应用熔点曲线分析输血传播病毒的基因变异

目的研究输血传播病毒(TTV)的基因变异及其临床意义。方法采用巢式荧光实时多聚酶链式反应(PCR)扩增TTVDNA,收集TTVDNA阳性病例142例。其中献血员4例;非甲-非庚型慢性肝炎患者16例;乙型肝炎病毒携带者(ASC)7例;慢性乙型肝炎患者(CHB)39例;慢性重型乙型肝炎患者(CSHB)76例。采用熔点曲线方法进行TTV基因变异检测。结果非甲-非庚型肝炎患者熔点曲线波峰数量显著多于献血员(P<0.05);重型与重度肝炎患者组中熔点曲线波峰数量显著多于中度患者(P<0.05),重度肝炎患者熔点曲线波峰数量与重型患者比较差异无显著(P>0.05)。乙型肝炎病毒感染者中CHB和CSHB组中熔点曲线波峰数量显著多于献血员及ASC组(P<0.05),CSHB和CHB重度熔点曲线波峰数量显著多于CHB中度患者(P<0.05)。但CHB重度患者TTVDNA熔点曲线波峰数量与CSHB相比较差异无显著(P>0.05)。结论TTV存在基因变异;TTV基因变异株的复杂性或称准种感染的复杂性可能是TTV与HBV感染者重叠感染使病情加重的因素之一;熔点曲线可以用于基因变异分析。     

输血传播病毒(TTV)重叠感染在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的临床意义

目的：研究乙型肝炎病毒感染患者TTV重叠感染情况及初步探讨TTV的致病性。方法：在ORF1区设计特异性引物建立巢式多聚酶链式反应（PCR），检测乙型肝炎病毒感染患者血清中TTV DNA，对PCR产物进行分子克隆和测序。结果：献血员、慢性乙型肝炎病毒携带者、慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTV DNA阳性率分别为10％、11％、27％、48％。其中前两者与后两者比较均有显著差异，慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者相比也有显著差异（P＜0．05），乙型肝炎病毒感染者中其HBV感染复制指标的阳性率在TTV DNA阳性与TTV DNA阴性组之间无明显差异（P＞0．05）。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者的ALT和TBIL在TTV DNA阳性病人组与TTV DNA阴性病人组之间比较有显著性差异（P＜0．05），TTV DNA阳性病人组明显高于TTV DNA阴性病人组。结论：献血员中存在TTV感染，乙型肝炎病毒感染患者重叠感染TTV较常见。慢性乙型肝炎和慢性重型乙型肝炎患者TTV DNA阳性率明显高于献血员和慢性乙型肝炎病毒携带者的阳性带，提示TTV的重叠感染可能是HBV感染病情加重因素之一，TTV重叠感染对HBV的复制可能不存在相互作用。     

熔点曲线法研究慢性乙型肝炎患者中TTV准种与其临床分型的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者中输血传播病毒(transfusion transmitted virus,TTV)准种及其与患者不同临床分型的关系。方法收集TTV DNA阳性的慢性乙型肝炎病例126例,其中乙型肝炎病毒携带者(ASC)4例;慢性乙型肝炎患者(chronic hepatitis B,CHB)46例,其中轻度、中度、重度分别为7例、14例、25例;慢性重型乙型肝炎患者(chronic severity hepatitis B,CSHB)76例。采用巢式荧光实时多聚酶链式反应(PCR)扩增TTV DNA,用熔点曲线方法进行TTV准种检测。结果乙型肝炎病毒感染者中CHB中度、重度和CSHB组中熔点曲线波峰数量显著多于ASC和CHB轻度组(P<0.05),CSHB和CHB重度熔点曲线波峰数量显著多于CHB中度患者(P<0.05)。但CHB重度患者TTV DNA熔点曲线波峰数量与CSHB相比较差异无显著性(P>0.05)。结论TTV存在病毒准种,TTV准种感染的复杂性可能是TTV与HBV感染者重叠感染使病情加重的因素之一。     

肝病患者中TT病毒感染的检测及其临床意义

采用NPCR法和ELISA法检测 98例肝病患者中TTVDNA和IgG抗TTV。结果 :病原未明肝病患者TTVDNA阳性率 47.83% ( 11 2 3)显著高于职业献血员 10 % ( 2 2 0 ) (P <0 .0 1) ,说明TTV是病原未明肝病患者的一种重要致病因子。TTVDNA阳性患者中慢性肝炎的比例为 75 .86% ( 2 2 2 9) ,其中乙型肝炎的比例为 5 8.63% ( 17 2 9) ,说明TTV有与慢性肝炎病毒相似的血行传播途径。同时对TTV单纯感染和混合感染的肝功能指标作了比较 ,两者无明显差异 (P >0 .0 5 )。     

南京地区TTV分子流行病学调查

目的 :探讨经血传播病毒 (TTV)在南京地区分子流行学状况及TTV可能的传播途径。方法 :选择各型病毒性肝炎 975例 ,献血员 30例 ,慢性肾功能衰竭长期血透者 1 50例及健康者 32例作为研究对象 ,用n -PCR法检测各种人群中 (TTVDNA)的感染情况。并研究TTVDNA阳性与输血的关系。结果 :在各种人群中TTVDNA的检出率分别为非甲～庚型肝炎 2 2 % ,病毒性肝炎 1 3 .9% ,献血员 33 .3 % ,长期血透者 2 7.3 % ,健康人 9.4% ,1 36例TTVDNA阳性病毒性肝炎患者仅 1 9.9% (2 7/ 1 36)有输血史。结论 :献血员及其它经常接触血制品的人群是TTV感染的高危人群 ,输血是TTV感染的途径之一 ,肠道传播可能也是TTV传播的一条途径     

长沙地区献血员血清TT病毒DNA检测及核苷酸序列分析

目的 :了解长沙地区献血员输血传播病毒 (TTV)感染情况 ,初步探讨该病毒感染与肝炎的关系。方法 :根据己报道的TTV基因保守序列 ,设计两对引物以套式聚合酶链反应 (nested PCR)对 1 82份献血员血清标本进行TTVDNA检测。结果 :45份单纯ALT升高血清标本TTV阳性 1 6例 (3 5 6%) ,1 2 9份ALT正常血清标本TTV阳性 2 1例 (1 6 3 %)。ALT升高组TTVDNA的阳性率明显高于ALT正常组 (x2 =7 40 ,P <0 0 5)。序列分析结果显示 ,献血员TTV分离株相应位置核苷酸序列与日本株和中国株的同源性≥ 97 1 %。结论 :长沙地区献血员中TTV感染率较高 ,TTV感染与肝炎密切相关 ;长沙地区分离的TTV可能与日本株AB0 0 83 94和中国株AF0 791 73属同一基因型。     

肝病患者TTV指标阳性的临床分析

目的；分析肝病患者中TTV感染情况及机体对TTV免疫应答水平，方法：采用nPCR法，ELISA法检测208例肝病患者，20例献血员血清TTVDNA，I gG抗TTV，同时动态观察部分TT指标阳性肝病患者TTVDNA，IgG抗TTV的消展情况，结果；20例献血员中2例TTVDNA阳性，未检出IgG抗TTV，208例肝病患者中53例TT病毒指标阳性，其中单纯TTVDNA阳性16例，单纯IgG抗TTV阳性20例，TTVDNA和IgG抗TTV均阳性17例，IgG抗TTV阳性者的COI(Sample/cut off)分布在1．0－3．51间，结论：肝病患者中存在较高的TTV感染率，TTVDNA和IgG抗TTV不一定同时存在，机体对TTV有一定的免疫力。     

桂西壮、汉族不同人群TTV感染及其基因型研究

目的 :探讨本地壮、汉民族不同人群输血传播病毒 (TTV)感染及其基因型特点。方法 :用 EL ISA法检测不同人群抗 -TTV,阳性者用 PCR法检测 TTVDNA,微板核酸杂交 - EL ISA法检测基因型。结果 :壮、汉族慢性肝病、静脉吸毒者、血液透析者、献血员的 TTV总感染率以及壮族慢性肝病、静脉吸毒者、血液透析者、献血员、汉族慢性肝病 TTV感染率与健康体检者比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,两个民族比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。壮、汉族 TTV基因型 型 74 .6 3%、 型10 .4 5 %、 混合型 14 .93% ,两个民族相比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,壮、汉族慢性乙肝各临床类型 TTV感染率与非甲～庚肝比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :本地壮、汉族感染 TTV的基因型分为 型、 型、 、 混合型 ,以 型为主 ,TTV及其基因型与民族无关 ,慢性乙肝、非甲～庚肝、静脉吸毒者、血液透析者、献血员是 TTV感染的高危人群 ,血液传播是主要传播途径 ,HBV与 TTV混合感染可能不导致病情加重     

百色市慢性乙肝患者重叠感染TTV及其基因型研究

目的　探讨百色市慢性乙肝患者重叠感染TTV状况及其基因型特点。方法　采用PCR法检测TTVDNA ,微板核酸杂交 -ELISA法检测TTV基因型。结果　本地慢性乙肝患者TTVDNA总感染率 13 2 9% ,与健康体检者比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,慢性轻度乙肝感染率 6 5 2 % ,慢性中度乙肝感染率 15 2 8% ,慢性重度乙肝感染率 17 5 0 % ,三者比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;2 1例TTVDNA阳性患者中Ⅰ型 15例 ,占 71 4 3% ,Ⅱ型 2例 ,占 9 5 2 % ,Ⅰ /Ⅱ混合型 4例 ,占 19 0 5 %。结论本地慢性乙肝患者重叠感染TTV较常见 ,其TTV基因型可分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅰ /Ⅱ混合型 ,以Ⅰ型为主 ,TTV重叠感染可能不导致慢性乙型肝炎病人病情的加重。     

两例TTV感染者不同TTV克隆的DNA序列分析

目的探讨TTV的基因变异及其与致病性的关系。方法在ORF1区的高变区设计特异性引物建立巢式多聚酶链反应（PCR），扩增献血员与慢性非甲-庚型重型肝炎患者血清中的TTV DNA。PCR产物纯化回收后进行分子克隆，每例挑选10个不同TTV DNA克隆进行测序。不同们TTV DNA克隆之间及其与日本株TA278之间进行序列比较并进行进化树分析。结果成功地构建了TTV DNA克隆。与G1a亚型TA278的序列相比较有74％～95％的同源。献血员存在2种不同的TTV病毒株，其序列有7％的差异，都为G1a亚型。慢性非甲-庚型重型肝炎患者中存在7种不同的TTV病毒株，彼此之间序列有5％～24％不同，分别属于G1a和G1b亚型。结论慢性非甲-庚型重型肝炎患者中TTV的基因变异比献血员中的复杂得多。TTV基因变异的复杂性及其基因变异过程中可能产生的强毒力病毒株均有可能在其致病机制中起一定作用。G1b亚型可能有一定的致病性。     

输血传播病毒（TTV）基因变异的临床意义

OBJECTIVE: To investigate the clinical significance of gene variant of transfusion transmitted virus (TTV). METHODS: A nested polymerase chain reaction (nested-PCR) assay with specific primers from open reading frame one (ORF1) of TTV genome was established to detect TTV DNA in the serum samples from patients with hepatitis B and blood donors. Asymmetric PCR was established to get single strand DNA in the TTV DNA positive cases, and then single strand conformation polymorphism (SSCP) was applied. RESULTS: 1.25 +/- 0.50, 1.60 +/- 0.55, 3.36 +/- 1.36 and 4.59 +/- 1.83 SSCP bands were detected in the blood donors, chronic HBV carriers, chronic hepatitis B patients and chronic severe hepatitis B patients respectively. SSCP bands were much more complicated in chronic hepatitis patients and chronic severe hepatitis than those of chronic HBV carriers and blood donors (P < 0.05). CONCLUSION: There is gene variant in TTV infection. The complication of gene variant strain or quasispecies infection of TTV may be one of the causes responsible for clinical exacerbation of TTV superinfection in chronic hepatitis patients.     

部分人群中输血传播病毒的检测

目的　了解部分人群是否有输血传播病毒 (TTV ,TransfusionTransmittedVirus)感染。方法　利用半套式PCR方法对慢性乙肝患者、慢性丙肝患者、血液透析者、健康人群中TTV的感染状况进行了筛选。结果　 2 40例慢性乙肝患者中发现 2例TTV阳性 ,10 0例慢性丙肝患者中发现 4例TTV阳性。 2 0例血液透析者和 10 0例健康人群中都未发现TTV感染。结论　慢性丙肝患者比慢性乙肝患者有较高的感染率 ,在血液透析者和健康人群中没有发现TTV感染者。     

原因不明性肝炎患者血清中TTV DNA的检出及其临床意义

目的：研究原因不明性肝炎患者输血传播性病毒（Rransfusion transmitted virus,TTV)感染的检出状况及其临床意义。方法：在TTV ORF1保守区设计引物,建立巢式聚合酶链反应（Nested-PCR),检测50例原因不明性肝炎、40例健康人与30例乙肝病毒携带者血清中TTV DNA,比较TTV DNA阳性的肝炎患者的临床特征。结果：50例原因不明性肝炎中16例TTV DNA呈阳性（占32％）,比健康人群（2／40,5％）与乙肝病毒携带者（2／30,6．7％）血清中TTV DNA检出率高（P＜0．05）,16例TTV DNA阳性患者中以慢性肝炎占多数（12／16,75．5％）,临床表现为反复、持续ALT异常。结论：TTV在原因不明性肝炎中感染率明显高于其他人群,其可能是本地区原因不明性肝炎的致病因子。     

新型病毒TTV与乙型肝炎病毒混合感染的初步探讨

目的了解新型肝炎病毒TFV与乙型肝炎病毒（HBV）混合感染对肝脏病变及HBV复制状态的影响。方法套式聚合酶链反应检测乙型肝炎患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。结果177例慢性HBV感染者中32例TTVDNA阳性,阳性率18．1％：其中无症状携带者5/52（9．6％）,慢性肝炎7/46（15.2％）,重型肝炎9/39（23．1％）,活动性肝硬化9／40（22．5％）,各组间无统计学差异;在慢性肝炎、重型肝炎及活动性肝硬化病人中,TTV阳性者与TTV阴性者的各项肝功能指标及血清HBeAg阳性率无统计学差异;但HBV、TTV混合感染的重型肝炎死亡率较高,具有统计学意义。,结论TTV混合感染似乎不影响HBV所致的肝脏病变及其复制状态,但可能影响重型肝炎的预后。     

TT病毒对干扰素的敏感性及其临床意义分析

目的 :探讨各种肝病 TTV- DNA阳性的临床意义 ,并对丙型慢性肝炎的干扰素疗效及 TT病毒对干扰素敏感性进行研究。方法 :利用半套式 PCR方法检测 TTV- DNA。结果 :TTV- DNA阳性者非甲～丙型急性肝病 4 0 .9%、乙型急性肝病 30 %、非甲～丙型慢性肝病 2 5 %、乙型慢性肝病 37.5 %、丙型慢性肝病 39.6 %。对丙型慢性肝炎进行干扰素治疗的 TTV- DNA阳性 10 1例病例和阴性 15 4例间的年龄、性别、AL T、肝组织学及 HCV- RNA量差异无显著性 ,干扰素治疗后的 AL T变化和 HCV- RNA的消长是一致的 ,和 TT病毒无关。结论 :TT病毒和丙型肝炎病毒重复感染的慢性肝炎患者 ,肝损伤的主要原因是丙型肝炎病毒 ,与 TT病毒关系不大     

TTV与HBV重叠感染的研究

目的：研究乙型肝炎病毒（HBV）感染者重叠感染输血传输病毒（TTV）的状况。方法：采用斑点杂交法检测乙型肝炎病毒感染者血清TTV DNA。结果：在364例乙型肝炎病毒感染者中检出血清TTV DNA阳性者82例，阳性率22．53％。其中，急性乙型肝炎患者组阳性率23．21％，慢性乙型肝炎患者组阳性率26．25％，HBsAg携带者组阳性率15．22％，三者之间的差异无统计学意义P＞0．05。结论：在我国存在TTV感染，但其致病性值得进一步探讨。     

HBV感染者重叠感染TTV的研究

目的 研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者重叠感染输血传播病毒（ＴＴＶ）的状况。方法 采用斑点杂交法检测乙型肝炎病毒感染者血清ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 在１６９例乙型肝炎病毒感染者中检出血清ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者２３例,阳性率１３．６１％。其中,急性乙型肝炎患者组阳性率１３．４６％,慢性乙型肝炎患者组和阳性率１５．０７％,ＨＢｓＡｇ携带者组阳性率１１．３６％,三者之间的差异无统计学意义Ｐ〉０．０５。结论 在