SUMO-1 mRNA在诊断胆囊癌中的价值研究

目的研究胆囊癌中SUMO-1基因mRNA的表达水平及在胆囊癌诊断中的应用价值。方法采用RT-PCR的方法检测外科切除的胆囊癌、癌旁肝组织、胆囊腺瘤样息肉中SUMO-1基因mRNA的表达水平并比较胆囊癌和癌旁胆囊组织之间、CA19-9阴性和阳性的胆囊癌之间、胆囊良恶性病变之间的SUMO-1基因mRNA表达水平的差异。结果 SUMO-1基因mRNA在胆囊癌及癌旁胆囊组织中都有表达,但在胆囊肝癌中的表达水平显著高于癌旁胆囊组织;在不同CA19-9水平的胆囊癌患者中SUM0-1基因mRNA均高表达,差别没有显著性;在胆囊腺瘤样息肉中SUMO-1基因mRNA也有表达,但表达水平明显低于胆囊癌。结论在不同CA19-9水平的胆囊癌中,SUMO-1基因mRNA均明显高表达,而在癌旁胆囊组织及胆囊腺瘤样息肉中表达较低,SUMO-1基因mRNA可作为诊断胆囊癌的一个重要的标志物。     

SUMO-1基因在肝癌中的表达及意义

目的 研究肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达及意义.方法 采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测肝癌传代细胞、肝癌标本及癌旁肝组织中SUMO-1基因的表达.结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在肝癌传代细胞SMMC-7721、Hep3B、HepG2及肝癌标本中均明显高表达,而癌旁肝组织中SUMO-1基因明显低表达,肝癌组织和癌旁肝组织中SUMO-1表达差异有统计学意义(P<0.001).结论 SUMO-1基因在肝癌中高表达,SUMO-1可能为肝癌诊断和治疗中的一个靶点.     

SUMO-1 mRNA诊断肝癌的价值研究

目的 研究肝癌中SUMO-1 mRNA表达水平及诊断肝癌的应用价值.方法 采用RT-PCR检测外科切除的肝癌、癌旁肝组织、肝血管瘤及肝局灶性结节性增生标本中SUMO-1 mRNA表达水平,并比较肝癌与癌旁肝组织,甲胎蛋白(AFP)阴性与阳性的肝细胞性肝癌,肝良、恶性肿瘤之间SUMO-1 mRNA表达水平的差异.结果 SUMO-1 mRNA在肝癌及癌旁肝组织中均有表达,但在肝癌中的表达水平明显高于癌旁肝组织;在不同AFP水平的肝细胞性肝癌中SUMO-1 mRNA均高表达,差异无统计学意义;在肝血管瘤及肝局灶性结节性增生中SUMO-1 mRNA也有表达,但表达水平明显低于肝癌.结论 在不同AFP水平的肝细胞性肝癌中SUMO-1 mRNA均高表达,而在癌旁肝组织及肝良性肿瘤中表达较低,SUMO-1 mRNA可作为诊断肝癌的一个重要标志物.     

SUMO-1基因在胆囊癌中的表达及意义

目的研究胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达及意义。方法采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测胆囊细胞株、胆囊癌标本及胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因的表达。结果在mRNA及蛋白水平,SUMO-1基因在胆囊癌细胞株GBC-SD、SGC-996、NOZ及胆囊癌标本中均明显高表达,而胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1基因表达明显低,胆囊癌组织和胆囊腺瘤样息肉组织中SUMO-1表达有明显的差异(P<0.001)。结论 SUMO-1基因在胆囊癌中高表达,SUMO-1可能为胆囊癌诊断和治疗中的一个潜在的靶点。     

缺氧诱导因子对高原应激的影响

缺氧诱导因子1（Hypoxia Inducible Factor-1,HIF-1）在细胞低氧应答反应中起核心作用,当组织器官出现缺血缺氧表现时,细胞内普遍出现HIF-1的聚集,加强糖酵解反应,为细胞提供能量,促进血管生成和红细胞携带氧气的能力,从而改善细胞的物质代谢,高原应激条件下通过肺通气增加,动脉氧分压上升,从而缓解高原低氧对人体的影响。     

自噬在缺氧应激中的保护作用及其调控机制

自噬作为机体重要的分解代谢过程,参与机体的多种应激反应如缺氧应激。在缺氧状态下,机体可通过多条通路调控自噬的发生,避免细胞的氧化损伤。在对自噬做简单的介绍后,本文将针对机体缺氧应激时多条信号通路对自噬的分子调控机制做一综述,最后,以肠缺氧为例,说明自噬在机体缺氧应激损伤中保护作用。     

SUMO-2/3与孕激素受体的共价结合及其对该受体转录活性的调节

目的研究B型孕激素受体(progesterone receptor B type;PRB)是否能被SUMO-2、SUMO-3类泛素化修饰,并探讨这种修饰对孕激素受体转录活性的影响。方法以人的MCF-7 cDNA为模板进行PCR反应,扩增出SUMO-2、SUMO-3的cDNA,构建真核表达载体pcDNA3FLAG-SUMO2与pcDNA3FLAG-SUMO3;将质粒pXJ40-myc-PRB分别与pcDNA3-FLAG、pcDNA3FLAG-SUMO2、pcDNA3FLAG-SUMO3共转染人胚肾细胞293T,运用免疫共沉淀及western印迹的方法检测其是否发生类泛素化修饰;运用测定荧光素酶报告基因的方法检测类泛素化修饰对孕激素受体转录活性的影响。结果构建成功表达载体pcDNA3FLAG-SUMO2与pcDNA3FLAG-SUMO3;免疫共沉淀实验证实sumo2/3均可以与PRB共价结合;SUMO-2、SUMO-3能以孕激素依赖的方式增强PRB的转录活性。结论 SUMO-2、SUMO-3分子能够对孕激素受体PRB进行类泛素化修饰,并调节其分子功能。     

SUMO-1 Enhancing the p53-induced HepG2 Cell Apoptosis

Wild-type p53 gene ( wtp53) can induce cellapoptosis andinhibit oncogenesis[1 ,2]. The proteinof muring double minute gene 2 ( MDM2) was in-duced by wtp53 .After MDM2's binding to p53 pro-tein,it can sti mulate the p53 degradation throughthe ubiquitin pathway , forming the p53-MDM2negative feedback circle[3 ,4].Small ubiquitin-likemodifier-1 (SUMO-1) plays an crucial role in theprotein post-translational modification[5 ,6].SUMO-1 can compete the receptor binding sites of someproteins wi…     

SUMO-1基因沉默对肝癌细胞株SMMC-7721bcl-2及c-myc基因表达的影响

目的 探讨SUMO-1基因沉默后对肝癌细胞株SMMC-7721 bcl-2及c-myc表达的影响.方法 将人工合成的针对人SUMO-1基因的siRNA片段转染人肝癌细胞株SMMC-7721,采用RT-PCR、Western blot方法检测siRNA沉默SUMO-1基因的效果及SUMO-1基因沉默后对bcl-2及c-myc基因表达的影响.结果 人工合成的针对SUMO-1基因的siRNA片段能显著地抑制SMMC-7721 SUMO-1基因的表达,24、48、72 h沉默率分别为9.80%、73.43%、46.56%.SUMO-1基因表达下调后SMMC-7721 细胞内bcl-2及c-myc基因表达也明显下调,差异有统计学意义.结论 siRNA是一种理想的沉默SMMC-7721 SUMO-1基因表达的方法,SUMO-1基因沉默后SMMC-7721细胞内的bcl-2及c-myc基因表达均明显下调,说明SUMO-1基因控制癌基因bcl-2及c-myc的表达.     

缺氧诱导因子与内质网应激关系的研究进展

缺氧诱导因子(HIF)是缺氧环境下介导细胞适应性反应最主要的转录因子,内质网应激(ERS)是应激状态下(包括缺氧在内)恢复细胞内蛋白质稳态的重要细胞反应。HIF和ERS之间存在密切的相互作用:ERS不仅直接调节HIF的合成和活性,还对HIF靶基因的表达(如促红细胞生成素和血管内皮生成因子)有调节作用;HIF也可以调节ERS。本研究综述HIF的特点和调节机制、ERS相关的未折叠蛋白质反应和凋亡,以及HIF和ERS间相互作用的研究,为进一步研究提供理论依据。     

缺氧应激对HepG-2增殖活性和HIF-1α、MMP-2表达的影响

目的研究缺氧应激对人肝癌细胞HepG-2增殖和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、基质金属蛋白-2(MMP-2)表达的影响。方法将缺氧(5%O2、5%CO2、90%N2)和常氧环境中培养的HepG-2细胞,在相差显微镜下观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活性;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定常氧组和缺氧4、12、24h组HepG-2细胞HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA的表达量;用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定常氧和缺氧12、24h组细胞培养上清MMP-2蛋白含量。结果同时相缺氧组HepG-2细胞增殖活性与常氧组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。常氧下HepG-2细胞不表达HIF-1αmRNA,缺氧4h时HIF-1αmRNA表达量最高,随后下降(P<0.01),但仍高于常氧组;缺氧4h时MMP-2mRNA表达量最高,随后下降,但仍高于常氧组(P<0.01);缺氧组HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA呈高度正相关关系。缺氧24h组HepG-2细胞培养上清液中的MMP-2蛋白含量与常氧24h组含量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧应激(5%O2)促进人肝癌细胞HepG-2的增殖作用并上调HIF-1α和MMP-2的表达量。     

Nrf2/HO-1通路通过调控内质网应激改善小鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用研究

目的：探讨Nrf2/HO-1信号上调对小鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的改善作用及相关机制。方法：小鼠原代心肌细胞分为正常培养处理和缺氧/复氧处理,其中缺氧/复氧处理的心肌细胞分为模型组、Nrf2过表达组、HO-1过表达组、HO-1沉默+Nrf2过表达组。采用MTT法检测细胞活性,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞培养上清中心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量,荧光定量PCR检测内质网应激相关分子水平。结果：小鼠心肌细胞缺氧/复氧处理后,心肌细胞活性降低、细胞凋亡增加及细胞培养上清中cTnⅠ和CK-MB含量升高(P<0.05)。Nrf2或HO-1过表达可有效减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤(P<0.05)。给予HO-1基因沉默预处理后,Nrf2过表达产生的细胞保护作用明显减弱(P<0.05)。此外,缺氧/复氧处理后,心肌细胞内GRP78、ATF6、CHOP和Caspase-3的mRNA表达量升高(P<0.05)。Nrf2或HO-1过表达引起GRP78、ATF6、CHOP和Caspase-3表达水平下调(P<0.05),而下调...     

重度新生儿缺氧缺血性脑病并应激性溃疡91例报告

<正> 重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)多数(80%)发生应激性溃疡而致上消化道出血。我科新生儿急救中心(ICU)1993年12月～2000年12月,对此进行了临床观察。现总结报告如下。1 临床资料1.1 对象 全部病例均为我科(ICU)的HIE患儿,均符合HIE诊断及分度标准;均为重度HIE且排除了先天性消化道畸形,药物影响及全身出血性疾病,有呕吐咖啡色物质或鲜血,经鼻胃管抽取咖啡色液体或鲜血者确诊为上消化道出     

缺氧预适应小鼠脑组织中缺氧诱导因子-1的表达

为探讨缺氧诱导因子-1(HIF-1)在缺氧预适应小鼠脑组织中的表达,用Western印迹法检测慢性缺氧(H)和不缺氧(C)HeLa细胞、急性重复性缺氧0次(H₀)、1次(H₁)、4次(H₄)小鼠脑组织中的HIF-1α.结果:慢性缺氧HeLa细胞中可检测到较多的HIF-1α,H₀组脑组织中检测不到HIF-1α,H₁组检测到微量HIF-1α,H₄组检测到较多HIF-1α.结果显示:脑组织中HIF-1α 的含量随缺氧预适应的产生而逐步增加,提示HIF-1可能参与缺氧预适应的形成.     

缺氧预适应小鼠脑组织中缺氧诱导因子-1的表达

为探讨缺氧诱导因子 1 (HIF 1 )在缺氧预适应小鼠脑组织中的表达 ,用Western印迹法检测慢性缺氧 (H)和不缺氧 (C)HeLa细胞、急性重复性缺氧 0次 (H0 )、1次 (H1)、4次 (H4 )小鼠脑组织中的HIF 1α。结果 :慢性缺氧HeLa细胞中可检测到较多的HIF 1α,H0 组脑组织中检测不到HIF 1α ,H1组检测到微量HIF 1α,H4 组检测到较多HIF 1α。结果显示 :脑组织中HIF 1α的含量随缺氧预适应的产生而逐步增加 ,提示HIF 1可能参与缺氧预适应的形成。     

轻、中度缺氧应激时声强对脑认知功能的影响

目的：通过分析在4种不同高度和5种不同声强条件下P300的潜时及波幅,反应时,得出轻、中度缺氧条件下最佳声强值。方法：14名受试在地面及1500m,3000m,4500m三个模拟高度（吸低氧混合气体）分别进行5种不同声强值（55,60,70,80,85dB)的听觉oddball测试,记录脑电图（EEG）、反应时（RT）及主观感觉,EEG经平均叠加处理提取出脑事件相关电位（ERP）中的P3波幅、潜时。以P3潜时和RT为主要指标评定脑认知能力,结合主观评价确定最佳声强值。结果：P300潜时及RT,在地面及1500m,5种听觉oddball任务声强为55dB时的P300潜时及RT明显长于其它4种声强（P＜0.01),而其余4种声强间则无明显差别。在3000m,5000m,声强为70,80,85dB时P300潜时及RT明显短于55dB及60dB的P300潜时和RT（P＜0.01),而主观评价反映80,85dB声强刺耳,难以忍受。结论：在地面及1500m轻度缺氧情况下最佳声强值为60-70dB;在3000m及5000m中度缺氧条件下,最佳声强值为70-80dB,此时P3潜时及RT最短;缺氧会减慢脑信息加工过程。     

缺氧诱导因子-1α/Notch1通路在缺氧致病机制中的研究进展

缺氧普遍存在于多种疾病中。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是细胞适应缺氧微环境的关键转录调节因子,Notch信号是传递缺氧反应的关键中间体,缺氧状态下Notch信号的激活独立于HIF-1α,HIF-1α与Notch1信号存在串扰,共同参与疾病的发生与发展。现就HIF-1α/Notch1通路在缺氧致病机制中的作用相关研究进展进行综述,为靶向缺氧途径提供新的策略。     

缺氧诱导因子-1在肿瘤细胞能量代谢中作用的研究进展

文章介绍缺氧诱导因子-1在肿瘤细胞能量代谢中作用的研究进展。     

缺氧诱导因子HIF-1a通过上调Isthmin1促进结肠癌增殖的作用机制

目的 Isthmin1蛋白(ISM1)参与肿瘤的发生发展过程,但其对于结肠癌发生发展的作用机制和功能仍未被阐明。明确ISM1在结肠癌组织以及细胞系中的表达情况及预后价值,并探讨缺氧诱导因子缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)通过上调Isthmin1促进结肠癌增殖的机制研究。方法 应用TCGA和Kaplan-Meier plotter数据库分别分析ISM1在结肠癌中的表达情况及其与结肠癌患者预后的关系。免疫组化和免疫荧光检测结肠癌、癌旁组织中ISM1、HIF-1a的定位及表达水平。Western blot检测人正常结肠上皮细胞HcoEpic、NCM460以及人结肠癌细胞系HCT116、HT29及SW620中ISM1的表达水平。构建ISM1过表达稳转株,SRB法和平板克隆法检测其对结肠癌细胞增殖活性的影响。缺氧处理后,Western blot检测ISM1的表达水平。结果 生物信息学分析结果显示,结肠癌组织中ISM1的表达明显高于正常结肠组织,且ISM1低表达的结肠癌患者比高表达的结肠癌患者总生存期更长(P<0.01)。ISM1在结肠癌组织和结肠癌组织细胞系中的表达水平明显高于对应的癌旁...     

缺氧诱导肝细胞中葡萄糖转运体1表达变化机制的实验研究

目的探讨缺氧诱导肝细胞中葡萄糖转运体1(GLUT-1)蛋白表达变化的机制.方法以含有GLUT-1全长调控序列的表达载体(构建体A)为模板,构建野生型(构建体N)和突变型(构建体M)缺氧反应元件(hypoxia response element, HRE)表达质粒,转染体外培养的肝细胞BRL,与含有全长缺氧诱导因子1α(HIF-1α)cDNA的质粒p(HA)HIF-1共转染,1%氧浓度诱导表达,分析报告基因的表达及变化.结果成功构建了构建体N和构建体M,转染BRL细胞后,缺氧明显诱导了构建体N和构建体M中报告基因的表达,与转染空载体的对照相比,报告基因的表达分别增加了7.2倍(P<0.05)和3.1倍(P<0.05),且两者之间具有明显的差异(P<0.05).构建体N与p(HA)HIF-1共转染,报告基因的表达增强了16倍,而构建体M与p(HA)HIF-1共转染时,与单独转染构建体M相比,两者没有显著差异(P>0.05).结论 HRE中的HIF-1结合位点在GLUT-1mRNA的缺氧诱导中起重要的作用.