HIF-1α、EGFR、Caspase-3在鼻咽癌中的表达

目的研究HIF-1α、EGFR、Caspase-3在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法采用免疫组化S-P法检测28例鼻咽癌和25例鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α、EGFR及Caspase-3的表达,RT-PCR检测YC-1对鼻咽癌细胞CNE-2Z中EGFRmRNA表达的影响。结果在鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α和EGFR的阳性率均高于鼻咽癌组（P〈0.05）;Caspase-3的阳性率低于鼻咽癌组（P〉0.05）。Spearman相关分析显示鼻咽癌组织中HIF-1α与EGFR表达具有相关性（γ=0.387,P〈0.05）,与Caspase-3表达无明显相关性。鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α阳性表达鼻咽癌患者放疗后复发时间早于阴性表达患者,但差异无统计学意义（P〉0.05）,HIF-1α与Caspase-3表达呈负相关（γ=-0.436,P〈0.05）,与EGFR表达无明显相关性。YC-1抑制CNE-2Z细胞中EGFRmRNA的表达（P〈0.01）。结论 HIF-1α及EGFR表达与鼻咽癌放射敏感性有关,EGFR可能通过非HIF-1α依赖途径参与鼻咽癌放疗后复发。     

鼻咽癌组织EBI3和p35蛋白的表达及临床意义

目的 检测EBI3、p35在鼻咽癌（NPC）组织中的表达水平,分析EBI3和p35在NPC发生发展中的作用及临床意义。方法 应用免疫组织化学方法检测50例NPC患者、30例癌旁黏膜和25例鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中EBI3和p35表达,并分析其与NPC患者临床分期、病理组织类型和淋巴结转移的关系。结果 NPC组织中EBI3高表达率为62.0%,显著高于癌旁黏膜组织中的36.7%（χ2=4.83,P〈0.05）和鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中的36.0%（χ2=4.53,P〈0.05）。T3～T4期NPC患者中EBI3高表达率显著高于T1～T2期患者（χ2=17.24,P〈0.01）;非角化型鳞癌NPC患者癌组织中EBI3高表达率显著高于角化型鳞癌患者（χ2=8.78,P〈0.01）;有颈部淋巴结转移NPC患者癌组织中EBI3高表达率显著高于无颈部淋巴结转移癌患者（χ2=14.49,P〈0.01）。p35高表达率为60.0%,显著高于癌旁黏膜组织中的33.3%（χ2=5.33,P〈0.05）和鼻咽黏膜慢性炎患者炎症组织中的36.0%（χ2=3.85,P〈0.05）。T3～T4期NPC患者中p35高表达率显著高于T1～T2期患者（χ2=19.28,P〈0.01）;非角化型鳞癌NPC患者癌组织中p35高表达率显著高于角化型鳞癌患者（χ2=7.24,P〈0.01）;有颈部淋巴结转移NPC患者癌组织中p35高表达率显著高于无颈部淋巴结转移癌患者（χ2=5.56,P〈0.05）。NPC组织中EBI3和p35表达之间呈正相关（r=0.328,P〈0.05）。结论 NPC组织中EBI3和p35高表达与鼻咽癌发生、发展相关,有望作为患者预后判断的重要标志物。     

鼻咽非角化鳞状细胞癌组织内T淋巴细胞亚群的变化及意义

目的观察T淋巴细胞亚群在鼻咽非角化鳞状细胞癌中的表达情况,探讨免疫细胞的变化在鼻咽癌发生发展中的意义。方法通过免疫组化SP法和免疫组化双染法检测CD3、CD4、CD8、CD4FoxP3和CD8FoxP3在101例鼻咽癌和21例鼻咽黏膜慢性炎中的表达。结果 CD3、CD4、CD8、CD4FoxP3、CD8FoxP3在鼻咽癌组与黏膜慢性炎组之间的表达差异均有统计学意义,P〈0.05。CD3^＋、CD4^＋FoxP3^＋、CD8^＋FoxP3^＋T细胞在分化型非角化鳞状细胞癌和未分化型鳞状细胞癌中的表达差异有统计学意义,P〈0.05。结论鼻咽非角化鳞状细胞癌中,T淋巴细胞亚群数量变化提示了机体免疫功能低下,为鼻咽癌的发生发展提供了良好的条件。不同分化程度的鼻咽癌肿瘤微环境内的免疫状态不同。     

鼻咽癌Survivin基因表达与预后关系的研究

目的探讨鼻咽癌组织中凋亡抑制基因Survivin蛋白和mRNA表达与鼻咽癌患者预后之间的关系。方法应用免疫组织化学和原位杂交技术检测44例鼻咽癌患者活检组织标本Survivin蛋白和mRNA表达量,以30例同期鼻咽慢性炎症患者作为对照。结果鼻咽癌患者两者阳性率分别为79.5%、75.0%,明显高于对照组（P〈0.01）,且Survivin蛋白与mRNA水平具有很好的一致性;两者任何一项高表达的鼻咽癌患者平均生存时间均低于低表达者（P〈0.01）。结论 Survivin基因的过度表达在鼻咽癌的发生、发展中起重要作用,而且对其预后有重要的临床价值。     

晚期鼻咽癌的原癌基因c—MetmRNA表达与其生物学行为及预后的关系

目的探讨晚期鼻咽分化型非角化性鳞癌中c—metmRNA的表达与生物学行为及预后的关系。方法应用原位杂交检测晚期鼻咽分化型非角化性鳞癌标本55例c—metmRNA的表达。结果55份晚期鼻咽分化型非角化性鳞癌中,总阳性率为65．5％（35／55）,生存期在5年以下的患者c—metmRNA高表达占8．6％（18／37）,5年以上患者占16．7％（3／18）,两组间差异有统计学意义（χ2=5．25、P〈0．05）。c—metmRNA表达在有颅底侵袭组为74．4％（32／43）,无颅底侵袭组为33．3％（4／12）,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。c—metmRNA表达在颅神经损伤组为77．7％（35／45）,无颅神经损伤组为10．0％（1／10）,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论本组晚期鼻咽分化型非角化性鳞癌患者中c—metmRNA的表达与其侵袭有密切的关系,c—met在鼻咽癌的预后中有重要价值,可作为临床治疗、预后的参考指标。     

IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中的表达及意义

目的探讨白细胞介素．8（IL-8）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白表达在鼻咽非角化性癌发生发展中的意义。方法应用免疫组化S-P法检测15例鼻咽黏膜慢性炎和80例鼻咽非角化性癌中IL-8和VEGF的表达,分析两者的相关性及与临床病理指标的关系。结果黏膜慢性炎组织IL-8和VEGF阳性率均为20％（3／15）,而鼻咽非角化性癌中IL-8和VEGF的阳性率分别为67．5％（54／80）和65％（52／80）,IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中的阳性率均明显高于黏膜慢性炎组织（P〈0．05）;IL-8与VEGF表达呈正相关（r=0．328,P〈0．05）;IL-8和VEGF与性别、年龄、颈部淋巴结转移、病理类型、临床分期等临床病理特征无相关性。结论IL-8和VEGF在鼻咽非角化性癌中存在过表达,在鼻咽非角化性癌发生发展中可能起协同作用。     

鼻咽癌组织中LRP蛋白的表达及意义

目的探讨肺耐药相关蛋白LRP在鼻咽癌组织中的表达水平及意义。方法免疫组化SP法检测LRP蛋白在鼻咽癌和慢性鼻咽炎粘膜组织中的表达情况及放疗前后肿瘤残留率。结果 56例鼻咽癌组织中LRP蛋白阳性表达率为41.1%（23/56）,正常鼻咽粘膜组织中阳性率为7.60%（3/26）,2组间差异有统计学意义（P〈0.05）。LRP蛋白表达与鼻咽癌分化程度,淋巴结转移范围,TNM分期及性别、年龄无关（P〉0.05）。LRP蛋白表达与放疗鼻咽癌放疗结束时肿瘤残留率率有关,具有统计学意义（P〈0.05）。结论 LRP蛋白在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽粘膜组织中的表达,提示LRP蛋白与鼻咽癌的发生有关,鼻咽癌具有较高的原发耐药性。LRP与鼻咽癌分化程度,淋巴结转移范围,T分期及性别、年龄无关,但与鼻咽癌放疗结束时肿瘤残留率率有关,LRP蛋白降低了鼻咽癌对放疗的敏感性。     

△Np63、p21~(WAF1)及MDM2基因蛋白在鼻咽癌组织表达的研究

目的 :探讨鼻咽癌组织中△Np6 3、p2 1WAF1 和MDM2蛋白的表达及意义。方法 :采用免疫组化方法研究△Np6 3、p2 1WAF1 和MDM2蛋白在 6 0例鼻咽癌活检组织的表达 ,6 0例鼻咽癌的组织类型包括角化性鳞癌 3例 ;非角化性癌 5 7例 ,其中含未分化癌 12例。结果 :6 0例鼻咽癌抗△Np6 3染色成不同程度阳性反应 ,表现为细胞核棕黄色。其中角化性鳞癌呈弱阳性表达 ,癌巢周边基底样细胞阳性略呈环状分布 ,或弥散分布 ;非角化性癌多呈强阳性反应 ,染色深 ,呈弥漫或片状分布 ,癌旁粘膜及正常鼻咽粘膜仅基底层和上基层细胞呈阳性表达。p2 1WAF1 在鼻咽癌、癌旁上皮及正常粘膜上皮的阳性率分别为 2 6 %、15 %、7% ,在三组的表达无显著性差异 ;MDM2在鼻咽癌、癌旁上皮及正常粘膜上皮的阳性率分别为 19%、5 %、4 % ,在癌组和非癌组表达有显著性差异。结论 :△Np6 3蛋白在鼻咽非角化性癌中高表达 ,表明与细胞恶性增生密切相关 ,可能在癌细胞多相性退分化中起作用 ,是鼻咽非角化性癌有价值的诊断指标。MDM2在鼻咽癌组的表达显著高于对照组 ,起癌基因作用。△Np6 3和MDM2均抑制p5 3转录活性 ,使NPC中p5 3虽然无突变却缺乏失活。p5 3活性低则不能上调p2 1WAF1 ,G1 关卡失去功能 ,形同虚设。△Np6 3及MDM2高表达和p2 1WAF1 低表     

bFGF和uPA蛋白表达与鼻咽癌浸润转移及预后的关系

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）蛋白的表达与鼻咽癌浸润转移及预后的关系。方法：用SupervisionTM免疫组化方法检测bFGF和uPA蛋白在155例鼻咽癌及20例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达情况。结果：bFGF和uPA蛋白在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为80.6%和79.4%,在鼻咽黏膜慢性炎中均无表达,两组间的差别具有统计学意义（均P〈0.05）。bFGF和uPA蛋白的表达与鼻咽癌TNM分期和临床分期相关,差异具有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）。鼻咽癌组织中bFGF和uPA蛋白表达呈正相关（r=0.557,P=0.000）。bFGF和uPA蛋白单独或联合表达阳性患者放疗后中位生存时间短于阴性患者（P=0.001,P=0.01）。结论：bFGF和uPA蛋白表达与鼻咽癌的浸润转移有密切关系,并在鼻咽癌浸润转移过程中起到协同作用;bFGF和uPA蛋白表达阳性鼻咽癌细胞具有高转移潜能;二者单独或联合表达提示预后不良。     

CD25+细胞在鼻咽癌中的表达及与EBV的关系

目的探讨CD25^＋细胞在鼻咽癌组织中的表达情况及EB病毒感染对CD25表达的影响。方法用免疫组织化学方法检测CD25^＋细胞在鼻咽癌组织和鼻咽慢性炎症组织中的表达情况。并用组织原位杂交技术检测EB病毒对其表达的影响。对照组选取鼻咽慢性炎症组织。结果CD25^＋淋巴细胞在鼻咽癌组织中比在鼻咽慢性炎症组织中的表达明显升高．差异具有显著性意义（P〈0．001）,且在未分化癌中表达高于角化型癌和非角化型癌（P〈0．05）。原位杂交显示EB病毒与CD25^＋淋巴细胞高表达有关。结论CD25^＋淋巴细胞在鼻咽癌组织中表达高于慢性炎症组织,EB病毒感染与CD25^＋淋巴细胞表达间存在相关性。     

Survivin mRNA在鼻咽癌中表达及其与细胞凋亡关系

目的检测鼻咽癌组织中Survivin的表达及肿瘤细胞凋亡情况。方法应用原位杂交和原位末端标记技术对64例鼻咽癌和30例慢性鼻咽炎鼻咽部组织中Survivin的表达和细胞凋亡进行检测,并分析两者之间的关系。结果鼻咽癌Survivin的阳性表达率为65．6％,慢性鼻咽炎鼻咽部组织阳性表达率为33．3％,差异有极度统计学意义（P〈0．01）;在Survivin阳性表达和阴性表达的组织中,细胞凋亡指数分别是（0．63±0．36）和（1．58±0．44）,Survivin阳性表达者明显低于Survivin阴性表达者;差异有统计学意义（P〈0．05）。慢性鼻咽炎鼻咽部组织中细胞凋亡指数为1．32＋0．36,与NPCSurvivin阳性表达者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在鼻咽癌的发生发展过程中Survivin表达引起的凋亡抑制可能有一定的作用。     

无精子症患者病理组织中Survivin与Cnspase-3的相关性研究

目的探讨生存素（Survivin）与半胱天冬氨酸蛋白酶（Caspase-3）在无精子症睾丸中的表达相关性。方法用免疫组织化学方法检测44例无精子症患者睾丸组织中的Survivin、Caspase-3。结果Survivin阳性（＋-＋＋＋）表达率在生精功能正常组与生精功能异常组分别为100．0％（11／11）、63．6％（21／33）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）;Caspase．3阳性（＋-＋＋＋）表达率在生精功能正常组与生精功能异常组中分别为18．2％（2／11）、39．4％（13／33）,两者比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Survivin与Caspase-3表达呈负相关（r=-0．636,P〈0．05）。结论Survivin与Caspase-3的低表达可能共同参与了人睾丸精子生成过程。     

VEGFC、NF-κBp65及Survivin在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的 通过检测VEGF-C、NF-κBp65及Survivin在鼻咽癌组织（实验组）及鼻咽部慢性炎症组织（对照组）中的表达,探讨它们在鼻咽癌发生、发展过程中的作用及相互关系。方法 采用免疫组织化学技术SP法检测VEGF-C、NF-κBp65及Survivin在57例鼻咽癌和20例对照组中的表达情况,并观察其与鼻咽癌的临床病理特征的关系。结果  VEGF-C、NF-κBp65及Survivin在鼻咽癌组织的阳性表达率分别为73.68％、61.40％、68.42％,而在对照组中的表达率分别为40.00％、30.00％、20.00％,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。VEGF-C、NF-κBp65及Survivin的表达与临床分期、淋巴结转移密切相关（P＜0.05）。NF κBp65的表达与VEGF-C及Survivin的表达呈显著正相关,VEGF-C与Survivin的表达亦呈显著正相关。结论 NF-κBp65可能通过上调VEGF-C及Survivin的表达促进鼻咽癌的发生、发展及颈部淋巴结转移;VEGF-C和Survivin在鼻咽癌的发生发展中存在着协同作用。     

TNF—α对鼻咽癌放射增敏的体内实验研究

目的探讨TNF—α对鼻咽癌放射敏感性的影响。方法裸鼠体内移植瘤实验观察CNE-2Z、H5、S1放射后的体内增殖能力,采用HE染色观察各组裸鼠移植瘤组织坏死程度、核分裂指数、肺转移率和淋巴结转移率,免疫组织化学染色和图像分析法检测不同方法处理的s1裸鼠移植瘤组织中Caspase-3和Survivin的表达。结果鼻咽癌细胞CNE-2Z存在放射敏感性异质性,S1细胞是具有放射抵抗潜能的亚克隆株。TNF-α联合放射治疗对s1裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用（P〈0．01）,TNF—α联合放射治疗组中瘤组织坏死程度、核分裂指数、肺转移率和淋巴结转移率与生理盐水联合放射治疗组比无明显差异（P〉0．05）。TNF—α联合放射治疗组S1裸鼠体内移植瘤细胞核中Caspase-3表达高于单独TNF—α处理组（P〈0．05）;各组S1裸鼠移植瘤细胞浆中Caspase-3及Survivin的表达无明显差异（P〉0．05）。结论TNF—α联合放射治疗可能通过影响胞核中Caspase-3表达抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤生长。     

丙型肝炎病毒NS4B调控肝细胞凋亡的相关机制研究

目的：研究HCV—NS4B对肝细胞Caspase-3及Survivin表达的影响,探讨HCV—NS4B对肝细胞凋亡的影响及相关机制。方法：通过转染丙型肝炎病毒非结构蛋白4B（HCV—NS4B）至L02肝细胞中,设置三组细胞（空白对照组、空白载体PCXN2组、PCXN2-NS4B组）,利用流式细胞仪检测各组Caspase-3的表达情况,免疫组化方法观察三组中Survivin的表达情况。结果：PcxN2-Ns4B转染入LO2细胞并有稳定表达,流式细胞术检测各组Caspase-3的表达情况：空白对照组、转染PCXN2组及PCXN2-NS4B组均有Caspase-3表达,分别为：（23．45±1．57）％、（23．17±1．79）％及（4．34±0．59）％,空白对照组、转染PCXN2两组差异无统计学意义（P〉0．05）,而空白对照组、转染PCXN2组与PCXN2-NS4B组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫组化方法检测Survivin的表达情况：空白对照组阳性表达率为25％,PCXN2组表达率为16．67％,PCXN2-NS4B组表达率为75％,空白对照组、转染PCXN2两组差异无统计学意义（P〉0．05）,而空白对照组、转染PCXN2组与PCXN2-NS4B组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：①NS4B转染入肝细胞后有稳定表达;②NS4B可抑制Caspase-3表达、促进Survjvin的表达;③HCV～NS4B可能抑制Caspase-3表达、促进Survivin的表达而抑制肝细胞凋亡。     

结肠癌术后辅助化疗对血Caspase-3、Survivin、CD44v6表达的影响

目的探讨结肠癌术后辅助化疗对外周血半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase-3）、存活素（Survivin）mRNA及黏附分子CD44拼构变异体6（CD44v6）表达的影响及其意义。方法接受根治性切除术的TNM分期Ⅱ期结肠癌患者60例,按术后是否进行辅助化疗分为未化疗组30例,化疗组30例。化疗组化疗方案为奥沙利铂/亚叶酸钙/5-氟尿嘧啶,共化疗6个疗程。比较两组患者术前1 d、术后6个月外周血Caspase-3、Survivin、CD44v6的表达水平。应用RT-PCR检测Caspase-3和Survivin表达,应用流式细胞仪检测CD44v6表达。结果术前两组外周血Survivin、Caspase-3、CD44v6表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。术后6个月,两组外周血Survivin、CD44v6表达水平较术前明显降低（P〈0.05）,且化疗组下降更明显（P〈0.05）。术后6个月,两组外周血Caspase-3表达水平较术前明显升高（P〈0.05）,且化疗组升高更明显（P〈0.05）。结论结肠癌术后辅助化疗可能通过细胞凋亡机制抗肿瘤复发,且术后辅助化疗具有抑制肿瘤转移的作用。     

汉黄芩素对胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、Survivin及Caspase-3表达的影响

目的探讨汉黄芩素在人胶质瘤患者中对U251细胞的增殖与凋亡及对存活素（Survivin）及半胱天冬酶-3（Caspase-3）表达的影响。方法不同浓度汉黄芩素作用于人胶质瘤96株U251细胞,并与使用替莫唑胺（TMZ）的阳性对照组（48株）及未给予任何药物的空白对照组（48株）对比细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及Survivin和Caspase-3蛋白的表达强度。结果各浓度汉黄芩素对细胞增殖抑制率均显著高于空白对照组,且随药物浓度及作用时间的增加呈现出显著增高趋势（P〈0．05）,汉黄芩素组细胞凋亡率显著高于TMZ组（P〈0．01）,TMZ组显著高于空白对照组（P〈0．01）,在汉黄芩素组内,细胞凋亡率随着药物浓度增加显著增加（P〈0．05）;汉黄芩素组Survivin表达强度佩著低于TMZ及空白对照组（P〈0．01）;两药物组Caspase-3表达强度显著高于空白对照组（P〈0．01）。结论汉黄芩素可通过调节Survivin、Caspase-3蛋白的表达对胶质瘤U251细胞起到诱导凋产的作用。     

BUB1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨BUB1在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化EliVision二步法检测60例鼻咽癌组织、25例慢性鼻咽炎组织标本中BUB1蛋白的表达,并分析其与鼻咽癌患者临床特征的关系。结果鼻咽癌组织中BUBl的阳性表达率为45．0％（27／60）,低于慢性鼻咽炎组织的84．0％（21／25）,两者差异有统计学意义（P〈0．01）;鼻咽癌颈淋巴结转移组BUB1阳性表达率为30．8％（12／39）,低于无淋巴结转移组的71．4％（15／21）,两者差异有统计学意义（P〈0．01）;BUB1的表达与鼻咽癌临床分期相关,随临床分期的提高,BUBI的表达逐渐下降,差异有统计学意义（P〈0．01）;BUB1在鼻咽癌中的表达与患者年龄、性别、T分期、颅底破坏及颅神经损伤无相关性（均P〉0．05）。结论BUB1的低表达在鼻咽癌发生、发展中可能发挥重要作用,BUB1可作为鼻咽癌诊断及预后的参考指标之一。     

食管鳞癌中Survivin和Smac/Diablo的表达及意义

目的:探讨Survivin和Smac/Diablo在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌的病例和相对应的30例病理确定为正常组织及30例癌旁组织进行Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白半定量免疫组化分析。结果:Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为81.25%,10.0%,3.33%,有显著性差异(χ2=72.983,P<0.01)。Smac/Diablo在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为61.25%,76.67%,93.33%,有显著性差异(χ2=11.518,P<0.01)。Survivin和Smac/Diablo表达与患者的年龄、性别、分化程度、浸润深度等均无明显关系(P>0.05)。但与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。在Smac阳性组中的表达率为23.21%(13/56),在Smac/Diablo阴性组中的表达率为16.67%(9/54),两者间有统计学差异(P<0.05),两者关联性较强,呈负相关。Survivin阳性率与淋巴结转移呈低度正相关(r=0.329,P<0.05),Smac/Diablo阳性率与淋巴结转移呈负相关(r=-0.733,P<0.05)。结论:Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白表达与食管癌的病理分期,淋巴结转移都有着密切的关系,Smac/Diablo在食管鳞癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能在食管鳞癌细胞凋亡信号传导网络中发挥重要作用。