一步及半巢式PCR检测石蜡包埋B细胞淋巴瘤组织克隆性IgH重排的比较

目的：建立一种简便有效的方法,来检测Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）石蜡包埋组织的免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排。方法：以ＩｇＨ的第三互补决定簇区（ＩｇＨ－ＣＤＲ３）为标志,用消化煮沸法和酚－氯仿法提取３６例Ｂ－ＮＨＬ及１０例扁桃体炎的石蜡包埋组织的基因组ＤＮＡ,比较两进行一步及半巢式聚合酶链反应（ＳｎＰＣＲ）,聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染后检测克隆性ＩｇＨ重排的结果。结果：Ｂ－ＮＨＬ组,３４例经酚－氯仿法提取ＤＮＡ,其一步及ＳｎＰＣＲ检测克隆性ＩｇＨ－ＣＤＲ３重排的阳性率分别为２６．５％和７６．５％（Ｐ〈０．０５）;２７例经消化煮沸法提取ＤＮＡ,其一步及ＳｎＰＣＲ的阳性率分别为７．４％和６６．７％（Ｐ〈０．０５）;２５例同时用上述２种方法提取ＤＮＡ,ＳｎＰＣＲ的阳性率分别为７６％和６８％（Ｐ〉０．０５）。对     

双波长薄层扫描法测定优力藤片中雷藤素甲的含量

用双波长薄层扫描法测定优力藤片（ＹＯＬＩＴＥＮ）中雷藤素甲（ｔｒｉｐｔｏｌｉｄｅ）的含量。采用硅胶Ｇ－ＣＭＣＮａ薄板，样品经氧化铝吸附、氯仿回流提取、浓缩后点样。展开剂为乙酸乙酯－氯仿（１．３：２．０），用岛津ＣＳ－９０００型扫描仪λ＿ｓ＝５１０ｎｍ，λ＿Ｒ＝６１０ｎｍ波长处扫描。随行外标两点法计算含量。线性范围为０．１２３１～０．７３８６μｇ，回归方程Ａ＝６１８０３．２６Ｃ＋５５７６．８５，ｒ＝０．９９９８。回收率为１０４．１％，ＲＳＤ＝２．７３％（ｎ＝６）。     

小蔓长春花组织培养物中长春胺的含量测定

采用薄层扫描法测定小蔓长春花组织培养物中长春胺的含量。应用高效硅胶Ｇ薄层板，展开剂为石油醚－氯仿－甲醇（１０：１０：１．２）。在λＳ＝４９０ｎｍ，λＲ＝５５０ｎｍ波长处扫描。长春胺标准品的线性范围为０．５３５￣３．７４５μｇ；平均回收率为９８．６８％，ＲＳＤ＝１．９％（ｎ＝６）。小蔓长春花组织培养物经碱性氯仿和２％硫酸提取后点样，按随行外标两点法进行测定，计算样品的含量。测得在固体和液体培养基Ｂ５     

离体人乳腺上皮细胞致癌过程中c-myc肿瘤基因的变化

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因在乳腺癌早期发生过程中的活动状态。方法：利用株人朱上皮细胞ＭＣＦ－１０Ｆ,经３种化学致癌物;ｂｅｎｚｏ（ａ）ｙｒｅｎｅ（ＢＰ）,ｄｉｍｅｈｔｈｙｌｂｅｎｚ（ａ）ａｎｔｈｒａｃｅｎｅ（ＤＭＢＡ）和Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ,（ＭＮＮＧ）处理并建立了肿瘤性转化克隆细胞素。其中ＢＰ,ＢＰ１,ＢＰ１－Ｅ来自ＰＢ,ＤＭＢＡ,Ｄ３,Ｄ３－１来自ＭＮＮＧ处理的     

侧柏叶炮制方法研究

目的：研究侧柏叶炮制前后槲皮素含量的变化,建立侧柏叶合理的炮制方法。方法：通过HPLC法对侧柏叶中槲皮素的含量进行测定,色谱柱为Agilent Eclipse XPB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为甲醇：0.2%磷酸溶液（55∶45）;流速1.0 mL·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃;并对侧柏叶的生品、烘制品及不同炮制品中槲皮素进行测定和比较。结果：槲皮素在0.03~0.52μg成良好的线性关系,回收率为97.5%~100.8%,RSD1.22%,槲皮素在烘制品中的含量较传统炮制品高。结论：所建立的HPLC法简便可靠、精密度高。烘制法具有和传统炮制法相接近的结果,提示其作为侧柏叶的炮制法存在一定的可行性。     

枸杞多糖的分离,纯化,分析及免疫作用的研究

枸杞子经热水提取，用蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法除蛋白，透析纯化得到枸杞多糖（ＬＢＰ），经ＵＶ扫描，ＬＢＰ未见核酸（２６０ｎｍ）和蛋白质（２８０ｎｍ）特征吸收峰，ＰＡＧＥ电泳和Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测蛋白质含量，仅测到微量蛋白质及低于５ｍｇ／ｇ糖。红外分析显示有典型多糖吸收峰。对其活性作了分析，结果表明本室所提取的ＬＢＰ具有明显增强ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用，并对Ｓ－１８０荷瘤小鼠具明显     

双波长薄层扫描法测定优力藤片中雷藤素甲的含量

用双波长薄层扫描法测定优力藤片（ＹＯＬＩＴＥＮ）中雷藤素甲的含量。采用硅胶Ｇ－ＣＭＣ Ｎａ薄板，样品经氧化铝吸附、氯仿回流提取、浓缩后点样。展开剂为乙酸乙酯－氯仿（１．３：２．０），用岛津ＣＳ－９０００型扫描仪于λｓ＝５１０ｎｍ，λＲ＝６１０ｎｍ波长处扫描。随行外标两点法计算含量。线性范围为０．１２３１～０．７３８６μｇ，回归方程Ａ＝６１８０３．２６Ｃ＋５５７６．８５，ｒ＝０．９９９８。回收率为１     

光密度HPTLC定量花松萝中的松萝酸

地衣花松萝Usnea florida中含有的松萝酸(usnic acid)具有显著的抗肿瘤性质,它的许多药物制品可作局部应用。已报道的在药物制品中的松萝酸的定量方法主要是分光光度和荧光方法,这些方法在定量前需经提取、分离和精制等几步,明显的缺点费时且不精确。本文报道以光密度HPTLC法直接定量粗氯仿提取物中的松萝酸;在285nm用UV扫描较化学显色更为快速和精确。含松萝酸标准品1.4,2.8,5.6,7.0,和14.0μg/ml的氯仿溶液作为标准溶液。地衣花松萝以100ml氯仿提取,过滤后,氯仿溶液被稀释至适当浓度作为样品溶液。与松萝酸标准溶液一起进行HPTLC分析。     

黑米对小鼠HyP和GSH—Px的影响

以黑米水提液，黑米醇提取，螺旋藻悬液经老龄ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠每日每只灌胃１ｍｌ经４５～６０天后，测定其皮肤及尾腱中的羟脯氨酸（ＨｈＰ）的含量及全血谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活力，结果表明黑米水提液，黑米醇提取能显著提高小鼠皮肤中ＨｙＰ含量（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５），黑米水提液能显著提高小鼠尾腱中ＨｙＰ的含量（Ｐ〈０．０５），而黑醇提液对小鼠尾腱中的ＨｙＰ含量无明显影响（Ｐ〉０．０５）。     

柯萨奇B组病毒逆转录聚合酶链反应检测方法的建立

根据柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）基因组５’非编码区核苷酸序列，选用了一对组特异性吸收物，用于逆转聚合酶链反应检测ＣＢＶ－ＲＮＡ，结果显示该法可检出ＣＢＶ１～６型ＲＮＡ，灵敏度为１０ＰＦＵ不能检出其他病毒ＲＮＡ，采用的碘化钠－异硫氰酸胍－氯仿法提取ＣＢＶ－ＲＮＡ与传统的蛋白酶Ｋ－酚－氯仿法及异硫氰酸胍－酚－氯仿法比较，具有快速，简便，稳定，可靠的特点，应用该法检测ＣＢＶ－５感染鼠外周血ＲＮＡ，第３ｄ即为     

SHR与SD杂交大鼠血压与细胞内阳离子含量的关系

观察ＳＨＲ与ＳＤ杂交大鼠血淋巴细胞内阳离子含量以及与血压的关系，拟阐明是否细胞膜阳离子转运异常是一种先天性遗传缺陷。结果显示，杂交大鼠淋巴细胞内Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｍｇ２＋的含量与血压值并不相关，但淋巴细胞内Ｃａ２＋的含量与杂交大鼠的收缩压（ＳＢＰ）和舒张压（ＤＢＰ）呈明显正相关（ＳＢＰｒ＝０．５２，Ｐ＜０．０５；ＤＢＰｒ＝０．６２，Ｐ＜０．０１），血压增高的杂交大鼠（ＢＰ≥１７．３／１２．０ｋＰａ）细胞内Ｃａ２＋浓度（１．３±０．５ｆｍｏｌ／细胞）显著高于对照组（０．９±０．３ｆｍｏｌ／细胞，Ｐ＜０．０５）。提示，原发性高血压的发生与细胞膜存在特异性缺陷及遗传性离子转运障碍有关，而这一转运障碍的离子主要为Ｃａ２＋。     

丹参有效成份764—3对血小板聚集和花生四烯酸代射产物的影响

７６４－３是从中药丹参中提取的有效成份，对ＡＡ和ＡＤＰ诱导的家兔和人血小板聚集有明显抑制作用，在以ＡＡ为底物，猪肺微粒体供酶系统中，小剂量７６４－３（５－１００μｇ／ｍｌ）明显促进６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ的生成，剂量与效应相关，大剂量７６４－３（５００μｇ／ｍｌ）对ＴＸＢ２和６ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ的生都有抑制作用，结果提示：小剂量７６４－３可能有利于ＴＸＢ２和６ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ平衡的调节。     

HPLC法考察不同炮制方法对温莪术中莪术醇含量的影响

[目的]研究不同炮制方法对温莪术中莪术醇含量高低的影响,为优选温莪术的炮制方法提供实验依据。[方法]采用不同炮制方法制得温莪术药材的各炮制品,运用高效液相色谱法（HPLC）测定并比较各炮制品中莪术醇含量高低。[结果]温莪术的不同炮制品中莪术醇含量在1.09%～1.38%（g/g）之间。[结论]不同炮制方法会影响温莪术中莪术醇的含量,各炮制品中莪术醇含量高低依次为：生品〉醋炒品〉莪术片〉醋煮品〉酒制品。     

柯萨奇B组病毒逆转录聚合酶链反应检测方法的建立

根据柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）基因组５’非编码区核苷酸序列，选用了一对组特异性引物，用于逆转录聚合酶链反应检测ＣＢＶ－ＲＮＡ。结果显示该法可检出ＣＢＶ１～６型ＲＮＡ，灵敏度为１０ＰＦＵ，不能检出其他病毒ＲＮＡ。采用的碘化钠－异硫氰酸胍－氯仿法提取ＣＢＶ－ＲＮＡ与传统的蛋白酶Ｋ－酚－氯仿法及异硫氰酸胍－酚－氯仿法比较，具有快速、简便、稳定、可靠的特点。应用该法检测ＣＢＶ－５感染鼠外周血ＲＮＡ，第３ｄ即为阳性，提示本法可用于ＣＢＶ感染的早期诊断     

不同绝育方法对兔输卵管分泌液的影响

３２只家兔随机分为４组：对照组（Ａ），Ｐｏｍｅｒｏｙ结扎组（Ｂ），聚氨甲酸乙酯栓堵组（Ｃ）和电凝组（Ｄ）。１２周后，测定卵管液中７种化学元素，总蛋白和葡萄糖含量。结果：Ｂ、Ｃ、Ｄ３组中总蛋白、Ｃａ、Ｚｎ含量均明显下降（Ｐ＜０．０５）。而Ｃｕ、Ｍｎ以及葡萄糖浓度差异无显著性（Ｐ＞０．０５），Ｋ含量升高，其中Ｂ、Ｄ两组含量差异有显著性（Ｐ＜０．０５），而Ｎａ含量Ｂ、Ｃ两组却明显下降（Ｐ＜０．０５），Ｆｅ含量仅Ｂ组明显下降（Ｐ＜０．０５）     

精神分裂症及其健康一级亲属全血11种微量元素的测定与分析

目的：探讨精神分裂症患者及其健康一级亲属全血微量元素含量与精神分裂症之间的关系。方法：采用等离子发光法测定了６６例精神分裂症病人、２４例精神分裂症患者的健康一级亲属、５０例正常对照３组人群全血１１种微量元素的含量。结果：精神分裂症病人 Ａｌ、 Ｃｕ、 Ｚｎ、 Ｂａ、 Ｃｒ 的含量显著低于正常对照组（ Ｐ＜ ００５）, Ｆｅ、 Ｍ ｇ、 Ｂ 含量显著高于对照组（ Ｐ＜ ００５）,一级亲属组 Ｆｅ、 Ｍ ｇ、 Ｂ含量显著高于对照组（ Ｐ＜ ００５）,同时 Ｃｕ、 Ｃａ、 Ｂａ 低于对照组（ Ｐ＜ ００５）;精神分裂症患者与其健康一级亲属相比微量元素含量无明显差异（ Ｐ＞ ００５）。结论：微量元素的代谢异常可能是精神分裂症病理过程的表现,同时遗传因素在精神分裂症的发病过程中有一定作用。     

凋亡相关基因FasL和Bcl-2在小鼠肝癌中的表达

ＨＣａ－Ｆ和ＨＣａ－Ｐ是同源且转移能力不同的肝癌细胞系,Ｐ为低转移（转移率〈３０％）,Ｆ为高转移（转移率〉８０％）。经Ｓｐ法免疫组化染色发现：ＦａｓＬ在Ｆ原发瘤中的表达显著强于Ｐ原发瘤（Ｐ〈０．０１）,Ｂｃｌ－２在两者均为强阳性,无显著性差别,提示ＦａｓＬ可能赋予Ｆ细胞杀伤免疫细胞的能力并与其较强的转移力相关。     

消炎止咳贴提取工艺的正交试验研究

目的：优选消炎止咳贴的提取工艺,方法：以麻黄碱和黄芩甙的含量为考究批标,对提取工艺进行Ｌ９（３＾４）试验,结果：影响提取效率的因素大小顺序是：Ａ〉Ｄ〉Ｃ〉Ｂ（Ａ：乙醇浓度;Ｂ：乙醇用量;Ｃ：提取时间：Ｄ：提取次数）。结论：用３倍量的８０％的乙醇提取３次,每次提取２小时,为比较理想的提取工艺,其浸膏竿膏率和有效成分的提取率均较高。     

雷公藤单体T_4、T_7、T_（15）及雷公藤内酯醇对大鼠精子核蛋白组型的影响

大鼠喂服雷公藤单体Ｔ_４、Ｔ_７、Ｔ_（１５）及雷公藤内酯醇（甲素）７周后，取附睾精子，用超声法分离精子核，从核提取总碱性蛋白（ＴＮＢＰ）。经电泳扫描分析，发现精子ＴＮＢＰ含量下降，总组蛋白（ＴＨ）／精核蛋白（ｐｒｏｔａｒｍｉｎｅ）比值升高，精核蛋白含量下降，提示以上雷公藤单体和甲素使精子细胞核蛋白组型转换受阻是导致大鼠不育的重要原因之一。     

雷公藤单体T4,T7,T15及雷公藤内酯醇对大鼠精子核蛋白组型…

大鼠喂服雷公藤单体Ｔ４、Ｔ７、Ｔ１５及雷公藤内酯醇（甲素）７周后，取附睾精子，用超声法分离精子核，从核提取总碱性蛋白（ＴＮＢＰ）。经电泳扫描分析，发现精子ＴＮＢＰ含量下降，总组蛋白（ＴＨ）／精核蛋白比值升高，精核蛋白含量下降，提示以上雷公藤单体和甲素使精子细胞核蛋白组型转换受阻是导致大鼠不育的重要原因之一。