淋病的实验诊断与体会

目的：探讨和交流淋病实验诊断的实用方法和经验。方法：男性标本直接涂片革兰氏染色镜检。女性标本先用涂片染色镜检，发现阳性再用培养法确诊。结果：2772例做淋病奈瑟氏菌(以下简称淋球菌)检查，其中男性直接涂片828例，阳性620例，阳性率74．9％，女性1944例，直接涂片阳性315例，阳性率16．2％。结论：实践证明女性标本用直接涂片法阳性率低，特异性差。因此女性标本用直接涂片法不论查到在细胞内或细胞外的G^-双球菌，都必须通过细菌培养加以确诊．     

3种β-HCG检测方法的比较评价

目的:比较分析胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和微粒子酶免疫法(MEIA)检测β-HCG的结果.方法:在相同条件下使用胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和微粒子酶免疫法(MEIA)分别对100份待测血清标本进行β-HCG平行检测并比较3种方法的测定结果.结果:微粒子酶免疫法(MEIA)检出阳性65例,阴性35例.ELISA法检测出阳性61例,阴性39份,有4份阳性标本没有检出,胶体金免疫层析法(GICA)检测出阳性56份,阴性44份,有9份阳性标本没有检出.若以MEIA法结果作为真值,ELISA法的敏感度为94.2%,特异性为100%,准确率为96%;GICA法敏感度为87.8%,特异性为100%,准确率为91%.结论:胶体金免疫层析法敏感度和准确性最低,但具有操作简便、快速、无需任何仪器等优点,适合于标本量少的基层实验室筛查使用.ELISA法敏感度和准确性较高,既可目测结果又可上机判读,适合广大实验室应用.微粒子酶免疫法(MEIA法)敏感度和准确性最高,但需要特殊仪器设备.     

ELISA测定HBsAg血清样本经化学发光法定量检测与乳胶免疫层析法两对半检测结果分析

目的探讨ELISA测定HBs Ag临界附近样本及其乳胶免疫层析法两对半检测结果综合分析的意义。方法ELISA测定HBs Ag阴性的血清样本并进行复检,临界附近样本以化学发光法(CLIA)定量检测进行结果比对,并进行乳胶免疫层析法两对半检测。结果 ELISA测定HBs Ag临界附近样本存在一定程度的假阴(阳)性率。乳胶免疫层析法两对半检测在HBs Ag 0.073 5≤A1.000、0.073 5≤A0.105一侧以Anti-HBs阳性682/1 020(66.86%)和全阴性345/1 020(33.82%)为主;而在0.105≤A1.000一侧主要是Anti-HBe或/和Anti-HBc阳性329/333(包括36例HBe Ag阳性者)(99.80%)。结论 ELISA检测HBs Ag临界附近样本可以CLIA定量检测进行结果判断;结合乳胶免疫层析法两对半检测结果综合分析可使绝大部分临界附近样本免做复检。     

痰涂片显微镜检查与培养结果的相关性分析

目的分析痰涂片显微镜检查(镜检)与培养结果的相关性。方法痰标本在进行细菌培养之前行涂片革兰染色、镜检;对培养出来的细菌进行革兰染色、镜检,对二者镜下染色的性质和形态进行比对;二者一致者作为病原菌进行下一步的鉴定和药敏试验。结果 786份合格标本共检出病原菌540株,阳性率68.70%,其中革兰阳性球菌185株,革兰阴性杆菌316株,真菌39株。痰涂片镜检与培养鉴定结果的符合率为72.01%(566/786),其诊断敏感性为77.78%,特异性为59.35%,阳性预测值为80.77%,阴性预测值为54.89%。结论痰涂片镜检结果与培养结果具有较高的符合率,痰涂片镜检可以提高痰标本病原菌的检出率。     

磁珠法对淋球菌DNA的检测分析

目的了解磁珠法提取淋球菌DNA的效率和敏感性。方法对2012年1月-2013年1月本院皮肤性病科送检的338例标本同时进行淋球菌培养和磁珠法提取淋球菌DNA。结果淋球菌培养阳性标本101例,培养阴性标本237例。结果表明,在101例淋球菌培养阳性标本中,淋球菌DNA检测全为阳性;在237例培养阴性标本中,淋球菌DNA检测共有201例为阴性,其中有36例为淋球菌DNA阳性。结论虽然淋球菌培养是金标准,但由于培养时间长,且淋球菌非常脆弱,培养阳性率较低,所以容易漏诊。磁珠法提取淋球菌DNA的效率快、敏感性较好,还在于细菌死亡后或早期使用抗生素产生淋球菌培养假阴性结果时,淋球菌DNA检测仍然为阳性,对这一部分患者能够做到早期诊断和鉴别诊断,对预防和治疗性病有重要作用。     

新型淋球菌快速检测方法的临床应用评估

以尿液为标本对１６５ 例临床疑为淋球菌感染者采用新型快速方法进行了检测,同时取尿道或宫颈分泌物进行细菌培养作为对比。８０ 例男性标本中,快速法４８ 例阳性,其中有７ 例标本ＮＧ 培养为阴性。与培养为标准进行比较,快速法灵敏度９５ ．３ ％ 。特异性８１ ．２ ％ ;女性单纯尿液检测其灵敏度和特异性低于男性,但可通过改进取材方法提高检出率。实验表明快速法取材方便,检测时间仅需５ 分钟,适用于筛查ＮＧ 感染者。     

宏基因组学二代测序技术对尿路结石继发感染的诊断价值

目的探讨宏基因组学二代测序(mNGS)技术在尿路结石继发感染病原诊断中的价值。方法回顾性选取2021年9月至2022年5月浙江省桐庐县第一人民医院收治的110例尿路结石患者, 分别采用尿细菌培养和mNGS技术检测患者尿液样本。以尿细菌培养结果作为"金标准", 分析mNGS在尿路结石继发感染诊断中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa一致性。结果尿细菌培养检出阳性35例, 阴性75例;mNGS检出阳性39例, 阴性71例。以尿细菌培养作为"金标准", mNGS技术在尿路结石继发感染诊断中的特异度为89.3%, 灵敏度为88.6%, 阳性预测值为79.5%, 阴性预测值为94.4%, Kappa一致性系数为0.756。与尿细菌培养相比, mNGS技术对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌检出的Kappa一致性系数分别为0.703、0.735和0.769。结论 mNGS技术可提高尿路结石继发感染的病原菌检出率, 且与尿细菌培养检出结果的一致性较高。     

细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的作用及阳性率分析

目的：探究微生物检验期间分别应用细菌培养、涂片镜检后的临床作用，分析检出阳性率。方法：纳入2022年1月～2023年1月本院进行微生物检验的患者200例为样本提供者，分别于微生物检验期间应用细菌培养、涂片镜检，判断两种检查方法诊断结果，所用观察指标包含检验合格率、阳性检出率、合格标本镜检结果和细菌培养的符合情况。结果：细菌培养、涂片镜检应用后检验合格率高达93.00%。采取细菌培养、涂片镜检后，痰液样本、粪便样本阳性检出率对比差异显著，P<0.05，血液样本、中段尿液样本、胸腹水样本、穿刺液样本、脑脊液样本阳性检出率对比未见明显差异，P>0.05。A级、B级细菌检出率明显高于C级P<0.05。在合格标本中共检出致病菌，涂片镜检结果和细菌培养结果总符合率为96.24%。结论：细菌培养、涂片镜检在微生物检验期间各有优缺点，其中涂片镜检可以提前作出预测报告，作为疾病临床诊断的初步依据，指导临床合理用药，两种诊断措施相互补充，具有较高可靠性。     

宫颈涂片预测女性生殖道沙眼衣原体感染的价值

目的:了解女性宫颈涂片白细胞计数对女性生殖道衣原体的预测价值。方法:对200名妇女进行宫颈涂片白细胞计数PMN和沙眼衣原体、淋球菌的检测。结果:衣原体的感染率为18.5%,淋球菌感染率为8.0%,除外淋病,宫颈涂片白细胞计数诊断沙眼衣原体的敏感性83.8%,特异性97.2%,阳性预测值89.0%,阴性预测值96.0%。结论:在资源缺乏地区,宫颈涂片白细胞计数对预测沙眼衣原体感染有一定的价值。     

痰涂片显微镜检查与培养结果的相关性分析 FREE

目的分析痰涂片显微镜检查（镜检）与培养结果的相关性。方法痰标本在进行细菌培养之前行涂片革兰染色、镜检;对培养出来的细菌进行革兰染色、镜检,对二者镜下染色的性质和形态进行比对;二者一致者作为病原菌进行下一步的鉴定和药敏试验。结果786份合格标本共检出病原菌540株,阳性率68.70%,其中革兰阳性球菌185株,革兰阴性杆菌316株,真菌39株。痰涂片镜检与培养鉴定结果的符合率为72.01%（566/786）,其诊断敏感性为77.78%,特异性为59.35%,阳性预测值为80.77%,阴性预测值为54.89%。结论痰涂片镜检结果与培养结果具有较高的符合率,痰涂片镜检可以提高痰标本病原菌的检出率。     

PCR法检测华支睾吸虫感染的应用研究

目的 探索PCR法在基层医院检测华支睾吸虫感染的应用前景。方法 采集94例普通住院患者粪便和血清样本,分别采用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz） 、PCR法和ELISA法3种方法进行华支睾吸虫检测,以Kato-Katz法为评价标准,对PCR法和ELISA法的检测结果进行分析。结果 研究共纳入2018年9—10月住院患者粪便和血液样本均有的患者94例,其中男性53例,女性41例,分别占56.4%、43.6%;20岁以下3例,20~39岁26例,40~59岁33例,60岁及以上32例,分别占3.2%、27.7%、35.1%、34.0%。Kato-Katz法检出华支睾吸虫阳性数26份,阳性率为27.66%,PCR法检出阳性数23份,阳性率为24.47%,ELISA检出阳性数53份,阳性率为57.45%,3种方法阳性率差异有统计学意义（P<0.01）。PCR法灵敏度和特异度分别为53.85%和86.76%,阳性预测值和阴性预测值分别为60.87%和83.10%。ELISA法灵敏度和特异度分别为96.15%和57.35%,阳性预测值和阴性预测值分别为46.30%和97.50%。结论 在华支睾吸虫高流行区的基层医院开展PCR检测华支睾吸虫感染有应用价值。     

免疫层析法检测乙肝病毒表面抗原和表面抗体结果分析

目的:探讨免疫层析法与酶联免疫法(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗-HBs)符合率。方法:分别用免疫层析法和酶联免疫法检测待检儿童血清HBsAg和抗-HBs,将两法检测结果做以分析、比较。结果:400例标本中,胶体金法和ELISA法检测HBsAg结果差异无统计学意义,两法符合率为97.25%;乳胶层析法和ELISA法检测抗-HBs结果差异有统计学意义,两法符合率为79.25%。结论:免疫层析法简便快速,但存在一定假阳性或假阴性率,不能完全替代ELISA法进行乙肝病毒血清标志物的检测,适合在不具备ELISA法检测条件的基层医疗单位和标本初筛使用。     

环介导等温扩增法诊断初诊肺结核病研究

目的:初步评价环介导等温扩增法(Lamp)检测痰中结核分枝杆菌的准确性,探讨临床诊断初诊肺结核病人的应用价值。方法:选取249例初诊疑似肺结核病人的痰标本,同时进行Lamp、直接涂片抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测。结果:剔除培养失败和非结核杆菌的标本,共检测了739份痰标本,其中直接涂片抗酸染色法检出阳性标本70份,阳性率9.47%;培养检出阳性标本118份,阳性率15.97%;Lamp检出阳性标本99份,阳性率13.40%。以培养法为标准,涂片法的灵敏度57.63%,特异度99.68%,符合率为94.30%;Lamp的灵敏度77.12%,特异度98.71%,符合率为96.61%。结论:Lamp在检测初诊疑似肺结核病人中有较高的灵敏度和特异性,适用于基层结核病工作中初诊肺结核病人的诊断。     

基于核酸扩增的检测方法灵敏地检测临床B组链球菌及序列分型

目的 B组链球菌是引发孕妇和新生儿致病的常见原因。方法本文验证了qPCR的高灵敏性,并进一步检测841例临床阴道拭子样本,并与细菌培养法作比较,采用Sanger测序对阳性样本进行序列分型。结果 qPCR法能够检测低至10拷贝/反应的靶分子,临床样本检测时,qPCR法共检出182例阳性(阳性率为21.6%),其中有69例阳性为细菌培养法检测阴性样本,这显示qPCR法优于细菌培养法,且细菌培养法会造成假阴性风险。70例阳性样本分型测序结果显示,主要亚型有9例,ST687亚型11例(15.71%),ST19亚型5例(7.14%),ST485和ST197各4例(5.71%),ST17、ST862、ST316、ST456及ST43各3例(4.29%),测序显示在中国广州地区共检出34种亚型,其中ST687、ST19、ST485、ST197、ST17、ST862、ST316、ST456及ST43等共9个型别占55.71%,其余25种型别占比44.29%。结论由于不同亚型可能存在致病性的差异,因此,这种序列分型方式也可能为临床个体化诊治提供一定的证据。     

2011-2016年广东省某院门诊病例淋球菌检测结果分析

目的分析广东省人民医院2011-2016年门诊病例淋病奈瑟菌(淋球菌)的检出情况,为淋病的防控提供参考依据。方法对2011-2016年广东省人民医院门诊送检的生殖道分泌物标本进行淋球菌的直接涂片检查和分离培养鉴定。结果纳入分析的标本9 400份,共分离培养出297株淋球菌(3. 2%),2011-2016年的淋球菌分离培养阳性率分别为2. 4%(36/1 520)、3. 3%(44/1 315)、3. 1%(56/1 817)、2. 4%(43/1 800)、3. 3%(48/1 468)和4. 7%(70/1 480),近6年阳性分离情况有显著性变化(χ~2=18. 72,P=0. 002),2016年的阳性检出率最高。297份阳性标本中尿道拭子、阴道宫颈拭子、精液和前列腺液构成比分别为82. 8%(246份)、14. 1%(42份)、2. 4%(7份)和0. 7%(2份);<10岁和10～19岁年龄组的阳性率分别达到14. 3%和7. 4%。男性患者占85. 8%(255例)、女性患者占14. 1%(42例);阳性患者主要分布在20～49岁阶段,占86. 9%。结论 2011-2016年广东省人民医院门诊病例淋球菌总体检出率为3. 2%,<19岁人群门诊阳性检出率偏高,迫切需要加强对男性青壮年人群的性健康教育和监测。     

玻片酶联免疫吸附法鉴定淋球菌

将分离培养的淋球菌涂片，加淋球菌抗血清，直接在载玻片上进行间接酶联免疫吸附法检测。结果，仅淋球菌出现阳性反应，其他１２株对照菌均为阴性，反应特异性为１００％。６４株临床标本分离株经传统方法鉴定为淋球菌，经本法检测反应均为阳性，两种方法鉴定淋球菌的符合率为１００％。该法简便，经济，省时，适应淋球菌快速鉴定。     

西宁地区阴道分泌物支原体检测及耐药性分析

目的:探讨西宁地区女性阴道分泌物解脲支原体(Uu)、人型支原体(Mh)感染情况及对6种抗菌药物耐药性。方法:对我院门诊及住院患者961名女性阴道分泌物检查,根据临床初诊疑为支原体感染的标本进行了培养、鉴定及药敏观察。结果:在961例女性阴道分泌物标本中,共分离支原体330例,分泌物均淋球菌培养或涂片镜检为阴性,确诊为非淋菌性泌尿生殖系感染患者。培养出支原体阳性330例,其中Uu阳性204例(61.8%),Mh阳性27(8.2%),Uu+Mh阳性99例(33.0%),培养阳性率为34.3%。药敏结果显示强力霉素、交沙霉素的抑菌能力较强,其敏感率为60.0%以上。     

应用实时荧光聚合酶链反应检测婴幼儿腹泻标本中的腺病毒

目的 建立实时荧光聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测腺病毒,并分析浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况.方法 根据GenBank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物,建立Real-time PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA,并与免疫层析法比较;同时对Real-time PCR方法 检测阳性的标本进行PCR产物测序和病毒分离培养及酶切鉴定.结果 建立快速、特异检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的Real-time PCR技术.157份婴幼儿腹泻标本中免疫层析法检测阳性3份,阳性率为1.91%;Real-time PCR检测阳性5份,阳性琦率为3.18%(5/157);154份免疫层析法检测阴性标本中,有2份Real-time PCR法检测为阳性.5份Real-time PCR检测阳性标本经测序鉴定,Ad3型占1.91%(3/157),Ad7型占1.27%(2/157);经病毒分离培养检出阳性2例,酶切鉴定为Ad3型.结论 Real-rime PCR技术结合PCR产物直接测序分析具有敏感、特异等优点,适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型.2008年2-4月浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型.     

大便隐血阳性患者加用饱和盐水漂浮法降低钩虫病漏诊探讨

目的：提高钩虫病检出率,降低漏诊误诊。方法：对大便隐血阳性标本,采用直接涂片法和饱和盐水漂浮法找钩虫卵。结果：2010-2013年从被检的大量的大便标本,大量隐血阳性的病例中,采用直接涂片法加上饱和盐水漂浮法从其中找到钩虫卵120例,直接涂片法阳性仅20例,再用饱和盐水漂浮法检出阳性100例（直接涂片法阳性和阴性的标本再用饱和盐水漂浮法做比较结果阳性率大有提高）。结论：对于大便隐血阳性标本采用直接涂片法加上饱和盐水漂浮法能有效提高钩虫卵检出率,降低漏诊误诊,具有临床实际意义。     

化学发光法检测梅毒特异性抗体进行梅毒筛查的可行性评价

目的探讨化学发光法(CLIA)检测梅毒特异性抗体对梅毒进行筛查的可行性。方法收集2012年5月-2012年9月临床需做梅毒筛查试验的标本2 633份,对试验标本分别作CLIA和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),其中任一方法阳性标本再使用苍白密螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确认。结果 CLIA检测阳性120例,阳性率为4.56%,TRUST检测阳性87例,阳性率为3.30%,两种方法检出阳性率差异有统计学意义(P<0.01),以TPPA为参比方法,CLIA的敏感性为99.17%,特异性为99.96%,阳性预测值为99.17%,阴性预测值为99.96%;TRUST敏感性为67.50%,特异性为99.76%,阳性预测值为94.18%,阴性预测值为98.47%。结论 TRUST筛查梅毒存在一定的假阳性和假阴性,而使用CLIA检测梅毒特异性抗体进行梅毒筛查的方法是可行的,特异性、敏感性优于目前使用的TRUST。