS大鼠结肠组织中Try、PAR-2、TRVP 1、SP和CGRP的表达水平,减轻IBS的高敏反应。     

通过SP/NK-1R信号通路探讨参榆洗液对痔术后大鼠的止痛机制

目的：探究参榆洗液通过调节SP/NK-1R信号通路对痔术后大鼠疼痛的改善作用。方法：将40只SD大鼠随机分为参榆洗液组(实验组)、金玄痔科熏洗散组(对照组)、模型组、空白组，每组各10只，完成模拟外痔切除术后，各组予以相应药物治疗及换药刺激，连续7 d,期间观察大鼠疼痛相关动物学行为。分别于第4天、第7天采集数据后麻醉处死各组半数大鼠，取肛周组织行HE染色观察以及检测肛周组织中P物质及NK-1受体的蛋白含量。结果：与空白组比较，模型组大鼠组织水肿与炎性浸润明显(P<0.05);与模型组比较，实验组、对照组可减少痔术后大鼠疼痛导致的扭体反应次数，延长首次舔舐肛周创面的潜伏时间，缩短舔舐肛周总时间，减少肛周创面组织中P物质、NK-1受体的阳性表达(均P<0.05)。与对照组比较，实验组对以上各项指标的改善效果更优(均P<0.05)。结论：参榆洗液可通过下调肛周组织P物质和NK-1受体表达抑制SP/NK-1R通路，阻碍疼痛信号的产生和传递，减轻组织水肿和炎性浸润，缓解大鼠的疼痛反应，故抑制SP/NK-1R通路是参榆洗液缓解痔术后疼痛的机制之一。     

喘可治注射液对COPD大鼠IL-12/IL-12R /STAT4信号通路的影响

目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P0.05,P0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P0.01,P0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。     

清瘟败毒饮对内毒素性急性肺损伤大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10表达的影响

目的:动态观察清瘟败毒饮对急性肺损伤(ALI)大鼠血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10表达的影响。方法:144只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、清瘟败毒饮大、中、小剂量组和泼尼松治疗组(n=24),经喉无创气道内滴注内毒素(LPS)溶液(2mg/kg)建立急性肺损伤大鼠模型,分别于造模后24、48、72h处死大鼠取血,行肺泡灌洗液(BALF)白细胞计数和测定肺干/湿比,右肺中叶HE染色观察病理变化,ELISA法检测血清细胞因子TNF-α、IL-8、IL-10水平。结果:模型组BALF中白细胞总数和肺干/湿比显著升高(P<0.01);血清TNF-α、IL-8、IL-10水平明显升高(P<0.01),分别于24h、48h、72h达高峰期,为正常对照组3倍、3.1倍、2倍;肺组织破坏及炎性浸润明显。清瘟败毒饮治疗组BALF白细胞数、TNF-α、IL-8含量较模型组明显下降,IL-10含量显著升高(P<0.01～0.05);肺泡结构破坏和炎症细胞浸润情况明显改善;清瘟败毒饮大剂量组肺干湿比明显下降(P<0.01)。结论:清瘟败毒饮可调节ALI时促炎因子和抗炎因子比例失衡,缓解肺部炎症损伤,从而起到保护肺组织的作用。     

清肝宁肺汤对咳嗽变异性哮喘模型大鼠IgE、IL-6、ICAM-1影响的实验研究

目的:探究清肝宁肺汤治疗咳嗽变异性哮喘(CVA)的部分作用机制。方法:利用卵蛋白(OA)及辣椒素,复制CVA大鼠模型,分为正常对照组、模型对照组、地塞米松片组、清肝宁肺汤组、地塞米松片合清肝宁肺汤组(以下简称为中西医结合组),以引喘诱咳时2min内大鼠咳嗽次数及血清中IL-6、IgE及ICAM-1的含量为指标。结果:与正常对照组比较,模型对照组咳嗽次数明显增多(P0.01),血清中IgE、IL-6、ICAM-1含量显著升高(P0.01)。经治疗后清肝宁肺汤组咳嗽次数明显减少(P0.01),血清上述指标含量明显降低(P0.01)。结论:清肝宁肺汤通过降低机体IgE、IL-6、ICAM-1的含量发挥治疗CVA作用。     

和胃降逆方对卵清蛋白联合酸灌注诱导非糜烂性反流病大鼠食管黏膜中PAR2、SP、CGRP蛋白表达的影响

目的观察和胃降逆方对卵清蛋白联合酸灌注诱导的非糜烂性反流病大鼠食管黏膜中特异性激活蛋白激酶2(specific activated protein kinase 2,PAR2)、P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)等相关蛋白表达的影响。方法雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白对照组5只和实验组25只。实验组采用腹腔注射卵清蛋白致敏剂诱导内脏高敏感,24小时后随机分为5组,模型组、和胃降逆方(高、中、低)剂量组、奥美拉唑组,每组5只。和胃降逆方(高、中、低)剂量组及奥美拉唑组分别给予相应的和胃降逆方水溶液及奥美拉唑水溶液灌胃,空白对照组、模型组均予等体积蒸馏水灌胃。干预2周后,悬尾实验评价大鼠内脏高敏感。验证成模后,联合弱酸灌注诱导非糜烂性反流病大鼠模型,通过透射电镜观察大鼠食管黏膜病理学变化,Western blotting方法检测大鼠食管黏膜PAR2、SP、CGRP蛋白表达,免疫荧光双标技术观察食管黏膜中与PAR2、SP、CGRP激活相关的肥大细胞(mast cell,MC)及辣椒素受体1(transient receptor potential V1,TRPV1)蛋白的共表达。结果 (1)悬尾实验不动时间比较:与空白对照组相比,模型组大鼠不动时间显著减少(P0.01);与模型组相比,和胃降逆方中剂量组、奥美拉唑组大鼠不动时间明显增多(P0.01),和胃降逆方低剂量组大鼠不动时间增多(P0.05)。(2) Western blotting方法检测PAR2、SP、CGRP表达比较:与空白对照组相比,模型组大鼠食管黏膜的PAR2、CGRP蛋白表达显著升高(P 0. 01),SP蛋白表达升高明显(P 0. 05);与模型组相比,各用药组PAR2的蛋白表达显著下降(P0.01),各用药组SP的蛋白表达下降明显(P0.05),各用药组CGRP的蛋白表达显著下降(P0.01)。(3) MC与TRPV1共表达比较:与空白对照组相比,模型组大鼠食管黏膜的MC与TRPV1的共表达有一定程度的增多;与模型组相比,各用药组MC与TRPV1的共表达均不明显。结论和胃降逆方可通过降低PAR2、SP、CGRP的表达,改善非糜烂反流病大鼠的病理变化及内脏高敏感状态。     

利金方对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型JAK2-STAT3-RORyt信号通路的影响北大核心CSCD

目的探讨利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症细胞抑制作用的影响。方法将105只SPF级Wistar大鼠随机分为7组:空白组、模型组、利金方低剂量组、利金方中剂量组、利金方高剂量组、JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组,每组15只。除空白组外,其余各组通过烟熏等复合因素建立COPD大鼠模型。造模结束后,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,利金方低剂量(3 g/mL)组、利金方中剂量(10.5 g/mL)组、利金方高剂量(21 g/mL)组分别给予不同浓度利金方灌胃,JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组分别予酪氨酸磷酸化抑制剂(AG490)试剂和STAT3信号传导通路抑制剂(WP1193)试剂腹腔注射。给药7天后,分别检测大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达,肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清与支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17含量。结果与空白组比较,模型组肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达与肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达,及血清与BALF中IL-17分泌均升高(P<0.05);与模型组比较,用药组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.05,P<0.01);与利金方低剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01);与利金方中剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01)。结论利金方能够通过调控细胞免疫中上游JAK2-STAT3-RORyt信号通路,抑制炎症细胞分泌从而起到抗免疫炎症作用。