妥泰对急性分离的大鼠海马神经元钠电流的影响

目的　在离子通道水平探讨妥泰 (Topiramax ,TPM)对大鼠海马神经元细胞的钠通道的作用。 方法　采用 7～ 10d的大鼠 ,以链霉素蛋白酶E加吸管吹打法制备海马神经元 ;利用全细胞膜片钳技术 ,观察TPM对急性分离大鼠海马神经元电压依赖性钠通道的作用。结果　TPM使这种河豚毒素 (Tetrodotoxin ,TTX)敏感的内向电流幅值减小 (n =2 7) ,这种作用具有浓度依赖性 ,它还可以使钠电流的稳态失活曲线负向漂移 (n =5 )。结论　TPM具有传统抗痫药物对钠电流的类似作用     

氧化苦参碱对大鼠海马神经元细胞钠通道的影响

目的 研究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对培养的新生大鼠海马神经元细胞膜钠电流作用,探讨OMT在离子通道水平的作用机制.方法 采用原代培养新生大鼠海马神经元细胞,应用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度OMT对培养8～12天的大鼠海马神经元细胞膜钠通道的作用.结果 OMT对海马神经元细胞膜钠电流有明显的抑制作用(n=20,P＜0.05),且这种作用具有浓度依赖性,OMT对钠电流作用的半数抑制浓度为(46.1±1.3)μmol/L.在30μmol/L时,OMT可使钠电流Ⅰ～Ⅴ曲线显著上移,并且改变钠电流的翻转电位,但不影响激活电位和峰电位.通道动力学显示OMT可以促进钠电流复活曲线向右移动,减慢通道由失活状态恢复到激活状态的过程,但对激活曲线和失活曲线则没有明显的作用.结论 OMT呈浓度依赖性和电压依赖性抑制大鼠海马神经元细胞膜钠电流,并且抑制钠通道的复活过程.     

马桑内酯对大鼠海马锥体神经元钙激活钾通道的影响

目的　了解致痫剂马桑内酯 (CL)对培养的大鼠海马锥体神经元细胞膜钙激活钾通道 (KCa)的调节作用及癫痫的发病机理。方法　采用膜片钳单通道电流记录技术进行定量研究。结果　 1在内面向外式膜片下 ,KCa(12 0 .34± 2 5 .12 ) p S表现出钙离子浓度依赖性 (n=6 )、电压依赖性 (n=17)和四乙基胺 (TEA)阻断特点 ;2在细胞贴附式膜片下 ,浴液中加入 CL 可明显激活 KCa(P<0 .0 1) ;3在对称性高钾溶液中 ,使浴液 [Ca2 + ]i 为 10 - 8m ol/L,维持神经元膜电位为 2 0 m V,当 CL 为 0 μl/ m l和 1.0 μl/ m l时 ,可分别使 KCa开放概率从 0 .0 2 5增加到 0 .5 5 3(P<0 .0 1) ,通道活动的平均开放时间 (ms)从 1.875± 0 .4 12增加到 6 .82 9± 0 .136 ,平均关闭时间 (m s)从 179.342±13.831降低到 6 .4 12± 1.383(n=2 5 ,P<0 .0 1)。结论　在 CL 诱导的癫痫发病中 ,钙激活钾通道活化可能起重要的负反馈调节作用。     

马桑内酯致慢性癫痫鼠海马谷氨酸脱羧酶阳性神经元的变化

目的：观察马桑内酯慢性癫痫模型中谷氨酸脱羧酶(glutamlc acid decarhoxylase，GAD)阳性神经元的变化与癫痫的关系。方法：用马桑内酯(coriaria lactone，CL)亚致惊剂量肌注的方法建立慢性癫痫模型，对照组以生理盐水注射。用振动切片机连续冠状切片，选取含海马结构中部的相邻切片，行GAD65／GAD67免疫组织化学染色。结果：1．马桑内酯致痫组大鼠均被点燃，且随着注射次数的增加，发作的潜伏期逐渐缩短(从50min减少到10min左右)，发作时间逐渐延长(从数分钟到数十分钟)，对照组均无发作。2，海马各区和齿状回GAD65／GAD67阳性神经元数在马桑内酯致痫组明显低于正常组，免疫反应减弱。结论：马桑内酯致痫鼠中GAD65／GAD67神经元数目的减少，免疫反应减弱，与癫痫关系密切。     

马桑内酯致痫大鼠皮层及海马神经元的放电模式

在腹腔注射马桑内酯所致的急性癫痫和慢性点燃癫痫大鼠模型上，观察了大脑皮层和海马神经元膜电位的变化及放电模式。结果显示：皮层脑电图出现明显的阵发性痫性放电，胞内微电极记录皮层及海马神经元放电的模式为：①单纯去极化；②去极化并伴有阵发性或持续性放电；③去极经与超极化交替出现等。表明马桑内酯可以引起大脑皮层及海马神经元生物电活动的改变，其改变形式不一，但主要引起去极化。     

马桑内酯致痫大鼠皮层及海马神经元的放电模式

在腹腔注射马桑内酯所致的急性癫痫和慢性点燃癫痫大鼠模型上，观察了大脑皮层和海马神经元膜电位的变化及放电模式。结果显示：皮层脑电图出现明显的阵发性痫样放电，胞内微电极记录皮层及海马神经元放电的模式为：①单纯去极化；②去极化并伴有阵发性或持续性放电；③去极化与超极化交替出现等。表明马桑内酯可以引起大脑皮层及海马神经元生物电活动的改变，其改变形式不一，但主要引起去极化。     

马桑内酯对大鼠海马锥体神经细胞内钙稳态的影响

目的　了解钙离子及钙通道在癫痫发病中的作用 ,探讨马桑内酯 (coriaria lactone,CL)调节神经细胞内钙稳态的机理。方法　利用激光扫描共聚焦显微镜和细胞培养技术 ,观察致痫剂 CL 对 Wistar乳鼠海马单个锥体神经细胞内游离钙离子 (Ca2 +)浓度的影晌。结果　经致痫剂 CL 作用后 ,锥体神经细胞内 Ca2 +浓度高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,但其升高不呈剂量依赖性 (P>0 .0 5 ) ;经钙通道阻滞剂尼莫地平处理后 ,CL 虽然仍能引起神经元胞内 Ca2 +浓度升高 (P<0 .0 1) ,但与单纯使用 CL 组相比仍有明显差异 (P<0 .0 0 1)。结论　 L-型钙通道开放在痫性放电的发生、发展上起了重要作用 ,促进钙通道开放可能是马桑内酯致痫的重要途径之一。     

马桑内酯癫痫大鼠海马的形态计量研究

用１０只健康成年ＳＤ大鼠，５只实验鼠在左侧大脑皮质前肢运动区注射ＣＬ３．８μｌ诱发癫痫；５只对照鼠注射等量生理盐水、无癫痫发作。在癫痫鼠发作６０分钟后与对照鼠同时取脑，比较海马的结构。发现癫痫鼠海马ＣＡ１区锥体细胞粗面内质网、溶酶体和线粒体的面积分数显著增加，表明癫痫发作６０分钟，海马ＣＡ１区锥体细胞已发生了某些超微结构改变，这为进一步研究癫痫脑神经元损伤的可复性打下了基础。     

马桑内酯点燃大鼠海马脑片CA1区的双脉冲...

Paired-pulse depression (PPD) technique was used to investigate the potency of recurrent synaptic inhibition mediated by GABA in area CA1 of 54 hippocampal slices from coriaria lactone (CL)-kindled and control rats. When paired stimuli were sent to the axon of CA1 pyramidal cell and Schaffer collaterals, the effect of population spike PPD lasted about 40-60ms; no significant change was observed on PPD potency between kindled and control groups (P = 0.06, 2-way ANOVA). The results indicate that the GABA-ergic synaptic inhibition seemed not to play a key role in the maintenance of the chemical kindling induced by CL.     

左乙拉西坦对马桑内酯致痫海马神经细胞钠电流的影响

目的 探讨左乙拉西坦 (Levetiracetam, LEV) 对马桑内酯(coriaria lactone, CL)致痫SD大鼠海马神经元钠电流增加的影响.方法 利用膜片钳全细胞模式, 记录急性分离后CL致痫的大鼠海马神经元钠电流,并给予LEV进行干预,分为对照组、LEV 150 μmol/L组、LEV 300 μmol/L组和未处理组.另用LEV 300 μmol/L预处理40 min后再给予CL致痫,观察钠电流的变化情况.结果 CL致痫后钠电流增加,加入LEV 150 μmol/L后最大电流峰值增加了36.92%±2.84%(P＜0.05),与未处理组比较差异无统计学意义(P＞0.05).LEV 300 μmol/L组钠电流增加了16.58%± 1.56%(P＞0.05);但与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).经LEV预处理后,CL仍使钠电流增加了32.86%±6.73%(P＜0.05),与未处理组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LEV未能抑制CL致痫海马细胞钠电流的增加,其抗癫痫作用可能不是通过抑制钠电流而产生的.     

The Effect of Coriaria Lactone on NMDA Receptor Mediated Currents in Rat Hippocampal CAI Neurons

To investigate the exact mechanism of epileptogenesis induced by coriaria lactone (CL), the effect of CL on NMDA receptor mediated current (Iasp) in rat hippocampal CAI neurons was investigated by using nystatin perforated whole-cell patch clamp. 10-6-10-4 mol/L Asp acted on NMDA receptors and elicited an inward current (Iasp) at a holding potential (VH) of -40mV in presence of 10-6 mol/L glycine and absence of Mg2+ extracellularly. CL enhanced NMDA receptor mediated current induced by Asp, but had no effect on threshold concentration, EC50,Hill coefficient as well as maximal-effect concentration and reversal potential of Iasp. The effect had no relationship with holding potential. These results showed that CL could enhance NMDA receptor mediated current to increase [Ca2+]I of neurons by acting on Gly site, thereby inducing epilepsy.     

马桑内酯对锥体神经元ATP敏感钾通道的作用

目的　研究致痫剂马桑内酯 (CL)对大鼠海马锥体神经细胞膜 ATP敏感钾通道 (KATP)的影响及KATP在癫痫发病中的作用。方法　用膜片钳单通道电流记录和组织培养技术对锥体神经元 ATP敏感钾通道进行研究。结果　对称性高钾溶液条件下 ,KATP的翻转电位接近 0 m V,通道可被 TEA阻断 ;0 .5 mol/ L的 ATP可抑制通道活动 ;30μmol/ L的二磷酸核苷 (DNP)可使通道开放增多 ;其电流 -电压曲线可被直线拟合 ,通道电导值为78.2 3± 12 .0 4 p S。 CL可明显激活 KATP,优降糖能抑制激活的通道。结论　在 CL诱导的癫痫发作中 ,ATP敏感钾通道开放的作用是降低动作电位频率、保护神经元 ,可能起一种负反馈调节作用     

钙通道阻滞剂维拉帕米对马桑内酯所致家兔海马点燃性癫痫发作的影响

作者用马桑内酯所致家兔海马点燃模型,观察了钙通道阻滞剂维拉帕米对痫性活动的影响。实验结果表明,海马内直接注入维拉帕米对家兔点燃性癫痫发作有对抗作用,但肌肉注射效果差,这可能与该药不易通过血脑屏障有关。     

SC1001钠盐对马桑内酯所致家兔海马点燃性癫痫发作的影响

作者用点燃效应模型对SC1001钠盐的抗痫作用进行了观察。实验结果表明,此药对马桑内酯所致家兔海马点燃性发作有一定的对抗作用,但肌肉注射SC1001钠盐100mg/kg的疗效不如肌肉注射苯巴比妥钠30mg/kg显著。     

马桑内酯在大鼠离体海马脑片上引起的癫痫样放电活动

采用大鼠离体海马脑片技术,建立了马桑内酯(Coriaria lactone,CL)引起的海马CA 1区锥体细胞癫痫样放电活动模型,并初步探讨了CL的致痫作用机理,可能与直接影响锥体细胞固有爆发放电能力有关。     

急性胰腺炎后心肌细胞快钠通道的变化

目的探讨急性胰腺炎后心肌细胞快钠通道的变化.方法以开腹胰管内注射牛磺胆酸钠的方法制备大白鼠急性胰腺炎实验模型,24～48 h后处死动物分离单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术观察心肌细胞快钠通道电流(INa)的变化,同时设假手术对照组.结果急性胰腺炎大鼠心室肌细胞的快钠电流受到抑制,电流密度-电压关系曲线上移,其峰值电流密度:对照组为(-13.55±5.33)pA/pF,急性胰腺炎组为(-6.80±2.03)pA/pF,较对照组下降了49.82%,P＜0.001;其失活曲线左移,半数最大失活电位对照组为(-105±21)mV;急性胰腺炎组为(-121±26)mV,与对照组比较显著减小,P＜0.01,失活速度加快;急性胰腺炎组INa恢复速度明显减慢,恢复时程延长,和对照组比较P＜0.01.结论急性胰腺炎后心室肌细胞的快钠通道受抑制,细胞兴奋性及传导速度下降,可能为急性胰腺炎后发生心律失常的机制之一.     

马桑内酯致大鼠点燃效应癫痫间期蓝斑去甲肾上腺素荧光组织化学的研究

用去甲肾上腺素(NA)荧光组化法研究马桑内酯致大鼠点燃效应癫痫发作间期的蓝斑,荧光强度通过显微摄影的自动曝光系统进行相对定量。结果显示:点燃效应癫痫发作间期蓝斑NA比对照组减少,作者认为NA的抑制作用减弱是导致癫痫的原因之一。