YY1基因在肾癌组织中的表达及对肾癌细胞功能的影响

目的探讨YY1基因在肾癌组织中表达及小干扰RNA(siRNA)对人肾癌786-O细胞增殖和侵袭的影响。方法以Real-Time PCR检测转录因子YY1在20对肾癌及癌旁组织中的表达;采用脂质体转染法将siRNA转染入人肾癌786-O细胞中,Real-Time PCR和Western印迹法检测YY1转染效率;MTT和平板克隆形成实验检测细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞周期;Transwell及Matrigel检测细胞侵袭能力,Real-Time PCR检测基质金属蛋白酶MMP9及钙黏附蛋白E-cadherin mRNA表达水平。结果与癌旁组织相比,20对癌组织中YY1 mRNA表达量显著增高(P<0.01)。转染人肾癌786-O后,siRNA-YY1组细胞YY1mRNA的表达抑制率达66%(P<0.01),蛋白表达水平也明显低于siRNA-NC组。与NC组相比,siRNA-YY1组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞生长被阻滞在G0/G1期,细胞侵袭能力明显减弱(P<0.01)。此外,与NC组相比,MMP9及E-cadherin mRNA水平有显著差异(P<0.01)。结论 YY1在肾癌组织中高表达,靶向沉默YY1可以在体外显著抑制肿瘤细胞的生长和侵袭能力。YY1特异性siRNA作为一种治疗肿瘤的新途径值得进一步研究。     

食管癌细胞中沉默Survivin基因对ATG16L1表达的影响

目的 探讨食管癌Eca109细胞中沉默生存素(Survivin, SVV)基因的表达对自噬相关蛋白ATG16L1表达的影响。方法 使用雷帕霉素(rapamycin, RAPA)在Eca109细胞中诱导建立自噬模型;使用Survivin抑制剂YM155和Survivin-siRNA作用于自噬模型,采用免疫荧光法观察自噬体数量变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平,Western blot法检测LC3-Ⅱ、p62、Survivin、ATG16L1的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测Survivin与p62的作用关系。结果 RAPA诱导Eca109细胞后,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高,p62蛋白的表达水平降低,同时细胞内自噬体数目增多。在RAPA组中ATG16L1mRNA和蛋白表达水平均升高。在细胞自噬模型中沉默Survivin表达后,Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平均降低。过表达Survivi...     

转录因子FoxO1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的检测FoxO1在食管鳞状细胞癌组织中的表达水平,分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素的关系。方法应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法,检测42例手术切除的食管鳞癌组织及配对的正常食管黏膜组织中FoxO1 mRNA的表达;免疫组化S-P法检测FoxO1蛋白的表达及组织学定位。结果正常食管黏膜组织中FoxO1mRNA及蛋白均呈低表达,而食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01)。高分化食管鳞癌组织的相对表达量显著高于中低分化食管鳞癌组织(P<0.01)。食管鳞癌组织中FoxO1 mRNA及蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05)。结论 FoxO1在正常食管黏膜组织和食管鳞癌组织中的表达存在明显差异,其表达水平与肿瘤分化程度密切相关。     

CLDN1在食管鳞癌中的表达及其分布异常在食管癌发生中的作用

目的 检测紧密连接蛋白CLDN1在食管鳞癌组织中的表达,研究CLDN1对食管鳞癌TE-11细胞生物学功能的影响。方法 应用免疫组化检测食管鳞癌组织芯片（含30例食管鳞癌组织、30例癌旁组织及30例食管远端组织）中CLDN1的表达,比较食管癌组织及癌旁组织中CLDN1的表达差异;应用Western blot检测15例食管鳞癌患者术后组织和食管癌细胞株CLDN1的表达,分析CLDN1在肿瘤细胞及正常食管上皮细胞内的分布;构建包含CLDN1 shRNA序列的慢病毒并转染TE-11细胞,采用Western blot和流式细胞术检测CLDN1干扰效果及细胞内分布。通过CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell检测细胞侵袭迁移能力;采用Rhodamine phalloidin染色TE-11细胞骨架并在激光共聚焦显微镜下观察细胞肌丝变化。结果 免疫组化结果显示CLDN1在癌组织及癌旁组织中阳性表达率无明显差异( P>0.05),但在高分化和中分化的食管鳞癌组织CLDN1呈强阳性表达,低分化食管鳞癌组织CLDN1表达明显降低;Western blot检测CLDN1在TE-11细胞中主要分布在细胞核内;干扰CLDN1表达后,TE-11细胞增殖明显减慢,侵袭及迁移能力降低。激光共聚焦显微镜显示下调CLDN1表达后,TE-11细胞骨架蛋白荧光强度减弱,细胞表面肌丝减少。结论 CLDN1在食管鳞癌组织中的表达与其分化程度相关,在TE-11中具有促癌作用,其表达及分布异常与肿瘤的发生发展密切相关,有望作为食管鳞癌的重要生物标志物。     

转录因子Yin Yang-1在头颈部肿瘤的研究进展

Yin Yang-1(YY1)是一种锌指蛋白,是GLI-Krüppel家族的成员,其可以作为转录抑制因子、激活因子或启动因子结合蛋白,指导并启动细胞和病毒基因的转录.因YY1的表达及功能与细胞周期的进展密切相关,最近被广泛应用于肿瘤生物学模型中.一些证据表明,YY1的表达和/或激活除了在正常的生物学过程中起调节作用外,...     

YY1在胃癌组织中的表达及其对SGC－7901细胞株增殖和凋亡的影响

目的:检测YY1在胃癌组织中的表达情况,探讨YY1对人胃癌细胞株SGC－7901增殖?凋亡的影响以及可能的机制?方法:利用定量PCR和免疫组织化学分别检测标本中YY1的mRNA和蛋白表达水平?利用慢病毒表达载体系统在胃癌细胞株SGC－7901中上调YY1,运用CCK－8?流式细胞术?平板克隆实验检测YY1对细胞的增殖?凋亡以及克隆形成能力的影响?结果:胃癌组织中YY1的mRNA和蛋白表达水平明显低于癌旁组织?与空载对照组(SGC－7901－Empty Vector,SGC－7901－EV)和与正常对照组(SGC－7901)相比,过表达YY1组细胞(SGC－7901－YY1)的增殖和平板克隆形成能力明显减弱,细胞凋亡增加?结论:YY1与胃癌的发生发展有一定的关系,可能起到抑癌基因的作用,YY1基因可能成为胃癌靶向治疗的新的潜在靶点?     

YY1 在胰岛素瘤中的表达及意义

目的探讨YY1在良、恶性胰岛素瘤组织中的表达情况及意义。方法收集2000~2014年南方医院19例胰腺神经内分泌 肿瘤组织蜡块,利用免疫组化法检测19例标本中YY1的蛋白表达水平。结果YY1在良恶性胰岛素瘤中组织中都有表达,恶性 胰岛素瘤组织中YY1表达强度高于良性胰岛素瘤组织（P=0.042）,YY1表达强度与胰岛素瘤的良恶性质存在正相关关系（P= 0.037）,YY1表达强度高的胰岛素瘤更具恶性潜能。结论YY1的高表达强度与胰岛素瘤发生发展有一定关系,YY1有望成为 检测胰岛素瘤恶性转化的新肿瘤标志物。     

PRDX1在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的：检测P RDX1蛋白在食管鳞癌中的表达,并分析其表达异常与临床病理学参数之间的相关性。方法：构建含144例食管鳞癌的组织芯片,免疫组化检测PRDX1蛋白的表达,统计学分析其临床意义及食管癌患者总生存期之间的关系。利用PRDX1 shRNA敲降PRDX1表达,MTT法观察癌细胞增殖能力的变化。结果：免疫组化结果显示PRDX1在食管鳞癌中的表达率为66．7％（96／144）,而癌旁粘膜中呈弱表达。 PRDX1的高表达与淋巴结转移和疾病进展呈正相关。单因素生存分析表明PRDX1蛋白阳性表达患者较阴性患者预后更差。而PRDX1的下调表达可抑制食管癌细胞的增殖。结论：P RDX1在食管鳞癌的发生进展过程中发挥了重要作用,是食管鳞癌患者治疗的潜在靶点之一。     

细胞周期素D1,p16,p27蛋白在食管鳞癌中的表达和临床意义(摘要)

目的：探讨细胞周期素D1（cyclinD1),p16,p27蛋白表达在食管鳞癌发生发展中的作用和临床意义。方法：应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（S-P法）检测石腊保存的48例食管鳞癌及癌旁组织，20例食管正常粘膜组织中cyclinD1,p16,p27蛋白的表达率。结果：食管鳞癌中cyclinD1,p16,p27蛋白的阳性表达率分别为72.9%,33.3%,35.4%，与癌旁组织和食管正常粘膜组织中的表达率有显著性差异，CyclinD1蛋白的表达与食管鳞癌的预后呈负相关，p16蛋白的表达与食管鳞癌的病理分级和预后相关；p27蛋白的表达与食管鳞癌的病理分级，TNM分期和预后相关。结论：Cy-clinD1,p16,p27蛋白从正负两个方面影响食管鳞癌的发生发展，对其进行检测可为食管鳞癌病情进展和预后判断提供帮助。     

黏蛋白1C亚基对食管癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨黏蛋白1 C亚基(MUC1-C)在食管鳞癌中的表达定位及在肿瘤细胞恶性生物学行为中的作用。 方法 Western blotting检测MUC1-C在食管鳞癌组织及正常组织细胞核内的表达;运用穿膜肽Go-201抑制MUC1-C入核后,集落实验及CCK-8实验检测食管鳞癌细胞的活性、生长和增殖能力;划痕实验及Transwell小室实验检测食管鳞癌细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测食管鳞癌细胞凋亡率。 结果 MUC1-C在食管鳞癌组织细胞核内的表达高于正常组织,抑制MUC1-C入核后食管鳞癌细胞活性、生长、增殖、迁移、侵袭能力均降低,凋亡率增高。 结论 MUC1-C通过入核发挥作用,能诱导和促进食管鳞癌细胞的恶性生长、增殖、迁移、侵袭,抑制肿瘤细胞的凋亡。     

RASSF1A和P16在食管鳞癌中的表达及临床病理意义

目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell car-cinoma,ESCC)中RASSF1A和P16的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组织化学法检测90例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织中RASSF1A、P16的表达,分析其与食管鳞癌临床病理参数的关系。结果:食管鳞癌组织中RASSF1A蛋白表达显著低于相应癌旁正常黏膜组织(51.1%vs 93.3%,P<0.01);P16蛋白表达显著低于相应癌旁正常黏膜组织(41.1%vs 91.1%,P<0.01)。RASSF1A蛋白低表达与食管鳞癌的TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),与大体类型无关(P>0.05)。P16蛋白低表达与食管鳞癌TNM分期、大体类型、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05)。两者表达皆与食管鳞癌患者的年龄、性别无关(P>0.05)。结论:RASSF1A和P16可成为判断食管鳞癌恶性程度和预后的检测指标。     

保罗样激酶1和p53在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨保罗样激酶1(PLK1)和p53蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学法分别检测87例食管鳞状细胞癌、53例癌旁组织及42例正常食管黏膜组织中PLK1及p53蛋白的表达,并分析两者的表达水平与临床病理因素的关系.采用χ2检验进行统计学分析.结果:PLK1蛋白在食管鳞状...     

转录调节因子Ets-1在食管鳞癌的表达及其意义

目的:探讨转录调节因子Ets-1在食管鳞癌组织的表达及其意义。方法:采用免疫组化技术(SP法)检测Ets-1在68例食管鳞癌组织及癌旁组织中的表达。结果:Ets-1在食管癌肿瘤组织高表达,远高于癌旁组织(P<0.005);Ets-1在肿瘤组织阳性表达率在不同病理分级、TNM分期各组中,差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01),而且Ets-1阳性表达率与病理分级、淋巴结转移和TNM分期均呈正相关关系(P<0.05~P<0.01)。未发现Ets-1在食管癌肿瘤组织的阳性表达率与病理类型有关(P>0.05)。结论:Ets-1在食管癌组织高表达,并与病理学分级、淋巴结转移及TNM分期有关。     

食管鳞状细胞癌(ESCC)中PD-1/PD-L1/PD-L2的表达与临床因素及预后的相关性

 目的 检验程序性细胞死亡分子1（programmed cell death-1,PD-1）/PD配体1（PD ligand-1,PD-L1）/PD配体2（PD-L2）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）患者中的表达,并评估其与临床特征及预后的关系。方法 收集2007年1月至12月在复旦大学附属中山医院胸外科接受手术治疗的325例食管肿瘤患者的临床数据,通过免疫组织化学染色分析石蜡包埋的肿瘤样品及部分对应的癌旁组织中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达,用免疫反应评分并分析其与临床特征及预后的关系。结果 PD-1、PD-L1、PD-L2三者阳性表达率分别为12.0%、52.6%、32.9%,PD-L（P<0.001）、PD-L1（P<0.001）、PD-L2（P=0.023）在癌旁组织和癌组织中的表达有差别。PD-L1的阳性表达与T分期（P<0.001）、术后分期（P=0.006）相关,PD-L2的阳性表达与T分期（P<0.001）、术后分期（P=0.002）及淋巴结转移（P=0.044）相关,与其他临床因素的相关性无统计学意义。PD-1（P=0.500）、PD-L1（P=0.058）、PD-L2（P=0.096）单阳性与患者生存状况均无明显关联。但三者表达均阴性的患者预后要显著优于仅其中一个因子表达阳性（HR=1.669）或二个以上因子表达阳性的患者（HR=1.606）。结论 PD-L1和PD-L2与ESCC患者的多个临床特征有关。虽然PD-1、PD-L1、PD-L2各自与患者预后之间无统计学意义关联,但表达均阴性的患者预后相对较好。     

67LR、MMP-7和TIMP-1在食管鳞癌组织中的表达及其意义

目的 检测67 kD层粘连蛋白受体(67LR)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白在食管鳞癌组织中的表达,并探讨其临床病理学意义.方法 应用免疫组化SP法检测56例食管鳞癌组织和26例非典型增生食管黏膜组织、23例正常食管黏膜组织中67LR、MMP-7和TIMP-1的表达,分析其与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移的关系及其相关性.结果 ①癌组织和癌旁非典型组织中67LR、MMP-7和TIMP-1的表达均高于正常食管黏膜上皮组织(P＜0.01);②侵及黏膜下、浅肌层、深肌层和外膜的食管鳞癌组织中,67LR蛋白阳性率组间差异无显著性(P＞0.05);MMP-7蛋白表达率依次增高,组间差异有显著性(P＜0.01);TIMP-1蛋白阳性率依次降低,组间差异有显著性(P＜0.05).③伴有淋巴结转移和无淋巴结转移的两组食管鳞癌组织间,67LR、MMP-7和TIMP-1蛋白阳性率之间差异均有显著性(P＜0.05或P＜0.01).④在食管鳞癌组织中,67LR的表达与MMP-7呈正相关、与TIMP-1呈负相关(P＜0.05);MMP-7的表达与TIMP-1无相关性(P＞0.05).结论 ①67LR、MMP-7、TIMP-1异常表达可能参与食管鳞癌的发生发展过程.②MMP-7、TIMP-1异常表达与食管鳞癌浸润有关,而67LR异常表达与食管鳞癌浸润无关.③67LR、MMP-7、TIMP-1异常表达与食管鳞癌淋巴结转移有关.④67LR、MMP-7、TIMP-1在食管鳞癌的发生发展及浸润、转移过程中可能起协同作用,联合检测其变化可预测食管鳞癌的恶性生物学行为.     

CREM-1蛋白在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究环磷酸腺苷反应元件调节蛋白(Cyclic AMP response element modulator 1,CREM-1)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达情况,结合临床病理资料初步探讨CREM-1的表达水平与食管鳞癌发生转移和侵袭的相关性。方法:采用免疫组化二步法测定98例食管鳞癌癌标本CREM-1的表达水平。Western blot检测4组转移性与非转移性食管鳞癌新鲜标本中CREM-1的蛋白表达水平。结果:Western Blot结果显示CREM-1在转移性食管鳞癌中表达明显低于非转移性癌组织,与上皮标记物E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达趋势一致。免疫组化结果显示CREM-1蛋白在转移性的食管鳞癌中低表达,在非转移性癌组织中高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。统计学分析显示CREM-1的表达高低与与肿瘤分期相关(P<0.05)。生存分析显示CREM-1高表达的患者预后不良(P<0.05)。Cox模型多因素分析提示CREM-1是独立的预后指标(P<0.05)。结论:CREM-1在转移性食管鳞癌中低表达,可能参与调控食管鳞癌转移及侵袭的发生发展过程。     

食管鳞癌及其淋巴结转移灶中E-cadherin的表达

目的 :探讨E cadherin(E cad)在食管鳞癌及淋巴结转移灶中的表达及其临床意义。方法 :应用免疫组织化学法 (SP法 )检测 19例正常食管上皮 ,5 2例食管鳞癌原发灶及其中 2 0例淋巴结转移灶中E cad的表达。结果 :19例正常食管上皮中E cad的着色为细胞膜着棕黄色 ,均有表达 ;食管鳞癌原发灶及淋巴结转移灶中E cad的表达率分别为 2 3 1%和 5 0 % ,3者相比差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;E cad的表达率与食管鳞癌的组织学分级 ,浸润深度及淋巴结转移有关 (P <0 0 5 )。结论 :E cad的表达减少与食管鳞癌的恶性进展有关 ,可做为判断食管鳞癌进展及预后的较好指标。     

VEGF在食管鳞癌中的表达及意义

目的 研究食管鳞癌患者病变组织及血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义.方法 采用酶联免疫吸附法检测46例食管鳞癌患者血清中VEGF的水平,选取10名健康人作为对照组;采用免疫组织化学法(Elivison 二步法)检测46例食管鳞癌组织标本中VEGF的表达.结果 食管鳞癌患者血清中VEGF水平显著高于健康人(P＜0.01);在食管鳞癌患者中,黏膜和肌层浸润者、外膜浸润者及邻近组织浸润者血清VEGF水平三者之间有统计学意义(P＜0.01);有淋巴结转移与无淋巴结转移的食管鳞癌患者血清中VEGF的表达水平有显著差异;组织中VEGF表达结果如下:VEGF主要表达于肿瘤细胞胞浆中,以癌巢边缘分布明显;在食管肌层及部分血管内皮细胞亦有阳性表达,但着色较癌细胞胞浆淡;周围坏死组织VEGF阳性表达明显,并呈弥漫性分布,着色要比肿瘤细胞胞浆中明显;正常食管组织几乎不表达VEGF.结论 血管内皮生长因子在食管鳞癌病变组织中及血清中异常表达,与食管鳞癌的浸润深度及淋巴结转移呈显著相关性,可以作为判断预后及筛选高危人群的潜在指标.     

食管鳞状细胞癌中WIF-1基因启动子区甲基化状态及mRNA表达的研究

目的探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)中WIF-1基因启动子甲基化状态及mRNA表达水平及其与病理指标之间的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测62例ESCC组织及30例癌旁组织中WIF-1基因启动子区甲基化状态和mRNA的表达水平,应用SPSS13.0探讨其与临床病理资料的关系。结果 WIF-1基因在癌组织中的甲基化率59.7%(37/62)明显高于癌旁组织13.3%(4/30),差异有显著性(P<0.05);其甲基化状态与年龄、分化程度及淋巴结转移情况相关(P<0.05);而与其他临床资料(性别、部位、浸润深度、临床分期)无明显相关性(P>0.05)。WIF-1基因mRNA在ESCC组的表达量(0.565±0.112)显著低于癌旁正常组(0.666±0.107),差异有显著性(P<0.05)。结论 WIF-1基因启动子甲基化在食管鳞癌的进展过程中起着重要的作用;WIF-1基因mRNA表达异常可能与ESCC的发生有关,此基因甲基化与mRNA表达两者之间的关系有待进一步研究。