干扰素-γ对血管紧张素II诱导的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 (VSMCs)增殖的作用及干扰素 -γ对其增殖的影响。方法　幼龄Wistar大鼠 (4周龄 ) 1 2只 ,分成对照组、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )组、干扰素 -γ组和干扰素 -γ +AngⅡ组 ,采用组织块贴壁法培养胸主动脉平滑肌细胞 ,分别测定3H -胸腺嘧啶 (3H -TdR)、3H -亮氨酸 (3H -Leu)的掺入量和细胞周期中各期细胞构成比。结果　AngⅡ (0 1 μmol/L)作用 2 4h能使VSMCs的3H -TdR与3H -Leu的掺入量比对照组增多 ,且S期和G2 /M期细胞增多 ,细胞增殖指数增大 ;干扰素 -γ组无以上作用。与AngⅡ组相比 ,干扰素 -γ(50 0U/mL) +AngⅡ组3H -TdR、3H -Leu的掺入量明显减少 ,S期细胞构成比和细胞增殖指数亦明显减少。结论　AngⅡ对血管平滑肌细胞有促增殖作用 ,这种促增殖作用能被干扰素 -γ所拮抗     

恒磁场对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及机制

目的：研究恒磁场对血管紧张素Ⅱ（ansiotensin，AngⅡ）诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖及胞浆内游离钙离子浓度的影响。方法：建立AngⅡ诱导的人脐VSMC增殖模型，5mT恒磁场垂直作用于VSMC，用四唑盐比色法和^3H-TdR掺入法检测增殖数量，流式细胞仪分析细胞周期，激光共聚焦显微镜技术观察恒磁场对VSMC胞浆游离钙离子浓度的影响。结果：5mT的恒磁场能逆转AngⅡ所致的人脐动脉VSMC数量增多，阻止VSMC由静止期（Go／G1期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2／M期）。5mT的恒磁场作用10-50min使胞浆内钙离子浓度明显下降。结论：5mT的恒磁场能抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖，对胞浆内的钙离子浓度有明显减少作用，适宜强度的恒磁场抑制VSMC增殖，是一种具有应用前景的治疗再狭窄的方法。[著者文摘] 摘要 目的:研究恒磁场对血管紧张素Ⅱ（angiotensin,AngⅡ）诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖及胞浆内游离钙离子浓度的影响。方法:建立AngⅡ诱导的人脐VSMC增殖模型，5mT恒磁场垂直作用于VSMC，用四唑盐比色法和3H-TdR掺入法检测增殖数量，流式细胞仪分析细胞周期，激光共聚焦显微镜技术观察恒磁场对VSMC胞浆游离钙浓度的影响。结果:5mT的恒磁场能逆转AngⅡ所致的人脐VSMC数量增多，阻止VSMC由静止期 （G0/G期）进入DNA合成期（S期）和有丝分裂期（G2/M期）。5mT的恒磁场作用10-50min使胞浆内Ca2+ 较对照组明显下降。结论:5mT的恒磁场抑制AngⅡ诱导的VSMC的增殖，对胞浆内的Ca2+浓度有明显减少作用，适宜强度的恒磁场抑制VSMC增殖，是一种具有应用前景的治疗再狭窄的方法。     

心血管疾病发病机制研究：细胞外信号调节激酶在血管紧张素Ⅱ引起血管平滑肌细胞增殖反应中的调节作用

目的：研究细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERKs)信号途径在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)介导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)促增殖等反应中的作用及其可能的调控机制。方法：选用6周龄230g清洁级SD大鼠2只：本实验在长海医院中心实验室完成。实验依随机数字表分为正常对照组、AngⅡ诱导组、PD098059预处理组、U0126预处理组。每组均为3孔(n=3)。实验以通过，H-胸苷(3H-TdR)掺入率与3H-亮氨酸掺入率分别反映VSMC的DNA代谢与蛋白质合成代谢速率；并通过给予MAPK激酶特异性抑制剂PD098059及ERKs抑制剂UOl26预处理。观察它们对细胞蛋白合成和DNA代谢及细胞增殖的影响。结果：①AngⅡ(1&;#215;10-7^mmol／L)处理30 min VSMC 3H-胸苷掺入率和3H-亮氨酸掺入率均明显增高(增加207．2％，P&;lt;0．01)；②AngⅡ增高3H-胸苷掺入的作用可明显被PD098059所抑制(增高抑制率52．3％。P&;lt;0．01)和完全被U0126所抑制(增高抑制率91．7％，P&;lt;0．01)；③AngⅡ增高3H-亮氨酸掺入的作用可部分被PD098059所抑制(增加抑制率29．3％，P&;lt;0．05)和明显被U0126所抑制(增加抑制率64．6％，P&;lt;0．01)。结论：ERKs激活在血管紧张素Ⅱ导致VSMC增殖反应中具有重要作用。并可通过ERKs信号途径的特异性抑制剂的抑制效应，影响血管平滑肌细胞的增殖效应。     

心血管疾病发病机制研究:细胞外信号调节激酶在血管紧张素Ⅱ引起血管平滑肌细胞增殖反应中的调节作用

目的:研究细胞外信号调节激酶(extracellularsignal-regulatedkinase,ERKs)信号途径在血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)介导的大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)促增殖等反应中的作用及其可能的调控机制。方法:选用6周龄230g清洁级SD大鼠2只:本实验在长海医院中心实验室完成。实验依随机数字表分为正常对照组、AngⅡ诱导组、PD098059预处理组、U0126预处理组。每组均为3孔(n=3)。实验以通过3H-胸苷(3H-TdR)掺入率与3H-亮氨酸掺入率分别反映VSMC的DNA代谢与蛋白质合成代谢速率;并通过给予MAPK激酶特异性抑制剂PD098059及ERKs抑制剂UO126预处理,观察它们对细胞蛋白合成和DNA代谢及细胞增殖的影响。结果:①AngⅡ(1×10-7mmol/L)处理30minVSMC3H-胸苷掺入率和3H-亮氨酸掺入率均明显增高(增加207.2%,P<0.01);②AngⅡ增高3H-胸苷掺入的作用可明显被PD098059所抑制(增高抑制率52.3%,P<0.01)和完全被UO126所抑制(增高抑制率91.7%,P<0.01);③AngⅡ增高3H-亮氨酸掺入的作用可部分被PD098059所抑制(增加抑制率29.3%,P<0.05)和明显被UO126所抑制(增加抑制率64.6%,P<0.01)。结论:ERKs激活在血管紧张素Ⅱ导致VSMC增殖反应中具有重要作用,并可通过ERKs信号途径的特异性抑制剂的抑制效应,影响血管平     

线粒体介导血管紧张素Ⅱ诱导NOX1基因表达的增加

目的：探讨在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）NOX1基因表达增加中线粒体所起的作用。方法：体外培养大鼠主动脉VSMCs,用线粒体呼吸链的抑制剂阻断线粒体的作用,用荧光实时定量PCR检测NOX1基因表达的量。结果：AngⅡ能够诱导NOX1基因的表达增加,线粒体呼吸链的抑制剂能够抑制上述这一作用。结论：在大鼠的VSMCs中,AngⅡ诱导NOX1的增加通过线粒体呼吸的作用。     

血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖过程中呋喃二氢吡啶二羧酸酯的抑制作用

背景血管平滑肌细胞是血管壁的主要细胞成份之一,在动脉粥样硬化中所起的病理作用已得到证实和认同.如何抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移而起到预防冠心病的作用已成为人们研究的热点问题之一.目的观察呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响.设计以体外培养的兔胸主动脉血管平滑肌细胞为研究对象进行随机对照研究.单位一所军医大学附属医院心脏内科.材料实验于2003-08/2004-06在第四军医大学西京医院心脏内科实验室完成,选用新西兰兔5只,将动物细胞随机分为对照组,血管紧张素Ⅱ组,血管紧张素Ⅱ+吡啶二羧酸酯组.方法高脂喂养新西兰兔,再用球囊损伤其胸主动脉内摸,取胸主动脉分离血管平滑肌细胞进行培养,实验采用培养的兔血管平滑肌细胞,应用3H-TdR掺入法,观察在血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞增殖过程中,呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管平滑肌细胞DNA合成的影响及其时间效应.主要观察指标记录各组细胞3H-TdR掺入的放射强度,显示兔血管平滑肌细胞增殖过程中DNA的合成情况.结果血管紧张素Ⅱ可促进兔血管平滑肌细胞DNA的合成,36 h时细胞DNA的合成达到高峰,与对照组相比差异有显著性意义(358.00±49.01 vs 272.42±54.96,P＜0.01).呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现出明显的浓度依赖关系,即随着呋喃二氢吡啶二羧酸酯浓度的升高其血管平滑肌细胞增殖的抑制率也逐渐增加,36 h时78.40 μmol/L的呋喃二氢吡啶二羧酸酯与0.08 μmol/L的呋喃二氢吡啶二羧酸酯相比其抑制作用明显增强(281.50±15.28 vs 349.25±32.10,P＜0.05).结论呋喃二氢吡啶二羧酸酯可明显抑制血管紧张素Ⅱ诱导的兔血管平滑肌细胞增殖,并存在一定的量效依赖关系及时间反应性,为动脉粥样硬化的一级康复预防提供了理论依据.     

血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖过程中呋喃二氢吡啶二羧酸酯的抑制作用

背景：血管平滑肌细胞是血管壁的主要细胞成份之一，在动脉粥样硬化中所起的病理作用已得到证实和认同。如何抑制血管平滑肌细胞的增殖和迁移而起到预防冠心病的作用已成为人们研究的热点问题之一。目的：观察呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的影响。设计：以体外培养的兔胸主动脉血管平滑肌细胞为研究对象进行随机对照研究。单位：一所军医大学附属医院心脏内科。材料：实验于2003-08／2004-06在第四军医大学西京医院心脏内科实验室完成，选用新西兰兔5只，将动物细胞随机分为对照组，血管紧张素Ⅱ组，血管紧张素Ⅱ+吡啶二羧酸酯组。方法：高脂喂养新西兰兔，再用球囊损伤其胸主动脉内摸，取胸主动脉分离血管平滑肌细胞进行培养，实验采用培养的兔血管平滑肌细胞，应用3H-TdR掺入法，观察在血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞增殖过程中，呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管平滑肌细胞DNA合成的影响及其时间效应。主要观察指标：记录各组细胞3H—TdR掺入的放射强度，显示兔血管平滑肌细胞增殖过程中DNA的合成情况。结果：血管紧张素Ⅱ可促进兔血管平滑肌细胞DNA的合成，36h时细胞DNA的合成达到高峰，与对照组相比差异有显著性意义(358．00&;#177;49．01 vs 272．42&;#177;54．96，P&;lt;0．01)。呋喃二氢吡啶二羧酸酯对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用，并呈现出明显的浓度依赖关系，即随着呋喃二氢吡啶二羧酸酯浓度的升高其血管平滑肌细胞增殖的抑制率也逐渐增加，36h时78．40μmol／L的呋喃二氢吡啶二羧酸酯与0．08μmol／L的呋喃二氢吡啶二羧酸酯相比其抑制作用明显增强(281．50&;#177;15．28 vs 349．25&;#177;32．10，P&;lt;0．05)。结论：呋喃二氢吡啶二羧酸酯可明显抑制血管紧张素Ⅱ诱导的兔血管平滑肌细胞增殖，并存在一定的量效依赖关系及时间反应性，为动脉粥样硬化的一级康复预防提供了理论依据。     

丹参酮ⅡA对AngⅡ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨丹参酮ⅡA（TSN）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响,以寻找药物作用的靶点。方法：分离大鼠胸主动脉中层平滑肌,贴壁法培养平滑肌细胞,建立AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖模型;以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察丹参酮ⅡA对VSMC增殖的影响;用酶促反应定磷法测定钙调神经磷酸酶（CaN）活性;应用免疫细胞化学法观察原癌基因c-fos和c-myc的表达。结果：成功建立AngⅡ诱导的VSMC增殖模型;随着TSN浓度增加VSMC增殖活性呈明显下降趋势（P〈0.05,0.01）;TSN各组随着浓度的增加,VSMC中CaN活性显著下降（P〈0.01）,VSMC中c-fos和c-myc表达水平也显著下降（P〈0.01）。结论：TSN能抑制血管平滑肌细胞的增殖,并呈浓度依赖性。其机制可能与下调VSMC中CaN活性、c-fos及c-myc表达有关。     

血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白对血管平滑肌细胞的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受（AT1受体）体相关蛋白（ATRAP）对AT1受体介导的血管平滑肌增殖和新构建的影响。方法：采用细胞培养和转染，将[，H]胸腺嘧啶掺入测定DNA合成、动物实验和外科程序。结果：[^3H]胸腺嘧啶掺入测定显示，ATRAPcDNA转染的血管平滑肌细胞（VSMCs）与pcDNA转染的VSMCs比较．过度表达的ATRAP明显抑制了AT1受体介导的VSMCs的增生，有时间依赖性。Western blotting结果显示．过量表达的ATRAP中含磷或不合磷的细胞外信号调控激酶（ERK）抗体表达均较对照组增高。组织病理学观察．过量表达的ATRAP明显抑制了AT1受体介导的VSMCs的增生。结论：过度表达的ATRAP明显抑制了AT1受体介导的VSMCs的增生，ATRAP的生长抑制作用可能是通过在VSMCs中的AT1受体介导的细胞外信号调控激酶（ERK）的后期激活。     

15脱氧前列腺素J2对同型半胱氨酸诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨15脱氧前列腺素J2（15d-PGJ2）对同型半胱氨酸（Hcy）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的抑制作用和对细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1/2）的作用。方法：用不同浓度的Hcy和15d-PGh对大鼠VSMCs进行刺激，以^3H-TdR掺入方法观察15d．PGJ2对Hcy诱导大鼠VSMCs增殖的抑制作用，以Western印迹方法分析ERK1/2蛋白表达和ERK1/2磷酸化水平。结果：15d-PGh可明显抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖，但对Hcy诱导的ERK1/2磷酸化无明显作用。结论：15d-PGJ2可能通过MAPK／ERK1/2信号途径的下游步骤抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖。     

肾上腺髓质素N端20肽对血管紧张素Ⅱ刺激血管平滑肌细胞增殖及胶原生成的影响

目的：观察肾上腺髓质素N端20肽对血管紧张素Ⅱ刺激血管平滑肌细胞增殖及胶原生成的影响。 方法：实验于2003-09／2004-09在南方医科大学珠江医院中心实验室进行。①采用组织贴壁法培养大鼠血管平滑肌细胞。②实验分组：空白对照组；1&;#215;10^-9 1&;#215;10^-8 ，1&;#215;10^-7，1&;#215;10^-6mol／L血管紧张素Ⅱ组；1&;#215;10^-9，1&;#215;10^-8，1&;#215;10^-7，1&;#215;10^-6mol／L肾上腺髓质素N端20肽组；1&;#215;10^-7mol／L血管紧张素Ⅱ＋（1&;#215;10^-9，1&;#215;10^-8，1&;#215;10^-7，1&;#215;10^-6mol／L）肾上腺髓质素N端20肽组。③以^3H脯氨酸掺入试验测定血管平滑肌细胞的胶原合成功能，以四氮唑盐法测定细胞增殖情况。分别观察不同浓度肾上腺髓质素N端20肽、血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖及合成胶原的影响。 结果：①肾上腺髓质素N端20肽及血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞的胶原合成功能的作用：肾上腺髓质素N端20肽组的。H脯氨酸掺入率与对照组相比（P〉0．05），差异均无显著性。随着血管紧张素Ⅱ浓度的增高，血管平滑肌细胞的。H脯氨酸掺入率呈递增趋势。血管紧张素H＋肾上腺髓质素N端20肽组的^3H脯氨酸掺入率在血管紧张素H浓度不变的情况下，随着肾上腺髓质素N端20肽浓度的增高，血管平滑肌细胞的^3H脯氨酸掺入率呈递减趋势，各组之间差异有显著意义（P〈0．01）。②肾上腺髓质素N端20肽及血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞增殖的影响：随着肾上腺髓质素N端20肽浓度的增高，四氮唑盐比色值差异无显著性（P均〉0．05）。随着血管紧张素Ⅱ浓度的增高，四氮唑盐比色值增也明显增高，各组间差异有显著性意义（P均〈0．01）。血管紧张素Ⅱ＋肾上腺髓质素N端20肽组中，在血管紧张素Ⅱ浓度不变的情况下，随着肾上腺髓质素N端20肽浓度的增高，四氮唑盐比色值均显著降低（P〈0．01）。 结论：肾上腺髓质素N端20肽对血管紧张素Ⅱ刺激血管平滑肌细胞增生及胶原的生成起明显抑制作用。     

AngⅡ通过ATF-1通路诱导NOX1高表达

目的：探讨激活转录因子（ATF1）在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）中NOX1基因表达增加的作用。方法：体外培养大鼠主动脉VSMCs,用荧光实时定量逆转录PCR（Real-time RT-PCR）检测NOX1基因表达的量,Western Blot检测ATF-1蛋白在AngⅡ的刺激是否引起NOX1基因的高表达并用RNA干扰（RNAi）技术转染VSMCs使ATF-1基因沉默来观察NOX1的表达。结果：AngⅡ能够诱导NOX1基因的表达增加以及增强ATF-1的磷酸化及活性,ATF1基因沉默反过来可抑制AngⅡ诱导的NOX1基因表达的增加。结论：在大鼠的VSMCs中,ATF-1是介导NOX1基因表达的一个必须的转录因子。     

CGRP 在内皮祖细胞抑制 Ang Ⅱ所致 VSM Cs 增殖中的作用

【目的】探讨降钙素基因相关肽（CGRP）在内皮祖细胞（EPCs）抑制血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖过程中的作用。【方法】采用ELISA检测EPCs表达CGRP ,对EPCs条件培养基采取CGRP抗体封闭和CGRP受体阻断后,观察EPCs条件培养基对 AngⅡ诱导的DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率及细胞周期的影响。【方法】EPCs能够表达并分泌高浓度的CGRP;CGRP阻断后,EPCs条件培养基对AngⅡ诱导的VSMCs DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率、细胞周期进程的抑制作用均较对照组明显降低（ P＜0．05）。【结论】EPCs通过旁分泌CGRP抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖。     

小牛血清和血小板源性生长因子对肺动脉平滑肌细胞Na^＋／H^＋交换器活性和细胞增殖的影响

目的：探讨小牛血清和血小板源性生长因子（PDGF）对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na^ /H^ 交换器－1（NHE－1）表达和活性的影响，及其与细胞增殖的关系。方法：体外培养肺动脉平滑肌细胞，10％小牛血清、PDGF－BB作用24小时后检测细胞NHE－1mRNA表达、^22Na摄取量、细胞内pH(pHi)和^3H-TdR掺入量，观察不同浓度NHE－1抑制剂－乙基，异丙基氨氯吡咪（EIPA）对细胞凋亡率的影响。结果：10％小牛血清、PDGF作用后24小时，肺动脉平滑肌细胞中NHE－1mRNA表达、^22Na摄取量明显增加，同时伴有pHi增高和^3H-TdR掺入量增加，以10％小牛血清作用更为显著。随着EIPA浓度增加和作用时间延长，细胞凋亡率明显增高。结论：小牛血清、PDGF等生长因子参与调节肺动脉平滑肌细胞NHE－1表达和激活，使细胞内碱化，可能在细胞增殖中起重要作用。     

血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化中对血管平滑肌细胞调节作用影响机制的研究进展

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)具有生长因子和细胞因子样特性,在动脉粥样硬化(AS)的发生与发展过程中发挥了重要作用.本文着重阐述血管紧张素Ⅱ在动脉粥样硬化斑块形成过程中促血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移、增殖、凋亡、表型转化以及促其表达与分泌多种促炎细胞因子、生长因子、细胞外基质蛋白的作用.     

miR-181a调控血管紧张素Ⅱ诱导骨桥蛋白在血管平滑肌细胞的表达研究

目的明确miRNA-181a在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)中的骨桥蛋白(OPN)的作用及相关机制。方法分离培养出的VSMCs,使用100 nM AngⅡ处理后,检测不同时间点OPN蛋白表达水平的变化,同时利用q PCR检测miR-181a的变化后,将VSMCs分为空白对照组(不做任何处理)、AngⅡ刺激组(加入100 nM AngⅡ诱导)、阴性miRNA+AngⅡ刺激组(转入阴性miRNA并加入100 nM AngⅡ)以及miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组(转入miR-181a模拟剂并加入100 nM AngⅡ)。48 h后Western blotting检测OPN在蛋白水平的变化,并使用Annexin V/PI方式检测凋亡变化、transwell检测迁移的变化;随后VSMCs被分为CON与miR181a inhibitor组,48 h后使用Western blotting检测p53、Bax、p21变化。结果使用100 nM AngⅡ处理后,VSMCs的OPN蛋白表达水平不断上升;使用100 nM AngⅡ处理24 h后,miRNA-181a相对表达量100 n M组显著低于0 nM组; VSMCs在转入miR-181a模拟剂48 h后,miR-181a模拟剂显著高CON组;在空白对照组、AngⅡ刺激组、阴性miRNA+AngⅡ刺激组以及miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组中,相对于阴性对照组,AngⅡ刺激组OPN表达显著上升,而miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组OPN表达显著低于AngⅡ刺激组,略高于阴性对照组;在细胞凋亡中,与AngⅡ刺激组阴性组和miRNA+AngⅡ刺激组相比,miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组Annexin V阳性细胞比率明显减少,说明能够明显抑制细胞凋亡。在细胞迁移中,miR-181a模拟剂+AngⅡ刺激组能够明显抑制细胞迁移。VSMCs在转入miR-181a inhibitor后,相对于CON组,p53、Bax、p21表达均有明显的上升。结论 miR181-a抑制了AngⅡ诱导VSMCs的OPN,同时抑制了AngⅡ诱导的凋亡与增殖,而miR181-a的抑制所诱导的凋亡与p53通路相关。     

白细胞介素4与血管活性多肽对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调节作用

以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察内皮素（ＥＴ）、血管紧张素Ⅱ及白细胞介素４（ＩＬ－４）单独作用和联合作用时对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。结果发现ＩＬ－４能抑制培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的＾３Ｈ－ＴｄＲ的掺入（最低浓度为５ｎｇ／ｍｌ），并存在剂量效应关系，而对正常血压大鼠（ＷＫＹ）的ＶＳＭＣ无影响；但预先以ＥＴ或ＡＧ－Ⅱ刺激ＷＫＹ的ＶＳＭＣ的增殖，则ＩＬ－４表     

蜂胶水提液影响血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖的作用

目的：观察蜂胶水提液对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法：实验于2005-03／2006-04在泰山医学院基础医学研究所完成。组织块法培养人脐动脉平滑肌细胞。取3～5代细胞进行实验。将培养的人脐动脉平滑肌细胞随机分为4组：①对照组：不加任何药物。②模型组：加入100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。③蜂胶组：分别加入50mg／L、100mg／L、200mg,／L的蜂胶水提液预处理2h后，再加入终浓度为100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。④氯沙坦组：加入1．5μmol／L的氯沙坦预处理2h后，再加入终浓度为100nmol／L的血管紧张素Ⅱ。同步化后，按分组分别加入处理药物孵育24h，倒置显微镜下动态观察细胞形态学的变化，同时计数细胞存活率，并用血细胞计数板计数各组细胞。采用流式细胞仪检测细胞周期，并分析细胞不同周期所占比例。采用免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原。计算增殖细胞核抗原阳性细胞百分率。增殖细胞核抗原阳性细胞百分率（％）=增殖细胞核抗原阳性细胞总数／血管平滑肌细胞总数&;#215;100％。结果：①相差倒置显微镜下观察各组细胞加药前后形态学无明显变化，细胞存活率均达95．0％以上。②模型组细胞计数高于对照组和氯沙坦组（P〈0．01），100mg／L和200mg／L蜂胶组低于模型组（P〈0．01）；50mg／L和100mg／L蜂胶组高于氯沙坦组（P〈0．01），200mg／L蜂胶组与氯沙坦组差异无显著性（P〉0．05）。③模型组G0／G1期细胞百分比低于对照组、氯沙坦组（P〈0．01）；100mg／L和200mg／L蜂胶组高于模型组（P〈0.01）150mg／L蜂胶组低于氯沙坦组（P〈0.05），100mg／L、200mg／L蜂胶组与氯沙坦组差异显著性（P〉0．05）。④模型组增殖细胞核抗原阳性率高于对照组、氯沙坦组（P〈0．01）；100mg／L和200mg／L蜂胶组低于模型组（P〈0．01），蜂胶各浓度组与氯沙坦组间差异无显著性意义。结论：血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞的增殖，氯沙坦能阻滞该作用；一定浓度的蜂胶水提液可抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞的增殖，其机制可能与限制细胞由G1期向S期转变及增殖细胞核抗原的表达有关。     

姜黄素介导的光动力疗法通过PI3K/AKT信号通路对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察姜黄素（CUR）介导的光动力疗法（PDT）通过磷酸酰肌醇3-激酶（PI3k）/丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）信号通路对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响及其可能的作用机制。 方法 分别选取大鼠胸主动脉平滑肌细胞系（A7R5）和小鼠主动脉平滑肌细胞系（MOVAS）进行平行实验,选择20 μg/L的PDGF-BB诱导VSMCs增殖。将培养好的VSMCs分为对照组、PDGF-BB组、姜黄素组、光动力组,其中光动力组再根据照射剂量的不同,又分为低剂量光动力组（照射60 s）、中剂量光动力组（照射120 s）、高剂量光动力组（照射180 s）,共3个亚组。对照组不予任何刺激,PDGF-BB组饥饿过夜后加入含20 μg/L的PDGF-BB的新鲜培养基刺激24 h,姜黄素组先给予与PDGF-BB组相同的干预,然后换液加入含20 μmol/L CUR的新鲜培养基刺激6 h,光动力组先给予与姜黄素组相同的干预,再换液后采用425 nm激光对光动力组各亚组进行对应时长的激光照射。采用细胞活力检测法（CCK8）检测光动力组中不同激光剂量照射后,VSMCs的存活率;然后采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EDU）阳性标记率法检测4组细胞的增殖活性,采用流式细胞术对4组细胞进行细胞周期检测,采用Western blot法检测PI3K/AKT通路相关磷酸化蛋白和细胞增殖核蛋白（PCNA）的表达水平。 结果 经CCK8法检测,本研究选择120 s作为激光照射的最佳剂量。干预后,中、高剂量光动力组的细胞存活率与PDGF-BB组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）。光动力组增殖的阳性细胞比例显著低于PDGF-BB组,差异有统计学意义（P＜0.05）。光动力组细胞在G0/G1期的比例明显低于对照组（P＜0.01）,而在G2/M期的比例则明显高于对照组和PDGF-BB组（P＜0.01）。光动力组增殖细胞核抗原（PCNA）、PI3K/AKT通路磷酸化蛋白的表达较PDGF-BB组显著下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）。 结论 CUR介导的PDT可抑制PDGF-BB诱导下的血管平滑肌细胞的增殖,其机制可能与CUR介导的PDT可下调PI3K/AKT通路相关磷酸化蛋白表达水平有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对同型半胱氨酸促血管平滑肌细胞增殖的保护作用

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在同型半胱氨酸(Hcy)促血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中的保护作用。方法采用不同的实验试剂培养人主动脉平滑肌细胞(HASMCs),分为对照组(control)、Hcy组(Hcy 100、200、500、1 000μmol/L)、EGCG组(EGCG 5、10、20μmol/L)、Hcy+EGCG组(Hcy 500μmol/L+EGCG 5μmol/L、Hcy 500μmol/L+EGCG 10μmol/L、Hcy 500μmol/L+EGCG 20μmol/L),在培养的24 h,采用CCK-8法、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记法观察细胞增殖情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血管紧张素Ⅱ(Ang II)浓度,Western印迹法测定Ang II受体1(AT-1R)蛋白表达水平。结果干预24 h后,与对照组相比,Hcy各组细胞增殖均显著增加(P0.05),EGCG 10、20μmol/L组细胞增殖显著减少(P0.05);与Hcy 500μmol/L组相比,加入EGCG 10、20μmol/L干预后细胞增殖显著减少(P0.01),Ang II浓度及AT-1R蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论 EGCG可抑制Hcy诱导的VSMCs增殖。