裸鼠造血微环境损伤实验动物模型的建立

目的建立适合移植实验使用的裸鼠造血微环境损伤动物模型。方法分别用3．5Gy、5Gy、6．5Gy、8Gy4个^60Coγ辐射剂量照射裸鼠，检测经过辐照后各组裸鼠1、3、5、7、14、21d血象变化，检测辐射后1、7、14、21d裸鼠骨髓基质CFU—F形成情况，用流式细胞仪检测辐射后1、7、14、21d骨髓基质细胞VCAM-1的表达。结果8．0Gy辐射剂量裸鼠死亡率100%；3．5Gy、5Gy、6．5Gy辐射剂量组裸鼠的造血损伤均能在辐射后21天之内自我恢复；6．5Gy组骨髓CFU—F于移植后7d（22±6）、14d（33±6）较3．5Gy、5Gy组均具有显著降低（P〈0．01），VCAM-1表达于7d（21．67±7．45）、14d（22．33±9．07）、21d（23．33±4．51）较对照组显著降低（P〈0．01）、较3．5Gy组差异有显著性（P〈0．05），21d（23．33±4．51）较5Gy组（34．00±4．36）差异有显著性（P〈0．05）。结论6．5Gy是裸鼠造血微环境损伤实验动物模型的适宜辐射剂量。     

A549肺腺癌细胞株BALB/C- nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

［摘要］ 目的　探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性．方法　选择健康6～8周龄Balb/c-nu/nu 裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu 裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu 裸鼠的成瘤情况．结果　全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60%．造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间．结论　通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究．     

A549肺腺癌细胞株BALB/C-nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

目的 探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性.方法 选择健康6～8周龄Balb/c-nu/nu裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu裸鼠的成瘤情况.结果 全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60％.造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间.结论 通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究.     

重视造血干细胞移植中的造血微环境问题

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是治疗血液肿瘤、非恶性血液病、遗传性疾病、代谢性疾病、急性放射病的有效手段之一,已在临床应用35年.造血干细胞移植的成败主要取决于供者造血干细胞能否在宿主的造血微环境中正常地增殖和分化,且尽量避免和降低移植并发症所带来的风险.既往对造血干细胞配型、移植物抗宿主病、移植失败和移植后疾病复发等问题的研究多侧重在造血干细胞方面,而对造血干细胞赖以生存的微环境缺乏足够的重视和研究[1-2].本研究主要阐述造血微环境功能在造血干细胞移植过程中的主要变化和作用,以期引起对该问题足够的重视和关注.     

骨髓造血微环境的研究进展

造血干细胞(HSCs)的微环境(Niche)是一类特化的结构,HSCs驻留在其内并受其调控。HSCs Niche主要由基质细胞和非细胞成分组成。目前,根据位置和功能不同可将HSCs Niche分为骨内膜HSCs Niche和血管HSCs Niche。研究表明骨内膜表面的细胞参与形成Niche,但不能肯定这些细胞确实参与构成了Niche,还是通过分泌HSCs相关细胞因子或生物大分子在骨内膜附近参与Niche的调控。血管及血管周围同样也可能具有Niche,因为大量的HSCs驻留其中。但随着研究的深入,科学家发现骨髓中可能存在非骨内膜Niche或脉管Niche的其他HSCs Niche。     

用BALB／c基因型裸鼠的骨髓细胞重建昆明小白鼠的造血功能

用ＢＡＬＢ／ｃ基因型裸鼠的骨髓细胞重建昆明小白鼠的造血功能胡军，马文煜，杨涌峰，张海，姜绍谆（西安微生物学教研室７１００３３）关键词裸鼠；骨髓移植；Ｃ带染色中图号目前，国内骨髓移植治疗血液病及放射病的研究主要从组织配型、免疫抑制剂的使用和Ｔ淋巴细胞克...     

猪造血微环境体外模型对人HSC分化作用的实验研究

目的 研究猪造血微环境对人造血干细胞(HSC)向红系分化的影响.方法 分别抽取健康志愿者骨髓6ml、实验用猪骨髓10ml,分离骨髓间充质干细胞(MSCs),接种DMEM/F12培养基,形成单层贴壁的成纤维样细胞后,作为人、猪造血微环境体外模型.按5×104/ml分别将人脐血CD34 细胞接种于人、猪造血微环境体外模型,以不含MSCs的培养系统为阴性对照,按3U/ml分别加入重组人EPO(rhEPO).于接种10 d后,取悬浮细胞,用流式细胞仪检测人CD71,以CD71阳性细胞率作为CD34 细胞向红系分化的分化率.结果 人MSCs支持下的人CD34 细胞在扩增的同时,(86.15±0.69)%细胞向红系分化;猪MSCs支持下的(82.46±1.46)%人CD34 细胞向红系分化,阴性对照(44.62±1.20)%人CD34 细胞向红系分化(P＜0.01).结论 与阴性对照相比,人/猪造血微环境体外模型均能显著促进人CD34 细胞向红系分化.     

整合素对造血干细胞在骨髓微环境中迁徙作用的分子机制

细胞粘附分子 (celladhesionmolecules,CAMs)在细胞与细胞、细胞与血管、细胞与细胞外基质之间的粘附及相互间的信号转导中发挥非常重要的作用 ,进而调节细胞的趋化迁移、定殖、增殖和分化。整合素 (Integrin)是一种重要的CAMs,与其他CAMs和细胞外基质发生相互作用 ,调节细胞的粘附功能。近年的研究表明 ,多种整合素家族的成员在造血干细胞跨骨髓微血窦血管内皮和细胞外基质的整个归巢过程中发挥重要作用。本文重点讨论整合素对造血干细胞在骨髓微环境中迁徙行为的作用。1　整合素的结构和功能整合素家族 (Integrinfamily)为细胞膜受体…     

裸鼠皮下前列腺癌模型的建立研究

目的:建立裸鼠皮下LNCaP前列腺癌模型,为前列腺癌动物实验研究提供工具.方法:以每只1×106 LNCaP细胞数与基底膜基质混合注射入5只BALB/c裸鼠前肢腋窝皮下,于第2周至第12周分别检测裸鼠血浆tPSA含量,12 w后处死裸鼠,取皮下肿瘤及相关器官做病理检查,监测肿瘤生长及转移情况.结果:80%(4/5)裸鼠于第8周后在前肢腋窝皮下长出肿瘤,肿瘤包膜完整,病理切片可见典型肿瘤细胞,但5只裸鼠均未发现肿瘤转移;5只裸鼠均可测得血浆tPSA,且血浆tPSA含量随肿瘤生长而升高,其中未长出实体瘤的裸鼠血浆tPSA含量亦随时间推移而升高.结论:成功地建立了裸鼠皮下LNCaP前列腺癌模型.该肿瘤模型能分泌PSA和表达DD3mRNA,能更有效地模拟人前列腺癌的生物学特性.     

去卵巢裸鼠人乳腺癌移植模型的建立

目的:采用雌激素皮贴刺激的方法,建立去卵巢(模拟妇女绝经后)裸鼠人乳腺癌移植模型,并探讨其部分生物学特性.方法:16只裸鼠切除卵巢后,背部给予雌激素皮贴,再接种雌激素受体阳性(ER )的MCF-7人乳腺癌细胞株,观察肿瘤块生长情况,30天后处死荷瘤裸鼠,切除肿块作病理切片及免疫组化.结果:接种后第4天即在接种部位可见结节,4周后肿瘤块平均表面积为(10.0±2.1)mm2,肿瘤移植成功率(成瘤率)为75%(12/16).病理学检查为浸润性导管癌,免疫组化雌激素受体表达呈阳性.结论:该方法采用了外部给予雌激素皮贴,刺激肿瘤的生长,成瘤率较高,且操作简便,成功的建立了去卵巢(绝经后)裸鼠人乳腺癌移植模型,经实验证明肿瘤可保持人乳腺癌生物学特性,为研究妇女绝经后雌激素依赖性乳腺肿瘤的发生机制提供了重要的科研工具.     

人颅咽管瘤裸鼠皮下移植瘤模型的初步建立

目的初步建立人颅咽管瘤(CP)的裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用胰蛋白酶消化法将新鲜颅咽管瘤组织进行原代细胞培养,然后将纯化的第3代颅咽管瘤细胞接种于到BALB/c裸小鼠背部皮下。观察接种成瘤后瘤组织生长情况和特点,明确肿瘤性质。结果 CP细胞可以在裸鼠皮下存活,接种后8d可见有移植瘤形成,成瘤率为33.3%,病理切片显示肿瘤样鳞状上皮细胞团增生。结论利用颅咽管瘤细胞初步建立了人颅咽管瘤裸鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究颅咽管瘤的生长特性奠定了基础。     

Establishment of orthotopic impact／metastasis model of human ovary cancer in nude mice

Ovarycarcinoma ,secludingly locatedandhardtobedetectedattheearlierstage ,istheoneofthehigh estmortalityrateinthegynecologictumors ,therefore ,itisalwaystoughfortheearlydiagnosisandtreatmentofthecancer .Atpresent ,althoughmanyamodelofovarycarcinomahavebeenestablishedforvariousstudy ,theyareallquitedifferentfromthenaturalde velopmentofthetumor .Ovarycarcinomaderivesmainlyfromthe germinalepitheliumoftheovary ,whichliesintheoutmostlayeroftheovaryandhasthediverse potentialsfordifferentiation .Byimp…     

裸鼠肝内移植瘤及腹水瘤乙型肝炎病毒动物模型的建立

目的：为了深入进行抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）治疗的研究，建立体内高效率持续复制ＨＢＶ的动物模型．方法：应用２．２．１５细胞（ＨＢＶ基因转染的ＨｅｐＧ２细胞株）转种裸鼠的肝脏和腹腔，建立肝内移植瘤及腹水瘤型ＨＢＶ动物模型．结果：肝移植瘤出现早，出瘤率高，实验周期短，带瘤裸鼠血清和肝肿瘤组织内有ＨＢＶ标志物的高效表达．结论：该模型是一种较好的ＨＢＶ治疗药物体内研究与评价的动物模型．     

人胰腺癌荷瘤裸鼠异位模型建立

目的:用人体胰腺癌细胞株,建立人胰腺癌荷瘤裸鼠异位模型。方法:裸鼠在SPF洁净环境下饲养,将4×106人胰腺癌细胞株SW1990肿瘤细胞悬液0.2 ml注射于裸鼠背部皮下,建立肿瘤模型。结果:肿瘤细胞移植成功率为90%(54/60),生长迅速,移植瘤灰白色,质硬。组织学检查符合胰腺低分化腺癌。结论:异位裸鼠人胰腺癌移植瘤模型易复制,时间短,成功率高,为胰腺癌体内研究提供了理想的动物模型。     

人舌鳞癌裸鼠移植瘤模型的建立

目的 为抑癌药物的研究建立人舌鳞癌动物模型.方法 选4-6周裸鼠24只,在其皮下接种体外培养的人舌鳞癌细胞系Tca8113细胞,建立人舌鳞癌移植瘤模型.结果 用本法可成功建立舌癌动物模型.成癌率为98.5%.组织病理学检查示组织呈低分化鳞癌表现.结论 本模型能较客观地反映了人舌鳞癌的生物学行为,为舌癌的生物学、治疗学研究,提供了一个良好动物模型.     

裸小鼠胃癌原位移植模型的建立

目的建立一种新的裸小鼠胃癌原位移植模型。方法采用Matrx VIP 3000型气体麻醉系统对实验动物进行麻醉。分别用"包埋法"、"挂线法"、和"胃囊法"建立BALB/c裸小鼠胃癌原位移植瘤模型。术后用Caliper IVIS Kinetic小动物活体成像系统对实体瘤的生长情况进行检测和分析。术后28 d对肿瘤组织进行组织病理学检查。结果采用包埋法建立胃癌原位移植裸小鼠模型,除了与其它常用方法一样具有高移植成功率以外,还具有操作简便、时间短、难度低、肿瘤组织不易与其它组织直接接触等特点。结论包埋法能快速制备大批量小鼠胃癌原位移植模型,为胃癌原位移植模型相关研究提供便利。     

SPF级BALB/c裸小鼠的生产管理与质量控制

SPF级裸小鼠的饲养及质量控制涉及多方面的环节和工作。生产管理及质量控制效果,直接影响动物的数量和质量。我中心2007年开始,逐步建立了规范的SPF级BALB/c裸小鼠生产繁育体系。裸小鼠生产繁育至今,数量和质量得到较好的保证。本文通过介绍我中心SPF级BALB/c裸小鼠的设施、种群、饲养管理及质量控制的具体做法和经验体会,为SPF级BALB/c裸小鼠相关繁育和研究提供参考和借鉴。     

HL60/VCR耐药细胞荷瘤鼠模型的建立

目的建立白血病HL60/VCR耐药细胞株移植动物模型方法。方法将生长状态良好的耐药细胞株HL60/VCR1.0×107/0.2ml接种到BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下,定期观察裸鼠生长状况,测量移植瘤大小,留取标本检测不同脏器肿瘤负荷及多药耐药基因MDR1表达情况。结果 2.0×106HL60/VCR细胞皮下接种BALB/c-nu/nu裸小鼠,成瘤率为67.7%,免疫组化检测荷瘤裸鼠肝脏和脾脏均可见巢状分布白血病细胞,PCR检测成瘤组织表达MDR1基因。结论皮下移植可成功建立耐药细胞株荷瘤鼠模型,为研究多药耐药细胞株动物体内生物学行为及逆转多药耐药提供了动物模型。