高表达Kiss-1对结肠癌SW480细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨高表达Kiss-1基因对结肠癌SW480细胞增殖及迁移的影响.方法 将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒转染至SW480细胞设为实验组,将pEGFP-N1质粒转染至SW480细胞设为阴性对照组,将SW480细胞设为空白对照组,采用Western blot法检测各组细胞中Kiss-1表达量;采用CCK-8法分析Kiss-1对SW480细胞增殖的影响;并用划痕实验评估Kiss-1对SW480细胞迁移能力的影响.结果 将pEGFP-N1和pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒转染至SW480结肠癌细胞,检测实验组Kiss-1表达量增加,实验组细胞增殖率明显低于对照组(P＜0.05),且实验组细胞划痕损伤愈合的速度明显下降.结论 高表达Kiss-1可抑制结肠癌SW480细胞的增殖,降低细胞迁移速度.     

Kiss-1在结肠癌组织中的表达及意义

目的　检测Kiss - 1 在结肠癌组织中的表达,探讨其临床意义及两者相关性。方法　采用链霉菌抗生物素蛋白- 过氧化酶连接(SP) 法检测68例结肠癌,26例结肠腺瘤 及26例正常结肠组织中Kiss - 1 的表达情况和其与各种临床病理参数的关系,同时分析两者表达的相关性。结果　Kiss - 1 蛋白metastin 在结肠癌组中的表达率(48.5%) 明显低于结肠腺瘤组(80.8 %) 及正常结肠组(96.2 %) ,并且其在结肠癌组中的表达率与组织学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移及五年生存率密切相关( P 均< 0.05) 。结论　Kiss - 1 蛋白metastin 的表达缺失可能与结肠癌的浸润、转移有关。     

1-甲基乙内酰脲与氟尿嘧啶联合对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡作用的研究

目的探讨1-甲基乙内酰脲(1-methylhydantoin)单用以及与氟尿嘧啶(5-Fu)联合对结肠癌SW480细胞增殖抑制作用和诱导凋亡。方法使用MTT比色法检测1-甲基乙内酰脲M_((a-h))在不同浓度(0.5、5、10、20、50、100、200、500 mg/L)单用及与不同浓度5-Fu_((a-d))(10、20、50、100 mg/L)联合作用于人结肠癌SW480细胞的吸光度值,然后再计算抑制率(IR)。流式细胞仪监测M_d、M_e、Fu_b、M_d+Fu_b、M_e+Fu_b处理SW480细胞48 h对细胞周期分布和凋亡影响。结果 1-甲基乙内酰脲在体外对人结肠癌SW480细胞有增殖抑制作用。在低浓度时,1-甲基乙内酰脲对人结肠癌SW480细胞增殖抑制效果与5-Fu相当(P0.05);在高浓度时,1-甲基乙内酰脲对人结肠癌SW480细胞抑制增殖效果弱于5-Fu(P0.05)。1-甲基乙内酰脲与氟尿嘧啶联合应用有协同抗肿瘤效果。结论 1-甲基乙内酰脲能够抑制人结肠癌细胞SW480的增殖和诱导凋亡作用,并与氟尿嘧啶有协同抗瘤细胞增殖效果。     

Kiss-1高表达抑制结肠癌侵袭与转移能力的影响

目的　探讨Kiss-1高表达对结肠癌SW480细胞侵袭与转移能力的影响,初步明确Kiss-1基因对基质金属蛋白酶-9（matrix　metalloproteinase-9,MMP-9）和MMP-2表达的影响。　方法　用脂质体转染方法将质粒pEGFP-N1-Kiss-1及pEGFP-N1空载体质粒瞬时导入结肠癌SW480细胞,细胞随机分三组：空白对照组、阴性对照组、实验组。应用Transwell实验检测结肠癌细胞的侵袭能力、Western-blot和Real-time　PCR分别从蛋白和mRNA水平检测Kiss-1表达对MMP-9、MMP-2表达的影响。　结果　成功将pEGFP-N1-Kiss-1重组质粒瞬时导入结肠癌SW480细胞。Transwell实验检测出实验组较阴性对照组和空白对照组能明显降低SW480细胞侵袭能力的作用（P<0.05）。Western　blot和Real-time　PCR检测出实验组Kiss-1　蛋白和mRNA表达水平较阴性对照组或空白对照组显著增加,而实验组MMP-9、MMP-2蛋白和mRNA表达水平显著降低,其差异均具有统计学意义（P<0.05）。　结论　Kiss-1抑制MMP-9和MMP-2的表达,其调控机制可能与抑制结肠癌的侵袭和转移能力有关。     

华蟾素对结肠癌细胞SW480生物学行为的影响

目的研究华蟾素对人结肠癌细胞株SW480细胞生物学行为的影响。方法采用华蟾素（0.01mg/L、0.1mg/L、1mg/L）干预SW480细胞,MTT实验检测细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,Transwell小室实验观察药物作用前后细胞侵袭能力的改变。结果华蟾素对SW480细胞有显著的增殖抑制作用,且呈现浓度和时间依赖性,经药物作用的细胞凋亡比例显著增高,侵袭能力明显下降。结论华蟾素能抑制结肠癌细胞增殖,诱导其凋亡,具有一定的临床应用前景。     

槲皮素对结肠癌SW480细胞增殖及蛋白表达的影响

目的研究槲皮素对SW480结肠癌细胞生长增殖及蛋白表达的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞后,采用人工重组基膜技术监测槲皮素对肿瘤细胞体外侵袭能力和运动活性的作用。将培养成功的细胞分为空白组和其余5个不同浓度(10、20、40、80、160 mg/L)的槲皮素作用组,观察干预结果,检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率,选择最佳作用浓度;并通过免疫印迹法检测人结肠癌SW480内增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki67的表达情况。结果结肠癌SW480细胞经槲皮素处理后,体外侵袭、运动能力呈剂量依赖性下降(P<0.05);槲皮素能显著抑制结肠癌SW480细胞的增殖,浓度为10、20、40、80、160μmol/L的槲皮素作用于结肠癌SW480细胞的增殖抑制率分别为(4.1±1.2)%、(13.9±1.5)%、(38.8±2.2)%、(41.5±2.6)%、(45.3±2.6)%,与空白组对照相比差异有统计学意义(P<0.05);干预的结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达均呈下调表现(P<0.05)。结论槲皮素可呈浓度和时间依赖性地抑制结肠癌SW480细胞的增殖,对人结肠癌SW480细胞的生长有抑制作用,并能诱导其凋亡。     

五味子多糖对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的作用

目的：探讨五味子多糖（Schisandra polysaccharide,SCP）对人结肠癌SW480细胞的增殖和凋亡的影响及其机制。方法：将人结肠癌SW480细胞分为对照组,SCP高剂量组、SCP中剂量组和SCP低剂量组,MTT法检测肿瘤细胞增殖情况,流式细胞仪检测凋亡,免疫组化法检测凋亡蛋白表达。结果：与对照组比较,SCP高、中、低剂量组均能不同程度抑制结肠癌SW480细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,使凋亡蛋白Bcl－2表达降低,Bax表达增加,具有剂量依赖关系。结论：五味子多糖能够抑制结肠癌SW480细胞的增殖同时促进细胞凋亡,这可能与其影响凋亡蛋白的表达相关。     

DADS对人结肠癌SW480细胞系增殖的影响

目的观察二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌SW 480细胞增殖的抑制作用。方法实验分DADS处理组和未处理组。MTT法、集落形成实验检测细胞增殖活性,光镜和电镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测周期分布,免疫细胞化学检测增殖细胞核(PCNA)表达改变。结果MTT和集落形成实验显示DADS作用SW 480细胞后,细胞生长抑制率呈浓度、时间依赖性增加,而集落形成率显著降低;组织学显示处理组细胞异型性降低,核质比下降,细胞器丰富;流式细胞仪分析显示DADS明显将细胞周期阻滞于G2/M期,且呈剂量依赖关系;免疫细胞化学显示处理组较未处理组细胞PCNA蛋白表达明显减弱(P<0.05)。结论DADS可体外抑制人结肠癌SW 480细胞增殖,使癌细胞阻滞于G2/M期,可能与下调PCNA蛋白的表达有关。     

高表达HAX1对人结肠癌细胞SW480凋亡的影响

观察高表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X-1(haematopoietic cell-specific protein 1-associated pro-tein X-1,HAX1)对结肠癌SW480在化疗药物打击后凋亡的影响。方法构建HAX1高表达的质粒,并瞬时转染入结肠癌细胞SW480中(HAX1组,转染了对照空质粒的结肠癌细胞SW480为CTL组),24h后加入顺铂(10μg.mL-1)处理细胞约36h,用Sub-G1法及Annexin V-FITC流式检测法检测并比较2组细胞凋亡率的差别。同时用Western blot方法检测转染细胞的HAX1表达情况及凋亡途径相关蛋白caspase-9和PARP的变化。结果顺铂打击36h后,Sub-G1法显示CTL组平均凋亡率为(33.67±2.50)%,HAX1组诱导凋亡率均值(16.33±2.10)%,比CTL组降低(P=0.026)。Annexin V-FITC法检测CTL组凋亡率均值为(46.33±9.30)%,HAX1组凋亡率均值为(24.33±6.10)%。HAX1组比CTL组明显降低(P=0.013)。Western blot证实在细胞高表达HAX1蛋白后,可明显降低caspase-9及PARP的剪切体蛋白的表达。结论高表达HAX1抑制顺铂诱导的SW480细胞凋亡,这种抑制作用是通过降低凋亡途径caspase-9及PARP剪切体表达情况完成的。     

华蟾素抑制人结肠癌SW-480细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的：观察华蟾素（Cinobufacini）抑制人结肠癌（SW-480）细胞系增殖及诱导凋亡的生物学效应。方法：以人结肠癌SW-480细胞为研究对象,采用MTT法观察细胞增殖抑制的影响;采用吖啶橙（AO）/溴乙锭（EB）荧光染色法观察细胞凋亡形态,并计算凋亡率。结果：在20~120μg/mL,华蟾素能明显的抑制SW-480细胞的增殖;AO/EB荧光染色法显示：随着药物浓度的增加细胞凋亡率逐渐增加。结论：华蟾素具有抑制人结肠癌（SW-480）细胞生长增殖,促进凋亡的作用。     

Hrs对结肠癌细胞凋亡及增殖作用的研究

目的：研究在结肠癌细胞系中Hrs与凋亡及增殖的关系。方法在结肠癌细胞系HCT?116和SW?480中下调Hrs蛋白表达,通过Incucyte、MTT法、软琼脂试验、FACS检测细胞凋亡与增殖情况。结果下调Hrs表达后,结肠癌细胞系HCT?116和SW?480凋亡明显增加,增殖及细胞活性均显著受到抑制。结论 Hrs与结肠癌细胞凋亡密切相关。     

非小细胞肺癌中Kiss—1的表达和淋巴管生成的意义

目的探讨非小细胞肺癌（Non—Small Cell Lung Cancer,NSCLC）转移抑制基因Kiss-1表达下调或缺失和淋巴管生成与淋巴结转移是否具有协同作用。方法兔抗人单克隆抗体Kiss-1蛋白metastin（45-54）-NH2和抗Podoplanin单克隆抗体（Elivision法）对68例NSCLC术后石蜡切片进行染色,显微镜下观察Kiss-1的表达和肿瘤间质及癌旁组织淋巴管生成情况。结果①NSCLC组织内淋巴结阳性组Kiss-1的表达阳性率为39．4％（13／33）,淋巴结阴性组Kiss-1的表达阳性率为91．4％（32／35）,两组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;②肿瘤组织间质中淋巴结阳性患者淋巴管密度（Lymphatic vessel density,LVD）平均值为15．73±0．74,淋巴结阴性患者LVD平均值为8．31±0．32,二者相比差异有统计学意义（P〈0．05）。③logistic回归分析显示,仅LVD对淋巴结转移有影响（P〈0．05）,其相对危险度（RR）为2．065,95％可信区间（1．202,3．547）。而Kiss-1的表达下调无意义,P值为0．569,95％可信区间为（0．011,12．143）。二者之间对淋巴结转移无明显协同作用（P〈0．05）。结论转移抑制基因Kiss-1的表达下调和淋巴管生成对淋巴结转移未见明显协同作用。     

FHIT基因转染对人结肠癌细胞系SW480增殖和侵袭力的影响

目的 探讨真核表达质粒pRc/CMV2-FHIT对结肠癌细胞株SW480增殖和侵袭活性的影响。方法 将携有FHIT基因的重组真核表达质粒pRc/CMV2-FHIT转化大肠杆菌DH5α并扩增,抽提纯化质粒并进行酶切鉴定,pRc/CMV2-FHIT体外转染SW480细胞（SW480-FHIT）,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pRc/CMV2的SW480细胞（SW480-pRc/CMV2）和正常SW480细胞为对照,用RT-PCR检测FHIT的表达情况,并用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）和细胞侵袭实验分别检测FHIT基因转染前、后SW480细胞增殖和侵袭活性的变化。结果 pRc/CMV2-FHIT的酶切鉴定证实含有目的基因FHIT;SW480-FHIT细胞的RT-PCR产物经凝胶电泳有明显的阳性条带,而对照组则无;MTT实验结果显示重组质粒转染组SW480细胞的增殖明显受到抑制;Transwell体外侵袭实验显示转染pRc/CMV2-FHIT能明显抑制SW480细胞的体外侵袭力(P<0.01)。结论 应用基因转染技术重表达FHIT基因能有效抑制细胞的生长、增殖及侵袭活性,为以FHIT为靶向的结肠癌基因治疗提供了新的思路和手段。     

青藤碱对人结肠癌细胞株SW480增殖和细胞周期的影响

目的 研究青藤碱对人结肠癌SW480细胞增殖和细胞周期的影响.方法 用不同浓度的青藤碱处理体外培养的人结肠癌SW480细胞24、48、72h后,采用CCK法检测细胞的增殖活性,采用流式细胞术检测细胞的细胞周期分布,并用光镜和透射电镜观察SW480细胞的形态学变化.结果 青藤碱在体外可抑制SW480细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性.干预48h后,中、低浓度的青藤碱（8mmol/L、4mmol/L）可诱导SW480细胞G1期细胞比例增加,而高浓度的SIN（16mmol/L、10mmol/L）可诱导G1期、G2期细胞比例增加.光镜与电镜下均见凋亡细胞增多.结论 青藤碱在体外能抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导该细胞系的凋亡,其机制可能与其阻滞细胞周期进程有关.     

MMP-9和Kiss-1在喉鳞癌中表达及关系临床研究

目的:检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和Kiss-1在喉鳞癌中的表达,探讨二者在喉鳞癌发生发展及转移中的作用。方法:应用免疫组织化学法检测172例喉鳞癌及64例正常喉粘膜组织中MMP-9和Kiss-1的表达,分析其在不同病理特征中的意义。结果:MMP-9和Kiss-1阳性主要表达于细胞浆和(或)细胞膜,喉鳞癌中MMP-9蛋白表达的阳性率明显高于正常粘膜组织,Kiss-1表达的阳性率明显低于正常粘膜组织。MMP-9和Kiss-1的表达与肿物大小、分化程度及淋巴结转移密切相关。喉鳞癌中MMP-9和Kiss-1的表达呈负相关。结论:MMP-9和Kiss-1在喉鳞癌的发生发展中具有重要作用,联合检测MMP-9和Kiss-1可能成为预测肿瘤预后的指标。