肺癌组织中DNA修复基因ERCC1的表达与多环芳烃-DNA加合物的关系

目的:探讨核苷酸切除修复基因ERCC1在肺癌中的表达及其与多环芳烃(PAH)-DNA加合物的关系。方法: 用RT-PCR技术检测150例肺癌、120例癌旁肺组织、40例肺良性病变和40例正常肺组织中ERCC1基因mRNA的表达;用免疫法检测PAH-DNA加合物;分析有关暴露因素对修复基因ERCC1的表达和PAH-DNA加合物的影响,并探讨ERCC1与PAH-DNA加合物的关系。结果:30.7%(46/150)的肺癌组织和2.5%(1/40)的正常肺组织存在ERCC1基因的表达低下;吸烟可抑制ERCC1基因的表达。肺组织中PAH-DNA加合物的水平与ERCC1基因表达呈显著负相关,Spearman相关系数为-0.648,P<0.01。结论:ERCC1是参与修复DNA加合物等损伤的一个重要的核苷酸切除修复基因,其表达低下在肺癌发生中起着重要作用。     

ADAM23、αvβ3在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究ADAM23、αvβ3在非小细胞肺癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组化和RT-PCR方法检测52例非小细胞肺癌及其配对癌旁组织和8例良性病变组织中ADAM23、αvβ3的表达。结果非小细胞肺癌中ADAM23蛋白的阳性率(38.5%)低于癌旁组织(86.5%)及肺良性病变组织(87.5%)(P0.05),而αvβ3蛋白的阳性率(80.8%)高于癌旁组织(26.9%)及肺良性病变组(37.5%)(P0.05)。ADAM23蛋白在非小细胞肺癌中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小以及组织学分型无关,而与分化程度、淋巴结转移和临床分期关系密切;αvβ3蛋白在非小细胞肺癌中的表达与患者的年龄、性别、组织学分型以及分化程度无关,而与肿瘤的大小、淋巴结转移和临床分期有关;RT-PCR结果显示AD-AM23mRNA在非小细胞肺癌中的表达与癌旁组织和肺良性病变组织无明显差异,而αv、β3在癌中的表达高于癌旁组织及肺良性病变组织;ADAM23和αvβ3的表达呈负相关(χ2=9.026,r=-0.417,P0.05)。结论 ADAM23在非小细胞肺癌中低表达,αvβ3表达增高,二者可能在肺癌的侵袭和转移中发挥重要作用,并且具有协同性。     

p16基因启动子甲基化联合检测在肺癌早期诊断中的临床意义

目的： 检测可疑肺癌患者外周血血浆、痰液、支气管肺泡灌洗液(BALF)、胸水以及活检组织中p16基因启动子的甲基化状态, 探讨p16基因启动子的甲基化检测在肺癌早期诊断中的意义。方法: 利用甲基化特异性PCR（MSP）检测可疑肺癌患者外周血血浆、痰液、BALF、胸水以及活检组织中p16基因启动子的甲基化状态。结果: 经病理证实,67例可疑肺癌患者中42例确认为肺癌。p16基因启动子甲基化阳性率在肺癌患者的血浆、痰液、BALF、胸水和活检组织中依次为52.4%（22/42）、47.6%（20/42）、59.5%（25/42）、71.4%（10/14）和61.9%（26/42）;25例良性病变患者中除1例在血液、1例在胸水中检测到异常甲基化外,其余标本中均未检测到p16基因启动子的异常甲基化(P<0. 05)。p16基因甲基化阳性检出率与肺癌的组织类型、临床分期、病理分级以及有无淋巴结和远处转移无关(P>0.05)。结论: MSP检测肺癌患者外周血血浆、痰液、BALF、胸水以及活检组织中p16基因启动子的甲基化状态, 是一项很有潜力的肺癌早期诊断技术。     

肺癌和肺癌前病变组织中维甲酸受体的表达

目的： 探讨维甲酸受体（RAR）在肺癌癌前病变（支气管黏膜上皮不典型增生）和肺癌病变中的表达。方法: 在40例正常肺组织、41例支气管黏膜上皮不典型增生组织及143例肺癌患者手术标本中,用免疫组化的方法检测RAR的表达,分析RAR基因在肺癌变不同阶段间的变化。结果: 80.0%（32/40）的正常肺组织中可检测到RAR基因的蛋白表达;68.3%（28/41）的支气管黏膜上皮不典型增生组织和57.6%（83/143）的肺癌组织中可检出RAR（P<0.05）;且随着肺组织癌变过程的变化,RAR基因蛋白的表达呈逐渐降低的趋势（P<0.01）。吸烟者RAR蛋白检出率低于非吸烟者。结论: RAR表达下降与肺组织癌变过程密切相关,吸烟暴露可导致RAR基因表达降低,检测RAR基因表达下降可能为肺癌的早期临床诊断提供科学依据。     

核转录因子FOXP3在肺癌组织中的表达及意义

目的： 检测核转录因子FOXP3在不同病变肺组织中的表达，分析CD4+ CD25+ 调节性T细胞在不同病变肺组织中的浸润情况，并进一步探讨不同病理类型的肺癌组织中FOXP3表达的异同。方法: 使用RT-PCR及Western blotting方法，检测21例肺癌、7例支气管扩张、5例炎性假瘤、3例结核球以及15例病灶旁手术切除正常肺组织共153份标本中FOXP3 mRNA及蛋白的表达。结果: 肺癌、肺良性病变及病灶旁正常肺组织FOXP3 mRNA及蛋白的表达阳性分别为41/63、8/45、0/45（P<0.05），肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达，分析其平均吸光度A值之间有显著差异（P<0.01）。病灶旁正常肺组织FOXP3 mRNA及蛋白无表达。不同病理类型肺癌组织中均有FOXP3 mRNA及蛋白的表达，分析其平均吸光度A值之间无显著差异（P>0.05）。结论: FOXP3可作为CD4+ CD25+调节性T细胞的一种标志物。肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达，FOXP3在肺癌组织中表达强于肺良性病变组织。     

肺癌FHIT基因表达下降的临床病理生理意义及与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系研究

目的研究FHIT(fragile histidine triad)基因表达下降与人肺癌临床病理生理特征和预后的关系,探讨FHIT基因表达与细胞增殖和凋亡的相关性。方法应用免疫组化法检测了166例肺癌组织标本和37例肺良性病变组织中FHIT基因及Ki-67的表达水平,应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测其细胞凋亡指数。结果(1)肺癌组织中FHIT基因表达水平显著低于肺良性病变组织(P＜0.01);(2)肺癌组织中FHIT基因表达水平降低与肺癌组织学类型、细胞分化程度,患者P-TNM分期、淋巴结转移程度存在相关性(P＜0.05);(3)肺癌组织中FHIT基因表达水平降低可能与肺癌患者长期大量吸烟有关(P＜0.01);(4)FHIT基因低表达组肺癌患者的术后长期生存率显著低于高表达组(P＜0.05);(5)FHIT基因表达水平降低与肺癌细胞的增殖活跃及凋亡受抑可能存在一定程度的相关性(P＜0.01)。结论FHIT基因可能参与了对肺癌肿瘤细胞增殖和凋亡的调节,其表达下降可能与肺癌的发生、发展过程有关。     

hnRNP A2/B1 mRNA在非小细胞肺癌和转移淋巴结中表达及意义

目的：探讨肺癌早期诊断基因核内不均一核糖体表达对肺癌淋巴结微转移的作用。观察hnRNP A2/B1 在各组织类型肺癌中的表达。方法：42例非小细胞肺癌患者开胸手术纵隔淋巴结清扫获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,12例肺良性病变手术切除标本作正常对照。荧光定量PCR检测切除肿块和淋巴结的hnRNP A2/B1 mRNA表达。结果：(1)转移性淋巴结中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平561.393显著高于无转移淋巴结156.669 (P＜0.05)。(2)Ⅲ期肺癌组织中hnRNP A2/B1 mRNA 表达水平305（249,533）显著高于Ⅰ期和Ⅱ期肺癌组织(2＝13.453,P＜0.01)。(3)hnRNP A2/B1 mRNA在鳞癌和腺癌中的表达水平分别为207(152,305)和249(177,476), Z=-0.899,P>0.05。(4)58组淋巴结阳性,84组阴性,42个病人142组区域淋巴结hnRNP A2/B1 mRNA阳性率为40.84%(58/142),12例肺良性疾病组织均阴性,HE染色42个病人的50组转移淋巴结阳性率为35.21%,与FQ-PCR 58枚（52.11%）无显著差异（P>0.05）。结论：NSCLC 癌组织存在着hnRNP A2/B1 的过度表达。NSCLC癌组织中hnRNP A2/B1表达水平与淋巴结转移状态及P-TNM 分期有关。 hnRNP A2/B1 检验敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断的标记。     

肺癌患者血清血管内皮生长因子、内皮抑素的表达研究

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、内皮抑素(En-dostatin)在肺癌患者血清中的表达以及与肺癌临床病理生理特征的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测初诊肺癌患者47例及18例肺良性病变患者血清中VEGF、Endostatin的表达水平。结果肺癌患者血清中VEGF(60.93±38.23)pg/ml、Endostatin(131.71±50.32)ng/ml水平显著高于肺良性病变者(33.28±26.49)pg/ml,(85.86±36.86)ng/ml(均P(0.01);肺癌晚期、有淋巴结及远处转移及肺腺癌患者血清VEGF、Endostatin高表达。结论检测血清中VEGF及Endostatin均有助于肺癌的诊断及生物学行为的评估。     

eIF3S10在肺癌组织中的表达及与化疗反应的关系

目的:研究eIF3S10在肺癌中的表达及其与化疗反应的关系,探讨其在肺癌预后中的作用。方法:收集在湖南省肿瘤医院治疗的31例支气管纤维镜检肺癌组织和20例肺良性病变组织及10例肺癌边缘正常组织的石蜡组织切片。采用免疫组织化学技术检测eIF3S10蛋白在肺癌组织、肺良性病变组织和正常肺组织中的表达,并分析eIF3S10表达水平与患者化疗敏感性的关系。结果:肺正常组织和肺良性病变组织中eIF3S10阳性率分别为30%和15%,而肺癌组织中eIF3S10的阳性率达61%。eIF3S10表达水平与化疗敏感性存在一定相关性。结论:肺癌组织中有eIF3S10过表达,而肿瘤组织eIF3S10表达过高可能提示患者对化疗反应敏感。     

The expression and its clinical pathologic significance of KLF6-SV1 in non-small cell lung cancer

目的 观察抑癌基因KLF6的剪切变异体KLF6-SV1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达特点,探讨其与临床病理学参数的关系.方法 应用免疫组化检测42例NSCLC和40例良性肺疾病(肺的炎性肌纤维母细胞瘤、肺脓肿、肺结核、肺的硬化性血管瘤等)中KLF6-SV1蛋白的表达水平,原位杂交检测42例NSCLC和40例良性肺疾病中KLF6-SV1基因mRNA的表达.结果 KLF6-SV1在NSCLC中的蛋白阳性率为71.4%(30/42),表达水平均高于良性肺疾病(P＜0.05).KLF6-SV1基因mRNA的阳性率为69.0%(29/42),表达水平高于良性肺疾病(P＜0.05).KLF6-SV1的蛋白表达水平与其mRNA表达水平之间具有较好的一致性.KLF6-SV1的表达与有无淋巴结转移及肿瘤的分化程度有关,组间差异具有统计学意义(P＜0.05),与病理分型、组织大小和临床分期无关,组间差异不具有统计学意义(P＞0.05).结论 KLF6-SV1的过表达可能与NSCLC的发生、发展及早期淋巴结转移密切相关,有望成为今后诊断的参考指标之一,并有可能成为肿瘤基因治疗的新靶点之一.     

血清和肺泡灌洗液中肿瘤标志物检测对肺癌的诊断价值分析

目的：分析血清和肺泡灌洗液中肿瘤标志物对肺癌的诊断价值,研究其表达水平与肺癌的相关性及用于肺癌诊断的可行性。方法：应用流式细胞术检测40例肺癌组和肺良性病变组hnRNPA2/B1的表达情况;同时用化学发光免疫法检测血清肿瘤标志物CEA、NSE、CYFRA21-1和SCCAg的含量。结果：hnRNPA2/B1在肺癌组与肺良性病变组表达率分别为86.01%±32.48%和32.1%±10.02%,差异显著（P〈0.01）。肺癌组hnRNPA2/B1检测阳性率为85%,40例肺癌组样本肿瘤标志物CEA、NSE、CYFRA21-1、SCCAg联检阳性率52.5%,肺泡灌洗液中hnRNPA2/B1的阳性检出率明显高于CEA、NSE、CYFRA21-1及SCCAg四项肿瘤标志物的联检。结论：血清CEA、NSE、CYFRA21-1及SCCAg四项肿瘤标志物联检肺泡灌洗液脱落细胞内hnRN-PA2/B1对肺癌辅助诊断有较大的临床应用价值。     

肺癌患者血清中游离DNA含量与肿瘤标志物相关性分析

通过对52例肺癌患者、8例肺部良性疾病患者和10名健康人血清游离DNA含量与肿瘤标志物(TM)CA19-9、CA125、CYFRA21-1、CEA和NSE的联合检测,对两种检测结果作相关性分析。将表皮生长因子受体(EGFR)作为肿瘤基因标志物,运用荧光定量RT-PCR方法检测血清游离DNA含量。结果显示,10名健康人血清游离DNA含量平均为18.81ng/mL(范围:0.17~54.64ng/mL)。若以19ng/mL作为血清游离DNA含量的阳性临界值,则87.5%的健康人低于此水平。8例肺部良性疾病患者游离DNA含量均值为76.86ng/mL(范围:5.33~189.7ng/mL),其中4例(50%)高于阳性临界值。52例肺癌患者游离DNA均值为107.6ng/mL(范围:6.39~1617ng/mL),37例(71.2%)的肺癌患者血清游离DNA含量高于正常值。血清游离DNA含量诊断肺癌的价值等同于肿瘤标志物五项指标联合检测。其灵敏度、特异性、准确性分别为:71.15%,50%,68.3%,提示血清游离DNA含量作为一项新颖肿瘤标志物具有潜在的临床诊断价值。     

非小细胞肺癌中KLF6-SV1的表达及临床病理学意义

目的观察抑癌基因KLF6的剪切变异体KLF6-SV1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达特点,探讨其与临床病理学参数的关系。方法应用免疫组化检测42例NSCLC和40例良性肺疾病(肺的炎性肌纤维母细胞瘤、肺脓肿、肺结核、肺的硬化性血管瘤等)中KLF6-SV1蛋白的表达水平,原位杂交检测42例NSCLC和40例良性肺疾病中KLF6-SV1基因mRNA的表达。结果 KLF6-SV1在NSCLC中的蛋白阳性率为71.4%(30/42),表达水平均高于良性肺疾病(P<0.05)。KLF6-SV1基因mRNA的阳性率为69.0%(29/42),表达水平高于良性肺疾病(P<0.05)。KLF6-SV1的蛋白表达水平与其mRNA表达水平之间具有较好的一致性。KLF6-SV1的表达与有无淋巴结转移及肿瘤的分化程度有关,组间差异具有统计学意义(P<0.05),与病理分型、组织大小和临床分期无关,组间差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论 KLF6-SV1的过表达可能与NSCLC的发生、发展及早期淋巴结转移密切相关,有望成为今后诊断的参考指标之一,并有可能成为肿瘤基因治疗的新靶点之一。     

外周血CK-20基因表达与大肠癌微转移关系的研究

目的:探讨靶基因CK-20在直肠癌患者外周血中的表达及与肿瘤微转移的关系。方法:应用套式RT-PCR方法检测10例健康成人,17例非恶性消化系统疾病患者,32例大肠癌患者外周血中的肿瘤细胞。结果:①正常对照组及非大肠癌对照组均未检出CK-20mRNA阳性细胞;②大肠癌组中,2例A期患者CK-20mRNA均呈阴性,15例B期患者中阳性4例;10例C期患者中阳性6例;5例D期患者中阳性4例;③在32例大肠癌患者中CK-20mRNA阳性总检出率为43.8%;A、B期阳性率为23.5%;C、D期阳性率为66.7%。结论:应用RT-PCR法检测外周血瘤细胞的CK-20靶基因对大肠癌具有特异、敏感、无损伤等特点,它可能有助于肿瘤经血液微转移的早期诊断以及指导化疗。     

人非小细胞肺癌中HIF-1α的表达与血管生成和细胞凋亡的关系及意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与血管生成和细胞凋亡的关系,评估它在NSCLC发生发展过程中的作用.方法 采用免疫组织化学的方法检测HIF-1α在正常肺组织、良性病变、癌前病变、原位癌、非小细胞肺癌及肺癌转移淋巴结中的表达,及血管内皮生长因子(VEGF)在NSCLC中的表达;采用TUNEL法检测部分NSCLC中细胞凋亡指数AI.结果 HIF-1α在支气管黏膜非典型增生、原位癌、NSCLC及肺癌转移淋巴结中的阳性表达率相似,总阳性表达率为40.0%(68/170),其在正常及良性病变中的总阳性表达率为6.0%(4/67),两组间有显著差异(P＜0.01).HIF-1α在NSCLC中的表达与各项临床病理特征均无明显相关性,仅与患者术后生存时间明显正相关(P＜0.01).VEGF在NSCLC中的表达与HIF-1α的表达呈正相关(P＜0.01),与患者预后呈负相关(P=0.027).凋亡指数(AI)在各组织类型和各分化程度的Ⅰ期肺癌中无明显差异,但生存期≥5年的肺癌患者AI明显高于生存期＜5年的患者(P=0.004).AI与HIF-1α的表达明显正相关(P=0.004).结论 HIF-1α在非小细胞肺癌组织中的表达较正常及良性病变肺组织明显上调,其与肿瘤血管生成及细胞凋亡均密切相关,在NSCLC生长中的作用具有多向性.HIF-1α可以作为评估患者预后的重要指标.     

非小细胞肺癌中窖蛋白1基因的蛋白表达和甲基化及其意义

目的 检测窖蛋白1(Car-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的蛋白表达以及启动子的甲基化状况,探讨Cav-1基因在NSCLC中的作用及其临床意义.方法 应用免疫组织化学(sP法)和量子点Qd600染色检测123例NSCLC组织、17例良性病变肺组织中Cav一1蛋白表达和亚细胞定位.亚硫酸氢钠处理DNA,甲基化特异性PCR(MSP)检测Cav-1基因启动子区域的甲基化水平.结果 Cav-1蛋白在肺支气管黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞、毛细血管内皮细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞的胞质和胞膜高表达.癌旁组织(对照)组和肺癌组中Cav-1蛋白的阳性率分别为17/17、43.1%(53/123),两组间差异有统计学意义(P=0.001);Cav-1蛋白在NSCLC不同的组织学类型(P=0.552)和分化程度(P=0.160)中差异均无统计学意义.Cav-1蛋白阳性率与NSCLC的TNM分期(P=0.001)以及淋巴结转移(P=0.001)均相关.在40例Cav-1蛋白表达为阴性的肺癌组织和12例癌旁肺组织,MSP法均未检测到Cav-1因启动子区域的甲基化.结论 Cav-1蛋白失表达的机制可能与启动子区是否甲基化无关.Cav-1蛋白高表达预示NSCLC恶化进展和高侵袭性.     

BCRP、LUNX基因mRNA表达水平与非小细胞肺癌患者的病理类型及分期的相关性

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和肺特异性X蛋白(LUNX)基因的mRNA水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者病理类型及分期的相关性及其对于预后的价值。方法选取2015年6月至2018年6月河南大学淮河医院收治的89例患者为NSCLC组, 以同期收治的55例肺良性病变患者为对照, 检测两组患者外周血中BCRP、LUNX的mRNA表达水平, 并分析其与临床病理特征及预后的相关性。结果 NSCLC组外周血中BCRP、LUNX mRNA的阳性表达率显著高于肺良性病变组(P<0.05);NSCLC患者BCRP mRNA的表达与分化程度、TNM分期有关(P<0.05), 与性别、年龄、吸烟、病理类型、淋巴结转移无关(P>0.05);其LUNX mRNA的表达与分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05), 与性别、年龄、吸烟、病理类型无关(P>0.05);BCRP mRNA表达组与LUNX mRNA表达组的总体生存率均显著低于无表达组(P<0.05);分化程度、TNM分期、淋巴结转移、BCRP mRNA表达、LUNX mRNA表达均为影响NSCLC患...     

肺腺癌组织中CPNE1蛋白的表达及临床意义

目的探讨Copine 1(CPNE1)蛋白在肺腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测CPNE1蛋白在186例肺腺癌组织及30例正常肺组织中的表达;采用RT-PCR技术检测肺腺癌组织及正常肺组织中CPNE1 mRNA的表达。结果在186例肺腺癌组织中68例CPNE1低表达(36.56%),118例呈CPNE1高表达(63.44%),CPNE1在正常组织中均呈低表达。相关性分析结果显示,CPNE1表达与肺腺癌分期、远处转移有关(P0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小等无关。RT-PCR结果显示,肺腺癌组织中CPNE1的表达量显著高于正常肺组织。结论 CPNE1蛋白在肺腺癌组织中的表达较正常肺组织高,且与淋巴结转移、临床分期有关。CPNE1蛋白表达与肺腺癌的发生、发展及预后密切相关,有望成为肺腺癌预后评估的重要指标。     

UVB照射前后银屑病T细胞趋化因子受体7及其基因的表达

目的:探讨CC趋化因子受体7(CCR7)在寻常型银屑病(psoriasisvulgaris,PV)患者外周血T细胞上的表达及其UVB照射对其表达的影响。方法:应用流式细胞术(FCM)和RT-PCR,检测23例PV患者和12例健康人外周血T细胞上CCR7的表达。结果:通过FCM发现PV患者外周血T细胞表面CCR7的表达率为(60.5±10.4)%,显著高于健康人(31.7±2.1)%(P<0.01)。RT-PCR检测显示,PV患者中CCR7基因的表达显著高于健康人对照(P<0.01),并发现200J/m2UVB照射可明显抑制CCR7基因的表达(P<0.01)。结论:PV患者外周血中CCR7 记忆性淋巴细胞数量及分布的异常可能与疾病的炎症维持密切相关。UVB照射的治疗作用可能与影响CCR7基因的表达有关。     

非小细胞肺癌患者血清VEGF水平和外周血CK19 mRNA的表达

目的： 研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化和外周血中细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）mRNA的表达及相互关系。方法： 3组研究对象为NSCLC组患者96例，支气管、肺良性病变组40例，健康对照组25例，分别采用ELISA法进行血清VEGF的检测，RT-PCR法进行外周血CK19 mRNA表达水平的测定。结果： NSCLC组的血清VEGF水平为（346.3±95.6）ng/L,外周血CK19 mRNA的阳性率为63.5%，均显著高于其它2组（P<0.01）；且两者均随临床分期的递增而逐步升高，差异显著（P<0.05）；不同病理类型的NSCLC患者的血清VEGF水平及CK19 mRNA阳性率之间无显著差异（P>0.05）；NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性者，其血清VEGF水平为（407.4±121.2）ng/L，显著高于阴性患者（P<0.01）。结论： VEGF血清水平联合外周血CK19 mRNA的检测有助于对NSCLC的病情和预后进行判断，且不受肺癌病理分型的影响。