马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ-氨基丁酸含量的测定

为了探讨氨基酸类神经递质在癫痫发病中的作用,我们采用高效液相色谱仪（HPLC）结合紫外分光光度仪分析检测了马桑内脂（CL）致病大鼠大脑皮层、海马Glu、Asp、Gly、GABA的含量变化。结果显示：CL致痫组与正常对照组相比,Glu、Asp、Gly含量增加（P<0.01,P<0.05）;GABA含量减少,但差异无显著性（P＞0．05）。这些结果提示兴奋性和抑制性氨基酸在癫痫发病中具有重要作用,可能参与了惊厥的发生、发展和惊厥后神经元损伤。     

贝美格致痫大鼠皮层、海马γ—氨基丁酸和谷氨酸免疫反应细胞的改变

目的 γ－氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）是脑内重要的抑制性和兴奋性神经递质，二者与癫痫发作密切相关，为了阐明癫痫发病的病理生理机制。方法 我们采用免疫细胞化学及PAP法，观察了贝美格（Bemegride,Be)腹腔致痫大鼠顶叶大脑皮层、海马CA1、CA3、齿状回Glu和GABA免疫反应细胞的改变。结果 图像分析结果显示：Be致痫组大脑皮层、海马Glu免疫反应平均阳性细胞数及光密度较正常对照组明显增加（P＜0．01）；GABA细胞数及光密度减少（P＜0．01）。结论 提示贝美格致痫作用与调节脑内GABA和Glu系统的兴奋性有关。     

神经元GABA合成、分解和分泌与癫痫发病的研究

目的 研究神经元的γ－ 氨基丁酸（GABA）合成、分解和分泌与癫痫发病的关系。方法 用致痫剂马桑内酯（CL）和抗痫剂苯妥英钠（PHT）处理培养大鼠神经元，用高效液相色谱仪，紫外分光光度计分别检测培养神经元内外的GABA浓度和神经元内γ－ 氨基丁酸转氨酶（GABA－T）活性。结果 与对照组比较，CL使神经元内GABA－T活性显著增强（P＜0．05），对神经元内外GABA浓度没有影响。与CL处理相似100μmol/L CL培养神经元24h）比较，PHT使CL致痫神经元内GABA－T活性显著减弱（P＜0．05），基本恢复到对照组水平。但神经元内外GABA浓度仍相对稳定。结论 癫痫发病中，痫性神经元合成、分解GABA增强，分泌GABA相对稳定。     

癫痫大鼠骨髓干细胞移植后海马组织中氨基酸含量分析

目的了解人骨髓间充质干细胞(hMSC)移植后致痫大鼠海马组织中氨基酸含量变化。方法采用氯化锂-毛果芸香碱诱发雄性SD大鼠癫痫持续状态(SE)模型。大鼠随机分为MSC组、磷酸缓冲液(PBS)组、假手术组(Sham)和正常对照组。术后10周断头取海马组织,测定兴奋性神经递质谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)及抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)含量。结果hMSC组和正常对照组海马组织Asp、Glu和GABA含量差异有统计学意义(P<0.05),Gly含量差异无统计学意义(P=0.0617);致痫成功的hMSC组、PBS组和假手术组海马组织中氨基酸含量比较差异均无统计学意义。结论所有致痫大鼠海马组织中氨基酸含量均低于正常对照组,hMSC移植并未明显改变SE大鼠海马组织中氨基酸含量。     

脑梗塞患者血浆抑制性氨基酸变化及兴奋性氨基酸的关系

目的目前对兴奋性氨基酸（EAA）和抑制性氨基酸（IAA）的临床研究较少，从临床方面探讨EAA，IAA在脑梗塞发展过程中的作用可为今后临床深人研究提供一定的参考资料。方法应用高效液相色谱法对44例动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞病人急性期和病后2周血浆EAA和IAA的含量进行测定，进行病人自身前后对照并与30例正常人对比。结果脑梗塞病人急性或血浆谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）、牛磷酸（Tau）含量明显高于正常对照组（P＜0.01）；病后2周其血浆含量有所下降，其中Glu含量与急性期相比有显著性差异（P＜0．01），但三者均未恢复正常，与正常对照组相比仍有显著性差异（P＜0．01）；血浆丙氨酸（Ala）、甘氨酸（Gly）在脑梗塞急性期及病后2周与正常对照组相比均无显著性差异（P＞0．05）。结论Glu、Asp作为损伤因素参与了脑梗塞的发生发展过程，研究EAA在脑梗塞中的作用时应同时观察IAA的相应变化．兴奋性毒性指数的概念值得进一步研究。测定血浆Glu的含量可考虑作为估计脑梗塞病程的一项生化指标。     

神经元Glu合成、分解和分泌与癫痫发病的研究

目的:研究神经元谷氨酸(Glu)合成、分解和分泌与癫痫发病的关系。方法:用致病剂马桑内酯(CL)处理培养大鼠海马神经元,用高效液相色谱仪、液体闪烁仪分别检测培养神经元内外Glu含量和神经元内谷氨酸脱羧酶(GAD)活性。结果:与对照组比较,CL致痫神经元内Glu浓度没有显著差异,神经元外Glu浓度显著升高(P<0.05),神经元内GAD活性显著增高(P<0.05)。结论:癫病发病中,痫性神经元Glu合成、分解、分泌增强。     

精神分裂症患者海马区γ-氨基丁酸能中间神经元钙结合蛋白的免疫组化研究

目的：通过定量分析精神分裂症患者海马区γ－氨基丁酸（GABA）能中间神经元相对密度的改变，探讨其在精神分裂症发病机理中的作用。方法：共30例患者的脑组织标本，其中精神分裂症患者15例（精神分裂症组），无神经或精神疾病史者15例（对照组），采用免疫组化法结合抗parvalbumin(PV）和抗calretinin(CR)抗体，测定精神分裂症组和对照组钙结合蛋白（CBPs)免疫反应（IR）阳性细胞在海马本体齿状回和阿蒙角（Ammon‘s horn,CA1-CA4)的分布，胞体大小，相对密度及海马亚区面积。结果：与对照组比较，精神分裂症组CR－IR中间神经元相对密度的差异无显著性（P＞0．05），而PV－IR中间神经元相对密度在海马各亚区均严重缺失，差异有显著性（P＜0．05－0．001），其中以男性患者为著，与年龄，病程和抗精神病药无显著性相关（P＞0．05），结论：精神分裂症患者海马区含PV的GABA能抑制性中间神经元亚群缺失，似符合早期神经发育异常的病因学假说。     

神经元GAD和GABA—T的活性与癫痫发病的关系

目的：研究探索神经元内谷氨酸脱羧酶（GAD）和γ－氨基丁酸转氨酶（GABA－T）的活性与癫痫发病的关系。方法：用致痫剂马桑内酯（CL）和抗痫剂苯妥因钠（PHT）处理大鼠培养海马神经元,用液体闪烁计数仪,紫外分光光度计检测培养神经元内GAD和GABA－T的活性。结果：与对照组比较,CL致痫组培养神经元内GAD活性和GABA－T的活性显著增高,运用抗痫剂PHT处理致痫神经元后,与CL致痫组比较,神经元内GABA－T活性显著降低,与对照组比较差异不显著。结论：在癫痫发病中,痫性神经元GAD和GABA－T活性增高。     

海马神经元激活物致疒间大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸受体的表达

目的 观察大鼠海马神经元在激活物作用下γ-氨基丁酸（GABA。）受体的表达,进一步探讨癫痫发病机制。方法 将大鼠海马神经尢被戊四氮（PTZ）作用后的激活物（实验组）及无血清培养基（对照组）注入大鼠侧脑室后观察其行为、脑电图（EEG）及脑组织GABA,受体表达的变化。结果 实验组大鼠注射后15～30min出现Ⅱ～Ⅲ级惊厥反应,EEG呈短程中高幅尖波、尖慢复合波;对照组的行为及EEG未见异常;各时点实验组大鼠脑组织GABA、免疫反应阳性细胞表达明显低于对照组（均P〈0．05）,对照组GABA,免疫反应阳性细胞广泛分布于大脑皮质、海马回、齿状回。结论 海马神经元激活物具有明显致痫作用,其致痫效应与GABAA受体含量下降有关。     

急性脑梗死患者脑脊液兴奋性氨基酸水平的变化及其临床意义

目的 研究急性脑梗死患者脑脊液（CSF）兴奋性氨基酸含量变化及其临床意义。方法 采用高效液相层析方法测定30例急性脑梗死患者及20例偏头痛患者（对照组）CSF谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）的含量。结果 脑梗死组患者CSF中Glu、Asp含量显著高于对照组（均P〈0．001）。脑梗死组患者CSF中Glu和Asp含量与梗死体积呈显著正相关（r=0．75，P〈0．01；r=0.437，P〈0．05），CSF中Clu含星与神经功能缺损程度亦呈正相关（r=0．55，P〈0．01）。结论 脑梗死发生后CSF中Glu、Asp含量明显升高提示其参与了脑梗死的病理生理过程CSP中Glu、Asp含量可反映脑梗死患者的病情及梗死灶的大小。     

大鼠全脑缺血再灌流后4个脑区的谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸及γ—氨基丁酸含量的测定

应用高效液相色谱仪,紫外分光光度检测器监测,测定大鼠全脑缺血再灌流后6h～7d的海马、纹状体、丘脑和新皮层组织匀浆中谷氨酸(Glu)、门冬氨酸(Asp)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)含量变化。结果显示在海马和丘脑Glu含量于再灌流后6h～3d下降(P<0.05和0.01),GABA含量升高(P<0.05和0.01),在纹状体和新皮层除GABA外,分别于6h～5d均有不同呈度的升高。比较有规律的变化是当GABA升高时Glu含量下降。这可能是由于缺血及再灌流早期Glu等兴奋性氨基酸(EAAs)大量释放,反射性GABA的合成与释放增多使Glu向GABA方向转化有关。     

脑温对局灶脑缺血再灌注损伤氨基酸含量的影响

目的研究轻度高温、亚低温对局灶脑缺血EAA和IAA的影响。方法建立大鼠可复流MCA闭塞模型,诱导目标脑温,用HPLC荧光法检测脑组织Glu、Asp、Gly、GABA含量。结果轻度高温组Glu、Asp、Gly明显增高,GABA短暂增高后下降;亚低温组Glu、Asp、Gly降低,GABA持续增高。结论轻度高温促进［Glu］×［Gly］/［GABA］比值增加,在持续增加Glu“兴奋毒性”方面起重要作用;亚低温使［Glu］×［Gly］/［GABA］比值下降,在降低Glu“兴奋毒性”方面起重要作用。轻度高温不利于;亚低温有利于“抑制性保护”机制的建立。     

帕金森病大鼠黑质纹状体中氨基酸含量的变化

目的：观察帕金森病大鼠黑质纹状体中氨基酸神经递质的变化。方法：将６－羟多巴胺（６－ＯＨＤＡ）注入鼠右侧黑质内以建立偏侧帕金森病模型,检测其黑质和纹状体中四种氨基酸的含量。结果：帕金森病大鼠损毁侧谷氨酸（Ｇｌｕ）、天门冬氨酸（Ａｓｐ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、和ｒ－氨丁酸（ＧＡＢＡ）的含量较未损毁侧显著增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兴奋性氨基酸可能参与了６－ＯＨＤＡ所致的黑质纹状体内神经元损伤。     

Ontogenic changes in the hypothalamic levels of amino acid neurotransmitters in the female rat

In order to evaluate the participation of several amino acid neurotransmitters (AANT) in sexual maturation we measured the hypothalamic concentrations of aspartate (Asp), glutamate (Glu), homocysteic acid (HCA), glycine (Gly), taurine (Tau) and γ-aminobutyric acid (GABA) in female rats at different ages of sexual development. Animals (15-, 20-, 25-, 30-, 35- and 40-day-old female rats, as well as adult diestrous rats, n = 8–10/group) were decapitated at noon; each brain was rapidly removed and frozen on dry ice. Preoptic area (POA) and mediobasal hypothalamic (MBH) needle punch samples were obtained from 500–600 μm thick coronal slices, homogenized and centrifuged. AANT concentrations were measured in the supernatants following derivatization with phenyl isothiocyanate and reverse-phase HPLC separation by UV detection. Significant (P < 0.05) changes in hypothalamic AANT concentrations can be summarized as follows: POA Glu, HCA and Gly levels rose transiently at day 20 and then increased steadily in 35- and 40-day-old rats. Asp concentrations rose in 35- and 40-day-old rats. Tau concentrations decreased markedly from day 30 onwards. GABA levels were lowest in 15-day-old rats, as compared to the other age groups. Asp, Glu, Gly and GABA concentrations were highest in adult diestrous rats. Changes in MBH AANT levels were not as relevant: only Gly concentrations rose significantly at day 40; Asp, Glu, HCA, Gly and GABA concentrations increased in adult diestrous rats and Tau concentrations were lower from day 35 onwards. It is concluded that increased levels of excitatory amino acids (Asp, Glu and HCA) could contribute to sexual maturation as a result of their synaptogenic properties and/or acting directly on the LHRH neurons, stimulating LHRH release. The striking decrease of hypothalamic Tau concentrations in peripubertal rats suggests a possible role of this amino acid in the neuroendocrine events leading to sexual maturation.     

出血性脑血管病患者血浆兴奋性氨基酸的临床研究

目的 探讨兴奋性氨基酸含量在出血性脑血管病中的变化规律及临床意义。方法 应用高效液相色谱法测定42例出血性脑血管病患(包括脑出血30例，蛛网膜下腔出血8例，脑室出血4例)和20例正常人血清谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)，进行忽自身前后对照及与正常人比较。结果 出血性脑血管病忠急性期血浆中Glu、Asp含量均显高于对照组(P＜0．001)；恢复期血浆中G1u、Asp均下降(P＜0．01)，其中Glu在2周后降至正常，而Asp仍较正常组高；急性期忠的出血量与Glu、Asp含量呈正相关rG0．809、rA0．675(P＜0.01)。结论 兴奋性氨基酸可能参与出血性脑血管病的急性脑损伤。     

戊四氮所致慢性癫癎大鼠海马神经元选择性凋亡的研究

目的 :探讨选择性凋亡在戊四氮所致慢性癫疒间形成中的作用。方法 :采用免疫组化及原位末端标记双标技术观察海马γ 氨基丁酸 (GABA)能神经元、谷氨酸 (Glu)能神经元各自凋亡情况。结果 :GABA能神经元凋亡数明显高于Glu能神经元凋亡数 ,两者比较有显著性差异。结论 :在癫形成期间脑内可能通过某种机制引发了细胞程序性死亡过程 ,选择性地引起GABA能神经元凋亡占优势 ,打破了兴奋与抑制性神经递质之间的平衡 ,从而促发癫     

托吡酯对纠正癫痫神经递质异常的可行性研究

目的研究托吡酯对纠正癫痫神经递质异常的可行性,为今后治疗癫痫寻找新的指导方向。方法将大鼠随机分为空白对照组(注射生理盐水)、戊四氮组(戊四氮诱导)与观察组(戊四氮诱导+托吡酯治疗),每组20只。记录大鼠惊厥的情况。采用免疫组织化学法对大鼠的神经递质〔γ-氨基丁酸(GABA)与谷氨酸(Glu)〕变化进行记录,同时检测大鼠大脑皮质与海马区的神经递质(GABA和Glu)含量。结果采用戊四氮对大鼠进行痫性诱导后,戊四氮组大鼠出现明显的痫性症状,相比空白对照组和观察组差异具有统计学意义(P0.01)。观察组大鼠在神经递质变化、大脑皮质和海马区(GABA和Glu)含量调节上与戊四氮组相比较,差异具有统计学意义(P0.01);与空白对照组相比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论托吡酯对癫痫出现的神经递质异常具有明显的纠正作用,其通过改善大脑GABA与Glu的调节平衡,减少反复同步放电对大脑造成的损伤。