分泌抗登革病毒单抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立

将纯化的登革３型病毒（ＤＥＮ－３）单克隆抗体３Ｄ３（ＡｂＩ）连结到载体分子ＫＬＨ上，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合。用ＥＬＩＳＡ夹心法检测阳性克隆，融合率达１００％，阳性率为５％，经２－３次克隆化，获得了６株分泌抗登革病毒单抗的独特型抗体（ＭｃＡｂ２）的杂交瘤细胞系。在进行阳性筛选及特异鉴定时，选择了以３－５μｇ／ｍｌ的最适Ａｂ１包被浓度，并用正常小鼠Ｉｇ及ＫＬＨ分     

分泌肾综合征出血热病毒单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的初步建立

本文在己制备了HFRSV多克隆抗独特型抗体的基础上，又制备了HFRSV的单克隆抗独特型抗体，为HFR马的研究开辟了新的途径。     

小鼠抗—HBs的单克隆抗独特型抗体杂交瘤细胞系的建立及鉴定

用纯化的小鼠单克隆抗-HBs(Ab1)免疫同系BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓细胞融合,获得两株(MA1、MA3)持续分泌抗-HBs的单克隆抗独特型抗体(抗-1d,Ab2)杂交瘤细胞系。对MA3做了较全面的鉴定。MA3的Ig类型为IgM,核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA竞争抑制和中和抑制试验表明,MA3所分泌的Ab2既能被不同来源的抗-HBs所中和,又能被HBsAg所竞争,且都呈现剂量依赖关系。将纯化的MA3 IgM免疫同系小鼠,诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab3)。因此认为MA3所分泌单克隆抗体(McAb),可模似HBsAg,具有类似HBsAg的免疫原性,是一种带有HBsAg表位内影像的抗-HBs的单克隆抗-1d。     

固定杂交瘤细胞间接免疫荧光法检测抗独特型抗体

<正> 在制备多克隆抗独特型抗体(简称抗Id抗体)过程中,检测抗Id抗体通用方法是用纯化独特型抗体(简称 Id 抗体)的 ELISA或RIA。由于分泌Id抗体的杂交瘤细胞表面表达有均一的Id抗体分子,Kennedy等人曾采用分泌Id抗体的新鲜杂交瘤细胞间接免疫荧光试管法检测抗Id抗体的活性及特异性,以节省纯化Id抗体的用量和提高初步检测的速度。我们在检测自制的多克隆抗Id抗体的过程中,对该法进行了改进,即用固定杂交瘤细胞间接免疫荧光玻片法检     

分泌肾综合征出血病热毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

将HFRS病人Ab_1免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合,制备了HFRSV的McAb_2。初期融合试验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3.2～7.4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明,5种McAb_2只与HFRS病人Ab_1结合,不与正常人Ig结合。McAb_2所识别的独特型是人Ab_1与部分小鼠抗HFRSV的McAb上的交叉反应独特型。本文还应用McAb_2作为探针,对抗HFRSV的单克隆抗体的独特型进行了分析。     

分泌肾综合征出血病热毒单克隆抗独特型抗体的杂交瘤细胞系的建立

将HFRS病人Ab1免疲BALB／c小鼠，取脾细胞与Sp2／0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞融合，制备了HFRSV的McAb2。初期融合试验中用ELISA间接法检测阳性克隆,阳性率为3．2～7．4％。其中5株杂交瘤经克隆化后阳性率达到100％。特异性鉴定表明，5种McAb2只与HFRS病人Ab1结合，不与正常人Ig结合。McAb2所识别的独特型是人Ab1与部分小鼠抗HFRSV的McAb上的交叉反应独特型。本文还应用McAb2作为探针，对抗HFRSV的单克隆抗体的独特型进行了分析.     

一次细胞融合制备分泌抗狂犬病毒抗杂交瘤及分泌抗独特型单…

根据独特型与抗独特型的免疫网络与免疫调节学说，利用狂犬病毒作为免疫原，设计了不同的动物免疫方案，免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠，免疫脾细胞与骨髓瘤细胞经一次融合，同时获得了分泌抗狂犬病毒单克扩一杂交瘤及分泌狂犬病毒抗独特型单克隆抗体杂交瘤，为抗独特型抗体的制备开辟了一条简捷经济的途径。     

带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体的建立和鉴定

本文采用鼠单克隆抗-HBs(Ab_1)作抗原免疫同系鼠,取免疫鼠的脾细胞与SP_2/0骨髓瘤细胞融合,经过反复筛选、克隆化获得两株(B_3,C_2)持续分泌单克隆的抗独特型抗体其(Ab_2)。对其中之一B_3作了深入鉴定。B_3的Ig类型为IgG,亚类为IgG_2a。核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA抑制试验对B_3进行鉴定,发现B_3一方面能与纯化HBsAg发生阳性的竞争性抑制,另一方面又能与不同来源的抗-HBs发生结合,出现阳性的中和抑制。无论竞争性抑制还是中和抑制,都呈现剂量依赖关系。将B_3Ig免疫同系鼠,经一次免疫后就能诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab_3)。以上结果表明:B_3株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗独特型抗体是带有HBsAg表位内影像的单克隆抗体。并对B_3Ig的可能应用意义进行了讨论。     

一次细胞融合制备分泌抗狂犬病毒单抗杂交瘤及分泌抗独特型单抗杂交瘤的实验研究

根据独特型与抗独特型的免疫网络与免疫调节学说，利用狂犬病毒作为免疫原，设计了不同的动物免疫方案，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，免疫脾细胞与骨髓瘤细胞经一次融合，同时获得了分泌抗狂犬病毒单克隆抗体杂交瘤及分泌狂犬病毒抗独特型单克隆抗体杂交瘤，为抗独特型抗体的制备开辟了一条简捷经济的途径。     

抗人重组SCF单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

本研究利用PEX31B作为载体,在大肠杆菌表达出重组人SCF融合蛋白。用该蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠。通过鼠-鼠杂交瘤技术,成功地获得4株分泌抗人重组SCF单克隆抗体(下称单抗)的杂交瘤细胞系。经检测,它们所分泌的抗体亚类均为IgG1,免疫印迹试验和抗体特异性鉴定证实,4株单抗均能特异性地识别可溶性SCF。抗SCF单抗杂交瘤细胞系的建立,为深入研究SCF的生物学特性、功能以及SCF产品的纯化,提供了有力的工具。     

分泌高效价抗催产素单抗杂交瘤细胞系的建立

为进一步研究催产素分子的生理功能及空间结构 ,制备识别其特有表位的单抗。用改良的碳二亚胺二步法交联催产素和牛甲状腺球蛋白 ,用常规方法制备针对催产素分子的单抗 ,测定了抗体的亚类、亚型和相对亲和力 ,并采用竞争ELISA法 ,检测各株细胞分泌的单抗和几种催产素的拟似物的交叉反应程度。结果制备出了 3株分泌高效价抗体的杂交瘤细胞 4G11、 2B11和 3F1,其亚类均为IgG1,亚型均为κ型 ,相对亲和力均较高。 3株中 4G11和 2B11可以特异性地和催产素反应 ,而 3F1与AVP、VAS及ASU有较强的交叉反应。催产素单抗可用于阻断催产素的生物学功能等研究     

甲病毒属系列单克隆抗体的研制及特性鉴定

本文报道应用电融合法和PEG法建立了11种甲病毒(SIN,SF,CHIK_1,CHIK_2,EEE,WEE,MAY,GET,RR,SAG,M-1)单克隆抗体杂交瘤细胞系。分别对各种McAb进行了多项鉴定。特异性试验结果表明,有亚组特异性的和种特异性的McAb。对于今后该类疾病的流行病学调查和临床诊断,以及有关毒株的鉴定具有一定实用价值。     

沙门氏菌单克隆抗体研究 Ⅰ.杂交瘤细胞系的建立

用沙门氏菌O,H,Vi抗原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,获得分泌抗沙门氏茵0-2,4,7,8,9,3,10,11和H-a,b,c,d,i及Vi抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系29株。所产生的抗体17株属IgM,7株为IgG3,3株为IgG1,1株为IgG_(2a),1株未测;轻链除3株为λ链外,其余为κ链。将杂交瘤细胞所诱生的腹水,组成一套(11种)沙门氏菌诊断用单克隆抗体试剂,经用沙门氏菌属和其它肠道菌属的代表菌株作鉴定,证明具有良好的特异性和敏感性、可供初步诊断伤寒,副伤寒和鼠伤寒用。与目前常规生产的家兔诊断血清相比,具有简化生产过程,节约家兔与培养基及省时省力等优点,值得在生产上和使用上推广。     

抗福氏痢疾杆菌单克隆抗体的制备及其特性研究

本文用福氏痢疾杆菌4a、4b煮沸致死菌体免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞在PEG介导下与Sp2/0细胞融合,经筛选、克隆化获得3株抗福氏痢疾杆菌McAb的杂交瘤细胞系。经连续传代6个月、液氮冷存6个月后,复苏仍能稳定分泌高效价的McAb。经鉴定,3株代号为401、420、421的McAb的Ig类型为IgG2b、IgG3和IgG3,轻链为λ、κ、κ;染色体数目为101～105条。交叉试验表明,3株McAb与志贺氏、宋内氏、鲍氏菌及常见肠道菌如大肠杆菌,变形杆菌、枯草杆菌、伤寒杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、克雷伯氏菌、小肠结肠耶氏菌等及革兰氏阳性杆菌等均不发生交叉反应。McAb的表位分析表明,McAb真正识别的表位在福氏菌脂多糖的特异性多糖即O-侧链上,从而进一步证实了McAb的特异性。     

地高辛单克隆抗体的研究 Ⅰ、分泌地高辛特异性单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及抗体特性分析

地高辛(Digoxin)是目前应用最广泛韵强心甙类药物,在心血管疾病临床治疗中占有十分重要的地位。强心甙治疗的安全范围较小,一般治疗量已接近中毒量的60%,并且有较大的个体差异,使得临床应用时中     

口腔颌面部肿瘤单克隆抗体研究的初步报告

作者用人牙龈癌细胞系Ca9-22免疫的BALB/c小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,制备出2株单克隆抗体(McAbs)C-D11和C-E9。2株McAbs的类型均为IgG2b型。杂交瘤培养上清液和腹水的效价分别为1:128～256和1:10~4～10~6。C-D11与13种培养的瘤细胞中的7种反应;C-E9与其中的10种瘤细胞反应;但2株McAbs与13种正常细胞几乎不反应。C-D11和C-E9相应抗原能耐受蛋白水解酶和一些有机试剂的处理,但不耐受过碘酸的氧化作用。     

4种抗支原体单克隆抗体免疫学特性的研究

为了有效地控制细胞质量、我们从1987年开始、相继建立了抗口腔支原体(M.orale),精氨酸支原体(M.arginini),猪鼻支原体(M.hyorhinis).和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)的杂交瘤细胞系共20株。并用IFA法、BA法或APAAP法对单克隆抗体进行了检测和鉴定。单克隆抗体(McAb)亚类鉴定结果:8株为IgG1,2株为IgG2b,其余10株为IgM。抗体效价测定大多数在4000～8 000之间。利用支原体纯培养的菌落进行了IFA染色试验,封闭试验,生长抑制试验和免疫电镜检查,均证实了它们的特异性,并获得2株对同属支原体有抗原交叉的McAb(3D1和3A11)。利用上述McAb检测实验室常用细胞的支原体污染,较常规法和DNA荧光染色法简便,快速,特异性较高。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。     

用单克隆抗体对我国登革2型04株病毒蛋白及其抗原表位的分析

从众多株抗登革2型单克隆抗体中挑选出登革2型病毒型特异、登革病毒亚群特异,黄病毒科特异3种代表类型的6株单抗,这6株单抗均无补结活性。放射免疫沉淀实验结果表明,这6株单抗均识别登革2型04株病毒的42K非结构性多肽。固相放射免疫竞争试验结果表明,3个型特异及1个亚群特异的抗原表位相互邻近,同在一个独立区内。这些抗原表位均不具有中和及血凝活性。而2个具有中和及血凝活性的黄病毒科特异性抗原表位,则位于另一个独立区内。上述2独立区拓扑距离较远。