活血通腑方抗实验性肠粘连作用及机制研究

目的观察活血通腑方对肠粘连的治疗效果,探讨其对肠粘连防治作用的机理。方法取SD雄性大鼠60只,随机分为6组:对照组、模型组、活血通腑方高、中、低剂量组、地塞米松磷酸钠阳性对照组。除对照组外,其余各组大鼠均制备肠粘连模型。对照组和模型组腹腔注射生理盐水,地塞米松组腹腔注射地塞米松磷酸钠(10mg/kg),活血通腑方低、中、高剂量组灌胃给予活血通腑方(0.65、1.3、2.6g/100g),连续给药1周。各组于术后第8天取血,ELISA法测定血清IL-6、IL-1β和TNF?α含量;取粘连组织,匀浆后试剂盒检测TGF-β1、CTGF的含量,同时记录大鼠肠粘连级别。RT-PCR检测粘连组织中FN mRNA的表达。Western blot检测p-Smad3的蛋白水平。结果模型组血清IL-1β和TNF?α含量增高,FN mRNA的表达增加,TGF-β1、CTGF含量增高。与模型组相比,活血通腑方低、中、高剂量组的肠粘连程度明显减轻,血清IL-1β和TNF?α及粘连组织中TGF-β1和CTGF含量明显下降(P0.05~0.01),FN mRNA和p-Smad3表达降低(P0.05~0.01)。结论活血通腑方可减轻肠粘连的程度,对肠粘连具有防治作用。     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7信号通路的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病(DM)模型,模型成功后随机分为3组:模型对照组、开搏通组、肾康丸组,另设正常对照组。治疗8周后,取大鼠肾脏,采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad 7蛋白表达的情况。结果8周后,DN模型组大鼠与正常大鼠比较,肾脏组织中FN和TGF-β1蛋白表达明显增加,Smad 7蛋白表达明显减少。肾康丸和开搏通都可以减少FN和TGF-β1蛋白的表达,增加Smad 7蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1/Smad信号传导通路的激活,减少ECM的沉积,从而延缓DN进程。     

实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、Smad3、Smad7、CTGF的表达及其意义

目的 :研究四氯化碳 ( CCl4 )诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad3、Smad7和结缔组织生长因子 ( CTGF)的表达及定位。方法 :将 2 4只大鼠随机分为正常对照组与模型组 ,模型组大鼠予以 40 %四氯化碳皮下注射 8周后处死。免疫组化技术检测 TGF-β1、Smad3、Smad7和 CTGF在肝脏的表达及细胞内的定位 ,放射免疫方法检测透明质酸 ,并进行肝组织病理检查。结果 :与正常组大鼠比较 ,模型组大鼠肝内 TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加 ,而 Smad7的表达降低。 TGF-β1、Smad3及 CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7主要在肝细胞浆表达 ;模型组大鼠血清 HA及肝组织Van Giseon染色、HE染色和电镜检查均支持肝纤维化改变。结论 :肝内 TGF- β1、Smad3和CTGF表达增强、Smad7表达减弱 ,提示 TGF- β1轴、CTGF参与了肝纤维的发生发展 ,可能作为防治肝纤维化发生发展的新途径之一     

壮通饮对糖尿病肾病大鼠肾皮质CTGF、TGF-β_1、PAI-1、FN细胞因子mRNA表达的影响

目的实验性研究壮通饮对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子(TGF-β1)、血浆纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、纤维连接蛋白(FN)细胞因子mRNA表达的影响,并探讨壮通饮对DN大鼠肾脏的保护作用机制。方法采用单肾切除术合并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导制备DN大鼠模型,并随机分为空白对照组、假手术组、模型组、卡托普利西药组(1g/kg)和壮通饮低(6.8g/kg)、中(13.6g/kg)、高(27.2g/kg)剂量7个组。于实验给药治疗6周后,用荧光实时定量RT-PCR法检测大鼠肾皮质CTGF、TGF-β1、PAI-1、FN细胞因子mRNA的表达。结果壮通饮可以降低DN大鼠肾皮质CTGF、TGF-β1、PAI-1、FN细胞因子mRNA的表达。结论壮通饮能改善肾皮质CTGF、TGF-β1、PAI-1、FN细胞因子mRNA的表达,以减轻肾脏病理改变,对DN大鼠的肾脏具有一定的保护作用。     

灯盏益肾颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β/Smad转导通路的影响

目的 观察灯盏益肾颗粒对糖尿病肾病（DN）大鼠TGF-Smad转导通路的影响，探讨其对DN防治作用。方法 雄性SD大鼠90只随机分成正常组（A组）、模型组（B组）、盐酸贝那普利组（C组）、灯盏益肾低、中、高剂量组（D、E、F组）。链脲佐菌素（STZ）55mg/kg一次性腹腔注射建立DN模型，给予不同实验因素干预后，生化检测胱抑素C（CysC）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿蛋白/尿肌酐（Up/Ucr）；免疫组化法测定大鼠肾组织TGF-β1、Smad 2、Smad 7、Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白（FN）的表达。结果 E、F组Up/Ucr、CysC、BUN低于B组（P<0.05或P<0.01）；E、F组肾组织中TGF-β1、Smad 2、Ⅳ型胶原、FN蛋白表达明显低于B组（P<0.01）、低于C、D组（P<0.05），Smad 7蛋白表达多于B、C、D组（P<0.05）。结论 灯盏益肾颗粒可以对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中TGF-β/Smad信号传导通路产生影响，调控肾组织中Ⅳ型胶原、FN表达，影响肾纤维化进程，随剂量增加，影响作用增强。     

桃红四物汤调控NF-κB/TGF-β1/Smad通路抑制宫腔粘连的机制

目的 研究桃红四物汤治疗宫腔粘连（IUA）的作用机制。方法 选取50只SPF级雌性SD大鼠为研究对象,通过机械和感染双重损伤建立IUA大鼠模型,随机分为IUA模型组、桃红四物汤高（18 g/kg）、中（9 g/kg）、低剂量（4.5 g/kg）组,每组各10只,同时选取10只大鼠作为正常组。连续灌胃24 d后收集各组大鼠子宫组织,分别采用RT-qPCR、ELISA和Western blot检测子宫组织中α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平,以及NF-κB、p-NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad、Smad3、p-Smad7及Smad7蛋白表达水平。结果 与正常组比较,IUA模型组子宫组织中α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6、IL-18、p-NF-κB、NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3水平明显上调,p-Smad7、Smad7水平明显下调（P＜0.05）;与IUA模型组比较,桃红四物汤组可显著降低α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6、IL-18、p-NF-κB、NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2及p-Smad3、Smad3的表达,上调p-Smad7、Smad7的表达（P＜0.05）,且中、高剂量组效果更显著（P＜0.05）。结论 桃红四物汤可通过抑制NF-κB/TGF-β1/Smad信号通路的活化,进而抑制IUA大鼠子宫组织纤维化及炎症反应。     

穿心莲内酯对大鼠腹腔粘连的抑制作用及其可能机制

目的探讨穿心莲内酯(Ad)对大鼠腹腔粘连的抑制效果及其可能机制。方法 (1)将60只SD雄性大鼠分为正常对照组、模型组、地塞米松组、Ad低剂量(20 mg/kg)组、Ad中剂量(40 mg/kg)组、Ad高剂量(80 mg/kg)组,各10只。除正常对照组外,其余各组大鼠均采用摩擦盲肠法制备腹腔粘连模型;建模后48 h,各药物组给予相应的药物干预10 d。给药结束后,评估各组大鼠腹腔粘连程度,并测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,以及腹腔液中转化生长因子β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)水平。(2)另收集50只雄性SD大鼠腹腔液,制备腹膜间皮细胞后分为照组、模型组、模型+不同浓度Ad组,各10只。模型组细胞加入TGF-β1培养,模型+不同浓度Ad组细胞加入TGF-β1和相应浓度的Ad(终浓度分别为10、20、40μmol/L)培养。培养24 h后检测各组细胞内Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)蛋白、Smad7、Smad2/3及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白水平。结果 (1)其他组粘连程度均重于正常对照组,地塞米松组与Ad中、高...     

实脾固肾化瘀方对阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨实脾固肾化瘀方对阿霉素(ADR)肾纤维化大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响。方法研究于2016年8—12月在上海中医药大学附属曙光医院肾病研究所进行,40只雄性SD大鼠随机分成正常对照组、模型组、实脾固肾化瘀方组、福辛普利钠组等4组,每组10只。除正常对照组外,其余3组大鼠均采用尾静脉注射ADR(4mg/kg)法制成肾纤维化大鼠模型。造模成功后实脾固肾化瘀方组予以实脾固肾化瘀方浸膏(43g/kg);福辛普利钠组予以福辛普利钠溶液(2mg/kg);模型组和正常对照组予以生理盐水。实验结束后,留取全部大鼠24 h尿量、血清及肾脏组织,观察各组大鼠肾脏病理变化及肾组织TGF-β1、Smad2及Smad7表达的变化。结果 Masson染色发现,正常对照组大鼠肾组织形态结构正常,未见肾小管、间质纤维化及炎细胞浸润等异常改变。肾间质胶原纤维微弱表达,胶原纤维呈蓝色,肌纤维及红细胞呈红色。模型组大鼠肾组织出现明显的病理损害,实脾固肾化瘀方组、福辛普利钠组大鼠肾组织病理损害明显减轻,且实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织病理改善比福辛普利钠组更明显。免疫组化染色并对其灰度值测定后发现,模型组肾组织TGF-β1、Smad2表达较正常对照组明显上调(P<0.01),实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织TGF-β1及Smad2表达较模型组明显下调(P<0.01),Smad7表达明显上调(P<0.01),与福辛普利钠组相比,实脾固肾化瘀方组大鼠肾组织TGF-β1、Smad2表达差异无统计学意义(P>0.05),而Smad7表达则明显上调(P<0.05)。结论实脾固肾化瘀方可能通过下调TGF-β1及Smad2表达、上调Smad7表达,干预TGF-β1/Smads信号通路,从而发挥改善ADR肾病大鼠肾纤维化、保护肾功能的作用。     

复肾汤对DN模型大鼠肾组织TGF-β1、CTGF及FN表达的影响

目的 观察复肾汤对糖尿病肾病(DN)模型大鼠肾组织TGF-β1、CTGF及FN表达的影响.方法 小剂量注射STZ+CFA建立DN模型,分为模型组、复肾汤不同剂量治疗组(FST2.5g/kg组、FST7.5g/kg组、FST22.5g/kg组),另设正常对照组,给药14周后,轻取肾脏,免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1...     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）大鼠TGF-β1／Smad信号通路影响。方法用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病（diabetes mellitus，DM）模型，模型成功后随机分为3组：模型对照组、开搏通组、肾康丸组，另设正常对照组，治疗8周后，取大鼠肾脏，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白（fibronetin，FN）和TGF-β1mRNA基因表达情况；采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织Smad2、Smad3蛋白表达的情况。结果在治疗的8周里，模型组大鼠血糖均维持在16．7mmol／L以上；出现多饮、多食、多尿、消瘦的DM症状；8周后，DN模型组大鼠与正常大鼠比较，肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达显著上调（P〈0．01），Smad2、Smad3蛋白表达明显增加。肾康丸和开搏通都可以抑制DN大鼠肾脏组织中FN和TGF-β1mRNA基因表达，差异具有统计学意义（P〈0．01），都可以减少Smad2、Smad3蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1／Smad信号转导通路的激活，减少细胞外基质合成和分泌，从而延缓DN进程。     

豹皮樟总黄酮血清对TGF-β1干预的大鼠肝星状细胞的作用及部分机制

目的 研究豹皮樟总黄酮(TFLC)血清对转化生长因子β1(TGF-β1)干预的大鼠肝星状细胞(HSC)的作用并探讨作用机制.方法 健康成年SD大鼠随机分为4组:正常组、TFLC高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)剂量组,给药4 d后取大鼠血清作用于TGF-β1干预的HSC,MTT法检测HSC的增值、半定量RT-PCR法检测HSC中α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Smad3、Smad7及CTGFmRNA的表达.Western-blot方法检测HSC中CTGF蛋白的表达.结果 各剂量组TFLC血清均能明显抑制TGF-β1干预的HSC的增值,下调α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Smad3、CTGF mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达,且明显降低CTGF蛋白的表达.结论 TFLC血清可抑制HSC的活化增值及胶原分泌,其机制可能与阻断HSC中的Smads信号传导通路进而下调CTGF的表达有关.     

透明质酸联合羟乙基淀粉预防术后腹腔粘连的作用机制初探

目的:探讨透明质酸(HA)与羟乙基淀粉(HES)联合作用下,大鼠腹腔粘连组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。方法:建立大鼠术后肠粘连模型,20只SD大鼠随机分成4组:假性粘连组、生理盐水对照组、透明质酸与羧甲基纤维素(HA-CMC)对照组和HA-HES实验组。用HE染色方法观察腹膜粘连程度以及用免疫组化的方法检测组织中TGF-β1和TNF-α的表达情况。结果:HA-HES实验组粘连分级及粘连发生率比生理盐水组和HA-CMC对照组明显减轻,差异显著(P<0.05)。结论:HA-HES防粘连剂能够明显减轻术后腹腔粘连程度,抑制术后腹膜损伤部位TGF-β1及TNF-α的表达。     

白芍总苷调控NF-资B/TGF-茁1/Smad信号通路对慢性盆腔炎大鼠子宫组织的影响

目的探讨白芍总苷（TGP）调控NF-κB/转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路对慢性盆腔炎大鼠子宫组织的影响。方法采用随机数字表法将120只雌性大鼠分为假手术组、模型组、妇科千金片组（150mg/kg）和TGP低、中、高剂量组（20、40、80mg/kg）6组，每组20只。除假手术组外，其余各组均采用机械损伤加混合细菌感染的方法制备慢性盆腔炎大鼠模型。造模10d后，TGP低、中、高剂量组分别给予浓度4、8、16g/L的TGP溶液（5ml/kg）灌胃，妇科千金片组给予浓度30g/L的妇科千金片溶液（5ml/kg）灌胃，假手术组和模型组给予0.9%氯化钠溶液（5ml/kg）灌胃，各组均1次/d、疗程21d。观察子宫大体情况并通过Verco评分评价子宫粘连状况，计算子宫系数（子宫重量/大鼠体重），HE染色观察子宫组织病理学改变并行病理评分；ELISA法检测血清炎症因子TNF-琢、IL-1茁、IL-10水平；Westernblot法检测子宫组织NF-资B、转化生长因子-茁1（TGF-茁1）、Smad同源物2（Smad2）、Smad同源物3（Smad3）蛋白表达水平。结果与模型组比较，妇科千金片组和TGP中、高剂量组大鼠子宫水肿状况及与周围组织粘连状况明显减轻，Verco评分和子宫系数均降低，子宫组织病变明显改善且病理评分降低，血清TNF-琢、IL-1茁水平均降低且IL-10水平升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；TGP中、高剂量组子宫组织NF-资B、TGF-茁1、Smad2、Smad3蛋白表达水平均下调（P＜0.01）。与妇科千金片组比较，TGP高剂量组子宫系数降低，血清TNF-琢水平降低、IL-10水平升高，NF-资B、TGF-茁1、Smad2、Smad3蛋白表达水平均下调，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。结论TGP具有抑制慢性盆腔炎大鼠子宫粘连和组织病变的作用，其机制可能与抑制NF-资B/TGF-茁1/Smad信号通路介导炎症反应有关。     

肝复健方对肝纤维化大鼠TGF-β/Smad信号通路的影响

目的 观察以"浊毒"立论的肝复健方对猪血清诱导的大鼠肝纤维化(HF)肝脏转化生长因子-β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ) mRNA水平和Smad2/3、Smad4、Smad7蛋白表达的影响.方法 SD大鼠腹腔注射猪血清0.5 mL,每周2次,连续8周制备HF模型,每天灌胃分别给予不同剂量的肝复健方(15.0、22.5、30、0 g/kg)和秋水仙碱(0.154 g/kg)治疗至12周末.实验结束后,RT-PCR法检测肝组织TGF-β1及其受体TβRⅡmRNA的表达,Weston-blot法检测肝组织Smad2/3、Smad4、Smad7蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,模型组TGF-β1、TβRⅡ及Smad2/3、Smad4表达明显增强,Smad7表达明显下降;经肝复健方治疗后大鼠肝脏TGF-β1及其受体TβRⅡ表达均比模型组减弱,Smad2/3、Smad4的表达减弱而Smad7蛋白的表达增强.结论 肝复健方能抑制TGF-β1及其受体TβRⅡ mRNA的表达,下调Smad2/3、Smad4蛋白表达,上调Smad7蛋白的表达.肝复健方对大鼠HF肝脏TGF-β/Smad信号通路有明显的影响,这可能是其治疗HF的机制之一.     

双重阻断肾素血管紧张素系统对糖尿病肾病大鼠肾小管间质纤维化的影响

目的观察双重阻断肾素血管紧张素系统（RAS）对糖尿病肾病大鼠肾小管间质TGF-β1、CTGF、FN表达的影响。方法将STZ诱导的糖尿病肾病大鼠模型随机分为对照组（A组）、贝那普利组（B组）、贝那普利联合氯沙坦组（C组）。B组给予贝那普利10mg／kg灌胃,C组给予贝那普利5mg／ks、氯沙坦10mg／kg灌胃,8周后免疫组化观察各组肾小管间质TGF-β1、CTGF、FN表达,RT-PCR测定TGF-β1、CTGF、FN的mRNA表达。结果B组、C组大鼠小管间质TGF—β1、CTGF、FN表达、mRNA表达较A组均明显下调（P〈0．01）,同时C组TGF-β1、CTGF、FN表达较B组也显著下调（P〈0．05）。结论贝那普利与氯沙坦联合阻断RAS,比单用贝那普利能更有效下调糖尿病大鼠肾小管间质TGF-β1、CTGF、FN的表达。     

基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制

目的基于TGF-β/Smad信号通路研究芒果苷对肝纤维化大鼠的作用机制。方法健康SD大鼠40只随机分为5组,包括空白组、模型组、芒果苷低剂量组、芒果苷中剂量组及芒果苷高剂量组。除空白组外,其余组采用四氯化碳诱导肝纤维化大鼠模型,造模成功后,芒果苷低、中、高剂量组分别以15mg/kg、30mg/kg、60mg/kg芒果苷生理盐水溶液灌胃,空白组、模型组等量生理盐水灌胃,1次/d,连续6周,待最后一次给药72h后眼眶取血并处死动物,采样。HE、Masson染色观察肝组织病理学改变; ELISA检测血清TGF-β1、HA、HYP、SOD水平;免疫组化检测肝脏组织Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β的表达; RT-PCR检测肝脏组织中Smad2、TGF-β、MCP-1 m RNA表达。结果 HE和Masson染色结果显示芒果苷高剂量组可明显减轻肝脏组织病理损伤;与模型组相比,仅芒果苷高剂量组能明显降低TGF-β1、HA、HYP、Collagen I、α-SMA、Smad2、TGF-β、MCP-1水平,明显升高SOD水平,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论芒果苷具有抑制大鼠肝纤维化作用,其机制可能与减轻炎症反应保护肝功能,抑制TGF-β/Smad信号通路有关。     

绞股蓝总皂苷对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的：观察绞股蓝总皂苷对大鼠肝纤维化转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响。方法：将Wistar雄性大鼠设为正常组、模型组、绞股蓝总皂苷组、秋水仙碱组,除正常组外采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型。造模第7周开始予相应的药物干预,每日给药剂量为股蓝总皂苷200 mg/kg、秋水仙碱0.1 mg/kg,共3周。观察大鼠一般情况变化,肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量,肝组织病理及胶原沉积;检测肝组织肝星状细胞（HSC）活化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达,肝组织TGF-β1/Smad信号通路指标TGF-β1、TGF-β1受体1（TβR-Ⅰ）、TGF-β1受体2（TβR-Ⅱ）、Smad2/p-Smad2、Smad3/p-Smad3蛋白表达。结果：模型组大鼠一般状态较差,肝组织Hyp含量较正常组显著增高,肝小叶被破坏,肝细胞脂肪变性伴炎性细胞浸润,并有大量纤维结缔组织增生;大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均显著升高,而Smad3蛋白表达与正常组比较无差异。绞股蓝总皂苷组及秋水仙碱组大鼠肝组织Hyp含量显著降低,肝组织病理改善;绞股蓝总皂苷组大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Smad2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均较模型组显著下降,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及Smad3蛋白表达无显著变化;秋水仙碱组大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Smad2、p-Smad3蛋白表达均较模型组显著下降,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、p-Smad2及Smad3蛋白表达无显著变化。结论：绞股蓝总皂苷对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有显著的干预作用,其作用机制可能与抑制HSC活化、TGF-β1分泌及其信号通路中p-Smad2、p-Smad3表达有关。     

抵当陷胸汤对糖尿病大鼠肝脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的 观察抵当陷胸汤通过调节TGF-β1/Smad3信号通路干预糖尿病大鼠肝纤维化病变的部分机制。方法 根据数字随机表法将34只SD大鼠分为空白组（10只）、模型组（8只）、抵当陷胸汤组（8只）和ALT-711组（8只）,按55 mg/kg剂量腹腔单次注射链脲佐菌素溶液制备糖尿病模型,予以相应的药物每天按相应剂量经胃灌药,于第8周末,麻醉后取材。采用Western blot法和实时荧光定量PCR法分别检测大鼠肝脏转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）及其信号蛋白Smad3蛋白及其mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠肝组织TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA表达水平均明显上调（P<0.05）,p-Smad3蛋白表达水平明显上调（P<0.05）;与模型组比较,抵当陷胸汤组和ALT-711组大鼠肝脏组织TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA表达水平均明显下调（P<0.05）,p-Smad3蛋白表达水平明显下调（P<0.05）;抵当陷胸汤组和ALT-711组大鼠肝脏组织TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白及TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 抵当陷胸汤通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路激活干预糖尿病肝纤维化病变。     

萝卜硫素通过TGF-β/Smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响

【摘要】 目的 探讨萝卜硫素通过转化生长因子（TGF-β）/smad3信号通路对肾病综合征大鼠系膜细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用2μM TGF-β诱导大鼠肾小球系膜细胞（HBZY-1）增生,将细胞分为对照组、TGF-β刺激组、TGF β联合20 μM萝卜硫素组及TGF-β联合40 μM萝卜硫素组。5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,不同剂量萝卜硫素处理HBZY-1细胞及肾病综合征大鼠,将大鼠分为空白对照组、阿霉素刺激组、阿霉素联合30 mg/kg萝卜硫素组及阿霉素联合60 mg/kg萝卜硫素组,每组各8只;采用CCK8法检测HBZY-1细胞增殖,HE染色分析肾病综合征大鼠肾组织系膜基质沉积,Western Blotting方法检测粘连蛋白（FN）、Ⅳ胶原蛋白（Col4）、TGF-β及p Smad3蛋白表达水平。结果 TGF-β刺激组能明显诱导HBZY-1细胞增生及HBZY-1细胞FN和Col4蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;TGF-β联合20、40 μM萝卜硫组与TGF-β刺激组相比能明显抑制TGF-β诱导的HBZY-1细胞增殖和明显抑制TGF β诱导的FN和Col4蛋白表达（P＜0.05）。阿霉素诱导肾病综合症大鼠肾脏系膜基质沉积增多（P＜0.05）,而不同剂量萝卜硫素治疗后,能显著降低肾脏系膜基质沉积（P＜0.05）。阿霉素刺激组能明显诱导大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平升高和大鼠肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;与阿霉素刺激组相比,不同剂量萝卜硫素能明显降低大鼠肌酐、尿素氮及24小时蛋白尿量水平、降低肾脏组织FN、Col4、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平（P＜0.05）。结论 萝卜硫素可通过下调TGF-β/Smad3信号传导抑制基质合成相关蛋白表达,进而降低了肾病综合征大鼠肾小球系膜细胞增生。     

川芎嗪对大鼠腹膜纤维化模型腹膜形态及TGF-β1表达的影响

目的观察不同剂量川芎嗪对腹膜透析腹膜纤维化大鼠模型腹膜形态的影响。方法50只大鼠随机分为5组,每组10只,1）空白对照组（大鼠不做任何处理）;2）模型组（HGC大鼠给于每天腹腔注射4.25%的透析液25ml）;3）川芎嗪给药组（HGL）：高剂量组每只大鼠腹腔注射含60mg/L川芎嗪的腹透液25ml;中剂量组每只大鼠腹腔注射含40mg/L川芎嗪的腹透液25ml;低剂量组每只大鼠腹腔注射含20mg/L川芎嗪的腹透液25ml。上述动物连续给药35d,HE染色观察腹膜形态,免疫组化的方法检测腹膜TGF-β1的表达。结果模型组腹膜组织厚度明显增加,壁层腹膜有大量纤维组织积聚,间皮细胞脱落,纤维裸露,间质有炎性细胞浸润。不同剂量川芎嗪对上述病变均有一定的改善作用,其中以中剂量组的作用最明显。正常大鼠腹膜组织的TGF-β1表达极少。而透析5周后腹膜组织TGF-β1表达明显增加,不同剂量川芎嗪均可抑制TGF-β1的组织表达量,低、中剂量抑制作用明显。结论川芎嗪能可抑制长期腹膜透析所致的腹膜纤维化,改善腹膜结构,而抑制腹膜组织TGF-β1表达可能是其抑制腹膜纤维化的机制之一。