NF-κB信号通路与骨质疏松

核因子Kappa B(NF-κB)最初发现是一种能与免疫球蛋白κ轻链基因增强子κB序列特异结合并调节κ轻链转录的核蛋白因子.随后发现NF-κB参与细胞生长、分化及炎症反应等基因表达调控[1,2],同时研究表明在很多常见的情况下出现NF-κB的异常激活或抑制,如肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化等,这些都表明NF-κB无论是在正常还是疾病状态下都扮演着重要的角色[3].骨质疏松(OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的,致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病.OP发生是由于骨形成和骨吸收的失衡,大量研究表明,NF-κB信号通路不仪在骨形成和骨吸收起着重要作用,而且通过与其他信号通路相互联系,彼此作用,影响OP的发生.因此,我们就NF-κB信号通路在成骨细胞和破骨细胞中的作用进行综述.     

锚蛋白重复序列通过NF-κB信号通路参与肠炎相关肿瘤的调控

目的:探讨锚蛋白重复序列(gann ankyrin repeats,Gankyrin)在炎症相关肿瘤进展中的作用机制.方法:将36只同系C57BL/6♂鼠随机分为3组,其中12只服用2.5%葡聚糖硫酸钠盐(dextransodium sulfate,DSS)饮水建立溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,其中12只首日腹腔注射氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM),10 d后开始服用2%DSS 7 d,恢复正常饮水2 wk后再次口服2%DSS共3个循环,建立结肠炎相关肿瘤(colitis-associated cancer,CAC)模型,另有12只同种系小鼠口服普通饮水饲养作为对照组.分别采用病理组织学苏木精-伊红(hematoxylineosin,HE)染色观察结肠组织;并用实时荧光定量PCR方法检测3组结肠组织中Gankyrin的m RNA水平;采用双荧光报告系统检测Gankyrin对肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和白介素(interleukin,I L)-1β刺激下核因子-κB(nuclear factor-κB,N F-κB)转录活性的影响,同时用免疫印迹方法检测转染效率.结果:病理组织学HE染色证实了UC和CAC小鼠模型的建立;3组小鼠结肠组织中Gankyrin mRNA表达明显不同,在肿瘤组织中Gankyrin mR N A水平明显高于炎症组织;在H C T116细胞中过表达Gankyrin能够明显抑制TNF-α和IL-1β刺激引起的NF-κB转录活性,而干涉Gankyrin后得到的结果则相反.结论:在肠炎进展至肠癌过程中Gankyrin的表达明显上调,可能通过NF-κB信号通路参与肠炎相关肿瘤的调控.     

EGCG经NF-κB途径抑制肝癌HepG2细胞增殖的研究

目的 初步探讨EGCG抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用机制.方法 通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验观察EGCG对HepG2细胞增殖的抑制作用;Western blot检测NF-κB P65蛋白的表达.结果 细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验结果显示,EGCG可有效抑制HepG2细胞的增殖(n=3,P＜0.05).Western blot检测结果显示,EGCG处理后NF-κB P65蛋白表达降低.结论 EGCG通过抑制HepG2细胞中NF-κB P65蛋白表达发挥其对细胞增殖的抑制作用.     

NF-κB信号通路与炎症性肠病

炎症是多种细胞及细胞因子参与的机体防御性反应,但严重或长期的炎症则会造成机体损伤.炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组以慢性、周期性炎症为特征的胃肠道疾病,长期、反复的胃肠道炎症不仅影响患者生活质量,而且增加了肠道纤维化及癌变的风险,而核因子Kappa B(nuclear f...     

七氟烷调节CARMA3靶向NF-κB通路抑制胃癌细胞迁移、侵袭

目的研究七氟烷对胃癌(gastric cancer, GC)细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其作用机制.方法运用Transwell法检测细胞迁移、侵袭量;将siCAR MA3组(转染siCARMA3)、NC组(转染siControl)、CARMA3组(转染pcDNA3.1-CARMA3)、Vector组(转染pcDNA3.1)均用脂质体法转染至SGC7901细胞;用qRT-PCR检测细胞中CARMA3 mRNA表达;Westernblot检测细胞中CARMA3、p-p65、p65蛋白表达.结果与对照组相比,七氟烷抑制GC细胞迁移、侵袭,且抑制CARMA3表达;沉默CARMA3抑制GC细胞迁移、侵袭,过表达CARMA3促进GC细胞迁移、侵袭,且CARMA3靶向NF-κB通路;七氟烷可抑制CARMA3失活NF-κB通路抑制GC细胞迁移、侵袭.结论七氟烷可抑制GC细胞迁移、侵袭,其机制可能与失活CARMA3/NF-κB信号通路有关,将可为七氟烷用于临床治疗GC提供依据.     

NF-κB信号通路的阻断对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡与炎症的影响

目的探讨核因子(NF)-κB信号通路的阻断对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞凋亡与炎症的影响。方法分离正常滑膜组织及RA滑膜组织中成纤维滑膜细胞(FLS),分为正常FLS组(正常组),RA FLS组(模型组),NF-κB抑制剂(PDTC)低、中、高剂量组(2,5,10μmol/L)(PDTC组)。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测PDTC对RA FLS细胞活力的影响,Annexin V-FITC流式双染检测各组细胞凋亡情况,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α,白介素(IL)-1β含量,Western印迹检测各组细胞中环氧化酶(COX)-2,Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果与模型组比较,PDTC低、中、高剂量组能显著抑制RA FLS活力,诱导RA FLS凋亡,抑制RA FLS细胞释放TNF-α、IL-1β因子,下调COX-2和Bcl-2表达,上调Bax表达(均P0.05)。结论阻断NF-κB信号通路能够显著抑制RA FLS细胞炎症并诱导细胞凋亡。     

NF-κB信号通路在急性弓形虫感染小鼠神经系统功能异常中的调控作用北大核心CSCD

目的探究NF-κB信号通路的活化对弓形虫感染过程中神经系统功能异常的调控作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为感染组(TDI)和对照组(NC),使用浓度为2×104个/ml的RH株弓形虫速殖子腹腔感染TDI组小鼠,NC组注射等量生理盐水。通过水迷宫实验(包含定航实验和空间探索实验,使用SuperMaze水迷宫图像记录系统进行监测、分析)、细胞因子检测(ELISA法,应用SoftMax Pro 4.3.1LS软件计算细胞因子含量)、Western blot(使用BCA法进行定量)分别检测TDI组和NC组小鼠学习记忆及认知能力、血清中IL-6和TNF-α产生水平、脑组织中NF-κB和caspase3蛋白水平,采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。结果与NC组相比,感染第3、4、5 d TDI组小鼠逃避潜伏期延长、目标象限花费时间明显减少、新物体认知能力显著降低(均P<0.01);TDI组小鼠脑组织中NF-κB蛋白为(1.10±0.01)pg/ml,是NC组(0.51±0.01)pg/ml的2.16倍(P<0.01);TDI组小鼠外周血中TNF-α、IL-6的水平显著升高,分别是NC组的10倍、15倍(均P<0.01);TDI组小鼠脑组织中caspase3蛋白显著升高,为(0.44±0.05)pg/ml,是NC组(0.31±0.02)pg/ml的1.42倍(P<0.01)。结论急性弓形虫感染过程中,小鼠的学习记忆和认知能力受到影响,可能与NF-κB信号通路的活化密切相关。其作用的潜在机制可能是NF-κB活化后诱导TNF-α及IL-6炎性细胞因子分泌增加和/或诱导caspase 3凋亡蛋白的表达从而引起脑神经胶质细胞凋亡而发挥作用。     

唐草片对大鼠肝纤维化及NF-κB P65/IκBα信号通路的影响

目的:研究唐草片对肝纤维化大鼠的保护作用并探讨其对NF-κB P65/IκBα信号通路的影响。方法:采用四氯化碳(CCl₄)联合猪血清的方法建立大鼠肝纤维化模型,72只SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组(0.12 mg/kg)、唐草片高中低剂量组(2,1,0.5 g/kg)。造摸第5周后,秋水仙碱组大鼠和唐草片组大鼠以体重按照剂量灌胃相应的药物,正常组大鼠和模型组大鼠灌胃同等容积的纯净水,持续8周后处死,取血和肝脏,苏木精-伊红和马松染色观察肝脏组织病理学改变;免疫组化染色法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);全自动生化仪检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),Elisa法检测透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)、Ⅳ型胶原蛋白(Ⅳ-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;Western blot检测各组肝组织核转录因子(NF-κB P65)、核因子κB抑制蛋白(IκBα)。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织出现明显肝纤维化,肝板结构排列紊乱,肝组织α-SMA,AST、ALT...     

NF-κB信号传导通路相关基因不同表型肝癌患者尿8-OHdG水平观察

目的观察NF-κB信号传导通路相关基因不同表型的肝癌患者尿8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平。方法 PCR-RFLP法检测155例肝癌患者（肝癌组）NF-κB信号传导通路中TNF-α、NF-κB、iNOS、COX-2的基因表型。采用ELISA法检测肝癌组及151例健康体检者（对照组）的尿8-OHdG。结果肝癌组尿8-OHdG水平为（9.29±8.04）ng/mg Cr,对照组为（7.27±5.06）ng/mg Cr,两组相比,P〈0.05。肝癌组NF-κB信号传导通路相关基因TNF-α、NF-κB、iNOS、COX-2基因不同表型组尿8-OHdG水平相比,P均〉0.05。结论肝癌患者尿8-OHdG水平高于正常,可能与肝癌发病有关。NF-κB信号传导通路相关基因多态性与肝癌患者尿8-OHdG水平无明显关系。     

Notch和NF-κB信号通路与心肌重塑相关性研究进展

心肌重塑是心血管疾病的共同病理过程,可见于高血压、动脉粥样硬化、心肌缺血、心肌病、心力衰竭等,是心血管疾病发生、发展和维持的病理基础。研究发现有多重因素参与心肌重塑的发生发展,同时这些因素相互促进,共同维持心肌重塑的发展。Notch信号通路由一组在进化上高度保守的细胞膜配体、受体及下游分子组成。细胞间受体配体作用可激活Notch信号转导过程,从而直接调节基因转录,使细胞基因表达受相邻细胞调控。Notch信号在细胞分化、胚胎发育、组织自我更新过程     

微小核糖核酸21通过负性调控TLR4/NF-κB信号通路减轻脓毒症性心肌损伤

目的：探讨微小核糖核酸21(miR-21)通过调控TLR4/NF-κB信号通路对脓毒症性心肌病(SIC)的作用和机制。方法：将48只成年雄性SD大鼠随机划分为对照组、SIC组、SIC+miR-21模拟物组和SIC+miR-21抑制剂组,每组12只。在SIC模型构建前24h将miR-21模拟物或miR-21抑制剂经过尾静脉注射给大鼠。利用细菌脂多糖(LPS)腹腔注射的方法构建SIC模型,并在模型构建24h后获取4组大鼠的血液和心肌组织。利用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测心肌组织中miR-21、TLR4 信号通路分子 TLR4、MyD88、IRAK-1、TRAF6、NF-κB和炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α 相对应mRNA的表达水平。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血液中心肌损伤标志物肌钙蛋白（cTnI）、脑钠肽（BNP）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌红蛋白（Mb）的表达水平。结果：与对照组比较,SIC组大鼠心肌组织中TLR4、MyD88、IRAK-1、TRAF6、NF-κB和炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α 的表达水平升高（P均<0.05）,血cTnI、BNP、CK-MB、Mb的表达水平也升高（P均<0.05）。与SIC组比较,SIC+miR-21模拟物组大鼠心肌组织中miR-21的表达量升高（P均<0.05）,心肌组织中TLR4、MyD88、IRAK-1、TRAF6、NF-κB和IL-1、IL-6、TNF-α及血cTnI、BNP、CK-MB、Mb的表达水平降低（P均<0.05）;而SIC+miR-21抑制剂组大鼠心肌组织中的以上各项检测指标与SIC+miR-21模拟物组则相反。结论：MiR-21通过负性调控TLR4/NF-κB信号通路的方式减轻脓毒症后炎症反应,降低SIC所致心肌损伤程度。     

NF-κB通路与帕金森病

帕金森病的发病机制有MAPK、NF-κB、PKC、NO和NOS等多种信号转导通路的参与,而这螳信号转导通路均通过调控细胞凋亡而参与帕会森病的发病。本文主要从NF-κB与帕金森病的关系予以综述。     

安罗替尼通过NF-κB信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨安罗替尼通过核因子κB(NF-κB)信号通路对人脑胶质瘤细胞（T98G细胞）增殖、凋亡的影响。方法 体外培养T98G细胞,并将其随机分为对照组、5μmol/L安罗替尼组、10μmol/L安罗替尼组、20μmol/L安罗替尼组、阳性药物组、抑制剂组。对照组不予干预,5μmol/L安罗替尼组、10μmol/L安罗替尼组、20μmol/L安罗替尼组分别以5、10、20μmol/L安罗替尼进行干预,阳性药物组以50 mg/L的5-氟尿嘧啶进行干预,抑制剂组加入10μmol/L安罗替尼+5μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082进行干预。用CCK-8法检测细胞活力,用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷法测算细胞增殖率,用Hoechst33258染色法测算细胞凋亡率,用Western blotting法检测细胞增殖、凋亡相关蛋白与NF-κB信号通路相关蛋白[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(NF-κB p65)]表达。结果 与对照组比较,5μmol/L安罗替尼组细胞活力差异...     

NF-κB与细胞凋亡

NF-kB家族及其介导的细胞信号转导通路在细胞凋亡中的作用是国内外研究的热点.研究发现,NF-kB信号转导途径可以通过多种途径抑制细胞凋亡,与IAPs家族、Bcl-2家族、TRAF家族、JNK、FLIP、A20、Gadd45β、MnSOD等有很大关系,但其具体机制尚未完全清楚.通过抑制NF-kB信号转导途径的激活,促进细胞凋亡,可能成为治疗免疫、炎症、肿瘤等疾病的新途径.此外,近年的研究证明NF-kB尚具有促细胞凋亡的作用,并发现NF-kB亚单位的种类及数量在细胞凋亡中起着决定性的作用,为疾病的治疗提供了新的策略.本文就NF-kB与细胞凋亡关系的研究进展作一综述.     

Diplacone通过抑制氧化应激作用及NF-κB信号通路活性降低Hcy诱导的血管内皮细胞损伤

目的采用高同型半胱氨酸血症(HHcy)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立血管内皮细胞炎性损伤模型,通过Diplacone预处理,在之前实验的基础上进一步探讨Diplacone对血管内皮细胞可能的保护作用机制。方法以HUVEC为研究对象,经过不同浓度的Diplacone预孵育2 h后,加入2 mmol/L同型半胱氨酸(Hcy)继续处理12 h,流式细胞术检测细胞凋亡率;通过检测活性氧(ROS)细胞比率和抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及MDA含量的变化反应细胞氧化应激水平。Western blot和qRTPCR检测核因子κB(NF-κB)蛋白和mRNA表达水平的变化。结果与对照组比较,2 mmol/L Hcy模型组细胞凋亡率显著增加,ROS细胞比率和MDA含量显著升高,抗氧化指标SOD、GSH-Px的活性显著降低,NF-κB的蛋白和mRNA表达水平逐渐升高。与2 mmol/L Hcy模型组比较,0.1～10μmol/L Diplacone预处理后细胞凋亡率逐渐降低;氧化应激指标ROS细胞比率和MDA含量降低,抗氧化指标SOD、GSH-Px的活性增加; NF-κB的蛋白和mRNA表达水平逐渐降低。结论 Diplacone具有抑制Hcy诱导的HUVEC内皮损伤的作用,且作用机制可能是通过降低氧化应激作用和抑制NF-κB信号通路活性而降低细胞凋亡率,抑制细胞凋亡。     

骨质疏松与NF-κB信号通路关系的研究进展

<正>核转录因子(NF-κB)是一个存在于哺乳动物细胞内的转录因子,它能对各种刺激做出快速反应,从而间接地调控与多种生理及其病理反应有关的基因表达,参与机体的炎症反应、免疫应答、细胞分化与凋亡及其他应激反应。有关研究〔1~5〕表明NF-κB信号通路的过度激活或抑制能引发多种疾病,这表明NF-κB在病理状态下发挥着十分重要的作用〔6〕。而骨质疏松(OP)已经成为严重影响老年人及绝经后妇女健康和生活质量     

穗花杉双黄酮通过NF-κB通路在放射性肠炎中的消炎、抗纤维化和抗菌作用

目的 探讨穗花杉双黄酮(Amentoflavone, AF)在放射性肠炎中的消炎、抗纤维化和抗菌作用。方法 选取雄性SD大鼠45只,随机分3组：空白组、辐射组(IR组)、辐射后AF干预组(IR+AF组)。采用高能X射线照射建立急性放射性肠炎大鼠模型,IR+AF组予60 mg·kg^-1·d^-1AF腹腔注射,空白组和IR组予生理盐水腹腔注射,分别于不同时段留取大鼠小肠组织、血清与粪便,观察肠黏膜组织病理学,采用ELISA法检测血清炎性因子TNF-α和IL-1β水平,qPCR检测组织NF-κB表达,应用16S rRNA测序方法对粪便样本进行测序及生物统计分析。另建立TNF-α诱导IEC6细胞损伤模型,采用qPCR法检测上皮细胞间质转化相关标志物：E-cadherin和Vimentin,采用划痕实验观察AF的修复作用。结果 IR组大鼠肠上皮结构及黏膜屏障均被破坏,IR+AF组未见明显的肠道结构破坏,胶原纤维增生明显减少。与空白组、IR+AF组相比,IR组的菌群α-多样性更低,β-多样性更显著,而血清TNF-α和IL-1β的分泌增加(P<0.05...     

肾衰饮对CRF大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及炎症状态的影响

目的基于toll样受体(TLR)4/髓样细胞分化因子(MyD)88/核转录因子(NF)-κB信号通路探讨肾衰饮对慢性肾衰竭(CRF)大鼠炎症状态的干预机制。方法将60只SD大鼠,随机分成四组,分别为正常组、模型组、尿毒清组和肾衰饮组。进行4 w的干预治疗后,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态改变,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,分别采用免疫组化法和Western印迹检测大鼠肾脏组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结果与正常组比较,模型组HE染色显示大鼠肾脏组织发生明显病理改变,血Scr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高(P<0.01),肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,尿毒清组和肾衰饮组肾脏组织病理改变明显改善,血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.01),肾脏组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论肾衰饮能有效改善CRF大鼠的肾功能,其机制可能是抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路从而抑制炎症反应发生,达到治疗CRF的目的。