微血管内皮细胞与人工血管内皮化（综述）

人工血管的应用日趋广泛，如何实现其内皮化是应用的关健。人工血管内皮化的效果决定于三个因素：种植的细胞数、细胞贴壁率、贴壁细胞抗切应力能力。为此，人们进行了内皮细胞获取、培养增殖、微血管内皮细胞获取的研究，尝试了从低密度种植、高密度种植、铺植到离体衬里的一系列内皮化方法，确实了人工血管内皮化的研究的方向：寻求可靠、丰富、方便的细胞来源，建立完善的离体衬里内皮化方法。     

犬自体微血管内皮细胞衬里ePTFE人工血管下腔静脉移植

采用犬自体网膜做血管内皮细胞离体衬里的进口ePTFE人工血管行下腔静脉移植。结果显示:离体衬里可在进口ePTFE人工血管腔面形成完全内皮化;衬里人工血管移植后观察5周,全部通畅,一直保持了完整内皮化,无附壁血栓,新内膜较薄(厚180μm±65μm,对照组厚873μm±194μm,P<0.001)。表明衬里的内皮层具备较好的抗切应力、抗凝血和抑制新内膜增生的作用,离体衬里内皮化是提高静脉移植人工血管通畅率的有效途径。     

人工血管内皮化的研究现状

工血管完整内皮单层的缺乏是导致新内膜增生、血栓形成和感染的主要刺激,因此,人工血管内皮化已成为目前研究的热点,并在许多方面取得了成绩,但是,仍存在许多问题有待解决。     

人工血管内皮化的研究进展

人工血管内皮化的研究进展潘明新综述杨继震何红兵审校作者单位：５１０２８２第一军医大学珠江医院普外科血管病研究室众所周知，人工血管置换病变的静脉和口径小于６ｍｍ的动脉，通畅率十分低下。这与人工血管的内表面难以自发形成抗血栓形成的内皮细胞衬里有关。理论上...     

血管内皮祖细胞在人工血管移植后内皮化中的作用机制

血管内皮祖细胞具有高度的分化增殖能力,可以定向分化为成熟内皮细胞,参与体内内皮损伤后的修复和血管再生。研究表明血管内皮祖细胞在人工血管移植后内皮化中也起重要作用,现就近年来的研究进展综述如下。     

~(99m)Tc标记血小板检测内皮化人工血管内皮细胞抗血小板粘附聚集功能的研究

内皮细胞衬里于人工血管使人工血管内皮化,从而使人工血管具有抗血小板粘附聚集的功能。为小口径人工血管的应用开辟了新的途径,国外已成功地应用于临床,国内亦已进行灵长类动物的研究并获得满意效果。目前主要采用多普勒超声及血管造影检查,间接反应内皮化人工血管抗血小板粘附聚集的功能。本实验首次用~(99m)Tc标记恒河猴血小板,对内皮化人工血管内皮细胞抗血小板粘附聚集功能进行了体外和恒河猴体内的研究。 首先,建立了同素~(99m)Tc标记恒河猴的血小板方法。采用10例雄性恒河猴静脉血,分离血小板后进行体外标记,以亚锡离子作游离~(99m)Tc的还原剂,分析了亚锡离子浓度和亚锡离子与体外血小板作用不同时间对血小板标记率的影响,鉴定丁标记血小板的放化纯度及其稳定性,比较了血小板标记前、后聚集功能的变化。证实在4.5mmol/L亚锡离子浓度、亚锡离子与血小板作用30分钟的条件下,血小板标记率最高,本方法所得标记血小板放化纯度高、性质稳定,血小板标记后血小板的聚集的功能未受损害。 其次,应用~(99m)Tc标记血小板进行内皮化人工血管内皮细胞抗血小板粘附聚集功能的体外研究。分三组人工血管,每组各6条,A组为无内皮细胞种植组,B组为内皮细胞种植后孵育2小时,C组为内皮细胞种植后孵育9天。在体外模拟循     

人造血管移植物自然内皮化的研究

一、内皮细胞功能和形态学特征在正常血管内膜除内皮细胞尚有内皮下层和内弹力膜构成.表面与血流接触的一层细胞为内皮细胞,以镶嵌体形式覆盖整个血管内面.内皮细胞形态多不固定.呈扁平、多角形或板状,其超微结构和一般细胞相同,但不发达,而有较多的吞饮小泡.血管内膜生物系统变化是一个复杂的调节,内皮细胞虽然结构简单,功能却相当复杂.除具有屏障功能外,能产生多种生物活性物质,如:前列环素2、组织纤溶酶原活化因子、纤溶酶原活化抑制因子、血栓调变蛋白和c蛋白等,其中前列环素2是一种短效、强力血管扩张剂,具有强烈的抗血小板聚集作用.内皮细胞的表面同血细胞一样带有负电荷,具有抗血小板聚集,防止血液凝固和血栓形成的作用.凝血因子Ⅶ是由内皮细胞合成和分泌的,     

内皮化小口径人工血管的研究

目的 探讨成人大隐静脉内皮细胞(HSVECs)种植到人工血管内表面的可行性.方法 酶消化法获取成人大隐静脉内皮细胞,在体外扩增培养13～15 d,将扩增培养的内皮细胞种植于纤维蛋白胶预衬的聚四氟乙烯(ePTFE)人工血管内表面,继续体外培养9～12 d.在不同的时间点,分别剪取部分内皮化的人工血管,行荧光显微镜和扫描电镜检查.结果 内皮细胞种植于人工血管后,扫描电镜下可见细胞在血管表面黏附、生长、增殖.平均孵育12 d后,人工血管腔面见一层均匀的基质,其表面有内皮细胞单层,内皮细胞排列紧密,呈梭形.结论 成人大隐静脉内皮细胞可以种植到人工血管,在体外增殖形成内皮细胞单层,达到内皮化的效果.     

基因工程内皮细胞种植人工血管的研究进展

自体和非自体的生物血管不能满足临床血管外科的需要。使用理化方法或单纯种植内皮细胞的方法处理人工血管因腔内血栓形成而效果小理想。为了增加人工血管的抗血栓活性，利用基因工程的方法对内皮细胞进行改造，可使其获得稳定表达抗凝血因子的能力。用这种基因工程改造的内皮细胞种植于人工血管，有可能获得较理想的效果。而最终要获得理想的血管移植物，尚有许多需要解决的问题。     

骨髓CD34+细胞人工血管内皮化实验研究

目的探讨骨髓CD34^ 细胞种植的人工血管内皮化和通畅性。方法取犬骨髓,经免疫磁珠分离出CD34^ 细胞,内皮细胞生长因子(vascular endothelial grow factor,VEGF)诱导并扩增;种植聚四氟乙烯(polytetra fluoro ethylene,PTFE)人工血管,再植入犬的下腔静脉和腹主动脉。结果骨髓分离的细胞经流式细胞仪鉴定为CD34^ 细胞,CD34^ 细胞经VEGF诱导培养后经免疫细胞化学和透射电镜检测证实为内皮细胞。内皮化人工血管植入动脉闭塞率0,狭窄率12．5％;人工血管植入静脉闭塞率12．5％,狭窄率25．0％。结论骨髓经免疫磁珠可分离出CD34^ 细胞,CD34^% 细胞经VEGF诱导可定向分化为内皮细胞。骨髓CD34^ 细胞经体外培养种植于PTFE人工血管,获得理想的内皮化和通畅率。     

小口径人工血管内皮化临床研究现状

冠心病、外周动脉闭塞性疾病、慢性肾功能衰竭建立血液透析通路以及小儿心血管疾病等，这些疾病大多需要小口径血管（直径〈6mm）行动脉移植手术。目前临床上已用的小口径血管移植物包括自体大隐静脉或乳内动脉、涤纶（Dacron）和膨体聚四氟乙烯（ePTFE）人工血管等。自体静脉或动脉移植后虽然能取得较满意的临床疗效，但是因来源有限和供区牺牲大而应用有所限制。在需要行动脉移植手术的患者中，30％以上缺乏适当的自体静脉或动脉移植物。常用的Dacron和ePTFE人工血管在高速血流、低阻力的大、中动脉重建中已取得满意的疗效，     

内皮细胞衬里人工血管静脉旁路移植10例

为进一步证实内皮细胞衬里人工血管的临床效果,报告临床应用１０例的长期随访。方法,本组１０例布加综合征病人,行腔房转流术６例,肠房转流术２例,肠颈转流术和肠腔转 流术各１例。应用人工血管内径１４ｍｍ,长８－３０ｃｍ,其中针织涤纶２根,编织涤纶７根,带外支持环ＰＴＦＥ１根。     

基因转染内皮细胞衬里人工血管的研究进展

目的：讨论使用外源性抗凝基因修饰内皮细胞后衬里人工血管，使人工血管局部抗凝活性提高以及对内皮细胞其他生物活性的影响等。方法：复习近几年的相关文献，作综述报道。结果：内皮细胞在转染纤溶酶原激活物(t-PA、u-PA、Urokinase)、血栓调节蛋白(TM)和水蛭素(hirudin)等基因后，均使局部血管的抗凝活性增高，但同时也导致内皮细胞粘附性、增殖功能下降。结论：外源性基因能使内皮细胞预衬的人工血管抗凝活性提高，但仍需进行深入研究。     

体外组织工程血管支架内皮化的实验研究

目的：研究兔血管内皮细胞种植于组织工程血管支架内腔面的生长状况。方法：（1）将聚羟基乙酸（Plyglycolic acid,PGA)纤维无纺网和胶原纤维相混合，设计构建组织工程血管支架材料。（2）采用酶消化法从兔主动脉中分离培养兔血管内皮细胞并传代，纯化，接种于组织工程血管支架的内腔面，体外培养，并行电镜等观察。结果：该支架具有一定弹性和韧性，内皮细胞在其内表面形成较完整内皮细胞层，生长状况良好。结论：胶原包埋处理的PGA支架可以作为组织工程人工血管研究的较理想支架材料。为组织工程方法构筑具有分层结构的组织工程血管打下实验基础。     

内皮细胞衬里人工血管抗血小板沉积的研究

使人工血管体外形成内皮衬里并评价其抗血小板沉积特性。方法 将培养扩增的在人大隐静脉内皮细胞铺植于贫血小板血浆和纤维连接素预衬的聚四氟乙烯人工血管，并体外培养９天，再用含＾１２５Ｉ标记血小板的全血以１００ｍｌ／ｍｉｎ的流速灌注６０分钟。人工血管内壁形态以扫描电镜观察，血小板沉积量以ｒ计数测定。     

体外扩增恒河猴自体内皮细胞人工血管移植研究（二）

目的：为自体内皮细胞移植的临床应用奠定理论基础。方法：将１５只恒河猴随机分为两组。实验组１０例，用衬里有自体静脉内皮细胞的人工血管置换髂总动脉；对照组５例，用未衬里内皮细胞塞外，其余８条人工血管术后四周均保持通畅，内膜下组织碍度为８０±１２μｍ；对照组５条人工血管全部阻塞。结论自体内皮移植可有效地南昌市人工血管的通畅率。     

^99m锝标记血小板检测内皮化人工血管内皮细胞抗血小板粘附聚集功能的研究

目的探讨内皮化人工血管内皮细胞抗血小板粘附聚集的作用。方法人工血管18条随机分为3组,Ⅰ组为无内皮细胞种植,Ⅱ组为内皮细胞种植后孵育2h,Ⅲ组为内皮细胞种植后孵育9d,将放射性同位素锝(     

人大隐静脉内皮细胞种植人工血管的实验研究

目的　探讨人自体静脉内皮细胞移植到人工血管上的可行性。方法　将人大隐静脉内皮细胞在体外扩增培养１３ ．０８ ±１ ．２４ 天, 将扩增培养的内皮细胞衬里用于纤维蛋白胶预衬的膨体聚四氟乙烯（ｅｘｐａｎｄｅｄ ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ ｐａｔｃｈ 〔ＧｏｒｅＴｅｘ〕Ｒ, ｅＰＴＦＥ） 人工血管继续培养９ 天。结果　所培养的细胞为二倍体细胞,纯度为９９ ％ 。原代及传代细胞培养上清液中６酮前列环素（６ｋｅｔｏＰＧＦ１α） 和Ｖｏｎ Ｗｉｌｌｅｂｒａｎｄ 因子（ｖ ＷＦ） 含量差异无显著性意义（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。细胞种植后第９ 天人工血管腔面见一层均匀的基质,其表面有一层连续的内皮细胞单层,内皮细胞排列紧密,呈梭形,形态饱满。结论　人自体大隐静脉内皮细胞可有效地移植到人工血管,为人自体细胞内皮化人工血管应用于临床奠定了理论基础。     

微血管顿抑与血管内皮细胞保护

心肌顿抑及微血管顿抑是心脏缺血再灌注后可逆性损伤的两种表现。微血管顿抑可影响顿抑心肌的功能恢复,并在某种程度上加重顿抑心肌的组织学损害,促使其向不可逆方面发展。氧自由基造成内皮细胞系统损害是微血管顿抑的核心内容。加强血管内皮细胞保护,促进心功能的恢复,是心脏外科手术心肌保护中不可忽视的方面。