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1.
将纯化的登革3型病毒(DEN-3)单克隆抗体3D3(AbI)连结到载体分子KLH上,免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞融合。用ELISA夹心法检测阳性克隆,融合率达100%,阳性率为5%,经2-3次克隆化,获得了6株分泌抗登革病毒单抗的独特型抗体(McAb2)的杂交瘤细胞系。在进行阳性筛选及特异鉴定时,选择了以3-5μg/ml的最适Ab1包被浓度,并用正常小鼠Ig及KLH分 相似文献
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本研究用纯化E.coliRecA蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以粗制E.coliRecA包被酶标反应板,间接ELISA方法筛选阳性孔,经有限稀释法4次克隆化,建立了两株分泌抗RecA蛋白McAb的细胞系2D6和3B1。免疫印迹表明McAb只对细菌的RecA有反应,不与细菌其它成分发生反应。间接ELISA进一步表明,McAb2D6、3D1只对细菌RecA类蛋白有反应,不与小鼠肝、心、肺、脾等和BHK细胞的内外蛋白反应。 相似文献
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本研究用纯化E.coliRecA蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,以粗制E.coliRecA包被酶标反应板,间接ELISA方法筛选阳性孔,经有限稀释法4次克隆化,建立了两株分泌抗RecA蛋白McAb的细胞系2D6和3B1。免疫印迹表明McAb只以地细菌的RecA有反应,不与细菌其它成分发生反应。间接ELISA进一步表明,McAb2D6,3D1只对细菌RecA类蛋 相似文献
4.
鼻咽癌抗独特型抗体诱导的体液和细胞免疫应答 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 探讨抗独特抗体2H4和5D3模拟抗原诱导免疫应答的能力。方法 用Ab2免疫Balb/c小鼠获得抗血清,以ELISA检测其Ab3,Western Blot分析其识别抗原的分子质量。用迟发型超敏反应(DTH)和淋巴细胞增殖试验,检测Ab2诱发细胞免疫反应的能力。结果 2H4,5D3免疫同系动物产生的含有抗抗蚀特型抗体(Ab3)的抗血清,可特异性地与靶细胞结合。FC2(Abl)和经2H4免疫的Ab 相似文献
5.
用淋球菌全菌体免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,以纯化PIA做ELISA间接法筛选,获得5株稳定分泌抗PIA的McAb的杂交瘤细胞株。5株McAb中3株为IgM类(2H11,4H8,4E10),另2株分别为IgG1(1C2)和IgG2b(5A5)亚类。2H11和1C2为高亲和力抗体,1C2与5A5识别的抗原表位相同。Westernblotting试验表明,5株McAb均能从复杂的淋球菌菌体崩解物中特异地识别分子量为35KDa的PIA抗原,与淋球菌PIB无交叉反应。 相似文献
6.
以亲和层析技术纯化的肾综合征出血热病毒(HFRSV)结构蛋白(55000,67000)为特异性抗原,体外免疫正常人外周血淋巴细胞(PBL),然后将体外免疫的淋巴细胞与人-鼠种间杂交瘤细胞(K6H6/B5)融合,经ELISA间接法筛选出2株(2D5,1B7)分泌抗-HFRSV人单克隆抗体(H-McAb)杂交瘤细胞株,4次克隆化后,100%阳性。对2D5株初步鉴定表明,其抗体类型为IgG1;培养上清中抗体浓度为20~30μg/ml;特异性免疫荧光反应证明2D5株H-McAb是HFRSV特异性;中和效价为1∶160;体外连续传代6个月仍稳定分泌抗体。 相似文献
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应用常规方法建立了3株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素(SEC1)单克隆抗体(McAb)的小鼠杂交瘤细胞系B3、C4和G8。其中B3和C4均为IgG1(k),G8为IgG2a(k)。B3和G8与SEA、SEB及SED均无交叉反应;C4虽与SEA和SED无交叉反应,但与SEB有交叉反应。间接ELISA测定小鼠腹水效价为10-5~10-8。应用识别不同表位的McAb建立了双McAb夹心ELISA法检测SEC1,敏感性可达1ng/ml。 相似文献
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分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用常规方法建立了3株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素(SEC1)单克隆抗体(McAb)的小鼠杂交瘤细胞系B3、C4和G8。其中B3和C4均为IgG1(k),G8为IgG2a(k)。B3和G8与SEA,SEB及SED均无交叉反应;C4虽与SEA和SED无交叉反应,但与SEB有交叉反应。间接ELISA测定小鼠腹水效价为10^-5~10^-8。应用识别不同表位的McAb建立了双McAb夹心ELIS 相似文献
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应用小鼠杂交瘤技术获得5株分泌抗D型葡萄球菌肠毒素(SED)McAb的杂交瘤细胞(DC3、DC4、DB11、4D3和4D5)。其中4D3为IgM(λ),其余为IgG1(k)。这组McAb除DC3外,其它4株McAb识别的抗原构象表位相同,其相对亲和力依次为4D5>DC3>DC4>4D3>DBll。利用抗SED多克隆抗体与HRP标记的DC3和4D3(针对不同表位)混合McAb建立了夹心ELISA法,并以该法检测了自临床标本中分离的80林金葡萄菌所产生的SED,其产毒率为41.3%。 相似文献
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抗D型葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的研制及其初步应用 总被引:1,自引:0,他引:1
应用小鼠杂交瘤技术获得了5株分泌抗D型葡萄球菌肠毒素(SED)McAb的杂交瘤细胞(DC3、DC4、DB11、4D3和4D5)。其中4D3为IgM(λ),其余为IgG1(k)。这组McAb除DC3外,其它4株McAb识别的抗原构象表位相同,其相亲和力依次为4D5〉DC3〉DC4〉4D3〉DB11。利用抗SED多克隆抗体HRP标记的DC3和4D3(针对不同表位)混合McAb建立了夹心ELISA法,并 相似文献
11.
治疗性抗体的改造 总被引:6,自引:0,他引:6
沈倍奋 《医学分子生物学杂志》2006,3(4):245-249
市场上已有18个被FDA批准的单克隆抗体,它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、病毒感染等人类疾病。治疗性抗体代表了生物制药业发展最快的领域之一。随着技术的发展,各种形式的工程抗体被构建来改善它们的特性和效能,包括:鼠抗体人源化,提高生物学活性,如亲和力成熟,改进效应功能,改善药代动力学。文章评述了这一领域的最新进展,同时也讨论了工程抗体的免疫原性和亲和力。 相似文献
12.
Nanobodies for the first time were identified in the sera of Camelidae. Single-domain antibodies or nanobodies are a class of next-generation antibodies that have specific features: small size (in nanoscale), high penetration in various tissues, high stability in hard situations and ease production process in microbial systems. In fact single-domain antibodies are the smallest fragment of the antibody with binding ability. Unique characteristics and features of nanobodies make them an appropriate candidate for further evaluation as the development of novel antibody-based therapeutics. In this regard single-domain antibodies are in the interest of many researchers as well as biopharmaceutical companies for diagnostic and therapeutic applications. Nowadays several single domain antibodies have been developed and evaluated in different clinical trials. Because of many advantages of single-domain antibodies over other formats of antibodies, they could be good replacement for other formats of antibodies in near future. Here, we review the biology, engineering platforms and application of nanobodies. 相似文献
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HIROSHI OKADA SADAO KAMIDONO GEORGE R. OWENS R. GEORGE NAGAMATSU JOSEPH C. ADDONIZIO 《American journal of reproductive immunology (New York, N.Y. : 1989)》1993,29(4):241-246
PROBLEM: ELISA is an ideal assay method for a large-scale screening of anti-sperm antibodies among a large number of infertile males. However, conventional ELISA with whole spermatozoa needs time-consuming steps of centrifugation. METHOD: A solid-phase assay used for detecting anti-sperm antibodies was established. This assay is suitable not only for detecting circulating anti-sperm antibodies of IgG, IgM, and IgA subclass simultaneously but also for screening hybridomas secreting anti-sperm monoclonal antibodies (mAbs). The microtiter plates, on which solubilized sperm antigens are fixed, can be stored at ? 80°C for up to six months without losing reactivity with anti-sperm antibodies. RESULTS: Using this assay, 53 sera (13 were proven positive and 40 were proven negative for sperm agglutination antibody) were tested. Although the false-negative rate was 0%, the false-positive rate was 32%. One thousand one hundred sixty-five supernatants from hybridomas constructed with splenocytes of mice who were hyperimmunized with human sperm and nonsecreting myeloma cells were tested by this solid-phase assay and two anti-sperm mAb secreting clones were selected and established. CONCLUSIONS: It is recommended that for research work this assay could be used for the first screening of the hybridoma secreting anti-sperm mAb, and for clinical use this assay might be suitable for the first screening of sera of infertile patients. However, conventional bioassays should follow to confirm the biological meaning of the positivity. 相似文献
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目的 分析自贡市自流井区从业人员健康体检ALT、HAV-IgM抗体和HEV-IgM抗体检测结果,为卫生监督管理及疾病预防控制等工作提供数据依据。方法 对2013~2017年自贡市自流井区从业人员的预防性健康检查结果进行分析。结果 共检测26900人,检测出HAV-IgM抗体阳性1人,阳性率0.04‰;HEV-IgM抗体阳性7人,阳性率0.81‰;ALT异常人数485人,异常率1.80%。男性ALT异常率为3.37%,高于女性的1.05%,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄段ALT检测异常率比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中以21~30岁年龄段ALT异常率最高,占2.25%;≤20岁年龄段ALT异常率最低,占0.56%。 结论 自贡市自流井区从业人员HAV-IgM抗体和HEV-IgM抗体阳性率较低,但也应重视和加强从业人员定期健康检查,防控相关传染病的发生。 相似文献
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抗MPO抗体的ELISA检测和应用 总被引:2,自引:0,他引:2
本文应用Matheson方法从人白细胞中提取髓过氧化物酶MPO,建立ELISA法检测63份血清标本中抗MPO抗体,同时与间接免疫荧光法(IIF)作比较,结果是:19例结节性多动脉炎(PAN)患者中6例抗MPO抗体阳性(32%),较IIF法阳性率提高(19例中1例),而22例正常人及22例其他肾脏病患者血清均为阴性。提示ELISA法既可从分子水平鉴定系统性血管炎致病的特异性抗体,又是系统性血管炎敏感的诊断方法。 相似文献
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目的 探讨线粒体抗体(AMA)阴性和阳性的PBC患者抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)阳性率及其相伴抗核抗体(ANA)核型,抗核抗体谱的不同免疫球蛋白抗体分布频率.方法 收集北京地坛医院2014年12月至2016年2月就诊的122例AMA阳性(AMA+)和46例AMA阴性(AMA-)PBC患者及224例非PBC患者(48例自身免疫性肝炎(AIH)、83例慢性乙型肝炎(CHB)、80例慢性丙型肝炎、13例酒精性肝病),采用间接免疫荧光法检测抗核抗体,免疫印迹法检测抗核抗体谱,免疫斑点法检测AMA-M2.结果 122例AMA(+)PBC患者中AMA-M2阳性率96.7%;46例AMA(-) PBC患者中AMA-M2阳性率17.4%.AMA阳性PBC患者的核膜型,核点型,着丝点型,核颗粒型阳性率分别是20.5%,7.4%,21.3%,40.2%;高于非PBC组的1.8%,0.8%,2.2%,13.8%(P均<0.01);AMA阴性PBC患者的核膜型,核点型,着丝点型,核颗粒型阳性率分别是17.4%,10.8%,19.5%,45.6%;高于非PBC组的1.8%,0.8%,2.2%,13.8%(P均<0.01).结论 AMA与AMA-M2及ANA部分核型的检测有助于PBC特别是AMA阴性PBC患者的诊断. 相似文献
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人群中腺病毒中和抗体调查 总被引:2,自引:0,他引:2
对北京、南京、成都、海口四市1253份不同年龄组人群中4,7型腺病毒中和抗体进行了调查。结果,人群中4,7型腺病毒总阳性率分别为31.0,22.2%。不同城市人群腺病毒抗体阳性率不一,北京地区高于其他地区。7型腺病毒抗体阳性率有由南往北逐渐增高的现象,表明北方7型腺病毒感染多于南方。 相似文献
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目的通过对ANA核型分布及核型与特异性抗体相关性分析,为临床对ANA和ANA谱检测结果判读提供参考。方法用间接免疫荧光法检测ANA,免疫印迹法检测ANA谱,对449例ANA或ANA谱阳性的结果进行核型和特异性抗体分析。结果 ANA核型分布以核颗粒型为主,占78.2%;核型与特异性抗体有一定的相关性,但同一种自身抗体可出现不同的荧光核型。结论 ANA和ANA谱同时检测能提高AID的检出率,有助于准确的判断特异性抗体,对AID的诊断、病情监测、预后判断有十分重要的作用。 相似文献
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用单克隆抗-(抗HBc)抗体(抗-Id)免疫BALB/c鼠,诱生出具有与抗-HBc相同反应性的抗-抗Id抗体(Ab_3)。这种抗体在ELISA试验中可与HBc-Ag特异性反应,并能抑制单克隆抗-HBc与HBcAg的结合。表明我们建立的抗-H-Bc的抗Id能模拟HBcAg刺激小鼠产生免疫反应。 相似文献