复方丹参液对细胞粘附分子的表达和血流变学的影响

目的研究复方丹参液对内毒素引起白细胞粘附分子CD11a、血小板粘附分子CD61、血管内皮细胞粘附分子ICAM -1表达的变化 ,观察复方丹参液预防细胞粘附和聚集的作用及对血液粘度的影响。方法复方丹参液大剂量组大鼠每天用0.5g/2ml复方丹参液灌胃2次/d ,复方丹参液小剂量组每天用0.3mg/2ml灌胃2次/d ,喂药10d。正常组和对照组不给药。各组大鼠由尾静脉注入内毒素1mg/kg,注入后2和4h分别由心脏取血 ,进行CD11a、CD61、血液流变学及脑血管ICAM -1免疫组化的测定 ,正常组不给内毒素。结果大鼠注入内毒素后2h ,血小板CD61表达(142.3±23.2)明显比正常组(126.2±19.6)高。复方丹参液大剂量、小剂量用药组血小板CD61表达比对照组明显减少 ,注入内毒素4h后对照组CD61表达比正常组低 ,复方丹参液大剂量、小剂量组CD61表达与正常组相近。血液流变学的测定结果显示 :复方丹参液大剂量组全血粘度和全血屈服应力均比对照组低 ,红细胞变形指数比对照组高。结论复方丹参液可通过减少血小板粘附蛋白CD61的表达 ,减轻血小板粘附和聚集 ,降低血液的粘度 ,改变红细胞的变形性 ,达到改善或促进微循环的作用。对白细胞CD11a和内皮ICAM -1的表达作用不明显     

山莨菪碱对A23187诱导血小板聚集和5-羟色胺释放的效应

已有报道山莨菪碱(654)抑制内毒素及ADP诱导血小板聚集效应,与抑制血小板TXA_2合成、增加血小板cAMP含量、降低血小板膜流动性等有关。也有报道654对缺氧心肌细胞有保护作用,对离体心肌收缩减弱效应可被提高细胞内,或细胞外Ca~(2+)浓度对抗等,提出654具有钙拮抗作用。为此,本文以钙离子载体A23187为诱导剂,比浊法测定兔血小板聚集反应,     

山莨菪碱对失血性休克作用机制的研究

本工作研究肠道内给654-2(药物不进入全身循环)对失血性休克的发展过程及血浆溶酶体酶(组织蛋白酶)含量的影响。实验在成年雄猫(2.8-3.7kg)进行,全麻下在十二指肠中部和小肠下端各置一瘘管,并阻断肠系膜上动脉(SMA)下将含0.5mg/ml的654-2-生理盐水按25ml/kg从瘘管灌入小肠胜,30分钟后排出654-2并以50ml/mg生理盐水灌洗小肠腔以排降654-2。对照组不给药物,只给等量生理盐水。给药组使随     

内毒素休克中5-羟色胺的作用及山茛菪碱对5-羟色胺的可能作用

5-羟色胺(5-HT)等化学介质的释放,参与休克的发病学已为众人所知。但在休克不同阶段中5-HT的作用并不完全清楚,我们比较了内毒素和临床上抗休克有效药物之一——山莨菪碱(654-2),对狗血色氨酸(5-HT前体)、5-HT、循环血小板的影响,及在体外对兔血小板释放5-HT和溶酶体酶的影响,进一步探讨5-HT释放在内毒素休克中的意义及654-2的可能作用。     

内毒素诱导血小板MLCK活化和纤维蛋白原受体显露

本文观察了内毒素(ET)对人血小板20kd蛋白磷酸化,胞浆游离钙[Ca~(2+)]i,~(45)Ca~(2+)摄取以及纤维蛋白原与血小板结合的影响,以探讨ET致血小板聚集的机制。结果显示:250μg/ml的ET在体外可诱导血小板20kd蛋白磷酸化。500μg/ml ET可在15秒钟内使20kd蛋白磷酸化,60秒钟达高峰,放射性强度分别为对照组的139±     

富血小板血浆中血小板浓度对血小板聚集的影响

目的探讨富血小板血浆（PRP）血小板浓度对血小板聚集的影响。方法随机收集107名门诊体检健康志愿者静脉血浆,分离PRP和PPP（贫血小板血浆）后,用血液分析仪测定PRP血小板浓度,按PRP浓度用自身PPP配成50×109/L～400×109/L浓度梯度的血浆,用血浆比浊法测血小板聚集率。结果 PRP血小板浓度在50×109/L～400×109/L,二磷酸腺苷（ADP）和花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集率分别为（10.4±8.7）%至（55.3±9.9）%和0%至（75.2±10.1）%,血小板聚集率随血小板浓度的增高而增高,血小板浓度为250×109/L时,聚集率增幅减缓,血小板浓度小于150×109/L时,血小板聚集率明显降低。结论 PRP血小板浓度对血小板聚集的影响明显,血小板聚集试验PRP血小板浓度大于150×109/L;血浆比浊法血小板聚集试验适宜的血小板浓度为250×109/L。     

654—2对家兔红细胞膜Na^＋—K^＋—ATPase活性及血浆LPO含量的影响

日本大耳兔9只,其中6～8月龄5只,2～2.5年龄4只。均喂以2％654-2溶液1ml/天(即20mg)共43天。结果不分年龄统计,LPO含最下降0.827±1.048 nmol/ml(P<0.05)。Na~+-K~+-ATPase活性增加0.057±0.074μmol Pi/mg pro/hr(P<0.05)。认为654-2可能有抗衰老作用,并与普鲁卡因比较,讨论了其降低LPO的可能途径。     

654-2对吗啡戒断大鼠肠系膜微循环的影响

目的观察654-2对吗啡戒断大鼠肠系膜微循环的影响。方法采用递增皮下注射吗啡6天后，经纳络酮催瘾（0．5mg／kg），建立吗啡戒断模型，在戒断前给654-2组大鼠腹腔注射654-2（10mg／kg），然后用BI-2000医学图像分析系统分别观测正常大鼠、吗啡戒断大鼠和654-2治疗组大鼠肠系膜微血管管径、血流速度及有无渗出、出血。结果与吗啡戒断组比较，654-2组大鼠肠系膜微血管口径，血流速度以及血液渗出等情况均有不同程度的改善（P〈0．05）。结论654-2能明显改善吗啡戒断大鼠肠系膜微循环，可能是通过654-2解除微血管痉挛、抑制血小板聚集、增加红细胞的变形性而起作用。     

E.Coli内毒素对血小板胞浆Ca~(2 )浓度和纤维蛋白原受体的影响

已知细菌内毒素可引起血小板聚集和数目减少,此效应参与感染性休克时的并发症播散性血管内凝血和呼吸窘迫综合征的发病机制。纤维蛋白原(fg)和Ca~(2 )为血小板聚集必不可少的因子,血小板膜糖蛋白IIb/     

蝎毒和蝎毒多肽对家兔血小板聚集的影响

目的　检测蝎毒 (SV)和蝎毒多肽 (PSV)对家兔凝血系统的影响 .方法　麻醉家兔 ,颈动脉取血制备富含血小板血浆 (PRP) ,分别加入SV和PSV ,测定二磷酸腺苷 (ADP)诱导的血小板聚集作用 .结果　较低浓度的SV即可使血小板聚集曲线明显下降 ;PSV对血小板聚集影响不大 ,即使用较高的浓度 ,血小板聚集曲线亦仅轻微下降 .结论　SV对血小板聚集起抑制作用 (抗凝血作用 ) ;PSV对凝血系统的影响远远小于蝎毒     

蝎毒和蝎毒多肽对家兔血小板聚集的影响

目的检测蝎毒(SV)和蝎毒多肽(PSV)对家兔凝血系统的影响.方法麻醉家兔,颈动脉取血制备富含血小板血浆(PRP),分别加入SV和PSV,测定二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集作用.结果较低浓度的SV即可使血小板聚集曲线明显下降;PSV对血小板聚集影响不大,即使用较高的浓度,血小板聚集曲线亦仅轻微下降.结论 SV对血小板聚集起抑制作用(抗凝血作用);PSV对凝血系统的影响远远小于蝎毒.     

血小板聚集实验诱导剂储存条件及配制

目的 探讨血小板聚集诱导剂花生四烯酸(从)和二磷酸腺苷(ADP)的储存条件.方法 随机收集101例门诊体检健康志愿者静脉血标本,枸橼酸钠抗凝,离心分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP),采用血浆比浊法,分别用不同储存条件从和ADP作为诱导剂,上机测血小板聚集率.结果 AA-50℃储存0月和7月诱导血小板聚...     

Pam3CSK4对血小板活化及其TLR2表达的影响

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)在血小板激活及免疫方面的作用.方法 取健康人(n=5)全血6 ml,以密度梯度离心法制备洗涤血小板.用1、5、10μg/ml的TLR2激动剂Pam3CSK4(一种合成的细菌脂蛋白)刺激人洗涤血小板,然后测定血小板聚集率,血小板表面蛋白CD62p和TLR2表达的变化.结果 Pam3CSK4以浓度0、1、5和10μg/ml激活血小板:聚集率增加分别为(12.83±2.43)%、(28.32±5.67)%、(52.56±8.54)%、(76.24±11.23)%,P<0.01;血小板表面CD62p表达量增加分别为(11.20±1.67)%、(18.45±2.66)%、(22.45±2.04)%、(29.53±4.08)%,P<0.01.Pam3CSK4在1μg/ml时TLR2表达为(16.85±6.10)%,与对照组(10.81±3.99)%相比差异无统计学意义(P>0.05),在5 μg/ml、10μg/ml时TLR2表达量分别为(21.15±9.90)%和(22.52±9.26)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 细菌脂蛋白Pam3CSK4通过激活TLR2引起血小板聚集、活化,是血小板参与抑制革兰阳性细菌感染的免疫应答机制之一.     

大鼠软脑膜微血栓模型的建立及抗血栓药物的实验观察

以建立一个筛选抗血栓药物的体内微血栓模型为主要目的,本实验采用显微操作仪和微量注射技术,将二磷酸腺苷(ADP)溶液(1×10~(-2)M,5×10~(-2)M)微量注射到大鼠软脑膜微血管表面,在微血管中定位、定量诱发出白色的血小板性附壁血栓。通过对血栓形成过程的定量分析,观察几种体外血小板聚集抑制剂(阿斯匹林、654-2、川芎嗪)对血栓形成的影响。结果表明:在不损伤血管壁的条件下,单纯ADP(2μl/次)对微静脉的血栓诱发率达85%,病理切片结果发现血栓体主要由血小板构成。三种血小板聚集抑制剂均表现有不同程度的抗血栓作用。以上结果提示该微血栓模型在研究抗血栓药物及血栓形成机制方面可能有一定的实用价值。     

山莨菪碱对创伤性休克的保护作用

本实验以一定重力致兔左侧股骨中下1/3处粉碎性骨折造成创伤性休克,连续监测血压4hr;治疗组于创伤后2hr自颈外静脉注入654-2(5mg+10ml生理盐水/kg);预防组于创伤前由耳缘静脉注入654-2(2mg/kg)余同治疗组;另取4只家兔作为假手术组。结果显示,对照组家兔创伤后4hr末,血压降至休克前的41%,低于假     

ADP和E·Coli内毒素对血小板纤维蛋白原受体显露的影响及654-2的抑制作用

完整或安静的血小板膜上纤维蛋白原受体无活性。在血小板激动剂的作用下,纤维蛋白原受体可显露。本文以人血小板为对象,研究内毒素对其纤维蛋白原受体的显露作用及654-2(山茛菪碱)的影响。 本实验采用改良Tyrode's缓冲液洗涤血小板,并加入本室提取的腺苷三磷酸双磷酸酶,     

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂ETBT对血小板功能的影响

目的:观察血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)拮抗剂——依替巴肽(Eptifibatide,ETBT)对血小板聚集、释放、收缩血块和促凝活性等的影响。方法:在正常人全血或富血小板血浆(PRP)中加入不同浓度ETBT,分别检测二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板最大聚集率(rPAmax)、血小板CD62p表达百分率、血块收缩率和血小板3因子(PF3)有效性,通过与对照组比较获得ETBT对血小板功能的抑制率。结果:各种浓度(0.5～5.0μM)ETBT均对rPAmax有显著抑制作用(P0.01),且随ETBT浓度增加而增加;较高浓度(5.0～10μM)ETBT对血块收缩有显著抑制作用(P0.01);ETBT(0～80μM)ETBT对血小板CD62p表达(P=0.425)和PF3有效性没有明显抑制作用。结论:ETBT显著抗血小板聚集作用,但对血小板CD62p表达和促凝作用的影响较小;ETBT抗血小板聚集及抑制血块收缩的作用与其浓度呈正相关。     

不同条件对大鼠全血血小板聚集的影响

本文报道了不同条件对二磷酸腺苷(ADP)诱导的全血血小板聚集(简称全血聚集)的影响。结果表明,全血聚集血样制备简单、迅速;且用血量少。由于血小板在生理环境中与血细胞相互作用,能客观地反映血小板的功能状态。在本实验条件下,阿司匹林(ASA)和前列环素(PGI_2)物质对ADP诱导的聚集(4.34±1.10Q)有抑制作用,其抑制率分别为49.5%和80%;聚集度分别为2.19±0.74Q和0.87±0.75Q(P<0.01);而山莨菪碱(654-2)与ADP则显示协同作用(聚集度为6.13±2.68Q,P<0.05),其详尽的机理尚待研究。     

青藤碱和阿魏酸钠防止补体激活引起的白细胞聚集

补体激活引起的嗜中性粒细胞(PMN)聚集在器官的微血管内形成栓子,阻滞微循环血流;同时PMN激活引起氧自由基、花生四烯酸代谢产物和蛋白酶等释放,损伤血管内皮和实质细胞,是发生器官衰竭的重要原因。我们发现青藤碱和阿魏酸钠对阻止活化补体引起的PMN聚集有良好效果。青藤碱对PMN的半数抑制聚集量为0.76mg/ml(1.9mmol/L),阿魏酸钠的为0.82mg/ml(3.8mmol/L).药物浓度在2～25mg/ml之间时,药物剂量的对数与PMN聚集的抑制率之间有良好的量-效关系。     

内毒素诱导血小板20kD蛋白磷酸化、钙转运及纤维蛋白原受体显露

本文观察了E.Coli大肠杆菌内毒素对人血小板蛋白磷酸化,钙转运及纤维蛋白原受体的影响,实验采用SDS-凝胶电泳及放射自显影技术分离血小板蛋白并测定其磷酸化程度,结果发现内毒素刺激血小板后,内源性20kD蛋白迅速磷酸化,这一作用在细胞外Ca~(2 )存在时明显加强。同时还观察到血小板对~(45)Ca~(2 )摄取加强,胞浆游离Ca~(2 )升高,血小板结合荧光标记纤维蛋白原的阳性细胞百分率明显提高。提示:内毒素可能通过诱导Ca~(2 )动员,蛋白磷酸化,使血小板纤维蛋白原受体显露,导致血小板聚集。