怀化部分地区295例新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症基因检测结果分析

目的了解怀化少数民族地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症的基因突变类型,分析各突变型的发生率。方法用荧光分析法对2016年1月-2017年5月新生儿及门诊疑似病例进行G6PD缺乏症筛查,采用时间飞行质谱生物芯片系统(Massarray)检测阳性病例常见突变位点;对未检测出常见突变的样本采用Sanger测序技术进行基因检测,统计其突变频率。结果 295例初筛阳性样本中,使用Massarray技术检测出7种常见突变,包括c.1388GA(89例)、c.1376GT(50例)、c.1024CT(41例)、c.95AG(34例)、5.c.871GA(32例)、c.1004CA(1例)、c.487GA(1例);Sanger测序检出11种单个位点突变,包括c.854GA(1例,国内罕见)、c.25CT(1例)、c.305TG(1例)、c.485+3AG(1例)、c.733GT(1例)、c.-8-635CT(1例)、c.-9+505_-9+534dup(1例)、c.1094GA(1例)、c.1164CT(1例)、c.1288-11 CT(1例)、o.486-34de1T(2例);复合突变c.1376GT/1388GA(1例);c.835AG/c.486-34del T、c.871GA/c.95AG、c.1024CT/c.95AG及c.486-34del T/c.241CT各1例;其余30例未检测出基因突变。结论本研究共检测出18种G6PD缺乏症单个基因位点突变,且在国内G6PD缺乏症中首次报道了c.854GA突变类型。C.1388GA(33.58)、c.1376GT(18.87)、c.1024CT(15.47)、c.95AG(12.83)、c.871GA(12.08)共占92.83%,是怀化地区新生儿G6PD缺乏症的热点基因突变类型,与国内报道一致。     

大同地区耳聋基因GJB2和mtDNA1555突变分析

目的通过筛查大同地区87例耳聋患者常见基因GJB2和mtDNA1555的突变频率,研究该地区CJB2和mtD-NA1555基因突变情况及热点突变位点。方法采集大同地区87例耳聋患者外周血,对目的基因扩增并进行测序分析。结果所有患者中有58例GJB2基因检测到11个突变位点,与编码连接蛋白的非综合征耳聋突变数据库（http：／／davinci．crg．es／deafness／index．php？section=mut_db＆db=nonsynd）比对,9个位点已见报道,其中包括5个多肽位点c．79G〉A、c．341A〉G、c．608T〉C、c．368C〉A、c．765T〉C和4个致病住点c．235delc、c．109G〉A、c．176-c．191del16和c．299-c．300delAT,其中,c．79G〉A是主要突变方式,携带率为24．14％（42／174）。新发现两例未见报道的突变位点c．277A〉G和c．558G〉A;患者中只有1例检测到mtDNA1555A〉G位点突变。结论通过对大同地区GJB2基因和mtD-NA1555突变位点的研究,了解大同地区该基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。     

海南汉族、黎族人葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的基因突变型分析及一种新的G6PD基因突变型的鉴定

目的 阐明海南汉族、黎族人群中葡萄糖－6－磷酸脱氢酶缺乏症的分子基础。方法 用聚合酶链反应、限制性内切酶消化筛查了1388G→A、1360C→T、1024C→T、517T→C、493A→G、487G→A、392G→T和95A→G突变。用单链构象多态性分析筛查其它突变;用核苷酸顺序分析鉴定具有SSCP异常区带样品的突变;。结果 在59例汉族G6PD缺乏症患者中,发现1388G→A14例（23．7％）、871G→A3例（5．1％）、835A→T1例（1．7％）517T→C1例（1．7％）、392G→T3例（5．1％）95A→G4例（6．8％）;在32例黎族G6PD缺乏症患者中,发现1388G→A6例（18．8％）、871G→A3例（9．4％）和95A→G2例（6．3％）;在1例汉族患者中发现了一种新的G6PD基因突变－835A→G突变,此突变导致第279位的苏氨酸被丙氨酸取代,将此突变型命名为G6PD－海口,其酶活性约是正常的10％,此835A→T突变的活性低,后者的酶活性约是正常的40％。分析人G6PD的三维结构模型表明,第279位苏氨酸残基的羟基是维持G6PD亚基相互作用的基团。结论 海南汉族、黎族人群中具有共同的常见G6PD基因突变型;与中国其它地区人群的G6PD基因突变谱比较,结果表明某些G6PD基因突变广泛分布于中国南方不同地区人群中;G6PD第279位苏氨酸残基的可能是维持G6PD亚基相互作用及酶活性的必需基团。     

云南籍G6PD缺乏症病例的基因型分析

目的：确定23例云南籍G6PD缺乏症病例的基因突变类型,了解G6PD基因突变的分子遗传特性。方法：运用扩增阻滞突变系统、自然及错配引物PCR／限制性酶切、PCR－单链构象多态分析及DNA自动测序技术,检测分析了23例云南G6PD缺乏症病例第2－12共11个G6PD基因外显子和部分内含子的基因突变。结果：23例中共发现5种突变,形成了5种突变基因型：G487A10例（7例汉族、3例傣族）、IVS－11T39C复合C1311T7、IVS－5636或637T→del4例、G871A1例、G487A／T93C／C1311T1例。云南人群中存在93C／1311T、487A／93C／1311T两种单体型。IVS－11T93C突变产生的多态性NlaⅢ酶切位点与1311T呈现紧密关联。首次报道了IVS－5636或637T→del在中国人群中、G871A在中国大陆地区以及G487A在云南汉族的存在。结论：云南省G6PD缺乏症具有明显的异质性;G487A突变是该地区的常见G6PD基因突变,并可能有不同的起源;IVS－11T93C突变可能起源于非洲以外地区,并与C1311T共同作用而导致G6PD活性降低。G6PD基因突变型研究对疾病防治、民族起源及迁移等研究具有重要价值。     

长治地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A〉G相关性分析

目的通过对长治地区115例耳聋患者常见基因GJB2、GJB3和线粒体DIqA 12S rRNA 1555A〉G测序分析,研究该地区耳聋基因的突变情况及热点突变位点。方法收集长治地区特殊教育学校的115q,J耳聋患者的外周血样本,提取其DblA后对它的目的基因进行扩增并测序。结果115例耳聋患者中GJB2基因检测到81例发生突变,并发现了10个突变位点,其中C．7657T〉c是主要的多态位点,其携带率为22．6％（52／115）。另外,长治地区发现2例线粒体DNAl555A〉G位点突变,未检测出GJB3基因突变位点。结论通过对长治地区常见耳聋基因突变位点的研究,了解该地区的耳聋基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。     

吕梁地区遗传性耳聋GJB2基因和mtDNA1555位点的突变筛查

目的通过对吕梁地区96例耳聋患者的GJB2基因和mtDNA1555位点突变筛查,了解该地区的基因突变情况及热点突变位点。方法采用聚合酶链式反应（PCR）扩增96例标本的GJB2基因和mtDNA1555位点所在区段,产物酶切、测序分析。结果96例标本共计检出10个GJB2基因突变位点,与编码连接蛋白的非综合征耳聋突变数据库（http：／／davinci．crg．es／deafness／index．php？seccion=mut_db＆db=nonsynd）比对,8个位点已见报道,其中包括4个多肽位点c．79G〉A、C．341A〉G、c．608T〉C、C．457G〉A和4个致病位点C．235delC、e．109G〉A、c．176-C．191dell6和C．299-c．300delAT,其中,c．235delC是主要突变方式,携带率为6．25％（12／192）;2个位点（c．IVS1—35G〉T和c．88A〉G）属首次报道。酶切发现1例患者携带mt．1555纯合突变,后经测序发现还携带有mt．1438A〉G突变位点。结论吕梁地区耳聋患者以GJB2C．235delC为主要致病位点,本次研究结果为吕梁地区的耳聋预防奠定了基础,同时为今后临床医师诊断、治疗及遗传咨询提供了参考。     

G6PD缺乏症合并Turner综合征嵌合体的遗传学分析

目的 探讨1例疑似G6PD缺乏症合并Turner综合征嵌合体先证者的相关遗传学病因。方法 采用多色探针荧光PCR熔解曲线法和Sanger测序法对G6PD酶活性降低的先证者及家系进行G6PD基因诊断,联合染色体核型分析和QF-PCR分析等多种方法对本例G6PD缺乏症的家系进行分析。结果 先证者父亲为G6PD基因c.1388G>A纯合突变;母亲G6PD基因未检测出12种常见突变;先证者染色体核型为45,X[67]/46,XX[33],G6PD基因c.1388G>A杂合突变（测序的野生位点峰与突变位点峰面积比约为1∶2）,G6PD基因突变遗传自父亲。结论 对于G6PD酶活性异常或基因检测发现异常结果无法对该结果进行解释时,应同时考虑是否存在染色体病,并结合临床表型、实验室检查结果及家系分析,做出全面的诊断,达到准确诊断及正确的遗传咨询。     

宁波地区273例G6PD缺乏症基因突变类型分析

目的了解宁波地区新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症基因突变分布及基因频率,从分子水平上诊断和指导临床诊治。方法应用荧光分析法对新生儿足跟血干滤纸血片进行初筛,对可疑阳性者召回,采集静脉血以G6PD/6PGD比值法进行确诊,同时提取干滤纸血片DNA,进行G6PD基因常见突变位点检测。结果在400例初筛阳性及疑似女性杂合子患儿中,应用基因法检测到273例存在基因突变,检出突变类型11例,具体为c.1376 GT 85例(31.1%),c.1388GA 81例(29.7%),c.95 AG 38例(13.2%),c.1024 CT 37例(13.5%),c.871GA 16例(5.9%),c.392 GT 6例(2.2%),c.1004 CA 5例(1.8%),c.1360 CT 2例(0.7%),c.592 CT 1例(0.4%),c.487 GA 1例(0.4%),c.517TC 1例(0.4%),c.1376 GT+1024CT 1例(0.4%),c.95AG+1388GA 2例(0.7%),c.871GA+1024CT 1例(0.4%)。结论宁波地区G6PD缺乏症基因突变类型以c.1376GT,c.1388GA,c.95AG为主,占74%。     

忻州地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A〉G相关性分析

目的通过对忻州地区83例耳聋患者常见基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A〉G测序分析,从分子水平研究该地区人群聋病的遗传病因和特点,为临床防聋治聋提供策略、依据。方法收集忻州地区83例耳聋患者外周血样本,提取DNA后对目的基因扩增并进行测序分析。结果83例耳聋患者中GJB2基因检测到57例发生突变,9个突变位点,与编码连接蛋白的非综合症耳聋突变数据库（http：／／davinci．crg．OS／deafneSS／index．php？Seccion=mut_db＆db=nonsynd）比对,8个位点已见报道,其中包括3个多态位点c．79G〉A、c．341A〉G、c．368C〉A和5个致病位点c．235delC、c．30-35delC、c．109G〉A、c．176-c．191dell6和c．299-c．300delAT,其中,c．79G〉A和c．341A〉G是主要突变方式,携带率为30．12％（42／174）和23．49％（39／166）。新发现1例未见报道的突变位点c．186C〉T;患者均未检测出GJB3和线粒体DNA12SrRNA1555A〉G基因突变位点。结论通过对忻州地区常见耳聋基因突变位点的研究,了解忻州地区该基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断、治疗提供理论依据。     

湖南地区小儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶三种基因型突变及其临床表现

目的探讨湖南地区小儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的3种常见基因突变类型与临床表现的关系.方法使用突变特异性扩增系统(ARMS)法,对168例经G6PD/6PGD比值法证实为G6PD缺乏症患儿的静脉血进行3种点突变检测,并对其进行临床分析.结果168例中检出G1388A 37例发生率22%,G1376T74例发生率44%,A95G 45例发生率26.8%,未定型12例发生率7.2%.3种常见基因突变型均能导致严重的酶活性缺陷和急性溶血性贫血、不同程度黄疸等症状.结论G1376T、G1388A、A95G突变型是湖南人最常见G6PD基因突变类型,3种突变型患者具有相似的临床表现.     

中国福建遗传性乳腺癌BRCA1基因突变分析

目的研究福建遗传性乳腺癌患者BRCA1基因突变位点及携带情况。方法对20例遗传性乳腺癌患者血液标本进行检测,对其BRCA1基因第11号外显子全序列进行DNA测序。结果20例标本中检出5患者存在共计9种BRCA1基因突变,其中3个为新发现位点（错义突变1159T〉C,4071A〉C;同义突变4122C〉T）;其它6个已报道位点中2个（2201C〉T,2430T〉C）为同义突变,其余4个（2685T〉C,2731C〉T,3232A〉G,3667A〉G）属错义突变,本研究中BRCA1突变率为25%。结论福建遗传性乳腺癌患者BRCA1基因突变具有地域性特征,开展BRCA1基因突变检测有助于本地区女性患癌风险评估和早期诊断。     

运城地区耳聋患者常见耳聋基因突变分析

目的通过筛查运城地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、PDS和线粒体DNAl555位点的突变频率,来研究该地区常见耳聋基因突变的发生情况。方法采集运城市特殊教育学校75例耳聋患者外周血,对目的基因扩增并测序。结果75例患者中,45例患者的GJB2基因发生突变,其中,c．235delc、e．79G〉A和c.341A〉G的突变频率较高,分别为12％、22％和18．7％,另外还检测出4个突变频率较低的位点C．608T〉C（2％）、C．109G〉A（0．67％）、c．368C〉A（1．33％）和C．176—191del16（0．67％）;3例患者的PDS基因第19外显子发生突变,C．2168A〉G与IVs7—2G〉A突变频率分别为1．33％和2％;仅有1例患者mtDNA1555发生突变。结论通过对山西运城地区常见耳聋基因突变的研究,对建立山西省耳聋基因突变数据库提供素材,同时也为耳聋的预防,基因诊断及治疗提供强有力的依据。     

榆次地区非综合征性耳聋患者GJB2基因的检测分析

目的通过对榆次地区100q,J非综合征性耳聋患者GJB2基因突变位点的筛查,了解该地区耳聋基因的突变特点,为耳聋的早期诊断提供依据。方法收集榆次地区100例非综合征性耳聋患者的外周血标本,提取全血基因组DNA后,用聚合酶链反应（PCR）对目的片段进行扩增并测序,结果在GenBank上比对分析。结果100例耳聋患者中,检测到90例患者发生基因突变,其中有3,k位点未见报道：c．54C〉A（2．5％）、c．319h〉G（0．5＊／0）、c．512-5l3insAhCG（O．5％）;4个位点突变发生率较高：C．79G〉A（26．50％）、c．235delC（12．00％）、c．341A〉G（20．50％）、c．765T〉C（13．50％）;另外还检测出8个突变发生率较低的位点：c．109G〉A（1．5％）、C．176-19ldell6（1．00％）、C．223C〉T（1．00％）、c．253T〉C（0．50％）、c．299-300delAT（3．50％）、C．328delG（0．50％）、c．368C〉h（0．50％）、C．608T〉C（2．00％）。结论通过对榆次地区耳聋患者GJB2基因的检测分析,可以明确耳聋患者的病因,了解该地区的耳聋基因突变情况,为今后的耳聋患者的病因学诊断提供参考。     

Glucose-6-phosphate dehydrogenase mutations in Mon and Burmese of southern Myanmar

Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency is highly prevalent in Southeast Asians. G6PD mutations are associated with specific ethnic groups in Southeast Asia. Mon is a minority ethnic group in Myanmar, which speaks Monic, a distinct language of Mon-Khmer classification. We studied G6PD mutations in Mon and Burmese males of southern Myanmar who migrated to Thailand in Samutsakhon province. G6PD deficiency was identified in 19 (12%) of 162 Mon males and 17 (10%) of 178 Burmese males, and then assayed for G6PD mutations. Among 19 G6PD-deficient Mons, 12 were G6PD Mahidol; one case each was G6PD Jammu (871G > A; nt 1311C), G6PD Kaiping (1388G > A), G6PD Mediterranean (563C > T), a novel mutation 94(C > G); and three remain unidentified. Among 17 G6PD-deficient Burmese, 12 were G6PD Mahidol; one each was G6PD Coimbra (592C > T), G6PD Kerala-Kalyan (949G > A), and G6PD Valladolid (406C > T); and two remain unidentified. G6PD Mahidol (487G > A) is the most common mutation among Mons and Burmese. All G6PD deficient Mon and Burmese, except for a person with G6PD Valladolid, shared the same haplotype nt93T, nt1311C. Despite a similar language root with Cambodian’s Khmer language, our study suggests that Mon people share a common ancestry with Burmese rather than Cambodians.     

Glucose‐6‐phosphate dehydrogenase (G6PD) mutations in Thailand: G6PD Viangchan (871G>A) is the most common deficiency variant in the Thai population

Glucose‐6‐phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency is the most common hereditary disorder in humans. Through a population study for G6PD deficiency using a cord blood quantitative G6PD assay in Bangkok, Thailand, we found that the prevalence of G6PD deficiency is 11.1% in Thai male (N=350) and 5.8% in female (N=172) cord blood samples. Among the neonates with hyperbilirubinemia, the prevalence of G6PD deficiency is 22.1% in males (N=140) and 10.1% in females (N=89). We developed a PCR‐restriction enzyme‐based method to identify G6PD Viangchan (871G>A), and searched for this and 9 other mutations in DNA from G6PD deficient blood samples. G6PD Viangchan (871G>A) was the most common mutation identified (54%), followed by G6PD Canton (1376G>T; 10%), G6PD Mahidol (487G>A; 8%), G6PD Kaiping (1388G>A; 5%), G6PD Union (1360C>T; 2.6%) and “Chinese‐5” (1024C>T; 2.6%). Among 20 neonates with hyperbilirubinemia, G6PD Viangchan was also most frequently identified (60%), followed by G6PD Canton (10%), G6PD Mahidol, G6PD Union, and G6PD Kaiping (5% each). G6PD Viangchan appears from this study to be the most common G6PD mutation in the Thai population, bringing into question previous reports that G6PD Mahidol is most prevalent. G6PD Viangchan, together with G6PD Mahidol and G6PD Canton, are responsible for over 70% of G6PD deficiency in this study of Thais. With the data from other Southeast Asian ethnic groups such as Laotians, G6PD Viangchan (871G>A) is probably the most common variant in non‐Chinese Southeast Asian population.© 2002 Wiley‐Liss, Inc.