不同白毛夏枯草提取物抗肝癌机制分析

目的:以白毛夏枯草水提取物、乙酸乙酯提取物为例探究不同提取物的抗肝癌机制。方法:将白毛夏枯草的水提取物(STW)、乙酸乙酯提取物(ZTW)分别作用于肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721。运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的STW、ZTW对肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721增生的抑制作用,通过流式细胞仪检测不同浓度的STW、ZTW诱导肝癌HepG2和SMMC-7721细胞凋亡的凋亡率,运用一步法荧光RT-PCR(Real-time PCR)技术检测经不同浓度的STW、ZTW处理后HepG2和SMMC-7721细胞中Bax mRNA的表达情况。结果:STW、ZTW对HepG2和SMMC-7721细胞均有显著的抑制增生和诱导其凋亡的作用,同时能够抑制肝癌血管增殖。STW、ZTW的抑制机制呈一定的浓度依赖性,其中以乙酸乙酯提取物ZTW抑制性最强。结论:白毛夏枯草水提取物、乙酸乙酯提取物均通过抑制肝癌细胞增生,诱导细胞凋亡,抑制肝癌血管增殖,加速肝癌细胞分化等机制来抗肝癌。     

中药蛇六谷提取物对人肝癌HepG-2和大鼠胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的：观察蛇六谷提取物对体外生长的人肝癌HepG-2细胞和大鼠胶质瘤C6细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机理。方法：采用系统溶剂法初步提取分离蛇六谷不同有效部位,运用MTT法和生长曲线法观察不同浓度的各提取物对体外培养的HepG-2和C6细胞增殖的抑制作用,并以流式细胞仪检测其对两种细胞凋亡的影响。结果：蛇六谷醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物具有一定的抑制该两种肿瘤细胞增殖的作用,以石油醚萃取物的抑制作用最为明显,呈现较好的剂量-效应曲线和时间-效应曲线;流式细胞仪检测发现石油醚萃取物具有诱导HepG-2和C6细胞凋亡的作用。结论：蛇六谷石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物可能是该药抗肿瘤的有效部位。     

水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞体外抑制作用研究

目的研究水蛭提取物对人肝癌HepG2细胞的体外抑制作用。方法以液氮快速冻融法制备水蛭提取物,以常规水提醇沉法水蛭提取物作对照,不同浓度体外干预人肝癌HepG2细胞,MTT法检测两种水蛭提取物对HepG2细胞增殖的抑制作用,并进行细胞计数,吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡情况。结果水蛭液氮快速冻融法提取物药物浓度为6-15mg／mL时,对人肝癌HepG2细胞的增殖有明显抑制作用,细胞数目明显下降,并呈剂量依赖性,与水提醇沉法提取物比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。吖啶橙染色可见典型的凋亡细胞形态学特征。结论水蛭液氮快速冻融法提取物可体外抑制HepG2细胞的增殖并诱导凋亡,其作用明显优于水蛭水提醇沉法提取物。     

中药蛇六谷提取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖影响的实验研究

目的:观察蛇六谷提取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,探讨其可能的作用机理。方法:采用系统溶剂法初步提取分离蛇六谷不同提取物,运用MTT法和生长曲线法观察不同浓度的各提取物对人胃癌SGC-7901细胞的增殖的影响,流式细胞仪检测蛇六谷石油醚萃取物对该细胞周期分布及凋亡的影响。结果:蛇六谷醇提取物、石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物均具有一定的抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,以石油醚萃取物的抑制作用最为明显,呈现较好的剂量-效应曲线。生长曲线法观察发现蛇六谷石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用有一定的时间-效应曲线;流式细胞仪检测发现蛇六谷石油醚萃取物可阻滞SGC-7901细胞周期于G0/G1期,分析表明其作用机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。结论:蛇六谷石油醚萃取物可能是该药抗肿瘤的有效部位之一。     

藤梨根提取物对肝癌细胞生物学特性的影响以及机制研究

目的探讨藤梨根提取物对肝癌细胞生物学特性的影响以及潜在作用机制。方法通过不同浓度藤梨根正丁醇提取物(0,25,50,100,200,400μg/mL)作用于人肝癌HepG2细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测肝癌HepG2细胞增殖情况,采用流式细胞术和Transwell法检测细胞凋亡、迁移、侵袭情况,采用Western blot法检测核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达水平。结果不同浓度藤梨根提取物对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用(P均0.05),且具有浓度依赖性,其半数抑制浓度(IC50)为145.365μg/mL。145μg/mL的藤梨根提取物可显著抑制HepG2细胞迁移、侵袭(P0.05),诱导凋亡(P0.05),抑制NF-κB磷酸化(P0.05),下调基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白水平(P0.05)。结论藤梨根正丁醇提取物可能通过影响NF-κB信号通路调控肝癌细胞生物学特性。     

β-榄香烯抗肝癌的促凋亡机制研究

目的：研究中药莪术提取物β-榄香烯对人肝癌HepG2 细胞增殖抑制及诱导凋亡,以及小鼠肝癌H22 荷瘤小鼠凋亡相关蛋白表达的作用。方法:体外培养人肝癌HepG2 细胞,MTT 法检测β-榄香烯对细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡。通过建立H22 小鼠肝癌荷瘤模型,观察β-榄香烯对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对HepG2 细胞具有抑制增殖的作用,呈剂量和时间的依赖性;Annexin V-FITC/PI 法检测到早期凋亡细胞。不同实验组对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用程度不同,各药物浓度组Caspase-3 蛋白均上调（P<0.05）,P65 蛋白均下调。结论：β-榄香烯可有效抑制人肝癌HepG2 细胞的增殖,其抑制癌细胞增殖的途径是通过诱导细胞发生凋亡,并且与上调凋亡相关蛋白Caspase-3、下调NF-κB P65 相关。     

中药莪术提取物对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响

目的：观察莪术提取物对体外生长的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响。方法：采用系统溶剂法初步提取分离莪术不同有效部位,运用CCK8法和生长曲线法观察不同浓度的莪术各提取物对体外培养的MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用,并以流式细胞仪检测其对MDA-MB-231细胞周期的影响。结果：莪术石油醚提取物、莪术乙酸乙酯萃取物和高浓度的莪术水提取对MDA-MB-231细胞生长均有明显抑制作用,莪术石油醚提取物抑制作用最强,其差异有统计学意义（P〈0.05）。经流式细胞仪分析,表阿霉素和莪术的石油醚、乙酸乙酯提取物均可提高体外生长MDA-MB-231细胞G1期细胞比率,降低S期和G2细胞数。结论：莪术石油醚萃取物和乙酸乙酯提取物对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖有明显的抑制作用。     

5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2及SMMC7721增殖的影响

目的:探讨5种桦褐孔菌提取物对人肝癌细胞HePG2和SMMC7721细胞生长的抑制作用。方法:用桦褐孔菌水提醇沉物(HH1),石油醚萃取物(HH2)、乙酸乙酯萃取物(HH3)、正丁醇萃取物(HH4)及萃取后的水层物(HH5)的不同浓度10、20、40、60、80μg/mL在48h处理HePG2及SMMC7721细胞后,采用MTT法检测细胞生长的抑制率,计算各组IC50。结果:5种桦褐孔菌提取物均能浓度依赖性的抑制人肝癌HePG2及SMMC7721细胞生长。水提醇沉提取物与其他4种提取物作用于HePG2及SMMC7721的抑制率比较均有显著性差异(P<0.05;P<0.01),对于HePG2细胞,正丁醇萃取物的IC50大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异,与其他2种提取物比较有显著性差异(P<0.01);对于SMMC7721细胞,正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物及萃取后的水层物的IC50均大于80μg/mL,水提醇沉提取物与石油醚提取物的IC50比较无显著性差异。结论:水提醇沉提取物对人肝癌HePG2及SMMC7721的增值抑制作用略优于石油醚提取物,而显著优于其他3种提取物。     

鹅不食草提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长抑制作用的实验研究

目的:观察鹅不食草不同提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2生长的抑制作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:采用系统溶剂法制备鹅不食草不同提取物,MTT法观察不同浓度的各提取物对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的影响,并用流式细胞仪检测鹅不食草乙酸乙酯提取物对该细胞的凋亡作用。结果:鹅不食草石油醚和乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌细胞CNE-2有一定的抑制,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线,其作用机理可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。结论:鹅不食草乙酸乙酯提取物可能是其抗鼻咽癌作用的有效部位之一。     

雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响

目的探讨雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响机制。方法将对数期2种细胞随机分为正常组、DMSO组、水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组,采用流式细胞仪检测雪峰虫草不同提取物诱导NB4、U937细胞凋亡作用,采用Western blot法检测NB4、U937细胞内Bcl-2、Cyt C、Bax、caspase-9蛋白表达。结果正常组与DMSO组无统计学差异(P0.05),与DMSO组比较,水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组NB4、U937细胞凋亡增加(P0.05,P0.01);相较水提取物组和醇提取物组,乙酸乙酯提取物组诱导细胞凋亡作用更为明显(P0.05,P0.01);NB4、U937细胞内Cyt C、Bax和caspase-9蛋白表达增加(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P0.05,P0.01)。结论雪峰虫草不同提取物皆能诱导NB4、U937细胞凋亡,且乙酸乙酯提取物效果最佳,其作用机制可能与线粒体凋亡途径中细胞内Bax/Bcl-2蛋白表达比例失调,胞质中Cyt C分泌增多,caspase-9蛋白表达增加有关。     

中药复方博癌丸对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的研究中药复方搏癌丸对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的诱导作用.方法采用细胞药理学和血清药理学方法,对比观察(阴性无药血清对照、阳性药5-氟尿嘧啶血清对照)搏癌丸诱导HepG2细胞的增殖及凋亡.(1)MTT法观察4个搏癌丸药物血清浓度对HepG2细胞增殖的抑制作用,从中筛选出搏癌丸的有效药物浓度.(2)电镜及流式细胞仪观察HepG2细胞凋亡.结果(1)10%、5%、2.5%搏癌丸药物血清3个有效浓度均对HepG2细胞增殖有显著抑制作用(P＜0.01),增殖抑制作用随药物浓度增高而有加强趋势,3个有效浓度组间差异均有显著性(P＜0.01).(2)10%搏癌丸药物血清作用HepG2细胞48小时后,HepG2细胞核明显缩小,浆比减少,核仁减少、浓缩甚至消失,核内异染色质明显增多,核膜完整,可见早、中、晚期细胞凋亡,出现凋亡小体.(3)10%搏癌丸药物血清作用HepG2细胞48小时后,流式细胞仪检测的细胞凋亡率为25.34%,均显著高于相应无药血清对照组的3.54%(P<0.05).结论搏癌丸能在一定程度上抑制HepG2细胞的增殖和诱导HepG2细胞凋亡.     

藏药普尔那对肝癌HepG2细胞增殖作用的实验研究

观察藏药普尔那提取物对HepG2细胞的增殖作用。采用MTT比色法测定不同质量浓度普尔那根茎乙酸乙酯提取物(GE)、根茎水提物(GW)、叶乙酸乙酯提取物(YE)、叶水提物(YW)对体外培养人肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。125μg/mL的低质量浓度GE、500μg/mL的低质量浓度YE对HepG2细胞增殖具有一定抑制作用。普尔那不同提取部位主要体现细胞增殖的促进作用。应进一步研究藏药普尔那的物质基础、药理活性,进行体外、动物毒性实验,且严格控制其临床使用剂量。     

不同三叶青提取物体外抗肿瘤细胞作用研究

目的明确三叶青水、乙醇、乙酸乙酯三种提取物体外对乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用,分析不同提取方式对肿瘤细胞抑制强弱差异。方法 MTT法检测三叶青三种提取物含药血清分别在2、10、50、100、200μg·m L-1时对MCF-7细胞存活率的影响;采用流式细胞仪检测三种提取物含药血清在200μg·m L-1浓度时对MCF-7细胞凋亡的影响。结果三种提取物均具有与浓度相关的MCF-7细胞体外抑制作用(P0.05),作用强弱依次是乙酸乙酯提取物乙醇提取物水提取物;三种提取物均能促进MCF-7细胞凋亡(水、乙醇组P0.05,乙酸乙酯组P0.01);乙酸乙酯提取物比水提物组、乙醇组具有更强的凋亡促进作用(P0.05)。结论三种提取物均具有体外抗乳腺癌MCF-7细胞作用,其中乙酸乙酯提取物作用最强。     

藏荆芥不同萃取部位抗炎、镇痛活性研究

目的:比较藏荆芥不同萃取部位的抗炎、镇痛活性。方法:用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取分离得藏荆芥乙醇提取物的不同萃取部位,并通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验、醋酸致小鼠腹腔毛细管通透性增加试验、醋酸致小鼠扭体试验和小鼠热板试验筛选其不同萃取部位的抗炎、镇痛活性。结果:与模型对照组相比,藏荆芥醇提物的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取部位明显抑制二甲苯诱导的小鼠耳廓肿胀(P0.01),明显减轻醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的增加(P0.01),显著减少醋酸所致小鼠扭体次数(P0.05),显著延长热板小鼠的痛阈值(P0.01、0.05)。结论:藏荆芥抗炎镇痛的有效部位主要集中在石油醚、二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位。     

湖南产石菖蒲和水菖蒲乙醇提取物及其萃取组分抑菌活性的比较研究

目的石菖蒲和水菖蒲乙醇提取物及其萃取组分的体外抑菌活性比较。方法采用平皿打孔法和二倍稀释法测定各样品的体外抑菌活性。结果湖南产石菖蒲和水菖蒲乙醇提取物及其萃取组分对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白假丝酵母菌、乙型溶血性链球菌、幽门螺杆菌等多种致病菌表现出较强的抑制作用,对大肠埃希菌、痢疾志贺氏杆菌的抑制作用较弱,对绿脓杆菌无抑菌活性。石菖蒲和水菖蒲乙醇提取物及其石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取组分的抑菌活性明显强于正丁醇萃取组分和水层部分,其中水菖蒲石油醚和三氯甲烷萃取组分抑制乙型溶血性链球菌,水菖蒲正丁醇萃取组分抑制幽门螺杆菌的作用最强。最低抑菌浓度表明,水菖蒲乙醇提取物、石油醚和乙酸乙酯萃取组分对乙型溶血性链球菌,水菖蒲三氯甲烷和正丁醇萃取组分对幽门螺杆菌均具有显著的抑制作用,最低抑菌质量浓度为3.13 mg/mL。结论石菖蒲和水菖蒲均具有抑菌作用,尤其是水菖蒲对乙型溶血性链球菌和幽门螺杆菌的抑制作用显著,具有潜在的药用开发价值。     

两种卷柏属植物对人单核细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡影响

目的:研究垫状卷柏、翠云草两种卷柏属植物对体外培养的人单核细胞白血病细胞U937细胞的增殖和凋亡的影响。方法:分别采用95%乙醇对两种植物采用冷浸和热提取两种提取方法,回收溶剂后萃取得乙酸乙酯和石油醚萃取物。采用噻唑兰比色法(MTT)检测不同浓度样品作用于U937细胞24h后的细胞增殖情况,Hoechst33342染色分析细胞形态学变化,Western Bolt检测凋亡蛋白表达情况。结果:MTT法分析表明垫状卷柏、翠云草提取物均对U937细胞的增殖抑制成剂量依赖性关系。其中垫状卷柏热提物效果最佳,其乙酸乙酯和石油醚萃取物均有良好抑制效果,乙酸乙酯萃取部位抑制作用更强; Hoechst33342染色发现随着提取物浓度升高,凋亡细胞增多; Western印记分析凋亡相关蛋白,其中Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达量减少,Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量减少。结论:两种卷柏均能有效抑制U937细胞增殖,并且热提总提物抑制效果优于冷浸总提物,其中垫状卷柏热提总提物的乙酸乙酯萃取层初步认为可能是垫状卷柏抗肿瘤的有效部位,其诱导U937细胞凋亡与Caspase依赖性线粒体途径相关。     

泰山白首乌醇提物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的调节作用

目的:研究泰山产白首乌醇提物对HepG2肝癌细胞增殖与凋亡的调节及其相关分子机制.方法:白首乌95%的乙醇提取物,通过D101大孔吸附树脂梯度洗脱.MTT法检测不同洗脱部位对:HepG2细胞增殖的影响;流式细胞术检测HepG2细胞周期的变化;FTTC-AnnexinV/PI双标记检测90%乙醇洗脱部位对肝癌细胞凋亡的影响;免疫印迹法检测ERK,JNK1,p38/MAPK磷酸化水平的变化.结果:泰山白首乌50%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位可明显抑制HepG2细胞增殖,减少细胞的增殖指数(PI),且90%乙醇洗脱部位可诱导HepG2细胞发生凋亡,抑制ERK磷酸化并促进.JNK1的磷酸化.结论:泰山白首乌醇提物可抑制HepG2肝癌细胞的增殖并诱发凋亡,其分子机制可能与调节MAPK信号通路中ERK和JNK磷酸化水平的平衡相关.     

黄药子体外抗胃癌活性成分的筛选及分析

目的通过MTT体外实验观察黄药子4种不同提取物及从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇作用于MGC803、BGC823和SGC7901 3种人胃癌细胞株,探讨黄药子不同提取物及两个单体对3种胃癌细胞株的增殖情况的影响,从而筛选出黄药子有效抗胃癌活性成分。方法采用MTT法检测0.5、1、2、4、6、8、10、12 mg/mL的不同质量浓度的黄药子石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、水层萃取物、醇提物和最终质量浓度为1×10-4、5×10-4、1×10-3、5×10-3、1×10-2、5×10-2、1×10-1、5×10-1mg/mL的黄独乙素和β-扶桑甾醇分别作用于MGC803、BGC823和SGC 7901细胞株24 h后对细胞增殖的影响。结果石油醚萃取物、醇提物、黄独乙素和β-扶桑甾醇均有不同程度的抑制肿瘤细胞生长的作用,而乙酸乙酯萃取物和水萃取物低剂量有不同程度的促进肿瘤细胞生长的作用;大剂量表现为抑制肿瘤细胞生长的作用。结论从石油醚提取物中分离得到的黄独乙素和β-扶桑甾醇对胃癌细胞均有抑制作用。     

仙鹤草对人肝癌HepG2细胞凋亡作用研究

目的：探讨仙鹤草丙酮提取物正丁醇层对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法：以不同浓度的仙鹤草丙酮提取物正丁醇层作用于体外培养的HepG2细胞,MTY法检测细胞生长抑制率,应用FCM检测细胞凋亡率。应用FCM检测细胞内活性氧的变化。结果：仙鹤草可显著抑制HepG2细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。结论：仙鹤草丙酮提取物正丁醇层能诱导细胞发生凋亡;细胞内活性氧的增加可能是其作用机制。     

水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖抑制作用的研究

目的：观察水红花子不同提取物对人肝癌细胞Bel-7402生长的抑帝】作用,筛选其有效作用部位。方法：采用系统溶剂法制备水红花子不同提取物,MTT法观察水红花子不同浓度的各提取物对人肝癌细胞Bel-7402增殖的的抑制作用;通过光学显微镜、透射电镜观察凋亡细胞的形态学及超微结构的改变,并用流式细胞仪检测其乙酸乙酯提取物对该细胞周期分布及凋亡的影响。结果：水红花子石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物对人肝癌细胞Bel-7402均有-定的抑制作用,其中乙酸乙酯提取物抑制作用最明显,呈现较好的剂量-效应曲线;流式细胞仪检测发现水红花子乙酸乙酯提取物可阻滞Bel-7402细胞周期于G0／G1期,诱导肿瘤细胞凋亡。结论：水红花子乙酸乙酯提取物可能是其抗肝癌作用的有效部位之-。