藻酸包埋异体关节软骨细胞修复兔膝关节软骨缺损

目的 探讨异体关节软骨细胞作为软骨种子细胞修复关节软骨缺损的可行性。方法 无菌取成年新西兰大白兔四肢关节软骨，酶消化法分离细胞，条件培养基体外培养扩增，藻酸钙凝胶包埋培养1周，植入兔膝关节股骨髁间软骨缺损，对照组缺损旷置。术后3、6个月分别取材，观察缺损修复情况；切片特染和免疫组化观察修复组织病理，并Wakitnni评分评估修复质量。结果 7／8缺损为成熟透明软骨组织修复，1／8为纤维软骨修复；Wakitani平均评1．75分；空白对照组评7．65分。实验组3个月组标本未见淋巴细胞或白细胞浸润，6个月组标本未见明显退变；所有标本均未见藻酸残留。结论 用藻酸包埋异体关节软骨细胞修复兔膝关节软骨缺损的方法是可行的，异体关节软骨细胞在适当的处理后可成为关节软骨组织工程种子细胞。     

带蒂骨膜瓣翻转移植修复兔关节软骨缺损

目的 :设计建立一种以骨膜固有血管血供为主的带蒂骨膜瓣翻转移植修复关节软骨缺损的新方法。方法 :用墨汁混合液血管灌注观察大耳白兔股骨外髁部切取的“U”形骨膜瓣模型的血供。取大耳白兔 32只 ,在双膝股骨髌面外侧造成 5mm× 8mm的全层软骨缺损 ,分别行带蒂骨膜瓣 (实验组 )和游离骨膜移植 (对照组 ) ,术后 2周、4周、8周、12周取材行组织形态学观察。结果 :该骨膜瓣模型的血供主要来自骨膜固有血管 ,可维持骨膜瓣的存活。术后 4周 ,对照组和实验组新生组织的优势组织性质分别为纤维组织和幼稚软骨 ,术后 12周 ,实验组有75 %的优势组织性质为类透明软骨 ,对照组为 12 .5 % ,2组比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :带蒂骨膜瓣移植的成软骨能力优于自体游离骨膜移植 ,且取材简便、术式简单、操作容易。     

同种异体软骨细胞复合PLGA支架修复关节软骨缺损的免疫学观察

目的应用同种异体软骨细胞移植修复兔膝关节软骨缺损,评估术后免疫学表现及其修复效果。方法供体为1月龄新西兰兔1只,取其膝关节全层软骨片,0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化,分离培养软骨细胞。受体为4月龄新西兰兔30只,暴露股骨髁前面关节面,用钻在股骨内髁制作直径4mm、深2mm（达髓腔）的关节软骨缺损模型。软骨细胞移植组植入体外培养12d的PLGA软骨细胞复合体,PLGA移植组只植入PLGA,假手术组只做皮肤切开手术。术后不固定患肢,兔笼中活动。术前、术后3、5、7、12周分离受体外周血淋巴细胞,检测其与异体软骨细胞和PLGA混合后的刺激指数（stimulation index,SI）;术后5、7、12周取修复区软骨及软骨下骨观察局部组织学反应。结果软骨细胞移植组术后检测到淋巴细胞增殖,移植物局部见到淋巴细胞浸润。结论同种异体软骨细胞复合PLGA移植存在免疫反应。     

膝关节炎应用透明质酸钠单独治疗与联合复方倍他米松关节内注射治疗的临床研究

目的:探讨膝关节炎患者经透明质酸钠(即玻璃酸钠)与复方倍他米松联合注入关节腔治疗的临床效果。方法:92例膝关节炎患者按治疗前后顺序均分为对照组(n=46,共55膝)和联合组(n=46,共56膝)。对照组关节腔内注入2 ml玻璃酸钠,联合组第1次注入玻璃酸钠的同时注入1ml复方倍他米松,1周/次,4周为1疗程。疗程结束1周后比较治疗前、后两组的Lysholm膝关节功能评分、VAS疼痛评分及疗效。结果:经治疗,两组的膝关节功能和疼痛均较治疗前有明显的改善(P<0.05),且联合组的Lysholm评分和VAS评分均优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组的治疗有效率及不良反应发生率比较未见统计学差异(P>0.05)。结论:透明质酸钠单独治疗与其和复方倍他米松关节内联合注射治疗膝关节炎均有明显效果,联合治疗的短期效果较好。     

异种骨复合自体骨髓基质干细胞修复节段性骨缺损

目的探讨异种骨复合骨髓基质干细胞(MSCs)修复节段性骨缺损的可行性。方法将MSCs与异种松质骨在体外联合培养,兔桡骨中上段制成1.5 cm的骨-骨膜缺损模型,实验组植入复合异种骨,对照组植入单纯异种骨,空白对照组不植入任何材料,分别于术后4、8、12周各时间点行标本的组织学观察、X线片观察、透射电镜观察及骨密度测试,比较其骨缺损区骨修复情况。结果术后第12周,实验组骨缺损区完全修复,骨密度接近正常;对照组骨缺损区修复缓慢,新骨形成量少;空白对照组骨缺损区未修复。结论异种骨复合MSCs修复节段性骨缺损能力强,在成骨速度和量上明显优于单纯异种骨。     

冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性研究

目的观察冷冻同种异体骨软骨移植修复大面积关节软骨缺损的可行性，为临床应用提供实验依据。方法共选取36只新西兰兔，随机数字表法分成供体组、实验组和对照组，每组12只。供体组制备冷冻同种异体胫骨内侧髁骨软骨移植物后处死；实验组将经程序深低温冷冻保存的同种异体胫骨内侧髁移植；对照组将取下的胫骨内侧髁原位植入。所有实验动物在术后12周处死。应用苏木精-伊红染色观察关节软骨组织的病理学变化，软骨缺损的组织学评分以半定量的改良Wakitani score法评估，内容包括：细胞种类、髓质染色、表面完整性、软骨的厚度、移植软骨在受体周围组织的完整性5个方面，采用0、1、2、3、4评分，最高总分14分。观察两组动物的大体标本、X线片、组织学检查、Waki-tani score评分及免疫组织化学检查结果。结果①移植软骨的大体观察：两组动物关节活动度正常，关节腔无粘连、无积液，实验组移植软骨颜色及高度与周围关节软骨大致相同，关节面较平整，基底部界限模糊。对照组关节软骨面平整、无塌陷，厚度不变。②两组动物关节X线片均见骨折线已模糊，对位、对线良好。③组织学检查：两组动物关节软骨均已被透明软骨覆盖，细胞排列有序，软骨基质大量分泌，未见淋巴细胞和浆细胞浸润。④两组动物关节软骨Wakitani score评分结果无显著性差异，总评分相近（P〉0.05）。⑤两组修复软骨Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强阳性。结论冻存同种异体骨软骨移植后可完全修复大面积关节软骨缺损，并与自体骨软骨块修复兔的关节软骨缺损在组织学上相近，未见免疫排斥反应。     

自体软骨膜移植修复关节面软骨的实验及临床研究进展

<正> 近年来国外、国内开展了自体软骨膜移植的实验研究。Lester(1959)在为漏斗胸畸形复发的儿童动手术时发在肋软骨膜可以再生软骨。Skoog 等(1972)通过动物实验证明软骨膜确有再生软骨的能力Ohlsen、Sohn 等又进一步把软骨膜移植于动物自身皮下、肌间、肝实质等处均生成软骨。Eng-kvist(1975)用自体软骨膜移植再生软骨的方法修复关节软骨缺损。自体软骨移植已有许多实验研究和一些临床研究报道,本文从     

自体红骨髓-骨膜碎片复合移植修复关节软骨缺损的形态学研究

[目的 ]观察自体红骨髓 骨膜碎片复合移植修复关节软骨缺损的形态学变化 .[方法 ]将自体红骨髓和骨膜碎片复合移植到 2 0例家兔膝关节股骨髌面上制作的 3 0mm× 6 0mm全层关节软骨缺损区 ,通过肉眼、光学显微镜、电子显微镜和图像分析等方法 ,观察不同时期缺损区修复组织的形态学变化 .[结果 ]术后第 4周缺损区修复组织细胞形态、分布及排列接近周围正常软骨组织 ,修复组织中单个软骨细胞平均面积达到正常水平 .[结论 ]自体红骨髓 骨膜碎片复合移植组织具有良好的成软骨能力 .     

兔骨髓基质细胞同种异体移植修复骨缺损的实验研究

目的 :观察同种异体骨髓基质细胞移植治疗骨缺损的效果。方法 :取新生新西兰大白兔四肢长管骨骨髓 ,分离后加入条件培养液体外培养 ,冻存复苏的细胞以明胶海绵吸附后回植于异体兔的桡骨缺损处作为实验侧 ,对侧以明胶海绵吸附生理盐水作为对照侧。分别于术后 2、4、8、 1 2周取材 ,观察其修复骨缺损的能力和免疫排斥反应。结果 :植入异体骨髓基质细胞明胶海绵复合体未见明显的免疫排斥反应 ;术后 1 2周实验侧全部骨性愈合 ,对照侧由纤维组织填充。结论 :同种异体骨髓基质细胞移植能有效地修复骨缺损     

聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯支架复合同种异体软骨细胞修复关节软骨缺损的实验研究

目的:探讨聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯(PHBV)三维多孔材料作为软骨组织工程支架的可行性及有效性.方法:采用"压片-热处理-粒子析出技术"制备PHBV多孔支架.体外分离培养软骨细胞后接种到PHBV支架体外培养4周,期间扫描电镜观察细胞在支架上的生长情况,然后与单纯PHBV支架同时植入兔膝关节软骨缺损区继续培养4、8、12周后取材,分别行大体、组织学、Ⅱ型胶原免疫组化观察.进行Wakitani评分,观察其体内修复关节缺损效果.结果:电镜观察示软骨细胞在支架上黏附、增殖良好并能分泌细胞外基质,组织学观察示PHBV支架浅层有新生软骨组织形成,于4周后开始形成透明软骨样结构且表面基本平整与宿主整合良好,组织学切片上可见类软骨形成并分泌甲苯胺蓝异染的软骨基质和软骨特异性Ⅱ型胶原. 结论:PHBV可以作为软骨组织工程支架材料,能够用于再生修复软骨的缺损.     

柱形藻酸钙载体复合细胞修复异体兔膝关节软骨缺损

目的：应用柱形藻酸钙载体复合骨细胞俱复兔膝关节软骨缺损,为骨关节病的组织工程学修复提供一定的实验依据,方法,应用自行制作的柱形藻酸钙载体复合消化分离的兔关节软骨细胞,共同植入异体兔膝关节软骨缺损处,分别于术后4,8和12wk观察大体标本及组织学修复结果：结果：术后8wk时缺损处可见一定程度的修复,到12wk时大体标本修复较好,修复组织和周围关节面界限不清,组织学见缺损处表现为软骨组织修复,结论：通过短期观察说明藻酸钙可以作为软骨的细胞的革体材料,用于关节软骨缺损修复的组织工程学研究。     

地奈德乳膏联合透明质酸修护生物膜对女性面部皮炎的治疗效果

目的分析地奈德乳膏联合透明质酸修护生物膜对女性面部皮炎的治疗效果。方法收集2017年1～12月海军军医大学第一附属医院皮肤科门诊就诊的面部皮炎女性患者80例,并将患者按照随机数字表法分成试验组(n=42)及对照组(n=38),试验组给予地奈德乳膏外用,仅限于面部皮损处,同时予透明质酸修护生物膜外涂于皮损及正常皮肤;对照组仅给予地奈德乳膏外用。两组患者同时给予抗组胺药物左西替利嗪口服。治疗16 d后对两组患者的皮损情况、治疗效果及治疗后4周的皮损复发率进行比较。结果治疗前,两组患者的特应性皮炎评分(SCORAD)差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的SCORAD评分均有改善,且试验组SCORAD评分改善情况优于对照组(P<0.05);试验组治疗有效率为88.10%,高于对照组的65.79%(P<0.05);停止治疗2周后,试验组复发率为24.14%(7/29),低于对照组的58.82%(10/17),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论透明质酸修护生物膜联合地奈德乳膏可提高女性面部皮炎的临床疗效,且复发率低。     

透明质酸联合肝素灌注治疗难治性间质性膀胱炎

目的 探讨透明质酸联合肝素灌注治疗难治性间质性膀胱炎的疗效.方法 对24例难治性女性间质性膀胱炎患者采用透明质酸40 mg、肝素4万U混合膀胱灌注,膀胱内保留60 min.每周1次,连续8周,之后改为每月1次,连续4月,随访6个月.观察治疗前后患者每日排尿次数、平均每次尿量、O'Leary-Sant间质性膀胱炎问卷评分(ICSI/ICPI)、盆腔疼痛评分(PUF)变化及钾离子试验和膀胱镜检.结果 23例患者完成治疗和随访,随访3月时,每日排尿次数明显减少、平均每次尿量明显增加,ICSI、ICPI、PUF评分明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).随访6月时,各项指标维持,与随访3月相比,差异无统计学意义(P＞0.05),与治疗前相比,差异有统计学意义(P＜0.01).钾离子试验阳性患者由治疗前的16例降为2例.19例患者黏膜下出血点消失或减轻.结论 透明质酸联合肝素灌注治疗难治性间质性膀胱炎疗效确切.     

两种不同药物联合盐酸氨基葡萄糖治疗膝关节骨性关节炎的前瞻性研究

目的：评价口服盐酸氨基葡萄糖联合口服双氯酚酸钠或关节内注射透明质酸钠治疗膝关节骨性关节炎的疗效。方法：将120例诊断为膝骨性关节炎的患者随机分为两组,A组（口服盐酸氨基葡萄糖＋口服双氯酚酸钠组）和B组（口服盐酸氨基葡萄糖＋关节内注射透明质酸钠组）,每组60例。两组均治疗5周。停药后观察2周。收集两组治疗期间膝关节炎病人疼痛指数（Lequesne）评分和视觉模拟评分法（VAS）评分,来评估治疗前后膝关节症状变化程度。结果：治疗5周后,两组Lequesne总指数比治疗前均有明显下降,分别为3．5±1．2、3．3±1．4。VAS评分治疗5周后两组分别下降到1．9±1．0、2．2±1．1。与治疗前相比,差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：口服盐酸氨基葡萄糖和关节内注射透明质酸钠对膝骨性关节炎具有更好的疗效。     

透明质酸与甲硝唑或米诺环素联合用药在实验性牙周炎中的作用机制

目的 研究透明质酸分别与甲硝唑、米诺环素配伍后对实验性牙周炎抗炎效果的影响。方法 构建大鼠牙周炎模型,按阴性对照组,阳性对照组,甲硝唑组,透明质酸组,甲硝唑+透明质酸组,米诺环素组,米诺环素+透明质酸组分为7组,每组10只,在给药后2、6、24 h,5 d用ELISA法测定龈沟液中TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,同时在给药后24 h、5 d切取牙龈上皮western blot测定组织中MMP8、TIMP1表达情况。结果 给药后2 h,所有实验组TNF-α、IL -1β表达均受到抑制,P<0.01,透明质酸组、甲硝唑联合透明质酸组、米诺环素联合透明质酸组下降尤其明显;24 h时甲硝唑联合透明质酸组IL - 1β抑制作用明显;5 d时米诺环素联合透明质酸组对TNF-α仍有缓慢抑制作用。给药24 h后,各实验组MMP8表达均呈下降趋势,P<0.01,而TIMP1表达均明显增强,P<0.01,其中以甲硝唑联合透明质酸组、米诺环素组、米诺环素联合透明质酸组表达尤为显著;5 d时,甲硝唑联合透明质酸组中TIMP1的表达呈现上升趋势,P<0.01。结论 甲硝唑、透明质酸、米诺环素局部用药对炎症早期有明显效果,但远期维持效果一般;甲硝唑与透明质酸、米诺环素与透明质酸的联合用药效果均优于单一用药。相较而言,甲硝唑与透明质酸联合用药在5 d持续抗炎作用中优势更加明显。     

活血化瘀膏对膝骨性关节病关节滑液透明质酸的影响30例观察*

[目的]观察中药活血化瘀膏外敷治疗肾虚血瘀证型膝骨性关节病(OA)的有效性和对关节滑液透明质酸浓度(SF-HA)的影响。[方法]检测30例患者治疗(外敷活血化瘀膏)前后膝关节液透明质酸(SF-HA)含量的变化。同时应用Lysholm膝关节功能评分标准进行辅助评价。采用SPSS11.5统计软件进行统计分析。[结果]应用活血化瘀膏外敷治疗膝OA,治疗前后SF-HA浓度比较,P<0.05,治疗后SF-HA浓度明显高于治疗前;治疗前后Lysholm膝关节功能评分比较,P<0.05,治疗后显效率100%[,结论]活血化瘀膏外敷治疗膝OA在临床症状、体征方面均明显改善。     

血清透明质酸的变化与供肝冷缺血时间的关系

目的:探讨肝移植术中血清透明质酸浓度(HA)的变化与供肝低温保存冷缺血时间的关系.方法:根据低温保存时间的不同,将20例行原位肝移植术的患者分为A组(5～6h)、B组(8～9h)和C组(12h),分别在供肝血流再灌注后5、30、60、120和180min,取3组患者血清检测HA浓度.结果:供肝血流再灌注后,患者血清HA浓度逐步下降.A组平均下降速度为4.58μg/L·min-1,B组为4.16μg/L·min-1,C组为2.26μg/L·min-1.A组和B组HA平均下降速度比较的差异无统计学意义(P＞0.05);与C组相比,A组、B组平均下降速度的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:供肝低温保存导致的肝内皮细胞损伤程度与供肝低温保存的时间呈正比,并以患者血清HA的下降速度表现出来.     

骨髓间充质干细胞和软骨细胞共培养复合同种异体脱钙骨基质修复关节软骨全层缺损

目的:探讨自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)与软骨细胞共培养复合同种异体脱钙骨基质(DBM)修复关节软骨缺损的可行性,评价修复效果,为优化种子细胞源提供依据.方法:取浓度为5×109/L的第二代BMSCs和软骨细胞,按2:1比例混匀共培养作为种子细胞.DBM与共培养细胞复合植入修复为实验组(A组),单纯材料DBM组(B组)和不处理组(C组)作为实验对照组.移植8和16 wk后经大体观察、组织学评分和免疫组化染色评价缺损修复.结果:共培养的软骨细胞基质合成丰富,细胞增殖快,共培养5～7 d两种细胞比例达1:1以上.A组缺损修复组织呈软骨样,表面光滑平坦,与周围软骨整合的软骨细胞更为成熟.B组和C组的修复组织呈纤维组织.组织学评分表明A组优于B,C两组,差异具有统计学意义(P＜0.01),B组与C组差异无统计学意义(P＞0.05).免疫组化染色显示A组修复组织的细胞为透明软骨样细胞,柱状排列,Ⅱ型胶原染色阳性,与周围软骨及软骨下骨整合良好.结论:自体BMSCs与软骨细胞共培养,BMSCs能增强软骨细胞的增殖,促进软骨细胞基质合成,缩短软骨细胞培养时间和减少传代次数,可节省大量的软骨细胞,与DBM复合后能有效修复关节软骨缺损.