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相似文献
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1.
人肺腺癌多药耐药细胞系的建立   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:体外建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法:以泰素为诱导药,人肺腺癌细胞系SPC—Al为诱导对象,逐步增加泰素浓度冲击,以一定浓度的泰素维持培养共计24周后,光镜观察细胞形态,用MTS方法进行细胞耐药检测。结果:SPC—Al/TAX形态不规则,对阿霉素、长春地辛、足叶乙甙、顺铂、5—氟脲嘧啶、泰素(紫杉酵)六种抗癌药物有不同程度的耐药性。结论:建立了相对稳定多药耐药细胞系SPC—Al/TAX,用于研究其多药耐药性的机制及逆转等下游实验。  相似文献   

2.
人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及其生物学特征   总被引:14,自引:2,他引:12  
目的 建立人肺腺癌多药耐药细胞系。方法 以顺铂为诱导药物,人肺腺癌细胞系SPC-A-1为诱导对象,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法,诱导建立人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP;MTT法测定药物敏感性,透射和扫描电镜观察形态变化,常规染色体检测分析染色体变化。结果 用192d建成人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A-1/CDDP,它对顺铂的耐药指数为11.2,对顺铂、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、长春新碱和足叶乙甙等药物有不同程度的耐药性,但对羧基喜树碱无耐药性,电镜观察可见SPC0-A-1/CDDP细胞胞核不规则,较大,有丰富的微绒毛。结论 本研究建立了稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系(SPC-A-1/CDDP),可应用于下游实验。  相似文献   

3.
宋宗昌  胡义德  黄虎 《四川医学》2008,29(4):382-384
目的 探讨多药耐药性与肿瘤侧群细胞之间的关系.方法 以小剂量阿霉素(ADM)浓度梯度递增的方法诱导人肺腺癌A549细胞系,12周后观察细胞形态变化,用MTT法进行细胞药物敏感性检测,Hoechst33342/PI染色测定侧群细胞(SP细胞)比例.结果 A549/ADM细胞以长梭形为主,胞体增大,伪足增多,对阿霉素、顺铂、长春新碱、足叶乙甙、紫杉醇5种药物的耐药指数分别为9.588、6.348、1.736、11.213、4.333,SP细胞比例增加10倍.结论 肺腺癌A549细胞多药耐药性与侧群细胞比例增加有关.  相似文献   

4.
目的通过顺铂(cDDP)浓度递增法建立鼻咽癌耐药的细胞株CNE2/cDDP,并研究其耐药性变化。方法采用cDDP浓度递增法建立鼻咽癌顺铂耐药细胞系CNE2/cDDP,倒置显微镜进行形态学观察,MTT检测CNE2/cDDP细胞系对不同化疗药物的耐药性。结果MTT研究发现在不同药物(顺铂、长春新碱、卡铂、紫杉醇、5-FU)作用下,CNE2/cDDP较CNE2的IC50值及耐药指数均有明显的增加,CNE2/cDDP细胞对顺铂的耐药性最强,增加到200.6倍,对5-Fu的耐药性最差,增加到2.8倍;耐药细胞株CNE2/cDDP较非耐药细胞株CNE2生长速度减慢,其细胞倍增时间由18h增加到24h;CNE2/cDDP细胞体积较CNE2为小,常呈克隆聚集现象。结论CNE2/cDDP具有多药耐药性,是一个理想的用于鼻咽癌的多药耐药研究的细胞系。  相似文献   

5.
多药耐药细胞系A549/ADM的建立及部分特性   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的建立多药耐药细胞系A549/ADM和初步探讨人肺腺癌细胞多药耐药的发生。方法对肺腺癌细胞A549采用持续低浓度和逐渐增加阿霉素浓度间歇诱导,建立多药耐药细胞系;使用流式细胞仪器分别检测敏感细胞系和耐药系的P-gp和MRP的表达;采用MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度。结果与母细胞系相比,耐药细胞系A549/ADM对ADM的耐药程度增加了14.29倍,对VCR、DDP、VP-16均有不同程度的耐药,对5-FU无耐药性;耐药细胞系A549/ADM表面P-GP、MRP表达分别为74.8%和61.2%(P<0.01)。结论A549/ADM对多种常用肿瘤化疗药物表现有不同程度的耐药,其耐药性可能与P-GR和MRP高表达有关。  相似文献   

6.
目的探讨MicroRNA-98(miR-98)对肺腺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA(miRNA)芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549/DDP细胞:M.rr检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549/DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR.98的A549/DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549/DDP对顺铂的药物敏感性。  相似文献   

7.
目的建立肺腺癌氯氨顺铂诱导耐药细胞株,分析耐药细胞株生物学特性及染色体核型,为肺腺癌的治疗提供实验依据.方法采用氯氨顺铂(cis-diaminodichloroplatin, CDDP)大剂量冲击 逐步诱导法建立肺腺癌耐药细胞株A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP,MTT法检测细胞耐药指数,生物发光法测定细胞能量代谢,流式细胞仪测试细胞周期,染色体G显带技术和光谱核型分析(spectral karyotyping, SKY)技术分析染色体变化. 结果 MTT检测结果显示,A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP耐药指数为 14.0 和 12.0,其ATP、ADP、AMP含量较A549和SPC-A-1显著降低,细胞周期无明显变化.G显带结果表明A549/CDDP和SPC-A-1/CDDP染色体均为亚三倍体,SKY分析见两株耐药细胞均出现数条衍生染色体.结论 CDDP可以成功诱导肺腺癌耐药细胞株,衍生染色体,包括der(21)t(21;22)等可能与肺腺癌耐药有关.  相似文献   

8.
川芎嗪逆转肺癌细胞株多药耐药性的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的探讨中药川芎嗪(TMP)逆转肺腺癌SPCA-1细胞株耐药性的作用.方法人肺腺癌SPCA-1细胞株,以阿霉素诱导耐药至终浓度为0.4μg/ml,MTT比色法测定TMP对耐药细胞的耐药性逆转作用.结果100mg/L和320mg/L TMP对细胞的抑制率均小于5%,两者无显著差异.100mg/LTMP加丝裂霉素(MMC)组与相应浓度MMC组比较,细胞抑制率有显著性差异(P<0.05).加入320mg/L TMP的阿霉素(ADM)、长春地辛(VDS)、MMC组与相应浓度各药物组比较,其细胞抑制率均有显著性差异(P<0.05),其中1PPC VDS+TMP、1PPC MMC+TMP组与相应药物组比较,差异非常显著(P<0.01).顺铂(C-DDP)加TMP组与相应浓度C-DDP组比较,细胞抑制率均无显著性差异(P>0.05).结论无明显细胞毒浓度的TMP可显著逆转SPCA-1人肺腺癌细胞株对ADM、VDS、MMC的耐药性,但对CDDP介导的耐药无影响.  相似文献   

9.
目的探讨中药川芎嗪(TMP)逆转肺腺癌SPCA-1细胞株耐药性的作用.方法人肺腺癌SPCA-1细胞株,以阿霉素诱导耐药至终浓度为0.4μg/ml,MTT比色法测定TMP对耐药细胞的耐药性逆转作用.结果100mg/L和320mg/L TMP对细胞的抑制率均小于5%,两者无显著差异.100mg/LTMP加丝裂霉素(MMC)组与相应浓度MMC组比较,细胞抑制率有显著性差异(P<0.05).加入320mg/L TMP的阿霉素(ADM)、长春地辛(VDS)、MMC组与相应浓度各药物组比较,其细胞抑制率均有显著性差异(P<0.05),其中1PPC VDS+TMP、1PPC MMC+TMP组与相应药物组比较,差异非常显著(P<0.01).顺铂(C-DDP)加TMP组与相应浓度C-DDP组比较,细胞抑制率均无显著性差异(P>0.05).结论无明显细胞毒浓度的TMP可显著逆转SPCA-1人肺腺癌细胞株对ADM、VDS、MMC的耐药性,但对CDDP介导的耐药无影响.  相似文献   

10.
C-erbB-2基因在人肺腺癌细胞表达与药物治疗关系的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察紫杉醇、阿霉素和α-干扰素对不同C-erbB-2表达水平的人肺腺癌细胞系增殖能力的影响,探讨C-erbB-2基因和抗癌药物敏感性的关系。方法采用免疫组化方法检测C-erbB-2基因在肺癌细胞株(SPC-A-1、LTEP-α-2和A549)中的表达,观察紫杉醇、阿霉素及α-干扰素干预前后3株肺腺癌细胞系中GerbB-2基因表达率的变化;采用四氮唑盐(MTT)比色法检测抗癌药物对人肺腺癌细胞体外增殖能力的影响,计算相应IC50值;应用集落形成试验检测药物对肺腺癌细胞集落形成能力的影响;结合流式细胞术定量分析药物干预前后各细胞系DNA含量的变化。结果 SPC-A-1、LTED-α-2和A5493株肺腺癌细胞系均有不同水平C-erbB-2基因的表达。紫杉醇对低表达C-erbB-2基因的SPC-A-1肺腺癌细胞系的抗增殖作用明显强于高表达C-erbB-2基因的A549和ITEP-α-2肺腺癌细胞系,阿霉素对具有不同C-erbB-2表达水平的3株人肺腺癌细胞系均较敏感,α-干扰素对3株肺腺癌细胞均有-定的抑制作用,但较弱。在SPC-A-1细胞株应用阿霉素和紫杉醇后,LTEP-α-2细胞株应用阿霉素后,其C-erbB-2基因的表达率明显减低,但A549肺腺癌细胞系C-erbB-2表达率的变化无统计学差异。阿霉素和紫杉醇治疗后SPC-A-1和LTEP-α-2肺腺癌细胞系的G2-M期百分率明显升高,而A549肺腺癌细胞系表现为S期的百分率升高明显,α-干扰素对3株肺腺癌细胞系的细胞周期影响不大。结论化疗耐药可能与C-erbB-2基因的高表达有关,C-erbB-2基因的检测可作为非小细胞肺癌患者选择个体化治疗方案的指标。  相似文献   

11.
维拉帕米逆转肺癌细胞株多药耐药性的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
体外实验研究钙通道阻滞剂维拉帕米对多药耐药性肺癌细胞株SPC—A1/ADM耐药性的逆转作用。结果显示,无细胞毒作用剂量的维拉帕米可逆转SPC-A1/ADM细胞对长春新碱、阿霉素的耐药性,而对顺铂的耐药性无明显影响,该逆转作用有药物浓度依赖性。表明维拉帕米可望作为一种化学增敏剂应用于肺癌的治疗。  相似文献   

12.
目的:观察DNA依赖的蛋白激酶的催化亚单位(DNA-PKcs)对多药耐药的恶性胶质瘤细胞化疗抗性的影响,探讨其介导化疗抗性的分子机制。方法:采用siRNA技术构建DNA-PKcs基因表达沉默的人胶质瘤U251细胞株;采用Western blotting法检测U251细胞(U251细胞)、多柔比星(ADM)耐药的U251细胞(U251/ADM细胞)和DNA-PKcs基因表达沉默的多柔比星耐药的U251细胞(U251/ADM/siDNA-PKcs细胞)中DNA-PKcs蛋白表达水平;采用CCK8法检测3组细胞增殖活性;采用Western blotting法检测3组细胞中多药耐药性1(MDR1)、报告基因质粒pNF-κB/p6、总Akt蛋白、pAkt/T308和pAKT/S473蛋白表达水平。结果:U251/ADM细胞DNA-PKcs蛋白表达水平明显高于U251细胞和U251/ADM/siDNA-PKcs细胞(P<0.01);ADM、紫杉醇(PTX)和吉西他滨(GEM)对U251/ADM/siDNA-PKcs细胞的半数抑制浓度(IC50)值较U251/ADM细胞明显降低(P<0.01);U251/ADM/SIDNA-PKcs细胞中pAKT/S473、pNF-κB/p65和MDR1蛋白表达水平均明显低于U251/ADM细胞(P<0.05),而两者总Akt和pAkt/T308蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DNA-PKcs能明显增强多重耐药的恶性胶质瘤细胞化疗抗性,其作用机制与pAKT/S473和pNF-κB/p65表达上调,诱导MDR1表达有关。  相似文献   

13.
为研究人膀胱癌细胞株耐药机制,应用阿霉素(ADM)、足叶乙甙(VP-16)低浓度持续递增法,在体外持续培养10个月,逐步诱导人膀胱癌细胞系BIU-87,获得具有多重抗药性的BIU-87/A、BIU-87/V细胞。通过检测抗癌药物50%抑制率剂量,BIU-87/A、BIU-87/V细胞分别对ADM、VP-16的耐药程度较亲本细胞提高57.42倍、5.44倍。两种耐药株显示了相似的耐药谱,均对ADM、VP-16、长春新碱和阿糖胞苷等药物产生耐药性,且随着培养时间延长,耐药性增强,但对丝裂霉素C、噻替哌和顺铂仍保持敏感性。结果表明BIU-87/A、BIU-87/V细胞具有多重抗药性(MDR)表型,为不同药物诱导人膀胱移行细胞癌MDR机制和筛选抗药性逆转剂提供理想模型。  相似文献   

14.
目的建立人结肠癌多药耐药细胞系,并研究其生物学特性。方法以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为诱导药物,LS174T细胞株为研究对象,利用浓度递增诱导法,建立LS174T/5-Fu多药耐药细胞系。MTT法测定药物敏感性,光镜、细胞计数法、流式细胞仪及RT-PCR等方法观察其生物学特征及多药耐药相关基因(MRP)mRNA表达。结果历时6个月成功建立人结肠癌多药耐药细胞系LS174T/5-Fu,对5-Fu耐药指数为40.24,且与羟基喜树碱、顺铂、依托泊苷和脱氧氟尿苷等多种化疗药物有不同程度的交叉耐药性;细胞形态发生改变;倍增时间较亲代细胞延长;细胞周期发现其G1和S期细胞增加,G2期细胞减少;MRP mRNA表达增高。结论LS174T/5-Fu细胞是一种可靠的人结肠癌多药耐药细胞系,该细胞系的建立为深入研究5-Fu诱导人结肠癌多药耐药的发生机制奠定了基础。  相似文献   

15.
目的 探讨肺癌肿瘤干细胞分选及生物学特性的研究方法。方法 采用免疫磁珠分选经盐酸阿霉素(ADM)诱导的人肺腺癌SPC-A-1(SPC-A-1/ADM)细胞系中的ABCG2 +和ABCG2 -细胞,流式细胞术和裸鼠体内移植针对ABCG2 +和ABCG2 -细胞体内的成瘤率进行测定分析。结果 SPC-A-1细胞中的荧光强度平均为(1.001±0.014)×10 2,明显低于SPC-A-1/ADM细胞的(10.257±0.023)×10 2(t=17.320,P=0.001)。SPC-A-1细胞ABCG2/BCRP-FITC处理组与SPC-A-1细胞对照组(t=5.269,P=0.021)和SPC-A-1细胞同型对照组(t=6.869,P=0.012)间差异有统计学意义;SPC-A-1/ADM细胞对照组与SPC-A-1/ADM细胞同型对照组间差异有统计学意义(t=8.112,P=0.015)。SPC-A-1/ADM 细胞 ABCG2/BCRP-FITC 处理组阳性率为9.8%,是SPC-A-1细胞组的39.84倍。SPC-A-1/ADM 细胞 ABCG2/BCRP-FITC 处理组与SPC-A-1/ADM细胞组(t=9.120,P=0.005)和SPC-A-1/ADM细胞同型组(t=8.257,P=0.006)间差异有统计学意义。B 群细胞阳性率是 A 群细胞的 684 倍,差异有统计学意义(t=11.235,P=0.001),且 B 群细胞的荧光强度较强。接种SPC-A-1 细胞、A群细胞和B 群细胞的裸鼠平均成瘤体积分别为(6.96±1.82)、(6.70±2.55)和(9.17±2.41)mm 3,以接种B群细胞组最高,但3组间差异无统计学意义(F=2.362,P=0.086)。接种B群细胞组的成瘤率为75.00%,明显高于SPC-A-1 细胞组和A 群细胞组(F =19.780,P=0.002)。结论 ABCG2抗体与免疫磁珠分选法结合可以从人肺腺癌 SPC-A-1/ADM 细胞系内分离ABCG2 +细胞,其在裸鼠体内成瘤情况良好,可用于肺癌肿瘤干细胞的分选及生物学特性研究。  相似文献   

16.
目的:研究维生素K2对人肺癌SPC-A-1细胞株的细胞毒作用及其与顺铂(Cisplatin)联合应用的相互作用.方法:MTT比色法观察维生素K2单独及与顺铂联合应用在体外对肺癌SPC-A-1细胞株的抑制作用,利用中效方程分析两药协同效应.结果:维生素K2与顺铂单用及合用时随着药物浓度增加其效应肿瘤抑制率(fa)也增加,两药合用时的中效浓度小于两药单用时的中效浓度之和,且两药无排斥性.随着维生素K2浓度的增加,其fa逐渐降低,合用指数(CI)逐渐降低,当与浓度为0.01μg/ml的顺铂联合应用,维生素K2浓度>18.57μg/ml时,两药即可产生协同作用.结论:维生素K2与顺铂联合应用优于单药对SPC-A-1细胞株的抑制作用.  相似文献   

17.
目的: 探索快速建立肺癌耐药细胞模型的新方法,并探讨肺癌耐药和干细胞的相关性。方法: 应用无血清培养联合药物筛选法建立肺腺癌细胞耐药株A549/ADM;MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、ABCB1和ABCG2的表达水平及细胞内多柔比星的浓度;细胞免疫荧光及流式细胞仪通过特异性表面抗原标记法(CD133)检测肿瘤干细胞含量。裸鼠皮下种植瘤试验评估A549/ADM的致瘤性。结果: A549细胞经无血清培养可见细胞球形成;A549/ADM细胞对多柔比星、长春新碱、紫杉醇均产生了耐药,其耐药指数分别为A549的13.167,12.86,3.4倍;与亲代A549相比, 耐药株A549/ADM S期细胞比例由(45.76±1.41)% 降低至(23.33±1.32)%,细胞凋亡百分率由(58.23±0.82)% 减少至(16.49±0.77)%;耐药株A549/ADM中ABCB1和ABCG2的表达水平明显增高(P<0.05),且细胞内多柔比星浓度明显低于A549细胞; CD133细胞在A549/ADM和A549中的比例分别为(6.2±0.7)%和(1.9±0.2)%(P<0.05),免疫荧光检测A549/ADM细胞CD133表达水平较A549细胞高;A549/ADM具有高致瘤性。结论: 无血清培养联合多柔比星诱导能高效富集肺癌干细胞,成功建立了人肺腺癌A549/ADM多药耐药细胞模型。  相似文献   

18.
目的 通过测定艾迪及艾迪联合抗癌药物ADM、DDP、5—Fu、MMC对肝磁细胞系7721细胞的体外药物敏感性试验,为肝癌化疗、介入治疗用药提供参考依据。方法 用24孔板培养肝癌细胞系7721细胞,观察细胞在单药及联合用药时的生长、抑制和集落形成情况,以判定药物的敏感性。结果 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用,引起癌细胞G0/G1期阻滞,艾迪与MMC和ADM有协同作用,其中以艾迪和ADM联合应用时作用最强。结论 艾迪对肝癌细胞系7721细胞有抑制作用,剂量增加与疗效提高有较大关系;艾迪与ADM和MMC联合应用,有协同作用。  相似文献   

19.
目的:研究多药耐药相关蛋白-2(MRP-2)与白血病细胞耐药的关系,并探讨其在白血病多药耐药中的意义。方法:应用RT-PCR方法检测白血病细胞株K562与耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA的差异表达,然后将MRP-2反义及正义寡核苷酸片段分别用脂质体转染至耐药细胞株K562/A02,采用MTT法、流式细胞术及RT-PCR法检测转染后细胞内阿霉素的荧光强度、耐药指数及MRP-2 mRNA的表达情况。结果:耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA表达水平明显高于白血病细胞株K562(P<0.05)。MRP-2反义寡核苷酸片段转染后耐药细胞株K562/A02细胞内的阿霉素浓度升高,耐药指数较未转染细胞明显降低(P<0.05);转染后耐药细胞株K562/A02细胞MRP-2 mRNA表达水平较未转染细胞下降了67.5%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:MRP-2的高表达导致白血病耐药细胞内化疗药物浓度降低,可能是其导致白血病多药耐药的机制之一。  相似文献   

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