采用组织芯片技术研究宫颈癌中HPV与细胞周期调控因子p27表达的关系

目的研究宫颈癌组织中HPV感染与细胞周期调控因子p27表达的关系及意义。方法采用组织芯片技术制作60例宫颈癌组织芯片，同时用S—P免疫组织化学和原位分子杂交方法检测宫颈癌组织芯片中HPV、p27、p27mRNA的表达。结果60例宫颈癌组织中HPV、p27、p27mRNA的阳性率分别为48．3％、38．3％、51．7％。淋巴结转移阳性宫颈癌中p27和p27mRNA阳性率明显低于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．01）。淋巴结转移阳性宫颈癌中HPV阳性率明显高于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．05）。宫颈癌和CINⅢ级宫颈上皮内瘤变组织中HPV阳性率明显高于CINⅠ级和CINⅡ级（P〈0．05）。而p27和p27mRNA阳性率明显低于CINⅠ级和CINⅡ级宫颈上皮内瘤变组织（P〈0．05）。宫颈癌中HPV与p27及p27mR—NA表达呈明显负相关（r=-0．574，P〈0．05；r=-0．612，P〈0．01）。结论HPV感染和细胞周期调控因子p27低表达与宫颈癌密切相关。HPV感染与p27低表达有关。HPV和p27可作为评估宫颈癌预后的参考指标。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、方便、经济、准确的特点。     

宫颈癌及上皮内瘤变中p16表达与预后关系的研究

目的研究宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中p16基因表达的，临床意义。方法收集我院1996—2006年间妇科门诊活检及住院手术标本共164例，其中宫颈鳞状细胞癌86例，有淋巴结转移者22例，无淋巴结转移者28例，宫颈上皮内瘤变（CIN）78例，复习常规病理HE切片，并采用S-P免疫组化法对86例宫颈鳞癌和78例宫颈上皮内瘤变（CIN）蜡块标苓进行标记，观察P16基因的表达情况并进行对照分析。结果P16基因在宫颈鳞癌及CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中的阳性表达率分别为3g．3％（33／86）、70．0％（14／20）、484％（16／33）、44．0％（11／25），明显低于正常宫颈组织93.3％（28／30）（P〈0．05）；有淋巴结转移者和无淋巴结转移者P16基因阳性表达率分别为27．2％（6／22）、535％（15／28）（P〈005）。结论P16基因表达与宫颈鳞癌、CIN病变程度及淋巴结转移有关。     

宫颈组织中脆性组氨酸三联体基因和凋亡抑制蛋白的表达及临床意义

目的研究脆性组氨酸三联体基因（FHIT）蛋白和凋亡抑制蛋白（survivin）在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达情况,探讨两者在宫颈癌早期诊断和发生发展中的临床意义。方法采用免疫组织化学sP法检测20例正常宫颈组织;20例宫颈CINI级、25例CINⅡ／Ⅲ级;60例宫颈癌组织中的FHIT蛋白和凋亡抑制蛋白的表达。结果FHIT蛋白在正常宫颈组、宫颈CIN组、CINⅠ组、CINⅡ／Ⅲ组和宫颈癌组中的阴性率分别为0％（0／20）、24．4％（11／45）、10．0％（2／20）、36．0％（9／25）和66．7％（40／60）,各组间阴性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;凋亡抑制蛋白在正常宫颈组织、宫颈CIN组、宫颈癌组中的阳性率分别是20．0％（4／20）、31．1％（14／45）和95．0％（57／60）,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在宫颈CIN和宫颈癌中,FHIT和凋亡抑制蛋白的表达有一定的相关性（P〈0．05）。结论检测宫颈CIN中的FHIT蛋白表达情况,可用作高级别的CIN筛查或预测。FHIT和凋亡抑制蛋白对于宫颈癌前期病变和宫颈癌的筛查和早期诊断具有一定的临床参考价值。     

FHIT和PCNA在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达与临床意义

目的研究脆性组氨酸三联体基因（FHIT）蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的表达情况,探讨两者在宫颈癌早期诊断和发生发展中的临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测20例正常宫颈组织;20例宫颈CINI级、25例CINⅡ／Ⅲ级;60例宫颈癌组织中的FHIT蛋白和PCNA的表达。结果FHIT蛋白在正常宫颈组、宫颈CIN组、CINI组、CINⅡ／Ⅲ组和宫颈癌组中的阴性率分别为0％（0／20）、24．4％（11／45）、10．0％（2／20）、36．0％（9／25）和66．7％（40／60）,各组间阴性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;PCNA在正常宫颈组织、宫颈CIN组、宫颈癌组中的阳性率分别是65．0％（13／20）、93．3％（42／45）和98．3％（59／60）,各组间阳性率比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在宫颈CIN和宫颈癌中,FHIT和PCNA的表达有一定的相关性（P〈0．05）。结论检测宫颈CIN中的FHIT蛋白表达情况,可用作高级别的CIN筛查或预测。FHIT和PCNA对于宫颈癌前期病变和宫颈癌的筛查和早期诊断具有一定的临床参考价值。     

宫颈鳞癌组织圆柱瘤基因mRNA表达及其意义

目的探讨宫颈鳞癌组织中圆柱瘤基因（CYLD）mRNA的表达及其临床意义。方法采用原位杂交法检测45例宫颈鳞癌、64例官颈上皮内瘤变（cIN,包括CINI26例、CIN Ⅱ-Ⅲ38例）及20例正常宫颈组织中CYLD mRNA的表达,分析其阳性表达率与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。结果CYLDmRNA在宫颈鳞癌、CINⅡ—Ⅲ、CINI及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为42．2％、52．6％、73．1％、80．0％,宫颈鳞癌、CINⅡ-Ⅲ组织中CYLDmRNA的阳性表达率明显低于正常宫颈组织,差异均有统计学意义（x2=7．85、4．42,P〈0．05）。宫颈鳞癌CYLDmRNA表达与临床分期及淋巴结转移密切相关（x^2=4．64、5．59,P〈0．05）,但与组织学分级、肿瘤大小、病人年龄无关。结论CYLDmRNA低表达可能与宫颈癌的发生、发展及转移有关。     

Ki67在子宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的研究Ki67在不同级别的子宫颈上皮内瘤变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测Ki67在正常宫颈组织、CINⅠ级、CINⅡ级以及CINⅢ级的石蜡标本组织中的表达。结果47例组织标本（正常宫颈组织10例、CINⅠ级11例、CINⅡ级13例以及CINⅢ级13例）中，Ki67阳性表达率分别为10％，36．4％，84．6％，92、3％，各组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Ki67可反映出宫颈上皮细胞在癌变的过程中细胞增殖活性的改变，可作为早期诊断宫颈癌的标记物，以提高宫颈癌的早期诊断率。     

血管内皮生长因子C在宫颈癌组织表达及其意义

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF—C）在宫颈癌发生发展中的作用。方法选取宫颈鳞癌组织68例、宫颈上皮内瘤样变及原位癌（CIN）组织25例、正常宫颈组织12例,采用SP免疫组化染色方法检测VEGF—C的表达。结果宫颈癌组织VEGF-C表达阳性率明显高于正常宫颈组织及CIN组织,差异有显著性（x^2=4．10、4．53,P〈0．05）。有淋巴结转移宫颈癌组织的VEGF-C表达阳性率明显高于无淋巴结转移组织（x^2=6．11,P〈0．05）。VEGF-C表达与宫颈癌的病理分级有关,低分化宫颈癌组织中VEGF—C表达阳性率高于中高分化癌组织,差异有显著性（x^2=6．01,P〈0．05）。结论VEGF-C表达与宫颈癌的发生发展相关,对宫颈癌的分化及淋巴结转移可能起促进作用。     

HPV16／18、survivin与宫颈癌进展关系的相关性及临床意义

【目的】探讨HPV16／18和survivin在宫颈癌进展中的相关性及临床意义。【方法】选择高危宫颈癌患者108例做常规宫颈脱落细胞和分泌物PCR-HPV-DNA检查,并在阴道镜下行宫颈多点活检做病检和免疫组化,比较不同分级HPV感染阳性率和survivin蛋白表达阳性率,分析HPV-DNA基因表达与sur-vivin蛋白表达的相关性。【结果】宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ级（CINⅠ）、CINⅡ、CINⅢ级和宫颈癌患者的宫颈HPV16／18感染阳性率分别为42．42％、61．90％、68．42％和82．86％,显著高于正常体检者的15．00％,其差异有统计学意义（P＜0．05）;CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级和宫颈癌患者的宫颈survivin蛋白表达阳性率分别为81．82％、90．48％、100％和100％,显著高于正常体检者阳性率的10．0。％,其差异均有统计学意义（P〈0．05）;CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级和宫颈癌患者的HPVl6／18-DNA基因表达与survivin蛋白表达存在正相关（P〈0．05）。【结论】HPVl6／18和survivin与宫颈癌进展关系密切,且均随CIN分级和宫颈癌级别的升高而表达增加,两者联合检测有利于提高宫颈癌的诊断率。     

Ang2在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Ang2在正常宫颈上皮、子宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化S-P法,从蛋白水平检测Ang2在20例正常宫颈组织、32例宫颈上皮内瘤变（CINⅠ级12例,CINⅡ—Ⅲ级18例）、52例宫颈癌组织中的表达。结果Ang2在子宫颈癌中表达明显高于在子宫颈上皮内瘤变和正常宫颈上皮中的表达,三者差异显著;Ang2在子宫颈上皮内瘤变与正常宫颈上皮中表达相比,差异不显著;Ang2表达水平均与子宫颈癌临床分期、有无淋巴结转移相关,而与患者年龄、组织学类型、分化程度无关。结论Ang2参与宫颈癌血管生成,影响癌瘤的发生与发展;Ang2的异常表达可能对宫颈癌的浸润和转移有促进作用,可以作为宫颈癌的预后判定因子。     

Survivin和p16INK4a在宫颈癌及其癌前病变中的表达及相关性

【目的】探讨Survivin和p16INK4a在宫颈癌（CC）及其癌前病变中的表达及二者的相关性。【方法】采用免疫组化SP方法检测Survivin和p16INK4a在50例宫颈上皮内瘤变（CIN）50例CC和10例正常宫颈组织标本中的表达。【结果]Survivin在正常宫颈、宫颈CIN和UCC中的总阳性率分别为0％、50％和76％（X2=21.651,P〈0．05）,其中,宫颈CIN和CC标本的阳性率均高于正常宫颈标本（X2=8．571,X2=20．727,P〈0．0125）,CC组的Survivin阳性率亦高于宫颈CIN（X2=7．250,P〈0．0125）。p16INK4a“在正常宫颈、宫颈CIN和CC中的总阳性率分别为0％、62．0％和84．0％（X2=27．123,P〈0．05）,其中,宫颈CIN和CC标本的阳性率均高于正常宫颈标本（x2=12．828,x2=28．000,P〈0．0125）,CC组的p16INK4a“阳性率亦高于宫颈CIN,但差异无显著性（x2=6．139,P〉0．0125）。p16INK4a及Survivin在CINI、CINII中的表达均呈负相关,但CC中表达呈正相关（P〈0．01）。p16INK4a和Survivin表达的阳性率与CC病理学分级、临床分期及淋巴结转移相关（P〈0．05）。【结论]Survivin和p16INK4a阳性表达与CC及其癌前病变密切相关,联合检测宫颈病变中Survivin和p16INK4a的表达有助于CC的早期检出和预后预测。     

荧光原位杂交检测细胞中hTERC基因扩增在宫颈癌早期诊断中的意义

目的检测hTERC基因在子宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的拷贝数扩增情况,探讨其作为宫颈癌早期诊断标志物的可能性。方法采集在本院就诊的95例宫颈脱落细胞,经病理诊断确诊,其中正常10例,炎症／CINⅠ32例、CINⅡ20例、CINⅢ18例,宫颈癌15例。以生理盐水制片和TCT低渗法制片,应用荧光标记探针GLPTERC／CSP3米,用荧光原位杂交（FISH）方法进行hTERC基因拷贝数的检测。3号染色体着丝粒为对照,1株宫颈癌细胞和正常骨髓淋巴细胞为阳性对照,正常宫颈细胞为阴性对照。结果95例临床标本中,正常宫颈细胞中表达率为1．012％（阈值）;宫颈癌组的阳性率为93．3％（14／15）、CIN总阳性率为65．79％（25／38）,与正常和炎症／CINⅠ组3．13％（1／32）差异有统计学意义（P〈0．05）;CINⅡ组的阳性表达率为60％（12／20）,CINⅢ组的阳性率为72．2％（13／18）,与正常和炎症／CINI组差异有统计学意义（P〈0．05）;CINHI组与宫颈癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;hTERC基因在宫颈癌细胞株hela和正常骨髓淋巴细胞中基因扩增呈阳性;hTERC的阳性表达率与宫颈细胞癌前病变的严重程度相关。结论hTERC基因参与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生发展,作为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标志物,hTERC基因的检测可作为提高宫颈癌早期诊断率的重要手段和癌前病变治疗的重要依据。     

高危型HPV负荷量和端粒酶活性表达与宫颈病变意义

目的了解宫颈癌及癌前病变中高危型人乳头瘤病毒（HPV）负荷量和端粒酶活性表达的作用及临床意义。方法随机选取宫颈病变病人130例,其中宫颈上皮内瘤变（CIN）80例,宫颈癌20例,慢性宫颈炎30例（对照组）。采用第二代杂交捕获技术（HCⅡ）检测病人宫颈脱落细胞HPvDNA含量,阴道镜下定位活检,并用免疫组织化学EnVision二步法检测宫颈组织标本中端粒酶活性的表达。结果随着宫颈病变程度的加重,高危型HPV的表达阳性率和病毒负荷量均增高,宫颈癌组和CINⅢ组高危型HPV表达阳性率明显高于对照组、CINⅠ及CINⅡ组（x^2=7．414～29．501,P〈0.01）;CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组高危型HPV的病毒负荷量均高于CINI组,差异均有显著性（x^2=2045．871,P％0．05）。宫颈癌组端粒酶活性表达阳性率高于CINⅢ组,CINⅢ组高于CINⅡ组,CINⅡ组高于cINⅠ组,差异均有显著性（x^2=4．022～4．329,P〈0．05）。对照组、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组的高危型HPV感染病人中端粒酶活性表达的阳性率分别为0（0／5）、25．00％（2／8）、37．50％（6／16）、72．22％（13／18）、100．00％（19／19）。结论高危型HPV负荷量和端粒酶活性均与宫颈癌前病变及宫颈癌的发生发展密切相关,两者联合检测有望成为宫颈癌早期筛查、处理及预后判断的辅助指标。     

人乳头状瘤病毒在宫颈癌及癌前病变诊断中的意义

目的检测人乳头状瘤病毒HPv在宫颈癌（CO）和各级宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达情况,探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性。方法对我院2008年10月到2010年10月经病理确诊的19例宫颈癌、55例CIN（包括CINI级20例、CINⅡ级16例和CINHI级19例）和30例宫颈炎患者的宫颈脱落细胞,采用基因芯片技术对PCR扩增产物进行HPv检测,观察不同病情宫颈组织中HPV的感染情况及型别分布状况。结果HPV在宫颈炎、CINI级、CINⅡ级、CINIII级和宫颈癌患者组织中的检出率分别为43．3％、50％、68．8％、84．2％和94．7％。CINII／III级及宫颈癌组患者HPV检出率明显高于宫颈炎组和CINI组。检出型别主要是HPV16型,在宫颈炎症组、CINI级、CINII级、CINⅢ级和宫颈癌组宫颈刷脱细胞中HPV16型检出的阳性率分别为6．67％、15％、31．3％、42．1％、和68．42％。同时随着病情的加重,其阳性率也逐渐升高,其中在宫颈癌组中最高,与宫颈炎症组、CINI组及CINⅡ组比较,差异有显著性（P〈0．05）,与CINⅢ组比较,差别无显著性（P〉0．05）。结论HPV感染是宫颈癌前病变的主要致病因素,其中强Pv16型感染与其密切相关,随着病变程度的加重,HPV16栓出率升高。提示HPV16为宫颈癌的高危因素。     

宫颈上皮内瘤变进展过程中p16^INK4A和C称赞claudin-1的表达意义

目的：探讨p16^INK4A和Claudin-1在宫颈上皮内瘤变（CIN）进展过程中的作用。方法：应用免疫组化二步法，检测正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中p16^INK4A和Claudin-1蛋白的表达。结果：p16^INK4A和Claudin-1蛋白阳性表达率及表达水平在各组间差异有统计学意义（P〈0．05），其表达水平及阳性率随疾病南低度鳞状上皮内病变（LSIL）向高度鳞状上皮内病变（HSIL）和浸润性鳞状细胞癌（ISCC）进展同步增强。P16^INK4A与Claudin-1蛋白表达间无相关性（P〉0.05）。结论：p16^INK4A及Claudin-1与宫颈鳞状上皮的恶性转化相关；联合检测宫颈病变中p16^INK4A和Claudin-1的表达,有助于早期诊断CIN和宫颈癌。     

薄层液基细胞学试验筛查宫颈癌前病变价值探讨

目的通过分析门诊和普通体检女性人群薄层液基细胞学试验（TCT）检测结果的差异，探讨宫颈癌防癌普查的必要性。方法利用TCT，对妇科子宫颈管刷取的细胞标本进行制片、固定、染色及显微镜检查；根据《子宫颈细胞学Bethesda报告系统》（TBs）判断标准做出诊断。结果17556例门诊标本中，发现鳞状细胞癌44例（0．25％），腺癌7例（0．04％），宫颈上皮内瘤变Ⅰ级（CIN—Ⅰ）206例（1．17％），宫颈上皮内瘤变Ⅱ级（CIN-Ⅱ）81例（o．46％），宫颈上皮内瘤变Ⅲ级（CIN-Ⅲ）30例（0．17％）。3123例体检人群中，CIN—Ⅰ15例（0．48％），CIN-Ⅱ4例（0．13％），未检出CIN-Ⅲ及以上病变。结论TCT和TBS能全面、准确地反映宫颈病变情况，对于做过筛查的人群，其阳性率会降低，且病变程度会得到控制。     

宫颈上皮内瘤变组织人乳头瘤病毒感染与凋亡抑制基因表达的相关性研究

目的 探讨宫颈癌发生、发展过程中人乳头瘤病毒（HPV）感染与凋亡抑制基因Bcl-2表达的关系。方法 采用免疫组化法检测正常宫颈、慢性宫颈炎及宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ级（CINⅠ）、CINⅡ、CINⅢ共116例组织中凋亡抑制基因Bcl-2的表达；聚合酶链反应法检测HPV16、18型的存在。结果 ①Bcl-2在正常宫颈、慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组织中的表达呈上升趋势，CINⅡ、CINⅢ组织中Bcl-2的阳性率显著高于正常宫颈、慢性宫颈炎、CINⅠ组织（均为P〈0.05）。②HPV阳性组中，CINⅡ、CINⅢ组织的Bcl-2的阳性率显著高于阴性率（P〈0．05）；CINⅡ、CINⅢ组织的Bcl-2的阳性表达率与HPV感染呈正相关。结论 HPV感染可能通过诱导Bcl-2的过度表达，抑制细胞凋亡，促进组织增殖从而在宫颈癌发生的早期起重要作用。     

电子阴道镜诊断宫颈病变的临床应用

目的：评价电子阴道镜在宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌早期诊断的应用价值。方法：对975例门诊宫颈病变患者进行宫颈刮片，阴道镜检查同时在阴道镜下定点活检。前两种检查方法与病理学检查相对照。结果：病理结果回报CINⅠ、CINⅡ共68例、CINⅢ31例，宫颈癌为19例，宫颈炎症857例，阴道镜对CIN及宫颈癌诊断符合率为89．4％，宫颈刮片细胞学检查对CIN及宫颈癌的诊断符合率为32．4％，两者比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：电子阴道镜在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌早期诊断中具有较高的应用价值。     

N-Myc下游调节基因1和p27在宫颈癌中的表达及临床意义

目的：探讨N-Myc下游调节基因1（N-Myc downstream regulated gene1,NDRG1）蛋白和p27蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测54例宫颈癌组织,32例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织和28例正常宫颈组织中NDRG1蛋白和p27蛋白的表达,并分析它们与宫颈癌临床病理因素的关系。结果：宫颈癌组织中NDRG1的阳性表达率（77.8%）明显高于CIN组（46.9%）和正常宫颈组（28.9%）,P〈0.0125;表达水平与间质浸润、有无淋巴结转移有关（P〈0.05）;与临床分期、组织病理分级、组织类型无关（P〉0.05）。p27蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率（33.3%）明显低于CIN组（62.5%）和正常宫颈组（92.9%）,P〈0.0125;其表达水平与组织病理分级、间质浸润、淋巴结转移有关（P〈0.05）。结论：NDRG1蛋白过表达、p27蛋白低表达与宫颈癌的发生发展有关,联合检测NDRG1与p27蛋白对于早期诊断宫颈癌以及判断其侵袭转移潜能及预后有一定参考价值。     

Survivin、Ki-67核抗原在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达意义

目的探讨生存素（Survivin）、Ki-67核抗原在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达及生物学意义。方法采用免疫组化S-P法,检测26例宫颈癌,78例宫颈上皮内瘤变（CINⅠ28例,CINⅡ23例,CINⅢ27例）及12例正常宫颈组织中Survivin、Ki-67的表达水平。结果 Survivin、Ki-67核抗原在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达依次递增,Ki-67核抗原的表达随Survivin表达增加而上升,统计学上差异有显著意义（P〈0.05）。结论 Survivin、Ki-67核抗原在宫颈癌中的异常表达,可能与宫颈癌发生、发展过程中凋亡抑制和增殖能力增强有关。     

HPV在宫颈癌及其癌前病变中的临床分析

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）及浸润性宫颈癌（ICC）中的表达,旨在提高宫颈上皮内瘤样病变及浸润性宫颈癌的诊断率。方法：采用原位杂交（HCⅡ）方法检测30例慢性宫颈炎、23例CINⅠ～Ⅱ、19例CIN-Ⅲ以及22例ICC病例中高危HPV的表达。结果：慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅱ组织几乎不表达HPV,显著低于CIN Ⅲ ICC,有统计学差异（P〈0．05）。结论：检测高危HPV是早期诊断CIN Ⅲ及ICC的一个重要辅助方法。