神经性毒剂对人脑乙酰胆碱酯酶的抑制及肟类药物的…

本文观察了神经性毒剂沙林，梭曼，塔崩和ＶＸ对纯化人脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用及肟类药物对这些毒剂抑制的酶的体外重活化作用。结果表明，毒剂抑制人脑乙酰胆碱酯ＰＩ５０为７．９－９．１，毒剂的抑制能力为：梭曼＞沙林＝ＶＸ＞塔崩，肟类药物氯磷定，双解磷，双复磷和ＨＩ－６对沙林和ＶＸ抑制的人脑乙酰胆碱酯 酶的重化作用非常显著，但对梭曼和塔崩抑制的酶则母，且不药物对这两种毒剂抑制的乙酰胆碱酯酶的重活化作用也明显     

神经性毒剂对人脑乙酰胆碱酯酶的抑制及肟类药物的重活化作用

本文观察了神经性毒剂沙林，梭曼，塔崩和ＶＸ对纯化人脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用及肟类药物对这些毒剂抑制的酶的体外重活化作用。结果表明，毒剂抑制人脑乙酰胆碱酯酶的ｐＩ５０为７．９一９．１，毒剂的抑制能力为：梭曼＞沙林≈ＶＸ＞塔崩，脂类药物氯磷定，双解磷，双复磷和ＨＩ一６对沙林和ＶＸ抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的重活化作用非常显著，但对梭曼和塔崩抑制的酶则弱，且不同药物对这两种毒剂抑制的乙酰胆碱酯酶的重活化作用也明显不一样，与大鼠脑乙酰胆碱酯酶的实验结果相似。     

沙林对猴全血乙酰胆碱酯酶老化的抑制及重活化作用

目的 采用沙林抑制猴全血乙酰胆碱酯酶（AChE），研究磷酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化作用。方法 （1）37℃恒温水浴条件下，采用沙林抑制猴全血AChE的90%活性，后分别加入浓度为0.1, 0.33和1 mmol·L^-1双复磷、氯解磷定（PAM-2-Cl）、碘解磷定（PAM-2-I），用DTNB法分别测定各样品AChE活性，计算重活化率；（2）37℃水浴条件下，采用沙林抑制猴全血AChE的90%活性，每隔10 min, 1, 2, 4和14 h取出100 μl，然后，加入终浓度为1 mmol·L^-1的氯解磷定，用DTNB法测定AChE活性，计算重活化率。以重活化剂重活化率的对数对时间作图，可得磷酰化酶的老化曲线，曲线的斜率即为重活化剂抑制AChE的老化速率常数（K_老化），半老化时间（t_0.5）＝0.693／K_老化，老化率达到99％所需时间（t_0.99）＝4.605／K_老化。结果 在0.1, 0.33和1 mmol·L^-1的浓度下，氯解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为16%, 45%和83%；双复磷对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为18%, 39%和70%；碘解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为14%, 41%和72%。在0.1 mmol·L^-1时，双复磷重活化效果最好；氯解磷定在低浓度时，其重活化效果稍差于双复磷，但是，随着其浓度提高，显示出比双复磷较好的重活化效果。采用氯解磷定1 mmol·L^-1为重活化剂时，沙林抑制猴全血AChE磷酰化酶的半老化时间约为12 h。结论 本文实验中使用的3种重活化剂均对沙林抑制的猴全血AChE有较好的重活化作用，其中，氯解磷定对沙林抑制的猴全血AChE有较高的重活化率，实际应用中可能会取得相对较好的急救效果；随着沙林对猴全血AChE抑制时间的延长，磷酰化胆碱酯酶可失去重活化的能力，而成为“老化酶”，很难被重活化，因此, 沙林中毒后应尽早使用氯解磷定等肟类重活化剂。研究发现有一些有机磷中毒用肟类治疗后，有中毒症状缓解后又发生反复的现象，因此使用氯解磷定为重活化剂时，急性中毒症状控制后，建议在磷酰化胆碱酯酶老化之前酌情重复使用重活化剂，直至中毒症状彻底缓解。     

对硫磷与对氧磷抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的老化及重活化

目的　了解对硫磷与对氧磷在试管内对人脑乙酰胆碱酯酶 (AChE)的抑制 ,膦酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化效能有何差别。方法　微量羟胺比色法测定AChE活性。结果　对硫磷与对氧磷抑制人脑AChE 5 0 %活性的摩尔浓度的负对数值(pI50 )分别为 4 .10及 7.5 1,抑制人脑AChE 90 %活性的摩尔浓度的负对数值 (pI90 )值分别为 2 .5 5及6 .5 7。氯磷定、双复磷、双磷定和酰胺磷定 4种重活化剂对对硫磷与对氧磷抑制的人脑AChE的重活化作用有较大差异 ,等摩尔浓度条件下 ,其对对氧磷的重活化作用普遍好于对硫磷。且双肟类重活化剂作用普遍强于单肟类重活化剂 ;对硫磷与对氧磷的最佳重活化剂均为双复磷。对硫磷与对氧磷人脑AChE磷酰化酶的半老化时间 (t0 .5)分别为 14及 12h ,老化达到 99%的时间 (t0 .99)分别为 95及 81h。结论　对硫磷或对氧磷中毒时应尽早使用双复磷或双磷定。且在急性中毒症状控制后 ,仍须连续使用重活化剂 4d。     

HI-6对梭曼中毒活体膈肌胆碱酯酶的重活化作用

目的 研究HI-6对局部梭曼中毒活体膈肌胆碱酯酶(ChE)活性是否具有重活化作用。方法 大鼠戊巴比妥钠肌注40 mg·kg^-1麻醉后固定,沿腹正中线切开腹腔,暴露膈肌。以右膈神经穿过膈肌处为中心,在右侧膈肌上贴敷一片大小为0.5 cm×0.75 cm的棉纸。用微量进样器抽取10 μl 0.2%梭曼生理盐水溶液滴加其上。左侧膈肌为自体正常对照或全身系统给予HI-6的药物对照,中毒后暂闭腹腔,30 min后取出棉纸。实验分为两组：一组在大鼠膈肌局部梭曼中毒后1 min和10 min后肌注HI-6 144 mg·kg^-1;一组在大鼠膈肌局部梭曼中毒后1 min和10 min后局部给予180 ml（1 mmol·L^-1） HI-6, 分别于给药后24和72 h处死大鼠, 取出中毒部位膈肌,按Karnovsky等改良的硫胆碱法显示终板的AChE活性。将膈肌标本在4%甲醛2~4℃固定24 h后,冻切30 μm,37℃孵育30 min,在光镜下观察。结果 膈肌局部梭曼中毒后1 min和10 min后局部给予HI-6,24和72 h对局部中毒膈肌ChE均没有重活化作用,在光镜下均观察不到棕褐色椭圆形的运动终板;而膈肌局部梭曼中毒后1 min和10 min后,全身给予HI-6对局部中毒膈肌ChE有明显的重活化作用, 在光镜下可见到肌纤维上又出现了棕褐色椭圆形的运动终板。结论 HI-6对早期膈肌局部中毒的神经运动终板ChE有重活化作用。     

中毒胆碱酯酶重活化剂——吡啶醛肟双季铵盐的合成

为了寻找高效的抗神经毒剂梭曼的药物,本文根据HI-6为代表的双吡啶醛肟季铵盐类重活化剂的构效关系及作用机理,设计并合成了22个单吡啶醛肟双季铵盐,这22个目标化合物均系首次报道,合成产物经元素分析及光谱分析证实结构。初步的生物试验表明,某些化合物具有较好的预防和缓解神经毒剂中毒的作用。     

MS-302三道测量分析系统的应用及HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制

目的 呼吸肌麻痹是有机磷酸酯类化合物严重中毒致死的主要原因之一,由于膈肌是最主要的呼吸肌,因此,建立一种精确灵敏的实验方法评价药物对离体膈神经 膈肌的影响, 探讨相应的抗呼吸肌麻痹药物的实验显得尤为重要。本文在MS-302三道测量分析系统上探讨了抗神经毒有效化合物HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制。方法 采用MS-302三道测量分析系统,观察大鼠离体膈神经-膈肌的收缩功能,此方法较既往测量方法实时、高效而灵敏。观察膈肌收缩功能的同时,待标本稳定30 min后取膈肌置-20℃冰箱,留待测定正常乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,然后向麦氏槽中加入以台式液配置的药物,加入药液量一般不超过0.5 ml,使药物浓度为10 μmol·L^-1～1 mmol·L^-1, 对照组加入等量的生理盐水, 于加药后不同时间点留取膈肌样品测定AChE活性,观察药物对膈肌AChE活性的直接影响。结果 ① MS-302三道测量分析系统上,对膈神经-膈肌标本强直收缩曲线下的面积进行测量,能较为直接的反映膈神经-膈肌标本的生理功能,且结果精确。② HI-6 10和100 μmol·L^-1对正常膈神经-膈肌收缩功能影响不明显,当药物浓度为1 mmol·L^-1时, HI-6对正常膈神经-膈肌收缩功能有抑制作用;HI-6 10 μmol·L^-1对梭曼抑制的标本收缩功能既没有保护作用也没有拮抗作用; HI-6 100 μmol·L^-1有一定的保护和拮抗作用;当剂量增加到1 mmol·L^-1时,HI-6的保护作用和拮抗作用都明显增强,且保护作用在30 min内最佳。③ 预先给予HI-6不能减弱梭曼对大鼠离体膈肌AChE的抑制,提示HI-6对梭曼抑制的大鼠离体膈肌AChE无明显保护作用;梭曼中毒后给予HI-6对梭曼抑制的膈肌AChE活性无显著影响,提示HI-6对梭曼抑制的膈肌AchE无明显重活化作用。结论 HI-6对梭曼抑制的离体膈神经-膈肌收缩功能的恢复可能是直接生理对抗作用,在本实验条件下未见膈肌AChE活力有明显的恢复。     

含磷毒剂体外药效学评价方法建立

目的 含磷毒剂主要是通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)发生毒害作用,本文旨在建立一种在体外快速测定AChE 活性的方法,为有机磷毒剂中毒及解救时AChE活性检测奠定基础。方法 以动物全血红细胞作为AChE的来源,利用硫代乙酰胆碱与巯基显色剂DTNB反应形成黄色化合物的原理,用分光光度法在412 nm处比色定量测定AChE活性。首先利用还原型谷胱甘肽能提供巯基,其显色效应相当于硫代胆碱,故用谷胱甘肽进行DTNB法测定AChE活性标准曲线的绘制;其次进行了DTNB法测定全血样品AChE活性的方法学研究,主要包括对全血进行20, 40和60等不同倍数的稀释后测定AChE活性、使用兔、豚鼠、比格犬及猴等不同动物全血红细胞作为AChE的来源进行AChE活性的测定,同时对不同批次全血样品及同一批次血样不同时间的AChE活性进行测定,验证DTNB法测定AChE活性的方法的可行性;最后选择兔全血红细胞作为AChE的来源,对有机磷毒剂如沙林及梭曼进行了体外药效学评价,梭曼终浓度为6.25 nmol·L^-1～0.4 μmol·L^-1,沙林终浓度为6.25 nmol·L^-1～4 μmol·L^-1,以不同浓度沙林及梭曼的负对数对兔子全血AChE抑制百分率的对数作图,求出沙林及梭曼抑制动物全血AChE的量效曲线,计算得到其IC₅₀值和IC₉₀值。结果 以吸光度值（标准管吸光度值-零管吸光度值）为纵坐标,AChE活性为横坐标作图,即得谷胱甘肽标准曲线,标准曲线方程为Y=0.0029＋0.1218X,r＝0.9999,结果表明,该检测方法在AChE活性为0～10.8 mmol·L^-1的范围内保持线性。选取兔全血40倍稀释后作为AChE的来源进行实验,通过对不同动物批内及批间AChE活性进行测定并统计得出,批内差异为0.44%～0.67%,批间差异为1.03%～2.27%。表明该方法批内及批间差异较小,均不超过10%,可以进行有机磷类化合物的体外药效学评价。不同浓度沙林及梭曼对兔全血AChE活性抑制的量效关系表明其作用强度的顺序为：梭曼＞沙林,该实验结果与文献报道相符合。梭曼对兔全血AChE量效曲线图表明,其量效曲线方程为：Y= 372.69-45.53X,R=-0.9930;梭曼对兔全血AChE活性抑制的IC₅₀值和IC₉₀分别为83 nmol·L^-1和0.62 μmol·L^-1。沙林对兔全血AChE量效曲线图表明,其量效曲线方程为：Y= 284.45-3905X,R=-0.9679;沙林对兔全血AChE活性抑制的IC₅₀值和IC₉₀分别为1.2 μmol·L^-1和15 μmol·L^-1。结论 该方法能够快速测定不同动物全血红细胞AChE的活性,实验结果可靠,重现性好,可用于多种有机磷毒剂体外药效学评价。由于红细胞中AChE全部存在于细胞膜表面,因此,本测定方法不需将红细胞溶解就能够直接测定AChE活性,能够减少制备酶原的过程,适于快速完成体外AChE活性的分析测定。     

4种高毒有机磷化合物体外稳定性及小鼠染毒后体内活性持续时间

目的 评价梭曼、沙林、塔崩和维埃克斯(VX)4种有机磷化合物的体外稳定性及小鼠染毒后毒剂分子在血液中活性持续时间，为有机磷化合物中毒救治中药物的使用频率和给药时间等提供参考和指导。方法 (1)有机磷化合物体外稳定性评价。梭曼、沙林和VX分别用无菌水稀释1×10⁵倍，塔崩用无菌水稀释1×10⁴倍，将以上稀释好的4种有机磷化合物再分别用PBS稀释100倍后置37℃恒温培养箱孵育，分别在0,10,20,40,90,120和240 min取出一定量有机磷化合物与乙酰胆碱酯酶(AChE)溶液0.2 g·L^-1反应，采用Ellman法测定AChE活性，并计算酶活抑制率。(2)有机磷化合物染毒小鼠后血液分离物对AChE活性抑制作用。将4种有机磷化合物配置成不同浓度梯度后对KM小鼠进行腹部皮下染毒，以组内小鼠未出现死亡时的最高使用剂量为随后建模的动物染毒剂量，在该剂量染毒后分别于0,10,20,40,90,120和240 min取全血，采用超滤离心法分离各时间点体内残留的有机磷化合物并采用Ellman法测定其对AChE活性抑制率。结果 ...     

缺氧条件下有机磷毒剂梭曼对大鼠心肌损伤的实验研究

有机磷毒剂——梭曼是难防难治的神经性毒剂之一,其主要中毒机理是对机体乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制,造成胆碱能神经系统功能紊乱,引起中毒症状[1,2]。缺氧条件下梭曼中毒是可能发生在高原缺氧地区的一种特殊的化学中毒损伤,是在一种损伤(缺氧或梭曼中毒)的基础上加上另一种致伤效应(梭曼中毒或缺氧),无疑将使这种特殊损伤伤情和致伤机制复杂化,并增加救治难度。1　材料与方法1.1　动物和药品Wistar大鼠,体重(210±20)g,雌雄不限,由第三军医大学实验动物中心提供;梭曼,纯度94.6%,由军事医学科学院毒物药物研究所提供,临用时配制丙二醇-生理…     

梭曼对体外培养神经细胞的影响

目的　研究梭曼对体培养神经细胞的直接作用 ,为在细胞水平上构建出评价梭曼毒性和抗毒药物救治效果的模型奠定基础。方法　小鼠神经细胞的体外培养方法 ,乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性测定法 ,细胞死亡率及LC50 等。结果　梭曼浓度为 0 .96mg·L- 1时 ,对神经细胞的形态变化无明显影响 ,当梭曼浓度增加到 96 0mg·L- 1时 ,神经细胞形态学发生变化 ,表现为突触收缩 ,细胞收缩、变圆、死亡等。梭曼在 2 4h对神经细胞LC50 值为 2 0 .35mg·L- 1。神经细胞培养液中AChE活性随培养时间的延长 ,AChE活性有显著增加的趋势 (P <0 .0 1) ,而梭曼能显著抑制培养液中AChE活性 (P <0 .0 1)。结论梭曼对体外培养的神经细胞AChE活性的影响与整体动物一致 ,提示该细胞可作为快速评价梭曼细胞损伤及抗毒药物筛选的方法之一     

神经性毒剂预防药物研究进展

神经性毒剂是主要以引起胆能神经系统功能障碍为特征的致死性毒剂,主要是抑制体内乙酰胆碱酯酶(AChE) 的活性,致使胆碱酯酶不能水解乙酰胆碱(ACh),造成ACh大量蓄积,从而引起中枢和外周胆碱能神经功能亢进,导致急性中毒。因其毒性强、作用快,能通过皮肤、呼吸道、黏膜、胃肠道及眼等吸收引起全身中毒,加之性质稳定、生产容易、使用性能良好,因此成为外军装备的主要化学战剂。由于神经性毒剂的危害,外军也在加紧时间研究新的防治药物与方法。目前防治神经性毒剂的药物分为以下几类：① 预防药物;② 抗胆碱酯能药物,即受体保护药,主要指M样ACh受体拮抗剂,主要包括阿托品、苯那辛等;③ 酶重活化剂,可以复活被磷酰化的中毒酶,主要是肟类化合物,如氯磷定、酰胺磷定(HI 6)等。此外还经常使用地西泮等来控制惊厥等症状。由于战场上化学武器使用的突然性和神经性毒剂的速杀性,而且它与AChE的不可逆结合使AChE在很短时间内老化(如梭曼只有几分钟),给中毒后的药物治疗带来很大困难,为了减少神经性毒剂中毒引起的损害,使用药物预防神经性毒剂中毒非常必要和关键。 现在西方军队常用的预防药物是溴吡斯的明,但吡斯的明有一定的缺点如它是季铵盐,不能透过血脑屏障,无法保护中枢的AChE,不能对中枢神经损伤起到保护作用,治疗剂量不能防止惊厥症状,而且治疗剂量与中毒剂量很接近,容易引起中毒。新斯的明情况类似;而毒扁豆碱虽然可以通过血脑屏障,但是毒性作用较大,并且半衰期较短。预防药物有的国家为复方用药,处方中一般含有阿托品,阿托品作为M型乙酰胆碱受体阻断剂会抑制出汗,健康人群在较热的环境下或者穿着防毒衣的情况下服用阿托品会产生比较严重的不良反应如热损伤;东莨菪碱情况类似。还有一类是生物清除剂,即通过结合或催化机制在神经性毒剂与AChE反应前将其清除,如血浆丁酰胆碱酯酶等,但是由于可能的过敏反应及药物输送系统的问题,目前尚在研发阶段。另外神经性毒剂严重中毒的存活者常存在不可逆的中枢神经系统损伤,现在所用药物不能防止脑神经元的损伤和中毒后的功能丧失,影响生存质量。所以有必要寻找新的药物以减少毒剂导致的神经中枢毒性。 发展神经性毒剂预防药物一直为各国军方所重视。近年来在寻找新型预防药物的过程中,石杉碱甲(huperzine A, Hup A)作为比较理想的AChE抑制剂得到了人们的重视。Hup A是从蕨类植物蛇足石杉(Huperzia serrata)发现的一个新的高选择性的、可逆性的AChE抑制剂,现已作为治疗早老性痴呆和增强学习记忆的药物在我国上市,疗效显著。近年来的研究证明Hup A对神经性毒剂中毒具有明显的预防作用,引起世界各国药学工作者广泛关注和研究。法、德、美等国家的一系列研究表明,在多种动物模型上(包括猴、豚鼠、大鼠和小鼠),Hup A都显示出对梭曼等神经性毒剂的中毒有明显的预防作用,使用Hup A之后动物对于毒剂的耐受能力显著提高,存活率显著提高、存活时间显著延长,并能够抗惊厥;神经病理检查也证明其对神经损伤有显著的保护作用,其对于神经性毒剂的防护效果明显优于目前使用的同类药物溴吡斯的明和其他可逆性AChE抑制剂,并且副作用很小,半衰期长,选择性好。Hup A的作用机制也已经基本明确,主要是：① 对红细胞AChE有较好的选择性,抑制血浆中的丁酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的作用较弱,血浆中的丁酰胆碱酯酶和羧酸酯酶是神经性毒剂的内源性的清除剂;② 能透过血脑屏障,保护中枢的AChE,减轻神经损伤;③ 为N-methyl-D-aspartate (NMDA)受体的非竞争性拮抗剂,并可与乙酰胆碱竞争N胆碱受体结合位点而发挥作用。外军也正在积极考虑装备石杉碱甲做为正式的神经性毒剂的预防药物。 利用我国Hup A的资源优势,我们对Hup A的结构进行了化学修饰,从半合成的上百个化合物中发现了新化合物ZT 1,发现其抑制AChE活性与Hup A相接近,对多种来源的AChE均有较强的抑制作用;但对外周丁酰胆碱酯酶的抑制作用远弱于Hup A,因此它对AChE的选择性远大于Hup A,选择性更高(Ratio of IC₅₀ BuChE/AChE分别为1829和970)。进一步研究发现, ZT-1对AChE的抑制作用是可逆的,属混合竞争型,其K_i值为32 nmol·L^-1。ZT-1急性毒性（LD₅₀）仅为Hup A的1/10。相对于其他的AChE抑制剂,如多奈哌齐(donepezil)、溴吡斯的明及他可林(tacrine),ZT-1药效更强,作用时间更长,毒性更低。ZT-1对于皮质AChE活性的抑制在0.5~3 h最为显著,抑制活性可以持续6 h以上,给药方便,可以长时间维持有效血药浓度。ZT-1相对于现有药物Hup A与吡斯的明有明显的优势,预防神经性毒剂的保护作用更好,副作用更少且保护时间更长,从而说明ZT-1可以作为高效实用的神经性毒剂预防药物,具有良好应用前景。     

人 G类有机磷毒剂水解酶的性质(英文)

观察了部分纯化的人肝 G类毒剂水解酶 ( G酶 )的一些生化性质 .二硫苏糖醇 ( 5mmol·L-1)使G酶活性在 37℃ ,30 min内抑制 35% ;对氯汞苯甲酸 ( 1 - 1 0 0 0 μmol· L-1)不影响 G酶活性 .说明二硫键对酶分子的三维结构至关重要 ,而没有游离巯基参与酶的催化反应 .人肝 G酶专一性地水解带P- F键的有机磷化合物梭曼 ,但不催化带 P- O,P- C或 P- S键的有机磷化合物的反应 .     

皮肤洗消剂PF2009对化学毒剂的消毒作用

目的 评价皮肤洗消剂PF2009的消毒效果。方法 将皮肤洗消剂PF2009按比例分别同梭曼(GD)、维埃克斯（VX）、芥子气（HD）混合，采用色谱分析法或T-135法于不同作用时间检测化学毒剂的剩余量。将皮肤洗消剂PF2009及其基质分别按相同比例同梭曼、VX或HD相互作用，1 h后利用反应物进行在体动物实验，染毒后不同时间观察动物存活情况，检测乙酰胆碱酯酶（AChE）活性，观察皮肤损伤面积及组织病理学变化。结果 洗消剂对VX和梭曼具有快速、高效的消毒效果，洗消剂与化学毒剂按照体积比50∶1进行消毒时， 混匀后静置10 min，其消毒效率大于99％；洗消剂对芥子气也具有较好的消毒效果，混匀后静置10 min, 消毒率达到80%以上，静置 60min，其消毒率达到94％。毒剂与洗消液的摩尔比1∶10时，混匀60 min后梭曼消毒产物按照GD剂量4.54和9.0 mg·kg^-1（以初始加入GD量计）腹腔注射（ip）家兔, 6d之内家兔全部存活，血液AChE活性为正常对照的90%以上；VX 消毒产物3.3 mg·kg^-1（以初始加入VX量计）ip家兔，6 d之内家兔全部存活，血液AChE活性为正常对照的90%以上,而对应的基质对照组动物全部死亡。HD与PF2009消毒产物1 mg·cm^-2皮肤染毒组同芥子气基质消毒对照组相比皮肤损伤明显减轻。结论 皮肤洗消剂PF2009具有较好的消毒效果。     

MS-302三道测量分析系统的应用及HI-6在离体膈神经-膈肌上抗梭曼的作用机制探讨

目的 探讨抗神经毒化合物HI-6在离体膈神经．膈肌上抗梭曼的作用机制。方法采用MS．302三道测量分析系统,观察大鼠离体膈神经．膈肌的收缩功能,同时,测定膈肌乙酰胆碱酯酶（AChE）活性,观察药物对膈肌AChE活性的直接影响。结果（I）采用MS．302三道测量分析系统对膈神经．膈肌标本强直收缩曲线下的面积进行测量．较为直接地反映了膈神经．膈肌标本的生理功能,结果精确。（2）HI-610和100μmol／L对正常膈神经．膈肌收缩功能影响不明显,1mmol／L对正常膈神经．膈肌收缩功能有抑制作用。HI-610μmol／L预防和治疗给药时．对梭曼抑制的标本收缩功能既没有保护作用也没有拮抗作用;100μmol／L给药有一定的保护和拮抗作用;剂量增加到1mmol／L时。保护作用和拮抗作用都明显增强,且保护作用在30min内最佳。（3）预先给予HI-6不能减弱梭曼对大鼠离体膈肌AChE的抑制．梭曼中毒后给予HI．6对梭曼抑制的膈肌AChE活性无显著影响。结论HI．6对梭曼抑制的离体膈神经．膈肌收缩功能的恢复可能是直接生理对抗作用,在本实验条件下未见膈肌酶活力有明显的恢复。     

丁酮肟及酰胺磷定对大鼠血液中梭曼消除的影响

采用电鳐胆碱酯酶抑制法测定大鼠血液中梭曼残留浓度 ,考察了丁酮肟 (DAM)及酰胺磷定 (HI 6)对大鼠血液中梭曼消除的影响 .结果表明 ,4 15μg·kg- 1梭曼 ( 5LD50 )iv后 3min ,DAM预处理有加速梭曼在大鼠血液中消除的趋势 ,使血中梭曼浓度由( 86± 2 2 ) μg·L- 1下降到 ( 53± 9) μg·L- 1,这可能与DAM加速了大鼠体内主要解毒器官中膦酰化羧酸酯酶 (CaE)的脱膦酰化速率有关 ,使有限的酶分子结合了更多的梭曼 .相比之下 ,HI 6预处理则对大鼠血液中梭曼浓度没有明显影响 .提示在大鼠体内 ,CaE对梭曼的解毒作用比胆碱酯酶更为重要     

HI-6对正常及梭曼抑制大鼠离体膈神经-膈肌标本收缩功能的影响

目的　探讨HI 6对抗梭曼中毒所致呼吸抑制重活化作用外的其他可能作用机制。方法　采用MS 30 2三道生理记录仪 ,建立大鼠离体膈神经 膈肌收缩标本 ,观察HI 6对梭曼中毒膈神经 膈肌标本收缩功能的影响。结果　①梭曼 (2mg·L- 1)中毒后 ,膈肌收缩功能明显下降 ,中毒 10min内强直收缩曲线下面积下降至最低点 ,且在 3h内无明显恢复。②梭曼中毒前给予不同浓度的HI 6 (0 .0 1,0 .1,1.0mmol·L- 1) ,发现HI 6 (0 .1,1.0mmol·L- 1)对梭曼中毒所致膈肌强直收缩具有明显保护作用 ,且保护作用随着浓度的增加逐渐增强。③梭曼中毒后再给予HI 6 (0 .0 1,0 .1,1.0mmol·L- 1) ,发现 0 .0 1mmol·L- 1HI 6对中毒大鼠离体膈肌收缩功能无任何拮抗作用 ;当浓度增至 0 .1mmol·L- 1时 ,对膈肌强直收缩有一定的拮抗作用 ,但无统计学意义 ;但 1.0mmol·L- 1HI 6可显著对抗梭曼中毒所致膈肌收缩功能下降。结论　HI 6对梭曼中毒所致大鼠离体膈神经 膈肌收缩功能抑制具有明显拮抗作用 ,提示HI 6对抗梭曼中毒所致呼吸抑制作用机制存在酶保护作用外的直接生理对抗作用     

甲氟膦酸环己酯与甲氟膦酸异丙酯合用在试管内对大鼠脑乙酰胆碱酯酶的抑制及其重活化

为进一步了解甲氟膦酸环己酯(GF)与甲氟膦酸异丙酯(GB)的联合特性,为制订医学防护措施提供更多的理论依据, 用微量DTNB法对GF,GB和GF与GB混合对大鼠脑乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制及肟类重活化剂酰胺磷定（HI-6）和氯磷定（2-PAM-Cl）的重活化作用进行了研究. 结果表明, GF,GB和GF与GB混合抑制90%左右AChE活力的终浓度分别为 3.98, 39.8和21.9 nmol·L^-1, pI₅₀ 分别为10.3, 9.1和9.2. GF与GB合用对AChE的抑制强度未见增加. HI-6对AChE的抑制有较强的重活化作用,与2-PAM-Cl比较有显著差异. HI-6和2-PAM-Cl对GF与GB合用的重活化比单独的GF更容易.     

肟类重活化剂的作用模型研究

本文应用药物-受体相互作用的构象调解最小原理讨论重活化理论中的几何互补关系,通过对肟类重活化剂构效关系的量子药物化学理论分析,讨论了重活化剂的分子轨道作用模型。在修定和补充wilson假说基础上,建议一个新的重活化作用模型。对理想重活化剂应具有的结构特征进行理论预测,设计出新型重活化剂的基本结构形式。     

HI-6对梭曼染毒大鼠膈肌胆碱酯酶的重活化作用

目的研究HI-6对膈肌局部梭曼染毒大鼠膈肌胆碱酯酶的重活化作用。方法将大鼠麻醉后固定,沿腹正中线切开腹腔,暴露膈肌。梭曼局部染毒膈肌1和10min后,局部或全身给予HI-6,于给药后24和72h处死大鼠,取出中毒部位膈肌。用硫胆碱酶法显示终板的AChE活性,观察HI-6对胆碱酯酶的重活化作用。结果膈肌局部梭曼中毒1和10min后．局部给予HI-624和72h对局部中毒膈肌胆碱酯酶均没有重活化作用．在光镜下观察不到棕褐色椭圆形的运动终板：而膈肌局部梭曼中毒1和10min后,全身给予HI-6对局部中毒膈肌胆碱酯酶有明显的重活化作用,在光镜下可见到肌纤维上又出现了棕褐色椭圆形的运动终板。结论HI-6全身给药对早期膈肌局部中毒的神经运动终板胆碱酯酶有重活化作用。