20株中国医学细菌保藏管理中心标准肺炎克雷伯菌分子生物学特征分析

目的对中国医学细菌保藏管理中心收集保藏的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)进行分子生物学特征分析。方法对20株保藏KP菌株采用16S rRNA扩增及测序和质谱技术进行菌种鉴定验证;拉丝试验确定黏液表型;PCR筛查6种常见高毒力荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54和K57);采用多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型。结果 20株菌种均扩增出预期大小的16S rRNA基因片段,与KP模式菌株参考序列的相似性均99%;质谱技术检测均为KP,其中有4株鉴定到亚种;拉丝试验阳性率30%(6/20);共检出K2型3株(15%)、K5型4株(20%)、K54型1株(5%)、K57型4株(20%)和未分型8株;20株菌种分为10个ST型。结论该研究完善了KP菌株的分子生物学方面的质控指标。     

肝脓肿相关肺炎克雷伯菌毒力基因检测及同源性分析

目的探讨肝脓肿相关肺炎克雷伯菌高毒力荚膜血清型及主要毒力基因分布情况,并分析菌株的同源性。方法收集无锡市第二人民医院2016年1月至2017年8月肝脓肿相关肺炎克雷伯菌分离株12株;所有菌株进行黏液丝试验,PCR方法检测高毒力相关荚膜血清型及主要毒力基因;采用多位点序列分型(MLST)技术和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 12株肝脓肿相关肺炎克雷伯菌黏液丝试验阳性率为75%;检出K1(6株)、K54(1株)和K57(5株)3种高毒力荚膜血清型。毒力基因wca G、rmp A、ure A、fim H、mrk D、uge、Aer和iro NB检出率均为100%;iuc B检出率为83.3%;未检出cf29a基因;mag A、all S和kfu BC基因仅在K1血清型菌株中检出。MLST发现ST23(4株)和ST25(3株)为主要检出型,其次为ST412(2株)以及ST1660、ST1049和ST11各1株;PFGE结果显示12株肺炎克雷伯菌分为8个型,其中3株K1型菌株属于同一克隆型。结论分离的肝脓肿相关肺炎克雷伯菌均为高毒力菌株,ST23和ST25为主要检出ST型别,ST1049型为首次报道。PFGE结果呈现出遗传多样性,K1型肺炎克雷伯菌存在一定的流行。     

肺炎克雷伯菌荚膜血清型、毒力基因和耐药性研究

目的 研究肺炎克雷伯菌(KPN)主要荚膜血清型、毒力基因的分布特点和细菌耐药特征,并初步探讨三者之间的相互关系.方法 收集2019年1-9月该院临床分离的K PN,由DL-96Ⅱ细菌鉴定仪进行细菌鉴定和体外药敏试验;黏液丝试验检测黏液表型;聚合酶链式反应(PCR)法扩增6种主要荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K5...     

血流感染肺炎克雷伯菌毒力基因分布和临床分子特征

目的 分析血流感染肺炎克雷伯菌的毒力基因分布和临床分子特征。方法 收集2016年1月—2017年3月南昌大学第二附属医院158株肺炎克雷伯菌非重复临床分离株。采用自动化鉴定药敏仪进行菌种鉴定和体外药物敏感性试验。采用拉丝试验筛选高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)。采用聚合酶链反应(PCR)检测肺炎克雷伯菌毒力基因、耐药基因和5种常见荚膜血清型。对菌株进行多位点序列分型(MLST)和同源性分析。收集感染患者相关临床资料,比较碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)和常用抗菌药物敏感肺炎克雷伯菌(SKP)感染患者的临床特征。结果 158株肺炎克雷伯菌中,CRKP 22株(13.9%),SKP 29株(18.4%)。CRKP菌株均为多重耐药菌,全部表达碳青霉烯类耐药基因bla_KPC-2,其中1株同时携带金属酶碳青霉烯类耐药基因bla_IMP-4。拉丝试验结果显示,51株血流感染肺炎克雷伯菌中,有13株为hvKP,其中CRKP2株、SKP11株。SKP菌株uge、iutA、mrkD、alls、aerobactin基因检出率高于CRKP菌株,ybtA基因检出率...     

高毒力肺炎克雷伯菌的血清荚膜分型菌株特点及耐药性分析

目的 探讨肺炎克雷伯菌中高毒力型菌株的血清荚膜分型构成和特点,并对其耐药性进行分析,为临床抗菌治疗提供参考依据.方法 收集2016年1月至2019年1月该院各种临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌592株,采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪对高毒力菌株进行鉴定及药敏试验,分析其耐药情况,采用多重PCR检测高毒...     

高毒力肺炎克雷伯菌的研究进展

高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)致病性强,导致的感染多以严重的原发性肝脓肿为首发症状,并可合并眼内炎、败血症等其他部位的迁徙性感染.虽然传统观点认为hvKP对抗菌药物敏感性高.但近年来陆续发现了对多种药物耐药的hvKP菌株,高毒力与高耐药的重叠给临床治疗带来了极大挑战.本文对hvKP的流行现状、毒力影响因素及耐药性方面的...     

致多部位感染肺炎克雷伯菌的毒力分析

目的分析导致多部位感染的肺炎克雷伯菌的荚膜血清型和毒力基因分布,为临床抗感染治疗和院感防控提供帮助。方法收集宣武医院2017年1月至2018年12月临床血培养分离的肺炎克雷伯菌同时合并其他部位分离相同菌株患者菌株,回顾性分析其临床资料;黏液丝试验检测毒力表型,PCR扩增荚膜血清型和毒力相关基因,质谱技术分析菌株同源性。结果共收集肺炎克雷伯菌106株(来自34位患者),菌株主要分布于ICU72%普外科10%和神经内科6%;标本来源于血液34%、痰28%、尿液16%、导管6%、伤口3%、脓3%、引流液3%、胆汁2%、分泌物2%、子宫颈2%、保护性导管刷1%和腹腔积液1%;患者年龄28～91岁,平均年龄(66±5)岁,男性占70.7%,女性占29.3%。具有高黏液表型中黏液丝试验阳性者占22%(24/106),黏液丝试验阴性占78%(83/106)。毒力血清型包括K1(15%)、K2(42%)、K5(4%)、K54(11%)、K57(9%)和未分型(19%),携带rmpA(83%)、aero(79%)、mrkA (94%)、fimH(80%)和WabG(98%)等毒力因子,同时携带多种毒力基因者占47%。质谱同源性分为A型(59%)和B型(41%),A型包括A1型(40%)、A2型(19%),65%的患者为同一型别。结论该院致多部位感染的肺炎克雷伯菌分离到高毒力菌株,由同一克隆的肺炎克雷伯菌引起多部位感染菌株间的同源性较小。     

下呼吸道分离高毒力肺炎克雷伯菌和经典肺炎克雷伯菌常见耐药基因检测以及耐药性比较分析

目的 分析下呼吸道分离高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae,hvKP)和经典肺炎克雷伯菌(classical Klebsiella pneumoniae,cKP)常见耐药基因及耐药性比较分析,为临床抗感染治疗提供流行病学依据。方法 收集2019 年8 月～ 2021 年12 月下呼吸道分离的200 株非重复肺炎克雷伯菌菌株。用纸片扩散法(K-B 法)进行菌株抗生素敏感试验,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测菌株的毒力基因、耐药基因。采用毒力基因iucA,rmpA 和peg-344 均阳性的菌株定义为hvKP,其余菌株定义为cKP,比较分析hvKP 和cKP 的耐药性。结果 200 株肺炎克雷伯菌中,hvKP 91 株,占比45.50%;cKP 109 株,占比54.50%。hvKP 和cKP 耐药菌株中的超广谱β- 内酰胺酶(extended spectrum β-Lactamases,ESBLs) 耐药基因均以blaSHV,blaTEM,blaCTX-1 group(1,3,15)为主要基因型,喹诺酮类耐药基因均以qnrS,acc(6’)- Ⅰ b,qnrB 为主要基因型。hvKP 对头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、阿莫西林/ 克拉维酸、左氧氟沙星、环丙沙星和复方新诺明的耐药率均低于cKP,差异有统计学意义(χ2=14.25,10.38,11.80,10.11,7.44,24.34,21.42,均P ＜ 0.05);qnrS 基因在hvKP 中的阳性率低于cKP,差异有统计学意义(χ2=12.63,P=0.001)。结论 下呼吸道分离hvKP 与cKP 耐药菌株中耐药基因主要基因型一致,但是hvKP 对临床常用抗生素耐药率低于cKP,临床治疗应根据药敏结果合理应用抗生素。     

高毒力肺炎克雷伯菌致糖尿病患者颌面部间隙感染1例

肺炎克雷伯菌是医院获得性和社区获得性感染中常见的条件致病菌,高黏液表型的定义为高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)[1],具有极强的播散能力,能引起严重的侵袭、转移性感染 [2].颌面部间隙感染主要是指由病原菌侵入口腔颌面部及颈部以上潜在性筋膜间隙所致的一种急性炎症性疾病,常表现为局部红肿热痛、吞咽困难及呼吸道梗阻等,可发展...     

高毒力肺炎克雷伯菌的临床特征及分子流行病学研究

目的 探讨高毒力肺炎克雷伯菌的临床特征及分子流行病学研究。方法 收集2021年1-3月该院临床分离的肺炎克雷伯菌145株,采用拉丝实验对高毒力肺炎克雷伯菌进行初筛,并将初筛阳性菌株的DNA作为模板,分别对毒力基因peg-344、peg-589、iroB、iucA、terB、c-rmpA、p-rmpA和p-rmpA2等进行常规PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳,检测高毒力肺炎克雷伯菌毒力基因的携带情况,并通过WHONET 5.6软件对菌株的临床分布和耐药特征进行统计分析。结果 收集的145株菌种中初筛阳性的高毒力肺炎克雷伯菌56株,阳性率为38.62%(56/145)。56株初筛阳性菌株中,iucA基因阳性菌53株(94.64%),iroB基因阳性菌54株(96.42%),terB基因阳性菌51株(91.07%),peg-344基因阳性菌55株(98.21%),peg-589基因阳性菌51株(91.07%),p-rmpA基因阳性菌51株(91.07%),p-rmpA2基因阳性菌51株(91.07%),c-rmpA基因阳性菌仅有4株(7.14%)。145株菌株标本主要分离自痰液,菌株来源最多科室是...     

高毒力肺炎克雷伯菌的微生物学特征与毒力因子研究进展

高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)能够引起健康个体的社区获得性感染,比经典的肺炎克雷伯菌更具毒性。hvKp在亚洲首次被发现,是化脓性肝脓肿的主要原因。除肝脓肿外,hvKp与肺炎克雷伯菌的不同之处在于其具有很强的转移能力,包括肺、眼和中枢神经系统。由于导致高毒力的遗传决定因素通常在毒力质粒及染色体移动遗传元件上,该文对其与毒力相关的微生物学特征与毒力因子的研究进展进行综述,以期为高毒力肺炎克雷伯菌的早期识别、感染控制和新型治疗药物的研发提供线索。     

高毒力肺炎克雷伯菌分子致病机制研究进展

882年,肺炎克雷伯菌(KP)首次从死于肺炎的患者的肺中被分离出来[1]。KP属于肠杆菌科,是人类胃肠道菌群的一部分。它们携带多种毒力基因,并且具有获得抗菌药物抗性基因的能力,同时可以引起局部和播散性感染[2],是临床常见的条件致病菌之一。大多数“经典”肺炎克雷伯菌(cKP)能够引起肺炎、尿路感染、腹腔感染、血管内装置感染、手术部位感染、软组织感染、菌血症等,常发生于住院需长期护理或免疫功能低下的患者.     

376株肺炎克雷伯菌的毒力基因分析

目的 了解肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)的毒力基因及其高毒株分布状况,并评估用单个基因检测以预测高毒型KP(hypervirulent,HvKP)的性能.方法 搜集2016年1月-2018年12月临床分离的376株KP,采用聚合酶链反应法检测KP的12个毒力相关基因(entB、irp2...     

高毒力肺炎克雷伯菌毒力影响因素及分子流行病学研究的进展

肺炎克雷伯菌是一种常见的革兰阴性细菌,常引起免疫力低下、患者尿路感染、伤口感染等。高毒力肺炎克雷伯菌（hypervirulent klebsiella pneumoniae, HvKP）的毒性远大于经典肺炎克雷伯菌（classic klebsiella pneumonia, cKP）。被其感染的个体病情严重,治疗难度大,病死率高,严重威胁人类健康和生命。20世纪80年代首次发现并命名HvKP以来,世界各地也相继分离出此种细菌。近年来,在HvKP分离数量不断增加的同时HvKP的耐药率也在逐渐上升。本文总结了HvKP的临床特征、毒力影响因素及分子流行病学特点,希望对后续的研究有所帮助。     

肝脓肿肺炎克雷伯菌血清分型及毒力基因研究

目的探讨肝脓肿相关肺炎克雷伯菌耐药性、血清型和毒力基因分布。方法收集75株肝脓肿患者临床分离肺炎克雷伯菌,采用Vitek 2系统检测耐药性;PCR法检测血清型及毒力基因分布情况。结果 75株肝脓肿肺炎克雷伯菌对哌拉西林耐药率为16%,对复方磺胺甲噁唑的耐药率为4%,对头孢菌素类、氨基糖苷类等多种抗菌药物敏感。血清型分布以K1型(62.7%)为主,其次为K2型(21.3%),其他型别K5、K20、K54及K57均占2.7%,4株(5.3%)未分型。毒力基因以rmp A和aerobactin检出率最高,分别达98.7%和97.3%,其次为kfu(68%)、wca G(66.7%)和all S(57.3%)。K1血清型菌株中以rmp A、wca G、aerobactin、kfu和all S 5种毒力基因同时携带为主,占83%;K2、K20和K57型菌株的主要携带模式为rmp A+aerobactin;K5型为rmp A+aerobactin+kfu;K54型为rmp A+aerobactin+wca G。结论肝脓肿相关肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物敏感,K1、K2型是主要血清型,毒力基因rmp A和aerobactin检出率最高,K1血清型毒力基因检出种类最多。     

腹腔感染高毒力肺炎克雷伯菌的临床与分子特征分析

目的 分析引起腹腔感染高毒力肺炎克雷伯菌(hvKp)的临床及其分子特征,加强临床对引起腹腔感染hvKp的认知。方法 收集山东第一医科大学附属省立医院腹腔感染患者分离的84株肺炎克雷伯菌(Kpn);采用聚合酶链反应(PCR)检测荚膜血清分型和毒力基因;采用病历-对照回顾性分析引起腹腔感染的危险因素。结果 hvKp组大蜡螟24 h存活率与普通肺炎克雷伯菌(cKp)组和对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);hvKp组的荚膜血清分型以K1型为主,K1型检出率与cKp组比较,差异有统计学意义(P<0.05);毒力基因以peg-344和icuA检出率最高,分别为61.90%和54.76%,两组peg-344、icuA、rmpA检出率比较差异均有统计学意义(P<0.05);hvKp和cKp两组对常用抗菌药物的耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);两组肝脓肿、胆囊感染、糖尿病、肿瘤和出院带药患者比例比较差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析,糖尿病(OR=0.21,95%CI:0.01～0.64,P=0.01)是hvKp引起腹腔...     

高黏液型肺炎克雷伯菌药敏分析和荚膜血清分型

目的探讨高黏液型肺炎克雷伯菌的药物敏感性及其荚膜血清分型和临床特征,为医院制订感染控制措施提供依据。方法对该院2018年1-6月送检的细菌培养阳性标本进行鉴定和药敏试验,收集检出的肺炎克雷伯菌,拉丝试验筛选出有黏液丝形成,并且长度大于5mm的菌株为高黏液型,分析高黏液型和非黏液型肺炎克雷伯菌的药敏结果差异。通过PCR方法,分析高黏液型肺炎克雷伯菌的高毒力荚膜血清分型,同时查阅相应患者的病历信息,对患者的临床特征进行分析。结果 170株肺炎克雷伯菌中,拉丝试验阳性菌占36.5%。高黏液型肺炎克雷伯菌药物敏感率高于非黏液型肺炎克雷伯菌(P0.05);非黏液型肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶的阳性率(38.9%)高于高黏液型肺炎克雷伯菌(11.3%),差异有统计学意义(P0.05)。高黏液型高毒力荚膜血清型菌株阳性率为58.1%,其中K1、K2、K5、K20、K54、K57型分别占19.4%、22.2%、8.3%、13.9%、8.3%、27.8%。痰液标本分离阳性率为69.4%,伤口分泌物为11.1%,腹水为8.3%,全血标本为2.8%,尿液为8.3%。痰液标本所分离的阳性菌株中,K57型所占比例最高,腹水标本和全血标本均为K1型所占比例最高,尿液标本为K5型所占比例最高。高黏液型肺炎克雷伯菌主要分布在重症监护病房(38.9%),基础疾病以肺部疾病为主,占69.4%。结论高黏液型肺炎克雷伯菌存在于多种临床标本中,K1、K2、K57血清型检出率较高,应该加强监控,制订更严格的感染控制措施才能避免耐药性毒力菌株的出现和播散。     

医院分离高毒力肺炎克雷伯菌的毒力基因检测及耐药性分析

目的 研究医院分离高毒力肺炎克雷伯菌（Hvkp）的毒力基因及耐药性,为感染防控提供依据。方法采用基因检测和药敏试验方法,对某医院临床分离的肺炎克雷伯菌的毒力基因和耐药性情况进行检测与评价。结果 共检测肺炎克雷伯菌196株,有62株可判定为Hvkp,检出率为31.6%。62株Hvkp中毒力基因peg589、iroB、p-rmpA、p-rmpA2和irp2的检出率分别为88.7%、93.5%、96.7%、88.7%和66.1%,血清荚膜型K1和K2的检出率均为30.6%。Hvkp菌株对绝大多数临床常用抗菌药物的耐药率均低于10%,而经典的肺炎克雷伯菌株对绝大多数临床常用抗菌药物的耐药率均在15%以上。结论 临床分离的肺炎克雷伯菌中Hvkp构成比很高,其对常用抗菌药物的耐药率普遍低于经典菌株,提示应重视监测Hvkp菌株的耐药性,防止其在临床播散。     

1株耐亚胺培南肺炎克雷伯菌分型、耐药机制及毒力研究

摘要：目的：探讨1株临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌的基因分型及耐药机制。 方法：用PCR法对该菌鉴定并进行荚膜血清分型以确定其多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）;并用PCR对其相关毒力因子及相关耐药基因进行检测。 结果：确认该菌株为肺炎克雷伯菌,但不属于常见的高致病力K1、K2及K5型;MLST分型为ST11;PCR鉴定其携带有bla_CTX-M、bla_TEM、bla_SHV耐药基因及wabG、uge、ureA毒力基因。 结论: 该菌为ST11型的非K1、K2及K5菌株,致病力较弱,但可导致临床多重耐药菌株的增多。