同源异型盒基因MSX-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达

目的研究同源异型盒基因Msx-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达变化及意义。方法选择出生后1、2、5、8、12、15、18、22、30和45d的SD大鼠，采用免疫组化和Real—time PCR法分别检测颅缝不同位点的MSX-2表达。结果MSX-2表达于SD大鼠发育的颅骨成骨缘、颅缝间质及其下的硬脑膜组织。在后额缝和矢状缝均未闭合期（出生后1～8d），后额缝和矢状缝复合组织中均出现MSX-2少量表达；在活跃的后额缝闭合期（出生后12～22d），后额缝复合组织出现较多MSX-2表达，而矢状缝复合组织无明显的表达增加；在后额缝完全闭合期（出生后30～45d），MSX-2表达在后额缝减弱明显，并持续较低水平，此时矢状缝的表达略高于后额缝。结论同源异型盒基因MSX-2转录主要发生于颅缝闭合活跃阶段，在后额缝和矢状缝复合组织的表达有不同的时间趋势，提示可能参与颅骨发育和颅缝闭合的调控。     

同源异型盒基因MSX-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达

目的 研究同源异型盒基因Msx-2在SD大鼠颅缝闭合过程中的表达变化及意义.方法 选择出生后1、2、5、8、12、15、18、22、30和45 d的SD大鼠,采用免疫组化和Real-time PCR法分别检测颅缝不同位点的MSX-2表达.结果 MSX-2表达于SD大鼠发育的颅骨成骨缘、颅缝间质及其下的硬脑膜组织.在后额缝和矢状缝均未闭合期(出生后1～8 d),后额缝和矢状缝复合组织中均出现MSX-2少量表达;在活跃的后额缝闭合期(出生后12～22 d),后额缝复合组织出现较多MSX-2表达,而矢状缝复合组织无明显的表达增加;在后额缝完全闭合期(出生后30～45 d),MSX-2表达在后额缝减弱明显,并持续较低水平,此时矢状缝的表达略高于后额缝.结论 同源异型盒基因MSX-2转录主要发生于颅缝闭合活跃阶段,在后额缝和矢状缝复合组织的表达有不同的时间趋势,提示可能参与颅骨发育和颅缝闭合的调控.     

TGF-β1 在SD鼠颅缝融合中的表达及意义

目的：研究SD鼠不同时间位点的后额缝(PF缝)与矢状缝(Sag缝)中转化生长因子B1(TGF-β1)的表达，观察颅缝的融合及生长因子在融合中的作用。方法：取生后第1，6，12，17，22，35天SD大鼠的PF缝与Sag缝及硬脑膜。常规HE染色及TGF-β1免疫组化染色观察。结果：SD鼠的PF缝于12—35d融合。方向是从颅内侧到颅外侧；Sag缝1—35d一直保持开放。TGF-β1在PF缝融合过程中呈现高表达。而在始终开放的Sag缝中弱表达。结论：TGF-β1对PF缝的融合可能有重要的促进作用。     

电针大椎穴对大鼠颈椎病模型纤维环细胞FAK蛋白表达的影响

目的探讨电针大椎穴对动静力失衡性颈椎病模型SD大鼠颈椎间盘纤维环细胞内FAK表达的影响。方法选择SPF级SD大鼠32只,采用完全随机化区组设计方案,将32只SD大鼠分成空白对照组(空白组)、模型对照组(模型组)、模型电针治疗组(模针组)、模型美洛昔康片对照治疗组(美洛昔康组),每组8只。建立大鼠动静力失衡性颈椎病动物模型。手术造模2个月后通过行为学观察,运用HE染色对比观察空白组和模型组纤维环细胞组织形态的改变,经统计分析证实颈椎病模型复制成功后,分别对模针组进行固定后电针大椎穴治疗,美洛昔康组进行固定后美洛昔康灌胃治疗,空白组及模型组只进行同等条件的固定处理。连续治疗2个疗程后取材,采用Western Blot检测FAK蛋白表达。结果模型组与空白组比较有显著性差异(P<0.05);美洛昔康组、电针组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论手术造模能使SD大鼠颈椎间盘软骨中FAK蛋白表达下降,电针大椎穴、美洛昔康灌胃在一定程度上能提高SD大鼠颈椎间盘软骨中FAK蛋白表达。     

氟对大鼠骨组织Twist mRNA及其蛋白表达的影响

目的:观察氟对大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达的影响,探讨Twist在氟中毒引起氟骨症发病中的作用。方法:36只SD大鼠按性别和体重随机分为3组,每组12只,组内雌雄各半;对照组自由饮用自来水,低氟组、高氟组分别饮用含氟水5 mg/L、50 mg/L;实验6个月后股动脉放血处死大鼠,采用氟离子选择电极法检测大鼠尿氟、骨氟含量;HE切片观察大鼠股骨下段骨组织病理学改变,测定骨皮质厚度、骨小梁宽度等骨形态学变化;采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测慢性氟中毒大鼠Twist mRNA及其蛋白表达水平。结果:与对照组比较,氟中毒组大鼠尿氟及骨氟含量明显升高,股骨远端骨皮质增厚、骨小梁数目增多、骨髓腔间隙变小等骨质硬化表现,形态学计量指标的差异有统计学意义(P0.05),且随染氟剂量增加,以上病理改变逐渐加重;与对照组比较,染氟组Twist mRNA及其蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:氟可导致大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达水平降低,Twist可能参与氟中毒引起的骨骼损伤。     

Effect of Fluoride on the Expression of Twist mRNA and Protein in Bone Tissue of Rats

目的:观察氟对大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达的影响,探讨Twist在氟中毒引起氟骨症发病中的作用.方法:36只SD大鼠按性别和体重随机分为3组,每组12只,组内雌雄各半;对照组自由饮用自来水,低氟组、高氟组分别饮用含氟水5 mg/L、50 mg/L;实验6个月后股动脉放血处死大鼠,采用氟离子选择电极法检测大鼠尿氟、骨氟含量;HE切片观察大鼠股骨下段骨组织病理学改变,测定骨皮质厚度、骨小梁宽度等骨形态学变化;采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测慢性氟中毒大鼠Twist mRNA及其蛋白表达水平.结果:与对照组比较,氟中毒组大鼠尿氟及骨氟含量明显升高,股骨远端骨皮质增厚、骨小梁数目增多、骨髓腔间隙变小等骨质硬化表现,形态学计量指标的差异有统计学意义(P<0.05),且随染氟剂量增加,以上病理改变逐渐加重;与对照组比较,染氟组TwistmRNA及其蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:氟可导致大鼠骨组织中Twist mRNA及其蛋白表达水平降低,Twist可能参与氟中毒引起的骨骼损伤.     

胰岛素样生长因子I mRNA和颅缝闭合的相关研究

目的探讨胰岛素样生长因子I在大鼠颅缝闭合前、闭合中、闭合后的基因表达。方法选择出生后6、12、16、30d的SD大鼠的后额缝和人字缝，应用原位杂交方法检测胰岛素样生长因子I mRNA不同时间点在后额缝和人字缝的表达。结果胰岛素样生长因子I mRNA在12、16d的后额缝呈高表达，30d表达消失；而在人字缝的各个时间点都没有表达。结论胰岛素样生长因子I在调控控缝闭合中起着一定的作用。     

蛋白酶抑制因子对大鼠帕金森病造模条件探讨

目的 观察不同剂量蛋白酶抑制因子(proteasome inhibitors I,PSI)对大鼠行为学及脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)、α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)表达的影响,探讨PSI致帕金森病(Parkinson’s disease, PD)大鼠慢性模型的最佳条件。方法 将30只SPF级雄性大鼠随机分为3组,每组10只,皮下注射PSI,给药剂量分别为模型组A 3 mg/kg、模型组B 6 mg/kg,对照组以相同方法注射二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)溶液,剂量为3 mg/kg。连续隔日(每周一、三、五)注射2周后,观察PD大鼠的行为学变化,同时常规HE染色,在光学显微镜下观察中脑黑质区细胞变化情况,Western blot及免疫组化染色法检测各组大鼠的脑内多巴胺能神经元黑质酪氨酸羟化酶(TH)、中脑黑质区α-syn的表达变化。结果 与对照组相比,PSI模型组两组大鼠运动能力明显下降,模型组A爬杆实验行为学评分低模型组B,悬挂实验行为学评分高于模型组B(P<0.05);HE染色结果显...     

去骨瓣减压对大鼠心肺复苏后血清CK-BB和MBP表达的影响

目的:通过观察去骨瓣减压时血清磷酸肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)、髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平的变化,探讨去骨瓣减压对脑复苏的影响。方法:采用改良的窒息法制备大鼠复苏模型,成年雄性Wistar大鼠48只,随机均分为假手术组、对照组和去骨瓣组。对照组与去骨瓣组采用窒息致大鼠心脏骤停和心肺复苏(CPR)模型;去骨瓣组在大鼠CPR成功1 h后行去骨瓣减压;假手术组仅行气管插管、股动静脉置管术。每组处理后又分为6、12、24、48 h 4个亚组,每个亚组4只。分别于各时间点取血和组织标本;ELISA法检测血清CK-BB、MBP水平,HE染色观察海马及大脑皮质细胞凋亡的变化。结果:3组大鼠处理后6 h血清CK-BB水平差异无统计学意义(P>0.05),对照组和去骨瓣组术后12 h、24 h和48 h血清CK-BB水平均明显高于假手术组,去骨瓣组术后24 h血清CK-BB水平低于对照组(P<0.05)。3组大鼠术后6、12、24和48 h血清MBP水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:去骨瓣减压能降低大鼠CPR后血清中CK-BB的表达,从而减轻脑损伤。     

白细胞介素-1β在SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型中的表达及其意义

目的 通过构建雄性SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎(CNP)模型研究白细胞介素-1β(IL-1β)的表达,探讨IL-1β在CNP中的可能发挥的作用.方法 取3月龄雄性SD大鼠30只随机分为正常对照组和CNP模型组,每组15只.造模后通过HE染色观察两组大鼠前列腺组织炎症浸润情况,并应用Western blot法、免疫组化SABC法检测两组SD大鼠前列腺组织中IL-1β表达情况.结果 HE染色结果证实成功构建出SD大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型,Western blot法、免疫组化法检测都显示CNP模型组IL-1β的表达水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IL-1β在SD大鼠CNP模型中表达水平增高,在前列腺炎症的发生发展过程中起着重要作用.     

基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制因子-1在老年肌少症大 鼠中的表达及意义

目的 观察肌少症大鼠骨骼肌质量、力量的变化以及基质金属蛋白酶（MMP-1）、金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP-1）及Ⅰ型胶原的表达。方法 11 只5 月龄SD大鼠作为成年对照组(YC组）;18只24月龄SD大鼠根据双能X线吸光测定得到的相对瘦质量（瘦质量%）分为两组,其中9只大鼠为老年对照组（OC组）,9只大鼠为老年肌少症组（OS组）,分组标准为YC组相对瘦质量较OS组高2SD;大鼠喂养4周后处死;电子抓力仪测量大鼠前肢抓力;HE染色和天狼星红染色观察大鼠腓肠肌细胞外基质变化;Western blot检测MMP-1、TIMP-1及Ⅰ型胶原的蛋白表达量。结果 老年对照组相对抓力低于成年对照组（P<0.01）,瘦质量%与成年对照组无统计学差异（P>0.05）,HE染色和天狼星红染色示细胞外基质较成年对照组增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达高于成年对照组（P<0.05）,MMP-1的表达与成年对照组无统计学差异（P>0.05）;与老年对照组相比,老年肌少症组相对抓 力未见显著性差异（P>0.05）,瘦质量%显著下降（P<0.01）,HE染色及天狼星红染色示细胞外基质增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达增多（P<0.05）,MMP-1的表达降低（P<0.05）。结论 增龄过程中骨骼肌MMP-1/TIMP-1失衡,影响细胞外基质代谢,导致细胞外胶原纤维增多,进而影响骨骼肌质量和功能,可能是肌少症发病的重要原因之一。     

宁痛片对偏头痛大鼠行为学和硬脑膜肥大细胞影响

目的：观察宁痛片对偏头痛模型大鼠行为学和硬脑膜肥大细胞数目的影响。方法：将50只Wistar大鼠随机分为5组：正常组、模型组、对照组、治疗大剂量组及治疗小剂量组，分别灌胃7d，尾静脉注射硝酸甘油造偏头痛大鼠模型，观察造模后2h大鼠行为学症状，造模后4h取硬脑膜，观察单位面积肥大细胞数目。结果：与模型组比较，宁痛片改善大鼠行为症状，减少硬脑膜肥大细胞数目。结论：宁痛片能改善模型大鼠偏头痛症状，起到阵痛作用。     

骨髓间充质干细胞外泌体在高氧诱导的新生大鼠支气管肺发育不良模型中的修复作用

目的 明确骨髓间充质干细胞外泌体(BMSCs-Exo)对高氧诱导的大鼠支气管肺发育不良(BPD)模型的修复作用。方法 将新生4 d的Sprague Dawley(SD)大鼠吸入85%高氧建立高氧肺损伤模型。分为空气对照组、高氧组、高氧+PBS组和高氧+Exo组4组。使用BMSCs-Exo腹腔注射1周后处死SD大鼠，取肺组织进行石蜡包埋，分别进行HE染色，辐射状肺泡计数(radial alveolar counts, RAC),Masson染色、免疫组化染色和TUNEL染色。ELISA和Real time-PCR(qPCR)检测血清和肺组织蛋白白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、组织金属蛋白酶-9(MMP-9)及血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的表达。结果 动物模型中，HE染色后对各组肺泡进行统计学分析显示，高氧+Exo组的肺泡数量显著高于高氧组及高氧+PBS组(P<0.001)。Masson染色后对蓝色胶原纤维所占面积百分比进行定量分析显示，高氧+Exo组胶原纤维所占面积百分比显著低于高氧组和高氧+PBS组(P<0.001)。免疫组化染色示高...     

Bmp2影响脂肪干细胞成骨能力的研究

目的 探究在大鼠脂肪干细胞内过表达骨形态发生蛋白2(Bmp2)后成骨基因的表达情况以及成骨能力的变化。方法 通过电转染Bmp2至大鼠脂肪干细胞内，以空白组作为对照，分为空白对照组(Control组)、空载组(Vector组)、成骨诱导组(Inducement组)、过表达组(Bmp2组),采用Western blot、qRT-PCR及免疫荧光对比成骨基因表达情况，采用碱性磷酸酶染色与茜素红染色观察硫化钴沉淀及钙盐沉积情况。结果 Western blot与qRT-PCR检测显示，与Control组相比，Bmp2组的Bmp2、Bmp4、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)、矮小相关转录因子2(Runx2)、磷酸化大鼠信号转导分子1/5(P-Smad1/5)、远端缺失同源框2(Dlx2)、骨涎蛋白(BSP)表达显著增高(P<0.05),而Smad1/5的表达情况差异无统计学意义；免疫荧光检测显示，与Control组相比，Bmp2组的OPN、Runx2荧光强度显著增高(P<0.05);茜素红染色及碱性磷酸酶染色结果显示，与Control组相比，Bmp2组细胞周围钙盐沉积增多，硫化钴...     

神经生长因子促进骨折愈合的实验研究

目的观察神经生长因子(NGF)对骨折愈合的影响。方法 SD大鼠随机分为单纯骨折组40只,治疗组40只,分别于2、4周行骨折标本骨痂最大直径测量及骨痂组织HE染色观察。结果对照组骨痂断面最大直径明显小于治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色观察治疗组骨小梁成熟良好,大量编织骨形成。结论神经生长因子对骨折愈合有促进作用。     

FAK-PI3K/AKT信号通路在新生大鼠颅盖骨生长发育过程中作用机制的研究

目的 通过对不同时期的SD大鼠颅盖骨进行检测，探究大鼠颅盖骨的生长特点。方法 选取同窝1、4、7、10、12周SD大鼠颅盖骨(每周3只),使用Real-time PCR和Western blot技术检测颅盖骨中局部粘着斑激酶(FAK)-磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路的表达情况，并通过相关性分析FAK-PI3K/AKT在颅盖骨生长发育过程中的作用情况。结果 大鼠脑容积的增长与颅盖骨厚度的变化是同步增长；FAK的表达变化与大鼠各经线的变化呈正相关；FAK的表达变化与PI3K/AKT的表达变化呈正相关。结论 FAK的表达变化与大鼠头颅的生长发育规律具有相关性，FAK通过激活PI3K/AKT信号通路在颅盖骨中发挥作用，FAK可能作为颅骨快速生长发育期的标志物，为临床上的颅骨缺损修复治疗中时机的选择提供基础理论依据。     

振荡电场对脊髓损伤大鼠β-catenin蛋白表达和神经元再生的影响

目的 观察振荡电场对脊髓损伤大鼠β-catenin蛋白表达规律和神经元再生的影响.方法 60只SD大鼠采用改良Allen′s打击法建立脊髓损伤模型,随机分为对照组和实验组.实验组施加振荡电场干预,对照组只置入振荡电场刺激器而不给予干预.建模成功后分别在3、7、14 d取大鼠脊髓,行HE染色观察脊髓大体形态变化,采用Western blot和免疫组化技术检测脊髓中β-catenin蛋白表达规律,行免疫荧光检测观察神经元变化情况,并在取材前对两组大鼠行Basso-Beattle-Bresnahan(BBB)行为学评分.结果 Western blot和免疫组化结果均显示,3 d时两组脊髓灰质内β-catenin蛋白均高表达,随时间延长表达量逐渐减少,同时实验组在各时间点β-catenin蛋白表达量均高于对照组(P<0.05).神经元的表达在3~14 d时呈现递增的趋势,但实验组神经元在表达数量上明显优于对照组,同时细胞形态更加规则.两组BBB评分3、7 d时差异无统计学意义,而14 d时,实验组BBB评分明显高于对照组(P<0.05).结论 振荡电场可以提高大鼠脊髓损伤区域β-catenin蛋白表达量,并促进神经元再生,从而改善受损脊髓神经功能.     

FAK在脑胶质瘤55例中的表达及其临床意义

目的:探讨脑胶质瘤细胞中局部黏着斑激酶(FAK)蛋白的表达水平与组织学分级之间的关系。方法:将55例脑胶质瘤标本按照WHO胶质瘤分类标准(2000年)分为4组,其中Ⅰ级13例,Ⅱ级16例,Ⅲ级17例,Ⅳ级9例,同时取11例正常脑组织标本(急性颅脑外伤患者手术内减压切除的脑组织标本)为对照组,分别行HE染色和免疫组织化学染色,观察FAK蛋白表达情况,并比较各组间的差异。结果: FAK蛋白在正常脑组织中均不表达;低级别(Ⅰ+Ⅱ)组的阳性表达率低于高级别(Ⅲ+Ⅳ)组(P<0.05);FAK表达强度与胶质瘤病理级别呈正相关(r=0.424,P<0.05)。结论:测定FAK蛋白在人脑胶质瘤中的表达水平将有助于判断人脑胶质瘤细胞的恶性程度。     

α-硫辛酸拮抗铅对幼年大鼠骨生长及代谢的影响

目的：探讨α-硫辛酸（LA）对染铅大鼠骨显微结构及骨髓生化指标的影响．方法：将SD大鼠随机分为2组,空白对照组和铅染毒组（230mg／L的醋酸铅灌胃）,40d后各组取3只大鼠测血铅和骨铅,将已染铅大鼠随机分为4组,即铅对照组、3个LA治疗组[30,60,100mg／（kg·d）]．LA治疗80d后处死动物,测定血铅、骨铅、HE染色观察骨小梁结构,免疫组化法检测碱性磷酸酶表达．结果：①LA各治疗组大鼠血铅、骨铅水平均低于铅对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）．②LA100mg治疗组大鼠,HE染色观察骨小梁结构,碱性磷酸酶表达与铅对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）．结论：LA能够拮抗铅的骨毒性．     

陈旧性心肌梗死大鼠的实验研究

[目的]观察陈旧性心肌梗死大鼠的病理变化及细胞凋亡情况。[方法]40只SD雄性大鼠被随机分为模型组和对照组,每组20只,模型组结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,对照组开胸不结扎,术后3个月留取心脏标本,2,3,5-氧化三苯基四氮唑(tripheng ltetrazoliurn chlo-ride,TTC)染色法检测心肌梗死面积,HE染色法观察病理改变,Western blot法检测Caspase-3蛋白表达量。[结果]对照组梗死面积为0,Caspase-3蛋白表达量为(0.31±0.09),模型组的梗死面积为(30.60±5.20)%、Caspase-3蛋白表达量为(0.49±0.08),模型组显著高于对照组,P<0.01;HE染色发现模型组心肌细胞稀疏、萎缩,间质组织纤维化伴慢性炎症细胞浸润,心内膜软骨化,形态学特征符合透明软骨细胞。[结论]陈旧性心肌梗死大鼠梗死边缘区存在细胞凋亡。