用液相层析法测定血清皮质醇和11—脱氧皮质醇

目前用于测定皮质醇的方法不是完全特异的。荧光测定要受皮质酮、脱氧皮质酮和药物的影响;放射免疫测定法的特异性由于抗皮质醇抗体同其他类固醇(诸如皮质素,11-脱氧皮质醇,17-羟孕酮,皮质酮和脱氧皮质酮)有不同程度的交叉反应而受到限制;在竞争性蛋白结合测定法中亦可观察到相似的交叉反应。正常情况下,这些类固醇在血清中的浓度与皮质醇相比是很小的,使得这些测定方法还令人满意。但在新生儿、孕妇及先天性肾上腺皮质增生患者和服用甲吡酮后的血浆中,常存有一定量的与皮质醇起交叉反应的类固醇,正是在这种情况     

超高效液相色谱串联质谱同时检测人血清5种甾体激素方法学及生物参考区间的建立

目的 建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定人血清中睾酮(T)、双氢睾酮(DHT)、雄烯二酮(AD)、脱氢表雄酮(DHEA)和17α羟孕酮(17OHP)的方法,并确定表观健康人群血清中5种甾体激素的参考区间。方法 血清样品沉淀后经SOLAμHRP固相萃取柱纯化,采用Poroshell 120 ECC18色谱柱分离,用含0.05%甲酸的30%乙腈溶液和90%乙腈溶液梯度洗脱。采用电喷雾正离子多反应监测模式检测,采用同位素内标法定量检测甾体激素的浓度。对建立的UPLC-MS/MS方法进行全面的性能验证,并建立适用于上海地区人群人血清5种甾体激素的参考区间。结果 UPLC-MS/MS检测人血清中5种甾体激素的最低定量限为0.01～0.10 ng/mL,标准曲线范围覆盖1 000倍,r²值均>0.999 5,线性良好,样本经稀释后可报告范围覆盖5 000倍。5种分析物批内与批间的准确度为95.0%～105.6%,精密度均<8%。8种结构类似物对目标分析物均无干扰,高三酰甘油不影响检测结果,溶血可导致DHEA检测值降低。各分析物的提取回收率为...     

液相色谱串联质谱法分析血清中多囊卵巢综合征相关 甾体激素的性能评价

摘要：目的 建立液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯 的方法，并对其进行性能分析评价。方法 采用液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱 氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的含量。根据《中国药典》（２０１５ 年版）通则中 ９０１２“生物样品定量分析方法验证指导原则”和 《液相色谱串联质谱临床检测方法的开发与验证》对所建方法的线性范围、检出限、精密度、样本稳定性、回收率和携带污染率 等基本性能进行确认。结果 液相色谱串联质谱法定量检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表 雄酮硫酸酯的线性范围分别为 ０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、３２～ ８ ０００ ｐｇ ／ ｍＬ、０．１６～ ４０ ｎｇ ／ ｍＬ、２～ ５００ μｇ ／ ｄＬ，检出限分别 为０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００３ ２ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００８ ｎｇ ／ ｍＬ、１ ｎｇ ／ ｍＬ，定量下限分别为 ０．０３２ ｎｇ ／ ｍＬ、０．０１６ ｎｇ ／ ｍＬ、０．００６ ４ ｎｇ ／ ｍＬ、 ０．０１６ ｎｇ ／ ｍＬ、４ ｎｇ ／ ｍＬ，批内变异系数（ＣＶ）和批间 ＣＶ 均小于 １５％，回收率分别为 ８９． ７９％ ～ １０１． ２３％、８７． ２３％ ～ ９８． ３３％、 ９１．３９％ ～ １０１．１０％、８６．９９％ ～ ９４．３０％、８６．３５％ ～ １０８．３５％。同时，血清中各激素在－２０ ℃ 保存条件下 ７ ｄ 内是稳定的。结论 建 立的液相色谱串联质谱法基本性能符合评价标准，能够灵敏且准确地检测血清中 １７－α－羟孕酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表 雄酮和脱氢表雄酮硫酸酯的含量。     

环境对雄性快速老化小鼠P8血促肾上腺皮质激素、皮质醇与睾酮浓度的影响

目的 不同环境对雄性快速老化小鼠P8（SAMP8）血促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇和睾酮水平的影响。 方法 将雄性SAMP8小鼠30只随机分为丰富环境组、贫瘠环境组和标准环境组，每组10只，均在对应环境中生活8周。8周后采用放射免疫方法测定血ACTH、皮质醇和睾酮水平。 结果 饲养8周后，贫瘠组、丰富组和标准组血ACTH浓度分别为（60.54±16.22）pg/ml、（48.98±15.30）pg/ml和（28.49±8.24）pg/ml；血皮质醇浓度分别为（5.37±0.81）ng/ml、（4.09±0.92）ng/ml、（3.19±0.88）ng/ml；血睾酮浓度分别为（2.35±0.90）ng/ml、（7.07±1.57）ng/ml、（3.16±1.10）ng/ml。标准环境组小鼠的血ACTH水平和血皮质醇水平与贫瘠环境组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，标准环境组的血ACTH水平和血睾酮水平与丰富环境组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，丰富环境组小鼠的血皮质醇水平和血睾酮水平与贫瘠环境组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 贫瘠环境可促进SAMP8小鼠血ACTH分泌，皮质醇增多，并激活下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴。丰富环境对SAMP8小鼠血ACTH的产生和血睾酮浓度的升高有促进作用，但对皮质醇的促进作用不明显。     

力竭性运动对官兵甲状旁腺素、睾酮、皮质醇和胃泌素水平的影响

目的探讨机体在力竭性运动前后血清激素水平的变化。方法采用放射免疫分析法分别对100例官兵在军事对抗演习前后进行血清激素水平测定。结果演习前血清皮质醇、睾酮含量分别为(216.35±53.54)ng/mL、(462.29±189.64)ng/dL,演习结束后含量分别为(166.95±68.40)ng/mL、(419.34±157.11)ng/dL,演习结束后皮质醇、睾酮水平明显低于演习前(P<0.05);演习前血清甲状旁腺素含量为(4.62±4.36)ng/L,演习结束后含量为(18.37±8.00)ng/L,演习结束后甲状旁腺素水平明显高于演习前(P<0.05);演习前血清胃泌素含量为(25.96±10.37)pg/mL,演习结束后含量为(25.97±10.78)pg/mL,演习前后胃泌素差异无统计学意义(P>0.05)。结论力竭性运动对血清皮质醇、睾酮和甲状旁腺素影响显著,引起皮质醇、睾酮降低,同时甲状旁腺素增高;而对血清胃泌素无明显影响。力竭性运动对机体脏器损伤有一定影响。     

全血免疫抑制剂ID-LC-MS/MS候选参考方法的建立和性能评价

目的 建立同位素稀释液相色谱串联质谱（ID-LC-MS/MS）检测全血免疫抑制剂（他克莫司、西罗莫司、依维莫司和环孢素A）的候选参考方法,并评价其性能。方法 采用蛋白沉淀法（PPT）对全血样本进行前处理,采用ID-LC-MS/MS定量检测他克莫司、西罗莫司、依维莫司和环孢素A。对建立的候选参考方法的分析性能（线性、定量限、基质效应、精密度和正确度等）进行评估。结果 ID-LC-MS/MS检测他克莫司、西罗莫司、依维莫司和环孢素A的总检测时间为4.5 min;环孢素A的线性范围为10～500 ng/mL,定量限为10 ng/mL;他克莫司、西罗莫司和依维莫司的线性范围均为1～50 ng/mL,定量限均为1 ng/mL。4种免疫抑制剂的相对基质效应范围均≤8.64%,批内、批间变异系数（CV）均≤5%,加标回收率为98.84%～100.99%。他克莫司的扩展测量不确定度≤7.91%(k=2)、西罗莫司≤7.97%(k=2),依维莫司≤7.14%(k=2),环孢素A≤7.91%(k=2)。结论 成功建立了ID-LC-MS/MS检测全血他克莫司、西罗莫司、依维莫司和环孢素A的候选参考方法,可用...     

成都地区健康成人血清游离睾酮和生物可利用睾酮水平调查

目的调查成都地区健康成人血清总睾酮、游离睾酮和生物可利用睾酮的水平,为建立本地区血清睾酮的参考范围提供依据。方法共纳入499例体检健康人群,使用电化学发光免疫分析技术,检测其血清总睾酮和性激素结合蛋白(SHBG)水平,计算血清游离睾酮、生物可利用睾酮水平,分析其与年龄的相关性,计算其95%参考范围。结果男性总睾酮、游离睾酮、生物可利用睾酮与年龄呈均负相关(P<0.05),男性总睾酮随年龄增长下降趋势较缓(r=-0.171),而游离睾酮、生物可利用睾酮随年龄增长呈现明显下降趋势(r=-0.510、-0.571);女性总睾酮、游离睾酮、生物可利用睾酮与年龄均呈负相关(P<0.05),且三者下降趋势一致;男性总睾酮、游离睾酮、生物可利用睾酮的95%参考范围分别为:2.55~9.00ng/mL、41.27~133.42pg/mL、1.04~3.59ng/mL;女性总睾酮、游离睾酮、生物可利用睾酮的95%参考范围分别为:25.00~496.25pg/mL、0.22~6.44pg/mL、5.68~156.80pg/mL。结论男性和女性游离睾酮和生物可利用睾酮均与年龄呈负相关性,临床使用中应充分考虑年龄因素,男性游离睾酮和生物可利用睾酮较总睾酮更敏感。     

同位素稀释液相色谱-串联质谱法检测血清睾酮候选参考方法的建立及应用

目的建立基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术的血清睾酮候选参考方法,并采用该方法对临床常规检测方法(微粒子化学发光法)的正确性进行评价。方法采用睾酮-2,3,4-~(13)C_3作为内标,以等体积比的正己烷-乙酸乙酯溶液对样本进行液液萃取,上清液采用氮气吹干后用流动相复溶,进行LC-MS/MS分析。采用五点包括法计算血清睾酮浓度。参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和EP15-A3文件对建立的同位素稀释液相色谱-串联质谱(ID-LC-MS/MS)方法进行性能评价(方法残留、特异性、线性范围、精密度、准确度),参考CLSI EP9-A3文件对微粒子化学发光法的正确性进行评价。结果建立的ID-LC-MS/MS方法检测血清睾酮的分析时间为5min,特异性好,无残留,线性范围为0.034～22.00ng/mL,批内不精密度≤2.3%,批间不精密度≤2.2%,测定有证参考物质SRM971(Level male)的相对偏移为0.2%,测定2017 RELA-A、2017 RELA-B样本的相对偏移分别为-2.9%、-3.3%,测定2017 RELA-A样本的不确定度为0.11 ng/mL。微粒子化学发光法与ID-LC-MS/MS的相关性较好(r=0.963),但偏差较大[总平均偏差为-24.4%,低浓度样本(≤1 ng/mL)平均偏差为-62.4%,高浓度样本(1 ng/mL)平均偏差为6.3%]。结论成功建立了检测血清睾酮的ID-LC-MS/MS候选参考方法。该方法的精密度、准确度均较好,且操作简单,分析时间短。     

α-MSH和合成肽KPV对病理性应激大鼠血浆皮质酮的调节作用

目的观察不同程度烫伤大鼠血浆中皮质酮的水平及α-MSH和合成肽KPV对它的调节作用.方法采用放射免疫法检测正常对照组、轻度烫伤组和重度烫伤组大鼠血浆皮质酮的浓度;采用体内放射TNF-α、IL-1β中和抗体和α-促黑色素细胞刺激激素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)和合成肽KPV(Ac-D-Lys-L-Pro-D-Val)等措施调节其改变.结果与正常对照组的血浆皮质酮水平(154.32±59.12 ng/mL)相比,烫伤后12 h轻烫组的血浆皮质酮浓度(1 344±376.47 ng/mL)显著升高(P＜0.01);与轻烫组相比,重烫组大鼠血浆皮质酮水平(2 680±443.23 ng/mL)升高更加明显(P＜0.01).体内注射TNFα、IL-1β中和抗体和α-MSH及KPV均能明显降低重烫组动物血浆皮质酮水平.结论重度烫伤可使大鼠血浆出现高皮质酮血症,体内注射TNFα、IL-1β中和抗体及α-MSH和KPV均可在一定程度上减轻重度烫伤所致的高皮质酮血症.     

相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法的建立与评价

目的建立相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法并进行方法学评价。方法优化最佳相思子毒素多抗包被浓度后建立了相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其检测灵敏度、线性范围、特异性、重复性、回收率等。结果双抗夹心ELISA方法检测相思子毒素的最小检出限为1ng/mL,标准曲线在10～100ng/mL范围内线性良好。血清中加入已知量的标准毒素蛋白,测得平均回收率为89%。结论本方法检测相思子毒素的可测范围广、特异性强、灵敏度高、变异系数较小,表明其灵敏、特异、可靠。     

普罗布考片单次口服给药的人体药物代谢动力学研究

目的采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)研究普罗布考片的人体药物代谢动力学变化规律。方法 2010年10月-11月,24例健康男性受试者单次口服普罗布考片0.5 g,采用HPLC-MS/MS法测定给药后不同时间点血浆中普罗布考的经时血药浓度,采用DAS 2.0软件进行药动学参数计算。结果受试者单次口服普罗布考片,达峰时间为(11.50±6.66)h,峰浓度为(2 894.72±1 320.53)ng/mL,药-时曲线下面积(AUC)0-t为(238 876.96±131 873.67)ng/mL.h,AUC0-∞为(259 989.08±146 112.88)ng/mL.h,半衰期为(278.52±164.72)h。结论普罗布考片体内过程符合二室模型,单次口服具有较好的安全性。     

上海地区儿童快速免疫层析法cTnⅠ参考区间的建立

目的采用快速免疫层析法检测上海地区儿童末梢血心肌肌钙蛋白(cTnⅠ)水平,初步建立儿童末梢血cTnⅠ的参考区间,为临床诊断儿童心肌损伤提供实验室依据。方法选取7个月～12岁儿童240名,采用快速免疫层析法检测其末梢血cTnⅠ。先进行方法学评估(准确性、精密度、最低检测限、线性范围验证、方法比对),然后采用百分位数法确定cTnⅠ的参考区间。结果快速免疫层析法检测高、低值质控品的结果分别为4.73和0.49 ng/mL,均在质控品标示的预期范围内;低值质控品日间和日内精密度[变异系数(CV)]分别为5.97%和5.36%,高值质控品日间和日内精密度(CV)分别为6.35%和7.14%,均符合要求(CV10%);最低检测限为0.02 ng/mL;线性范围为0.028～26.400 ng/mL;与化学发光法的相关性良好(r=0.988),检测cTnⅠ的第99百位数值为0.1 ng/mL,第99百位数值的不精密度为18.5%。采用百分位数法计算99%参考区间上限值为0.5 ng/mL,同时结合试剂说明书中标示的参考区间(0.3 ng/mL),确定基于快速免疫层析技术的儿童末梢血cTnⅠ参考区间:0.3 ng/mL为阴性、0.5 ng/mL为阳性。cTnⅠ为0.3～0.5 ng/mL时需进一步检查,以判断是否有心肌损伤。结论初步建立了基于快速免疫层析法的上海地区儿童末梢血cTnⅠ的参考区间。     

大连市儿童血清25-羟维生素D水平分析

目的：通过对该地区儿童血清25-羟维生素 D 水平检测,为佝偻病防治提供依据。方法选取2012年3月至2013年3月儿保科门诊就诊儿童共445例。取清晨空腹血,采用串联质谱法检测其血清25-羟维生素 D水平。结果大连市儿童各年龄组血清25-羟维生素 D 水平均呈偏态分布,以中位数表示,分别为0～1岁组34．4 ng/mL（27．9～42．9 ng/mL）;1～3岁组32．5 ng/mL（25．6～38．8 ng/mL）;3～6岁组24．9 ng/mL（16．3～31．2）ng/mL;＞6岁组19．7 ng/mL（13．2～29．1）ng/mL;经秩和检验,不同年龄组维生素水平差异有统计学意义（P ＜0．01）。各年龄组除0～1岁组男性高于女性（P ＜0．05）外,其他年龄组男女性别无统计学意义（P ＞0．05）。445例儿童中,维生素 D 严重缺乏（＜5 ng/mL）占0．23％（1/445）;缺乏（5．1～15 ng/mL）占8．76％（39/445）;不足或以下（15．1～20 ng/mL）占6．97％（31/445）;充足（20．1～100 ng/mL）占84．04％（374/445）;过量（＞100 ng/mL）为0。维生素 D 不足（＜20 ng/mL）的儿童占15．95％（71/445）,其中0～1岁组为5．79％（8/138）;1～3岁组为5．20％（9/173）;3～6岁组为32．05％（25/78）;＞6岁组为51．78％（29/56）,以3岁以上儿童为主,各组间存在显著性差异（P＜0．01）。不同季节血清维生素 D 值差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论大连市儿童维生素 D 营养状况良好,血清25-羟维生素 D 水平随着年龄波动,3岁以上儿童需重视维生素 D 的补充,特别是冬季春季节。     

LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D分析性能评估

目的 对LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D的检测性能进行验证和评估,以确定是否满足临床检测要求.方法 依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件评价精密度,依据EP17-A文件验证分析灵敏度和功能灵敏度,依据EP6-A文件评估线性范围和临床可报告范围,依据C28-A2文件验证参考区间.结果 精密度实验结果表明批内精密度为5.23%,总精密度为6.57%,在厂家提供的数据(批内精密度5.50%、总精密度12.90%)范围内,可以接受.灵敏度实验证实化学发光法测定25-羟基维生素D的分析灵敏度为2.5 ng/mL,功能灵敏度为3.0 ng/mL,与厂家提供的数据(仅提供功能灵敏度4.0 ng/mL)比较,差异无统计学意义,可以满足临床需要.线性实验结果表明线性范围为6～131 ng/mL,临床可报告范围为3～262 ng/mL,涵盖了健康者和绝大多数患者,可以满足临床需要.结论 LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D在精密度、分析灵敏度、功能灵敏度、线性范围、临床可报告范围等性能参数上均符合要求,可以应用于临床检测.     

液相色谱-串联质谱法检测血清皮质醇方法的建立及性能评价

目的建立同位素稀释液相色谱-串联质谱法(ID-LC-MS/MS)检测血清皮质醇的方法并对其进行性能评价。方法采用ABSCIEX TRIPLE QUAD 5500液相色谱-串联质谱联用系统定量检测皮质醇,参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)相关文件对建立的方法进行线性、精密度、提取回收率和准确性等基本性能验证。结果内标平衡时间为室温下1 h。ID-LC-MS/MS检测皮质醇的线性回归方程为Y=0.018 7X+0.043 4,r=0.999 8;线性范围为25~500 ng/mL。检出限为0.05 ng/mL。批内、批间变异系数(CV)分别为4%、6%。提取回收率为84.5%~90.4%。国际临床化学和检验医学联合会参考实验室外部质量评价计划(RELA)-A和RELA-B样本测定结果的偏移分别为3.19%和2.84%。结论建立的ID-LC-MS/MS方法的精密度、准确度、重现性均较好,结果准确,可用于临床实验室检测血清皮质醇。     

甲胎蛋白和游离β-绒毛膜促性腺激素双标记时间分辨荧光免疫滤纸干血片测定试剂盒的性能评价

目的 对研制的甲胎蛋白（AFP）和游离β人绒毛膜促性腺激素（fβ-hCG）双标记时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）滤纸干血片测定试剂盒进行性能评价.方法 应用TRFIA法检测滤纸干血片中AFP和fβ-hCG的含量,并对干血片检测方法的精密度、分析灵敏度、特异性、Hook 效应等进行评价,与同类试剂盒进行方法学比对试验.结果 待评价试剂盒AFP和fβ-hCG的剂量-反应曲线线性相关系数（r）可达0.99以上;批内、批间CV（%）均小于10.0%;AFP和fβ-hCG的灵敏度均不高于1.5 U/mL和2.0 ng/mL;与同类试剂比对,AFP和fβ-hCG结果的线性r均可达0.99以上;临床研究评价一致程度百分比可达100%.结论 待评价试剂盒具有灵敏度高,精密度好,特异性强,样本需求量少的优点;与同类产品检测结果相关性好,能满足临床需要.     

同时测定血浆血管紧张素Ⅰ、Ⅱ和醛固酮的液相色谱 串联质谱法的建立与评价

目的 建立同时测定血浆中血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮(Aldo)的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法。方法 将200μL血浆和温育液在37℃温育3 h后，加入同位素内标，用固相萃取法提取各激素。通过LC-MS/MS分析AngⅠ、AngⅡ和Aldo,最终用标准曲线定量。结果 AngⅠ、AngⅡ和Aldo的线性范围分别为0.2～50.0、0.002～0.500、0.02～5.00 ng/mL,定量限(LOQ)为0.2、0.002、0.02 ng/mL。3种分析物的回收率在91%～103%之间。方法灵敏度高、重现性好，变异系数(CV)分别为1.4%～4.6%(AngⅠ)、2.1%～5.1%(AngⅡ)、2.4%～5.2%(Aldo)。健康人血浆中AngⅠ、AngⅡ、Aldo的浓度范围分别为1.4～11.8、0.003～0.016、0.02～0.20 ng/mL。方法无明显基质效应和携带污染。结论 建立了一种可同时准确、快速测定血浆AngⅠ、AngⅡ和Aldo的LC-MS/MS方法。     

优秀田径运动员大运动量训练后血液生化指标的变化

目的:观察优秀田径运动员大强度的运动训练前后血清激素、血清酶和全血乳酸、血红蛋白等生化指标变化。方法:实验于2005-04/2005-05在广西师范大学体育学院田径场和实验室完成,选择16名广西师范大学体育学院的中长跑项目男性运动员,平均(20±1)岁,均无器质性病变和遗传病史,且对检测项目知情同意。①采用递增负荷式中长距离的跑项目进行训练,共4周,训练课间的强度以瑞典生理学家Rorg研制的主观心理感觉的等级表来控制,并且在最后1次训练课上采用最大强度的力竭性运动训练。分3次抽取受试对象静脉血,进行实验前受试对象安静时第1次取样,第2次取样在大强度训练运动后即刻进行取样测定,第3次取样安排在完成上述运动训练次日7∶00～8∶00(运动恢复后)进行。②采用放射免疫分析法测定血清睾酮与皮质醇水平,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供;采用岛津公司产全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶、血尿素、乳酸脱氢酶等血清酶的活性;采用用美国产YSI-23L全自动乳酸分析仪测定全血乳酸水平,采用全自动血球计数仪进行测定血红蛋白水平。结果:纳入受试对象16名均进入结果分析。①血清睾酮、皮质醇的变化:运动后即刻血清睾酮和皮质醇值分别为(4.56±1.84),(0.20±0.03)μg/L,低于安静时[(4.87±0.20),(0.14±0.03)μg/L,P<0.05],血清睾酮与皮质醇的比值低于安静时及运动恢复后[0.47±0.15,0.65±0.17,0.70±0.21,P<0.01]。②血清肌酸激酶、血尿素、乳酸脱氢酶变化:运动恢复后的血清肌酸激酶活性高于安静时及运动后即刻[(6.86±2.21),(5.79±2.10),(5.20±1.77)μkat/L,P<0.01],乳酸脱氢酶活性高于安静时[(5.18±0.97),(4.28±1.15)μkat/L,P<0.05]。血尿素水平高于安静时及运动后即刻[(178.2±38.7),(151.9±25.2),(100.7±13.9)mg/L,P<0.01]。③全血乳酸和血红蛋白的变化:运动后即刻及运动恢复后血清血红蛋白含量低于安静时[(143.1±7.8),(149.5±13.4),(156.6±11.7)g/L,P<0.01],运动后即刻全血乳酸水平高于安静时及运动恢复后[(9.56±2.05),(3.95±0.93),(2.87±0.71)mmol/L,P<0.01]。结论:大运动量的训练后即刻测定睾酮/皮质醇、乳酸脱氢酶、全血乳酸三项指标、训练恢复期测定肌酸激酶、血尿素两项指标能更好的反映运动强度。     

LC-MS/MS法同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度

目的建立可同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的液质联用-质谱串联法(LC-MS/MS)。方法以地西泮为内标,血浆样品经乙酸乙酯萃取后经超高效液相色谱(Acquity UPLC)BEH C18色谱柱(2.1×100 mm,1.7μm)分离,欧前胡素与异欧前胡素在质谱条件为正电喷雾电离(ESI~+)(m/z:271.5204.2),锥孔电压为20 V,碰撞能量为33 V,考察特异性、线性范围、定量下限、基质效应以及方法学回收率、精密度和稳定性。结果欧前胡素与异欧前胡素保留时间分别约1.5 min及2.4 min,欧前胡素浓度在0.1～20 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 2),定量下限0.1 ng/mL(信噪比S/N10)。异欧前胡素浓度在0.05～10 ng/mL范围内线性良好(r~2=0.998 9),定量下限0.05 ng/mL(S/N10),基质效应为94.89%～110.70%,方法学回收率为94.3%～104.3%。欧前胡素与异欧前胡素的重复性以CV表示,CV分别4.91%、5.26%,期间CV分别16.39%、14.87%。冻融条件下二者CV均不大于7.21%,室温下均不大于10.44%。结论建立了同时测定欧前胡素与异欧前胡素血药浓度的LC-MS/MS法,该法灵敏度高、特异性好、稳定性好。     

胶体金法检测全血铁蛋白的性能评价及其在儿童缺铁性贫血中的临床应用

目的评价国产胶体金法检测全血铁蛋白的分析性能,探讨其在儿童缺铁性贫血中的临床应用价值。方法通过与免疫化学发光方法比较,根据EP文件从精密度、线性范围及抗干扰能力、可比性等方面评价胶体金法测定全血铁蛋白的分析性能;随机抽取重庆医科大学附属儿童医院50例缺铁性贫血患儿及重庆市妇幼保健院健康体检儿童50例,分别测定两组全血铁蛋白,分析其诊断效率。结果胶体金法测定全血铁蛋白批间精密度分别为7.2%和9.6%,线性为0~100ng/mL,溶血、黄疸、脂血无干扰,与雅培i2000SR血清铁蛋白检测结果比对差异无统计学意义(P0.05);与对照组相比,缺铁性贫血组全血铁蛋白明显降低。以20ng/mL作为诊断临界点,其灵敏度为94%,特异度为100%,诊断效率为97%。结论胶体金法分析性能良好,作为即时检测项目能满足临床,具有较高诊断效率,对儿童是否缺铁可作提示性诊断。