睾酮通过减少氧化应激干预血管内皮细胞衰老

目的观察睾酮对过氧化氢(H_2O_2)诱导衰老的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响。方法用SA-βgal细胞化学检测法观察不同浓度睾酮及雄激素受体拮抗剂、雌激素受体拮抗剂对H_2O_2诱导的HUVECs衰老的干预作用,用2,7二氯氢化荧光素二酯(H2DCF-DA)染色检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,用免疫印迹分析(Western印迹)法检测细胞中去磷酸化Rb蛋白水平。结果睾酮在3.0×10~(-9)、3.0×10~(-8)、3.0×10~(-7)mol/L等3种浓度下均具有延缓H_2O_2诱导的HUVECs的SA-βgal阳性率明显增加的趋势;与3.0×10~(-8)mol/L睾酮干预组相比,予10~(-6)mol/L ICI182,780预处理,HUVECs的SA-βgal阳性率明显增加,ROS水平增加,去磷酸化Rb蛋白水平明显增加。结论睾酮对H_2O_2诱导的HUVECs衰老的影响与其剂量有关;生理浓度睾酮具有延缓H_2O_2诱导的HUVECs衰老的趋势,其作用可能是通过转化为雌激素,作用于雌激素受体,减少氧化应激和调节去磷酸化Rb蛋白产生。     

雄激素缺乏对雄性大鼠血管内皮细胞的影响

目的:观察雄性大鼠去势后,雄激素缺乏对血管内皮细胞功能和结构的影响。方法:雄性Wistar大鼠20只随机化分为单纯去势组(10只)和假手术组(10只)。8周后,用放射免疫法测定两组大鼠血浆睾酮的浓度,取胸主动脉HE染色后,观察血管内皮细胞的形态变化;采用化学比色法测定血浆一氧化氮(NO)的水平,用ELISA法检测血清内皮素-1(ET-1)的含量。结果:与假手术组相比较,单纯去势组血浆睾酮的浓度及血浆NO的水平均显著降低,分别为[(2.47±0.53)μg/L vs.(0.28±0.07)μg/L和(33.44±8.50)μg/L vs.(21.61±10.51)μg/L,P<0.05];而血浆ET-1的含量则明显升高[(3.84±0.16)μg/L vs.(4.41±0.34)μg/L,P<0.05]。单纯去势组血管平滑肌细胞的排列不整齐,管壁厚薄欠均匀,血管内皮细胞增生。结论:雄性大鼠去势后雄激素缺乏可使大鼠血管内皮受损,释放NO减少以及ET-1增加。     

生理剂量睾酮通过雄激素受体改善小鼠行为学能力的研究

目的 探讨生理剂量的雄激素对小鼠行为学的影响及其机制.方法 29只4 w龄的C57BL/6J雄鼠分为正常组、去势组、去势+丙酸睾酮(TP)组,16只4 w龄的不表达有活性雄激素受体(AR)的睾丸女性化(tfm)雄鼠分为tfm组、tfm+TP组,造模3个月后对各组小鼠进行自主活动能力、避暗穿梭实验和水迷宫实验测定,最后由Nissl染色观测海马区的细胞形态学变化.结果 各项行为学检测及大脑海马区Nissl染色结果均一致,正常组、去势+TP组小鼠的各项指标结果皆显著优于去势组、tfm组和tfm+TP组小鼠,而去势组、tfm组和tfm+TP组之间未见统计学差异.结论 雄激素通过AR途径维持大脑海马区的正常形态来改善小鼠的自主活动能力、学习记忆能力.     

睾酮对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其与雄激素受体水平变化的关系

目的　探讨睾酮及其拮抗剂对雄性大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其与雄激素受体水平变化的关系。方法　采用贴块法培养雄性Sprague Dawley大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,分别用3 [H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法和MTT还原法观察不同浓度睾酮及其拮抗剂氟他胺对血管平滑肌细胞增殖的影响 ,用免疫印迹分析 (Westernblot)法检测细胞中雄激素受体水平。结果　 10 -5mol/L、10 -7mol/L、10 -8mol/L睾酮刺激可促进大鼠血管平滑肌细胞增殖 (3 [H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法测定分别为 137 6 3± 9 6 9、133 72± 8 81及 198 89± 13 2 9;MTT还原法测定分别为 14 0 5 4± 13 95、14 1 89± 2 0 86及 2 18 92± 11 2 4 ,与对照组相比 ,P <0 0 1) ;10 -7mol/L睾酮 +10 -5mol/L氟他胺能进一步促进血管平滑肌细胞增殖 (3 [H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法测定为 14 7 91± 11 5 5 ,MTT还原法测定为 175 6 8± 2 6 6 5 ,与对照组相比 ,P <0 0 1;与 10 -7mol/L睾酮相比 ,P <0 0 5 )。 10 -9mol/L～ 10 -5mol/L睾酮刺激组雄激素受体蛋白条带吸光度分别为 14 6 8± 7 6、4 30 9± 2 9 3、184 4± 6 6、14 9 7± 9 3、391 3± 6 0 ;10 -7mol/L睾酮 +10 -5mol/L氟他胺刺激组雄激素受体蛋白条带吸光度为 30 9 6± 2 2 4 ;单     

睾酮通过芳香化酶途径抑制人血管内皮细胞单核细胞趋化蛋白1的基因表达

目的 探讨睾酮对脐静脉内皮细胞生成单核细胞趋化蛋白1的影响与机制,分析睾酮与内皮细胞功能及动脉粥样硬化的关系.方法 脂多糖刺激体外培养的脐静脉内皮细胞,培养液中分别加入不同浓度睾酮(3×10-10、3×10-9、3×10-8、3×10-6 mol/L和3×10-4 mol/L),ELISA实验方法检测细胞上清液单核细胞趋化蛋白1蛋白含量,RT-PCR方法检测单核细胞趋化蛋白1 mRNA相对水平.培养液中加入雄激素受体拮抗剂或芳香化酶抑制剂,重复上述实验.结果 与空白对照组(374.16±10.2)比较,3×10-10 mol/L睾酮组上清液单核细胞趋化蛋白1蛋白含量明显增}Jn(424.50±11.3,P＜0.05),随着睾酮浓度增加,单核细胞趋化蛋白1逐渐减少,3×10-5 mol/L组差异具有统计学意义(292.29±12.6,P＜0.01).与对照组比较,3×10-9,3×10-6,3×10-5 mol/L组单核细胞趋化蛋白1mRNA水平明显降低.雄激素受体拮抗剂可逆转3×10-10mol/L睾酮对单核细胞趋化蛋白1对蛋白生成的影响,芳香化酶抑制剂可削弱睾酮对内皮细胞单核细胞趋化蛋白1基因表达与蛋白合成的抑制作用.结论 睾酮浓度降低,可促进血管内皮细胞发生炎症反应;睾酮达到生理浓度抑制内皮细胞发生炎症反应,这种作用是睾酮通过细胞内芳香化酶转化为雌激素实现的.     

雄激素对老龄大鼠血管平滑肌组织雄、雌激素受体基因表达的影响

目的　探讨不同剂量的庚酸睾酮 (TE)对老龄雄性大鼠血管平滑肌组织中雄激素受体 (AR)及雌激素受体 β(ER β)基因表达的影响。方法　 2 1月龄的老龄雄性Sprague Dawley纯系大鼠 4 0只随机分为A组 (老龄对照组 )、B组 (老龄低剂量组 ,肌注每次TE 2 .5mg/kg ,1次 /周× 16周 )、C组 (老龄中剂量组 ,肌注每次TE 5 .0mg/kg ,1次 /周× 16周 )、D组 (老龄高剂量组 ,肌注每次TE 10 .0mg/kg ,1次 /周× 16周 )。Western印迹法检测血管平滑肌组织中AR及ER β基因表达情况。结果　给予低、中、高 3种剂量的TE作用后血管平滑肌组织AR蛋白条带吸光度分别为 (99.5 0± 2 1.74 ) ,(12 5 .38± 2 8.6 8) ,(10 1.98± 15 .4 2 ) (对照组为 10 0 ) ;ER β蛋白条带吸光度分别为(92 .34± 18.6 8) ,(47.72± 18.12 ) ,(82 .13± 2 3.5 0 ) (对照组为 10 0 )。结论　中剂量的TE可促进AR基因的表达量 ,而中、高剂量的TE则抑制ER β基因的表达量。     

雌激素受体α在睾酮影响人脐静脉内皮细胞衰老中的重要作用

目的观察睾酮对过氧化氢(H2O2)诱导衰老的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响,并初步探讨其作用机制。方法将内皮细胞分为正常对照组、H2O2对照组、不同浓度睾酮组(3×10-9～3×10-6mol/L)、ICI182,780组和氟他胺组。用SA-β-半乳糖苷酶细胞化学检测法观察各组细胞衰老情况,Western blot法检测细胞中雌激素受体α(ERα)水平。结果与正常对照组比较,H2O2对照组可以引起HUVECs衰老细胞明显增加。3×10-9mol/L、3×10-8mol/L、3×10-7mol/L睾酮组均具有延缓H2O2诱导HUVECs衰老的趋势,3×10-6mol/L睾酮组却具有相反的作用。3×10-9～3×10-6mol/L睾酮组ERα各条带吸光度值分别为113.54±8.09、165.69±7.09、143.63±6.84、80.81±5.29。结论睾酮对H2O2诱导HUVECs衰老的影响与其剂量有关,而且睾酮还呈剂量相关性调节H2O2诱导HUVECs的ERα表达。     

吸烟对人体血浆中D-二聚体t、PA与PAI-1的影响

目的探讨不同烟龄、吸烟量的吸烟者的D-二聚体t、PA、PAI-1的变化及意义。方法随机选择80例不同烟龄、吸烟量的吸烟者,年龄27~55岁,不吸烟者30例,年龄21~50岁,进行D-二聚体t、PA、PAI-1测定比较。结果不同烟龄、吸烟量的吸烟者的D-二聚体t、PA、PAI-1的含量与不吸烟者有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论吸烟者的D-二聚体t、PA、PAI-1有显著性改变,其变化与吸烟密切相关。     

睾酮通过上调血管内皮生长因子表达促进外周血内皮祖细胞增殖

目的 探讨雄激素对外周血内皮祖细胞(PB-EPC,)增殖能力的影响及其可能机制.方法 将健康志愿者外周血经密度梯度离心法分离的单个核细胞接种至人纤维连接蛋白包被的培养板中,EGM-2MV培养7天后,多波长激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记的荆豆凝集素和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白双染色阳性为PB-EPC.将贴壁细胞分为5组,前4组分别加入0、1、10、100nmol/L睾酮,第5组加入10 nmol/L雄激素受体阻断剂氟他胺干预3h后,再加10 nmol/L睾酮干预.培养48 h后,MTT比色法检测各组PB-EPC的增殖能力.实时定量PCR检测血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达变化,ELISA检测VEGF分泌量的变化.结果 睾酮呈浓度依赖性促进EPC增殖,雄激素受体阻断剂氟他胺完全阻断睾酮对EPC的促进作用.与空白对照组相比,睾酮在mRNA和蛋白水平上调PB-EPC的VEGF表达,氟他胺可阻断此作用.结论 睾酮通过雄激素受体途径上调VEGF的表达,促进PB-EPC增殖.     

氧化低密度脂蛋白通过血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1诱导血管内皮细胞粘附分子的表达

目的探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）在氧化低密度脂蛋白（ox—LDL）诱导血管内皮细胞粘附分子表达中的作用。方法用不同浓度ox-LDL培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,用RrealtimeRT—PCR测定LOX-1 mRNA的表达;RT—PCR测定细胞间粘附分子1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子1（VCAM-1）以及E选择素的mRNA表达;用Westernblot测定LOX-1、ICAM-1、VCAM-1以及E选择素蛋白的表达,观察ox-LDL对血管内皮细胞粘附分子表达的影响。HUVECs预先用聚肌苷酸[poly（I）]和爱兰苔胶处理,再用ox—LDL培养,再分别测定上述粘附分子的表达水平,比较加入LOX-1阻断剂前后粘附分子表达的变化。结果ox-LDL各剂量组皆可上调LOX-1、ICAM-1、E选择素的mRNA和蛋白表达（P〈0．01）,在10～50μm/ml剂量范围内呈现明显的剂量一效应关系（P〈0．01）,但ox—LDL对VCAM-1的表达没影响。HUVECs预先与250μg／ml的poly（Ⅰ）或爱兰苔胶作用2h,然后加入50μg/ml的ox—LDL作用24h。poly（Ⅰ）和爱兰苔胶都能抑制ox—LDL诱导的LOX-1、ICAM-1和E选择素的mRNA和蛋白表达水平,与未阻断组相比,差异皆有统计学意义（P〈0．01）。结论ox—LDL可以上调血管内皮细胞粘附分子的表达,LOX-1受体阻断剂可以部分阻断ox—LDL的上调作用,ox-LDL诱导血管内皮细胞粘附分子的表过是通过LOX-1介导的。     

雄激素对老龄大鼠血管平滑肌组织雄激素受体及血小板源性生长因子受体基因表达的影响

2001年10月至2003年2月，我们通过本试验探讨不同剂量的庚酸睾酮(TE)对衰老雄性大鼠血管平滑肌组织中雄激素受体(AR)及血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)基因表达的影响。     

雷洛昔芬对血管内皮素-1基因mRNA表达的影响及与雌激素受体的关系

目的　观察选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬 (Raloxifene)对血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达的影响 ,并探讨Raloxifene的作用是否通过雌激素受体机制介导。　方法　采用Raloxifene处理培养的牛颈动脉内皮细胞 2 4h ,然后提取细胞总RNA ,取 2 0ug进行Northernblotting分析 ,观察Raloxifene对血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达的影响 ,同时采用雌激素受体阻断剂ICI182 780处理细胞 ,观察内皮素 1基因表达的变化。　结果　与未经Raloxifene处理的细胞相比 ,Raloxifene处理后的血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达明显降低〔分别为 (0 16± 0 0 5 ) ,(0 39± 0 0 7) ,P <0 0 5〕若同时应用ICI182 780处理 ,内皮素 1mRNA表达增强 (0 6 9± 0 0 8,P <0 0 5 ) ,Raloxifene的作用被阻断。　结论　选择性雌激素受体调节剂Raloxifene通过雌激素受体机制抑制血管内皮细胞内皮素 1基因表达。     

内皮素1对人血管内皮细胞基因表达谱的影响

目的探讨内皮素1对人血管内皮细胞基因表达谱的影响，进一步阐明内皮素1导致内皮细胞功能异常的分子机制。方法培养人血管内皮细胞，提取总RNA，采用人内皮细胞生物学功能基因芯片（含96个基因），检测内皮素1作用12h后人血管内皮细胞主要功能基因表达谱的变化。结果与未用内皮素处理的对照组相比，人血管内皮细胞在内皮素1作用12h后，共有53个基因出现差异表达，其中抗凝血和抗氧化基因等22个基因表达下调，促凝和炎性因子基因等31个基因表达上调。结论内皮素通过诱导人血管内皮细胞凝血和纤溶系统基因表达失衡、下调抗氧化酶基因表达和上调促炎因子基因表达，损伤人血管内皮细胞，造成其生物学功能异常。     

睾酮对血管内皮细胞衰老的干预作用

目的 观察睾酮对过氧化氢(H2O2)诱导衰老的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响,初步探讨其作用机制.方法 分别用MTT还原法和SA-β-gal细胞化学检测法观察不同浓度睾酮及雄激素受体拮抗剂Flutimide、雌激素受体拮抗剂ICI182,780对HUVECs衰老的干预作用.结果 睾酮在3.0×10-9、3.0×10-8和3.0×10-7 mol/L 3种浓度下均具有延缓H2O2诱导的HUVECs的细胞增殖率降低和SA-β-gal阳性率明显增加的趋势.与3.0×10-8 mol/L睾酮干预组相比,予1.0×10-6 mol/L ICI182,780预处理, HUVECs的细胞增殖率明显降低,SA-β-gal阳性率明显增加.结论 睾酮对H2O2诱导的HUVECs衰老的影响与其剂量有关,生理浓度睾酮对其具有一定的延缓作用,而且这种生物学效应是部分通过转化为雌激素后,作用于雌激素受体实现的.     

妊娠期高血压疾病患者血清血小板内皮细胞黏附分子1和人可溶性血管内皮生长因子受体1的水平

目的观察妊娠期高血压疾病患者血清血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM-1)和人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR-1)水平变化及临床意义。方法入选2017年2月至2018年2月收治的妊娠期高血压疾病孕妇192例为受试者,其中妊娠高血压66例、轻度子痫前期68例、重度子痫前期58例,同期孕周相匹配的正常妊娠孕妇62人为对照组。比较各组间PECAM-1和sVEGFR-1表达水平的差异。结果 PECAM-1在正常孕妇、妊娠高血压、轻度子痫前期以及重度子痫前期间的表达水平呈逐渐降低的趋势,而sVEGFR-1的表达水平呈逐渐升高的趋势(均P0.05)。多元逐步Logistic回归分析显示,PECAM-1、sVEGFR-1是妊娠期高血压疾病发病的影响因素(P0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者血清PECAM-1水平随着病情发展不断降低,而血清sVEGFR-1水平逐渐升高,是妊娠期高血压疾病发病的影响因素。     

睾酮对TNF-α作用于内皮细胞表达HO-1的影响

目的 观察不同浓度睾酮对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)作用于人脐静脉内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cells)ECV-304表达血红素加氧酶-1(HO-1)的影响,初步探讨其作用机制.方法 用ELISA法观察不同浓度睾酮及雄激素受体拮抗剂Flutimide、雌激素受体拮抗剂ICI182,780对ECV-304表达HO-1干预作用.结果 睾酮在3×10-6,3×10-7,3×10-8,3×10-9mol/L几种浓度下均具有促进TNF-α诱导的ECV-304细胞表达HO-1的量.与3.0×10-8mol/L睾酮干预组相比,予1.0×10-6mol/L ICI182,780预处理,ECV-304细胞释放的HO-1的量明显减少,并诱导HO-1的表达呈时间(当t=24 h达到最理想的分泌量)、浓度依赖关系.结论 睾酮对TNF-α诱导的ECV-304细胞表达HO-1的影响与其浓度有关,生理浓度睾酮对其具有一定的促进作用,而且这种生物学效应是部分通过转化为雌激素后,作用于雌激素受体实现.     

血管紧张素Ⅱ和卡托普利、缬沙坦对人脐静脉内皮细胞PAI-1、tPA蛋白表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI),卡托普利和Ang Ⅱ 1型受体(AT-1)拮抗剂缬沙坦对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)蛋白的释放及活性的影响.方法将不同浓度的Ang Ⅱ(10-6～10-9 mol/L)与HUVECs共同孵育24 h,以及将10-6 mol/L的Ang Ⅱ与HUVECs作用不同时间(0、4、8、12、24 h)后,用细胞酶联免疫法和发色底物法分别检测细胞培养液中PAI-1、tPA的含量及活性,并观察卡托普利和缬沙坦干预后的影响.结果 10-6mol/L Ang Ⅱ作用HUVECs 24 h后,可使细胞分泌的PAI-1含量与对照组相比明显增高(280±15.60 vs 83.33±10.56) ng/mL,P<0.01),PAI-1活性明显增加(9.25±0.39 vs 7.53±0.33) IU/mL,P<0.01),Ang Ⅱ虽也可刺激tPA含量增加(101.67±3.78 vs 70±5.62) ng/mL,(P<0.01),但PAI-1的增量是tPA增量的6～7倍(Δ196.67±21.34 vs Δ31±6.50) ng/mL,(P<0.01),Ang Ⅱ对tPA活性无影响(0.97±0.05 vs 0.95±0.08) ng/mL,(P>0.05);缬沙坦可显著抑制Ang Ⅱ的促PAI-1分泌作用(212.67±5.38 vs 290±6.57) IU/mL,(P<0.01),而卡托普利对Ang Ⅱ的促PAI-1分泌作用无明显抑制作用(278.33±9.16 vs 290±6.57) IU/mL,(P>0.05).结论 Ang Ⅱ可促使HUVECs分泌PAI-1,并使其活性增加;Ang Ⅱ亦可刺激tPA分泌,但作用弱于PAI-1,对其活性无明显影响.缬沙坦可抑制Ang Ⅱ促HUVECs分泌PAI-1的作用;卡托普利的作用不显著.     

血管紧张素Ⅱ和卡托普利、缬沙坦对人脐静脉内皮细胞PAI-1、tPA蛋白表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI),卡托普利和AngⅡ1型受体(AT-1)拮抗剂缬沙坦对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活剂(tPA)蛋白的释放及活性的影响。方法将不同浓度的AngⅡ(10-6~10-9mol/L)与HUVECs共同孵育24h,以及将10-6mol/L的AngⅡ与HUVECs作用不同时间(0、4、8、12、24h)后,用细胞酶联免疫法和发色底物法分别检测细胞培养液中PAI-1、tPA的含量及活性,并观察卡托普利和缬沙坦干预后的影响。结果10-6mol/LAngⅡ作用HUVECs24h后,可使细胞分泌的PAI-1含量与对照组相比明显增高(280±15.60vs83.33±10.56)ng/mL,P<0.01),PAI-1活性明显增加(9.25±0.39vs7.53±0.33)IU/mL,P<0.01),AngⅡ虽也可刺激tPA含量增加(101.67±3.78vs70±5.62)ng/mL,(P<0.01),但PAI-1的增量是tPA增量的6~7倍(Δ196.67±21.34vsΔ31±6.50)ng/mL,(P<0.01),AngⅡ对tPA活性无影响(0.97±0.05vs0.95±0.08)ng/mL,(P>0.05);缬沙坦可显著抑制AngⅡ的促PAI-1分泌作用(212.67±5.38vs290±6.57)IU/mL,(P<0.01),而卡托普利对AngⅡ的促PAI-1分泌作用无明显抑制作用(278.33±9.16vs290±6.57)IU/mL,(P>0.05)。结论AngⅡ可促使HUVECs分泌PAI-1,并使其活性增加;AngⅡ亦可刺激tPA分泌,但作用弱于PAI-1,对其活性无明显影响。缬沙坦可抑制AngⅡ促HUVECs分泌PAI-1的作用;卡托普利的作用不显著。     

尼古丁对血管内皮细胞PAI-1表达水平的影响

目的 研究尼古丁对人脐静眯内皮细胞(HUVECs)表达纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响.方法 HUVECs培养后接种于25 cm2培养瓶,随机分为对照组(培养液中不加任何干预)和尼古丁组(培养液中加入尼古丁.使其终浓度100 μmol/L),分别孵育12 h后收集各组细胞及细胞上清液,采用酶联免疫吸附双抗体夹心分析法(ELISA)测定各组细胞上清液中PAI-1的抗原浓度;采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组细胞PAI-1mRNA的表达水平.结果 尼古丁组PAI-1含量在12 h显著升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.01),且PAI-1mRNA的表达显著升高,与对照组比较有统计学意义(P<0.01).结论 尼古丁损伤血管内皮细胞,显著上调HUVECs PAI-1mRNA的转录和PAI-1蛋白的分泌,抑制内皮细胞的纤溶活性.