含氟达拉滨的预处理方案在脐血移植治疗重型β地中海贫血的疗效观察

目的　观察在“Bu+Cy+ATG”典型预处理中加入氟达拉滨 (Flu)对脐血造血干细胞移植 (UCBT)治疗重型β地中海贫血(地贫)的植入和移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法　2000年 6月至 2004年 6月中山大学附属二院儿科对 22例行脐血干细胞移植的地贫患儿,按预处理方案是否含Flu分为无Flu组 (8例 )和Flu组(14例)。无Flu组:Bu,Cy和马抗人胸腺细胞球蛋白 (ATG);Flu组在此基础上加Flu。观察两组植入率,急、慢性GVHD(aGVHD、cGVHD)的发生率及其程度。结果　无Flu组 8例患儿HLA全相合 5例,不全相合 3例,接受单个核细胞(MNC)为 7 03×107 /kg[ (4 7 ~12 7 )×107 /kg],其中CD34+数为 4 0×105 /kg[ ( 0 6 ~11 7 )×105 /kg], 6例植入,中性粒细胞绝对计数 (ANC)≥0 5×109 /L时间平均为 18d,血小板 (BPC)≥20×109 /L时间平均为 36 5d, 4例发生aGVHD, 1例发生cGVHD;Flu组 14例,HLA全相合 6例,不全相合 8例,平均输入供者MNC为 7 53×107 /kg[ (3 4~10)×107 /kg],其中CD34+数为 5 01×105 /kg[ (0 6~11 7)×105 /kg], 4例植入,ANC≥0 5×109 /L时间平均为 16d,BPC≥20×109 /L时间平均为 72d, 2例发生aGVHD, 3例发生cGVHD;两组植入率、aGVHD及cGVHD发生率无明显差异。Flu组的HLA不全相合病例多于非Flu组。结论　allo H     

异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血

目的评估异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗β地中海贫血(β地贫)的临床疗效和合并症。方法allo-PBSCT治疗9例小儿重型β地贫,男4例,女5例;年龄2~14岁(中位数9.0岁)。同胞供者8例,亲属供者1例;供者年龄3~33岁(中位数13岁);男6例,女3例。HLA全相合7例,5/6相合1例,4/6相合1例。供者皮下注射G-CSF5μg/(kg·d)×5d,用CS3000Plus血细胞分离机采集PBSC。预处理方案以白消胺(Bu,14~20mg/kg)、环磷酰胺(CTX,160~200mg/kg)和马抗胸腺细胞球蛋白(ATG,90mg/kg)为基础,6例加用噻替哌(TT)、2例马法兰(Melph)和氟哒拉宾(Fludarabine)。移植物抗宿主病(GVHD)预防方案有:①单独环孢素(CsA)方案(2例);②CsA 短程甲氨蝶呤(MTX)方案(4例);③CsA 短程MTX 霉酚酸酯(MMF)方案(3例)。受者获得的有核细胞(NC)数10.4(4.7~18.4)×108/kg,CD34 细胞数6.7(2.1~14.9)×106/kg,CFU-GM14.2(3.5~42.9)×105/kg。结果8例患儿植入,1例同胞HLA4/6相合患儿于2次PBSCT后d 60才自体恢复。aGVHD6例,cGVHD4例。CsA、MTX联合MMF方案者无cGVHD发生,而CsA或CsA MTX的6例中发生cGVHD4例。随访时间11~67个月(中位数31个月),总生存率6/9例,无病生存(EFS)6/9例。结论allo_PBSCT是治疗地贫的有效临床方法。     

慢性移植物抗宿主病的预防和治疗

目的　分析儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)的特点及甲泼尼龙(MP)、吗替麦考酚酯(MMF)与他克莫司(FK506)或环孢素A(CSA)联合免疫抑制治疗的效果,探讨有效治疗方案。方法　共进行异基因造血干细胞移植 45例, 30例完全植入。完全植入的患儿中脐血移植(UCBT)17例,异基因外周血干细胞移植 (PBSCT) 13例。GVHD的预防采用CSA、MP、氨甲蝶呤及MMF等组合的方案。cGVHD患者采用MP+MMF+FK506或MMF+CSA联合治疗方案。结果　30例完全植入的患儿中发生cGVHD者 9例(30% );其中血缘相关PBSCT13例中发生cGVHD6例(46% );UCBT者完全植入 17例,发生cGVHD3例(18% )。急性GVHD迁延者 6例(67% )。1例患儿经CSA+MMF联合治疗痊愈; 8例采用MP+MMF+FK506“三联”治疗,cGVHD症状均得到有效控制,有效率为 100%, 2例分别并发巨细胞病毒间质性肺炎或败血症死亡,死亡率为22%; 7例无事件生存>3年(78% )。副作用有肝损害、肾损害、高血压、关节滑膜炎、心律失常,均在减药或停药、对症处理后毒副作用消失。感染是主要的合并症和死亡原因。结论　PBSCT者cGVHD发生率较UCBT者高;急性GVHD迁延是发生cGVHD的高危因素;选用包含MP、MMF、FK506 (或CSA)的 2~3种药物联合免疫治疗cGVHD,效果理想,患儿均能耐受,是     

异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病的临床研究

目的评估异基因造血干细胞移植治疗儿童血液病的疗效及合并症.方法脐血移植(UCBT)治疗9例重症β地中海贫血(β-thal)、1例慢性特发性溶血性贫血(CIHA)、3例急性髓性白血病(AML-M3b、M2a、M5)及1例急性淋巴细胞白血病(ALL)合并中枢神经系统白血病;异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗5例β-thal及1例慢性粒细胞性白血病慢性期(CML-CP)患儿.同胞UCBT8例中5例HLA相合(6/6),5/6为1例,3/6为2例.6例非血缘相关脐血移植(UD-UCBT)中4例为6/6,1例5/6,双份脐血混合者为5/6和6/6.allo-PBSCT中5例均为血缘相关,HLA相合同胞及1例5/6父亲供者.输入脐血(UCB)有核细胞数(NC)为7.5(3.4～19.4)×107/kg,外周血NC为9.39(2.5～14.4)×108/kg.结果血缘相关脐血移植(RD-UCBT)8例中植入6例,其中排斥1例,死于肝静脉闭塞病(HVOD)1例,恢复地中海贫血状态2例;UD-UCBT中2例β-thal及2例AML均植入,1例AML-M5复发,AML-M3b自体恢复造血并完全缓解,1例AML-M2a死于巨细胞病毒间质性肺炎,1例ALL未植入,死于败血症.急性移植物抗宿主病(aGVHD)8例(80%),III度以上2例,广泛慢性移植物抗宿主病(cGVHD2)例.β-thal总生存率为90%,无病存活率(EFS)为60%,平均生存时间为21个月(2～42个月).allo-PBSCT病例全部植入,cGVHD5例,III°以上者2例,广泛cGVHD3例,死于HVOD1例.EFS5例,中位生存时间10个月(3～26个月).结论UCBT及allo-PBSCT是治疗儿童血液病的有效方法,UD-UCBT首次成功治疗β-thal.     

脐血移植治疗重型β地中海贫血的临床研究

目的探讨脐血移植(UCBT)治疗重型β-地中海贫血(简称β-地贫)的疗效.方法用人类白细胞抗原(HLA) 全相合或不全相合UCBT治疗重型β-地贫患儿12例.供受者的有核细胞(3.63～16.0)×107/kg,CD34+细胞(0.11～1.03)×106/kg,粒-巨噬细胞集落形成单位(0.17～1.18)×105/kg.移植的预处理方案HLA全相合的患儿采用马利兰+环磷酰胺+抗胸腺细胞球蛋白方案;HLA 2个位点不全相合者采用高剂量输血+连续静脉滴注去铁胺+羟基脲+氟达拉宾+马利兰+环磷酰胺+抗胸腺细胞球蛋白方案.结果 10例患儿获得植入,其中7例为长期稳定植入,3例植入后发生排斥;2例未能植入.获得植入的10例患儿均发生急性移植物抗宿主病(aGVHD),其中Ⅰ度aGVHD 7例,Ⅱ度aGVHD 3例.脱离地贫状态生存7例,血红蛋白始终维持正常.3例恢复地贫状态.2例未获植入的患儿1例发生移植后再生障碍性贫血,1例死于严重感染.结论 UCBT是目前β-地贫最有效的治疗手段.     

无关脐血移植治疗儿童高危急性白血病临床研究

目的　探讨无关脐血移植 (UD UCBT)治疗儿童高危急性白血病的疗效及合并症。方法　采用UD UCBT治疗儿童高危急性白血病 5例 ,其中急性淋巴细胞白血病 (ALL) 2例 ,急性混合性白血病 (HAL) 1例 ,慢性粒细胞白血病 (CML)急淋变 1例 ,非霍奇金淋巴瘤 (Ⅳ期 )第 2次完全缓解 (CR2 ) 1例。人类白细胞相关抗原(HLA) 5 / 6个位点相合 3例 ,6 / 6个位点相合 2例。输入脐血 (UCB)有核细胞数为 (4 9～ 11 78)× 10 7/kg。结果　 5例患儿中 4例获得造血重建。白细胞恢复至 1 0× 10 9/L以上所需时间为 13～ 18d ,与异基因骨髓移植无明显差别 ;但血小板恢复延迟 ,恢复至 2 0× 10 9/L以上所需时间为 4 5～ 6 0d。 4例获得造血重建患儿中 ,2例发生Ⅰ度急性移植物抗宿主病 (aGVHD) ,Ⅱ度和Ⅲ度aGVHD各 1例。aGVHD出现较早 (在脐血输注后 4～ 10d)。但增加环孢素A(CsA)剂量 ,加用甲基泼尼松龙治疗 ,aGVHD容易控制。结论　UD UCBT可有效重建造血 ,但血小板恢复延迟。严重aGVHD的发生与HLA不相合位点数目无关。在疾病的恢复稳定状态进行移植治疗 ,可望获得更好的远期疗效。     

单倍体造血干细胞移植治疗幼年型粒单核细胞白血病的临床研究

目的探索单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)治疗幼年型粒单核细胞白血病(JMML)的效果。方法回顾性分析2013年12月-2017年12月我科收治的12例JMML患儿进行haplo-HSCT的临床资料。男9例,女3例,平均发病年龄3.4(1.1～5.8)岁。采用haplo-HSCT治疗,观察预处理相关毒性、植入、移植物抗宿主病(GVHD)、移植物排斥、复发、感染及生存情况。结果 12例患儿预处理耐受性可;12例患儿全部获造血重建,中性粒细胞植活中位时间19.5(13～25)d,血小板植活中位时间25(12～129)d;移植后28d进行首次骨髓嵌合率检测:8例完全植入,3例混合植入,1例植入失败;aGVHD总发生率92%(11/12),其中Ⅲ～Ⅳ度aGVHD发生率42%(5/12),cGVHD发生率33%(4/12),广泛型cGVHD发生率为0%(0/12);2例并发移植物排斥,其中1例复发,1例经停用免疫抑制处理后再次达完全嵌合;12例患儿中2例复发,复发后1例接受二次移植,1例给予化疗+供者淋巴细胞输注(DLI)后再次达完全缓解。随访至2019年2月,中位随访时间21.5(7～61)个月,2年OS为75%,2年DFS为67%。结论 haplo-HSCT是治疗JMML的有效方法,但植入、GVHD、排斥、复发、感染仍是影响患儿生存的主要因素,优化移植方案及复发后的挽救性治疗方案是提高JMML生存的关键。     

CD40和CD40配体表达在异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病发生中的变化

目的 探讨在血缘相关人类白细胞抗原(HLA)全相合异基因造血干细胞移植(HSCT)中发生移植物抗宿主病(GVHD)患者CD40和CD40配体(CD40L)表达的变化及意义.方法 成功应用血缘相关HLA全相合异基因HSCT治疗19例重型珠蛋白生成障碍性贫血和1例遗传性溶血性贫血.其中脐血移植(UCBT)8例,异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)12例,移植前、后发生急、慢性GVHD时采用流式细胞仪检测和比较其外周血CD40和CD40L的表达.结果 UCBT 3例和allo-PBSCT 4例无急性GVHD,余13例均发生I-Ⅳ度急性GVHD.急性GVHD发生时CD4 CD40L 和CD8 CD40L T细胞表达明显升高,尤其在alloPBSCT者更明显.5例UCBT和12例allo-PBSCT发生慢性GVHD,慢性GVHD发生时患者的CD40L 、CD25 和CD69 在CD4 和CD8 T细胞上的表达增加.CD19 CD40 B细胞的表达在UCBT和allo-PBSCT后l a一直处于低水平.结论 HSCT移植后患者外周血CD40L T细胞的高表达可能与异基因HSCT GVHD的发生过程中的T细胞活化与增殖有关.     

无关血缘脐血移植治疗儿童恶性和非恶性疾病的临床研究

目的 探讨无关血缘脐血移植治疗儿童恶性和非恶性疾病的临床疗效.方法 24例进行非血缘脐血移植的患儿,包括急性淋巴细胞白血病(ALL)8例,急性髓系白血病(AML)4例,幼年慢性粒单细胞白血病(JMML)3例,慢性粒细胞白血病(CML)2例,骨髓增生异常综合征(MDS-RA)2例,急性混合型白血病、石骨症、X连锁肾上腺脑白质营养不良、Ⅵ型黏多糖和慢性肉芽肿各1例.HLA高分辨全相合6例,5个位点相合10例,4个位点相合5例,3个位点相合3例.预处理选用白消安(Bu)/环磷酰胺(CTX)/抗胸腺球蛋白(ATG)或全身放疗(TBI)/CTX/ATG为主方案.6例ALL采用TBI/CTX/ATG,其中2例加鬼臼乙叉苷(VP16),18例采用Bu/CTX/ATG,其中3例JMML加马法兰,1例ALL和1例AML加VP16,3例非恶性疾病加塞替哌.于0 d回输脐血有核细胞中位数为5.26(2.26～13.3)×107/kg,CD34细胞中位数为2.86(0.79～9.8)×105/kg.预防急性移植物抗宿主病(aGVHD)采用环孢素A和甲基泼尼松龙(MP)或骁悉,出现Ⅲ～Ⅳ度aGVHD者,加用CD25单抗.结果 脐血干细胞粒系植入率为91.7%(22/24),1例ALL未植入,1例CML于+130 d排斥;血小板植入率为83.3%(20/24),中性粒细胞≥0.5×109/L中位天数+15(+13～+28)d;血小板≥20×109/L中位天数+38(+25～+100)d.7例出现Ⅰ～Ⅱ度aGVHD;1例出现Ⅲ度aGVHD,给予MP均控制;2例出现Ⅳ度aGVHD,给予MP及CD25单抗后未控制.随访中位时间28(9～96)个月,均未发生慢性GVHD(cGVHD).现存活14例血型均转为供者型;死亡10例,其中原发病复发2例(急变期CML和婴儿型ALL各1例),Ⅳ度aGVHD合并感染2例,6例感染(CMV间质性肺炎4例,霉菌性肺炎2例).结论 无关血缘脐血是快速的造血干细胞来源之一,为恶性疾病患儿争取了治疗时间;因其cGVHD发生率低,对非恶性疾病患儿的治疗更具优势.     

亲代外周血造血干细胞移植成功治愈重型β-地中海贫血1例

目的　研究了亲代供者外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血(简称地贫)的相关问题。方法　改进了预处理方案:采用生理反馈机制,即在预处理前进行了高频输注红细胞悬液,使Hb达13 0g/L以上,同时口服羟基脲抑制造血使术前地贫骨髓的富细胞性变成贫细胞性,使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)加强对宿主淋巴细胞的攻击力度,结合使用马利兰、氟达拉宾和环磷酰胺。预处理后输异基因外周血干细胞3次。三次输入MNC分别为3 5×10 9/kg ,4 8×10 8/kg及6 2×10 7/kg。结果　移植过程中出现Ⅱ°皮肤GVHD、出血性膀胱炎、霉菌感染等并发症,均得到有效控制。+ 16d(移植后为+ )外周血等位基因PCR -STR检测13位点证实10个不相同位点均转为供体型(供受者本身有三个位点相同) ,完全植入。并于移植后+ 70d复查证实仍为完全植入状态。目前患儿移植后已5月余,无cGVHD表现。已五个月未输血制品,白细胞正常,血小板维持在90G/L ,血红蛋白维持在110g/L。结论　亲代所供HLA一个亚型不相合的外周血造血干细胞移植治疗重症β-地中海贫血是简单、可行的     

Blue blood

In a world of increasing immigration of a diverse range of nationalities, hereditary hemoglobin variants will be increasingly encountered, and should be considered in infants and children presenting with low saturations. We present a case report of an infant presenting with low oxygen saturations, who was extensively investigated before the correct diagnosis became apparent. Initial haemoglobin electrophoresis was normal, but subsequently abnormal on repeat testing. With further screening, a number of affected family members have since been identified.     

Peripheral circulation in the newborn: Interaction of peripheral blood flow,blood pressure,blood volume,and blood viscosity

Peripheral blood flow and systolic blood pressure (strain-gauge plethysmograph), blood volume (Evans blue) and whole blood viscosity (cone-plate viscometer) have been measured in 66 premature and full-term infants 6 to 144h of age. Blood flow and blood volume were moderately decreased in the infants with respiratory distress. Highly significant (P<0.001) correlations were found betwen blood flow and blood volume (r=0.77), blood pressure and blood volume (r=0.50), peripheral resistance and blood volume (r=-0.44), blood flow and blood pressure (r=0.50), blood flow and peripheral resistance (r=-0.67), peripheral resistance and blood viscosity (r=0.45), and blood viscosity and haematocrit (r=0.86). There was no correlation between peripheral blood flow and blood viscosity. However, at given blood volume, peripheral blood flow decreased with increasing blood viscosity. These results indicate that in newborn infants peripheral blood flow, blood pressure and peripheral resistance are influenced by blood volume, but also depend on blood viscosity.Supported by Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 147)     

Short-term effects of blood transfusion on blood volume and resting peripheral blood flow in preterm infants

The effects of blood transfusion on cardiac output and blood pressure are variable, but resting peripheral blood flow (RPBF) may be a sensitive indicator of changes in blood volume. The purpose of this investigation was to study the effects of red cell transfusion on blood volume (Evans blue), blood pressure, RPBF in the leg (strain-gauge plethysmography) and blood viscosity (cone-plate viscometer) in preterm infants during the first week after birth. Fourteen infants with mean ± SD birth weight of 1658 ± 429 g, gestational age 33 ± 3 weeks and postnatal age 64 ± 40 h received 18 ±4 ml/kg of packed red cells (red cells 11±2 ml/kg, plasma 7± 1 ml/kg) because their hematocrit was less than 0.45 l/l. Mean blood volume before transfusion was 88±15 ml/kg. The increase in blood volume (9 ±4 ml/kg) measured 4 to 6 h after transfusion was smaller than the transfused volume (18 ± 4 ml/kg), due to a shift of plasma to the extravascular space. The plasma shift increased with increasing pretransfusion blood volume ( r = 0.70; p = 0.007). Red cell transfusion caused an increase in RPBF by 25% ( p <0.01), whereas systolic blood pressure (BP) increased by only 12%. Peripheral resistance (R = BP/RPBF) decreased by 9% (p<0.01). Blood viscosity (±) increased by 21'% ( p <0.001) and vascular hindrance (R/±) decreased by 24% ( p < 0.001), indicating vasodilatation of limb arteries. The increase in RPBF and the decrease in hindrance were particularly pronounced in infants with high pretransfusion blood volume. We conclude that the increase in blood volume after transfusion is not proportional to the transfused volume and that RPBF increases more than systolic blood pressure with increasing blood volume. The increase in RPBF can be explained by vasodilatation of limb arteries and by increased blood pressure.