系统性红斑狼疮患者外周血浆细胞样树突状细胞的变化及意义

目的:探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中浆细胞样树突状细胞（pDC）及干扰素-α（INF-α）水平的变化及意义。方法:选取SLE患者60例（SLE组）和正常健康人30名（对照组）,利用流式细胞术检测外周血pDC在各组的相对计数;ELISA法测定血清中INF-α的浓度。结果:SLE患者外周血pDC相对计数显著低于对照组（P<0.01）。活动期SLE患者外周血pDC相对计数明显低于稳定期患者（P<0.01）。抗dsDNA抗体阳性的SLE患者外周血pDC的相对计数低于抗dsDNA抗体阴性的患者（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数与dsDNA定量和ANA定量均呈明显负相关关系（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数在P0抗体、抗U1RNP抗体、抗Sm抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗SSA/Ro60抗体、抗SSA/Ro52抗体、抗SSB抗体阳性组和阴性组间差异均无统计学意义（P>0.05）。肾脏病变阳性组的SLE患者外周血pDC相对计数低于阴性组患者（P<0.01）;血液系统损害阳性组的SLE患者外周血pDC相对计数低于血液系统阴性组患者（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数在颊部红斑、光过敏、口腔溃疡、关节炎阳性组与阴性组间的差异均无统计学意义（P>0.05）。SLE患者外周血pDC相对计数与红细胞沉降率、C反应蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、补体3、补体4及系统性红斑狼疮疾病活动度评分均无相关关系（P>0.05）。SLE患者血清中IFN-α水平均显著高于对照组（P<0.01）。结论:SLE患者外周血pDC相对计数显著降低,SLE的pDC相对计数与病情相关,检测pDC相对计数可作为临床判断SLE病情活动的参考指标。     

Toll样受体7在系统性红斑狼疮合并高危人乳头瘤病毒感染中的作用

目的：观察Toll样受体7（ TLR7）在系统性红斑狼疮（ SLE）、人乳头瘤病毒（ HPV）、SLE＋HPV感染者宫颈上皮细胞及不同HPV亚型宫颈癌细胞株中的表达,并探讨其意义。方法选择行子宫颈液基细胞学检查者20例,其中,SLE合并HPV DNA阳性5例（ SLE＆HPV＋组）、SLE合并HPV DNA阴性5例（ SLE＆HPV－组）、正常合并HPV DNA阳性5例（ CTL＆HPV＋组）、正常合并HPV DNA阴性5例（ CTL＆HPV－组）。收集的宫颈脱落细胞一份用于宫颈液基细胞学检查,剩余的标本用于高危型HPV及低危型HPV检测,另一份用于流式鉴定及胞内TLR7检测。结果流式cytokeratin＋CD45－设门鉴定的上皮细胞内TLR7表达的平均荧光强度：SLE＆HPV＋组＜SLE＆HPV－组＜CTL＆HPV＋组＜CTL＆HPV－组。不同HPV亚型人宫颈癌细胞系Caski（ HPV16阳性）、HeLa细胞（HPV18阳性）及HPV阴性的C33A细胞系内TLR7表达的平均荧光强度：Caski＜HeLa＜C33A。 SLE＆HPV＋组SLE疾病活动性评分显著高于SLE＆HPV－组,且更容易合并器官损伤;且病情复发指数也明显高于SLE＆HPV－组;同样,SLE＆HPV＋组患者全部为Anti－dsDNA阳性,而SLE＆HPV－组仅占20％。结论 TLR7下调可能与HPV逃避宿主免疫防御从而导致病情长期潜伏相关;HPV可能通过核酸特异性的TLR7激活固有免疫和调节免疫系统,导致病情发作或者非活动性SLE的复发;多种因素包括病毒感染本身、药物因素以及病情活动复发均可致SLE患者体内HPV持续易感。     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的 研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性.方法 提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列.结果 TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码.SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P＜0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合.结论 TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联.     

系统性红斑狼疮患者Toll样受体9基因多态性的初步研究

目的研究Toll样受体9(TLR9)基因在系统性红斑狼疮(SLE)中是否存在多态性。方法提取26例SLE患者mRNA并逆转录为cDNA,扩增产物经3730 DNA自动测序仪测定TLR9基因序列。结果TLR9 mRNA自起始位点起第1783、2269和3222位碱基存在二态性(A或G),这3个位点为单核苷酸多态性(SNP)位点,分别称之为SNP1、SNP2和SNP3,其中SNP1是我们新发现的多态性位点,SNP2和SNP3为美国国立生物技术信息中心(NCBI)SNP数据库中公布的位点,它们均不改变氨基酸编码。SNP2在人群中可表现为AA纯合、GG纯合或AG杂合3种基因型,在SLE患者中以AG型为主(50%),而在正常人中以GG型为主(75%)(P<0.05);SNP1和SNP3只在一名男性SLE患者中发现,表现为AG杂合,其余个体均为GG纯合。结论TLR9基因编码区中的一个单核苷酸多态性与SLE发病相关联。     

1,25-二羟维生素D3下调Toll样受体7在树突状细胞中的表达

目的观察1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(DC)的表型、功能以及对其Toll样受体7(TLR7)表达的影响,探讨TLR7在1,25-二羟维生素D3诱导耐受性DC可能的机制。方法体外扩增小鼠骨髓来源的DC,采用流式细胞术和混合淋巴细胞反应检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和功能的影响;利用RT-PCR半定量方法测定1,25-二羟维生素D3对DC的TLR7表达的影响。结果 1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD86和MHC II的荧光强度均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);对T细胞的刺激能力较对照组明显减弱(P<0.05);与对照组比较,1,25-二羟维生素D3可以明显下调TLR7的表达(P<0.01)。结论 1,25-二羟维生素D3可能通过下调TLR7的表达抑制DC细胞的成熟,从而使得DC具有耐受性特征。     

系统性红斑狼疮病人外周血髓样树突状细胞TLR2和TLR4表达情况及其临床意义研究

目的：检测系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血中髓样树突状细胞(mDC)表面Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)的表达情况及血清白细胞介素(IL)-10、IL-17A表达水平,探讨其在SLE发病机制中的作用及临床意义。方法：纳入SLE病人54例作为研究对象,根据SLEDAI-2000将SLE病人分为稳定组和活动组,同时选取本院30例健康志愿者作为对照组,应用流式细胞术检测SLE病人及健康志愿者外周血中mDC表面TLR2、TLR4的表达情况,并用ELISA法检测SLE病人及健康志愿者血清中IL-10、IL-17A的表达水平。结果：活动组SLE病人mDC-TLR2表达率高于稳定组、对照组(P<0.01),mDC-TLR4表达率高于对照组(P<0.01)。SLE病人血清中IL-10、IL-17A表达水平均高于对照组(P<0.01)。mDC-TLR2表达与抗Sm抗体呈正相关(P<0.05),与血清IgG、24 h尿蛋白定量呈负相关(P<0.05);mDC-TLR4表达与血小板计数呈正相关(P<0.05)。结论：SLE活动组病人mDC-TL...     

树突状细胞在系统性红斑狼疮发病中作用研究

系统性红斑狼疮(SLE)是一种十分复杂的自身免疫病,其确切的发病机制目前还不是很清楚。现在普遍认为SLE可能是一种T、B细胞免疫功能异常所引起的一种自身免疫疾病,其临床以自身抗体(如抗dsDNA抗体等)和自身免疫复合物引起的损害为主要表现。但近年的研究发现与树突状细胞(DC)相关的一些细胞因子在SLE疾病中表现异常[1],DC介导的某些细胞因子的独立或联合作用可能在诱发SLE疾病中也起着极其重要的作用。现仅将近年的研究成果,从DC耐受机制的崩溃,DC对T、B细胞的作用、自身稳定性的改变及介导的细胞因子等方面在诱发SLE中的重要作…     

Mu受体在小鼠树突状细胞中的诱导表达

目的研究Mu受体在小鼠树突状细胞中的诱导表达。方法取7～8周龄的C57BL/6J雌鼠骨髓细胞培养,培养7d后,用CD11c＋磁珠,采用磁性分选的方法纯化树突状细胞。用免疫荧光染色PCR检测Mu受体及其基因在树突状细胞中的表达。并用流式细胞仪对树突状细胞的表型进行分析。结果Mu受体在激活的树突状细胞上有明显（P〈0.05）表达。不同Toll样受体的配体诱导不同程度的Mu受体表达。结论活化的树突状细胞可诱导表达Mu受体。     

Toll样受体在树突状细胞的表达及其功能研究进展

树突状细胞(dendritic cells,DCs)是体内功能最强的抗原提呈细胞,它通过Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)识别病原相关模式分子,在固有免疫应答和适应性免疫应答中起桥梁和纽带作用,并调控免疫应答的强度和质量.文中就近年来TLRs在DCs的表达和功能研究进展作一综述.     

三氧化二砷对系统性红斑狼疮患者Toll样受体9及α-干扰素的影响

目的:了解三氧化二砷(AS2O3)对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体9(TLR9)mRNA 及α-干扰素(IFN-α)表达的影响,为阐明AS2O3治疗SLE的作用机制提供依据.方法:SLE患者和正常人PBMCs分别与环磷酰胺(CTX)及不同浓度AS2O3进行体外培养12h和24h...     

系统性红斑狼疮患者外周血T细胞CTLA-4表达及其临床意义的研究#

目的：研究系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）T细胞中CTLA-4的表达及临床意义。 方法：分离正常人和SLE患者的外周血单个核细胞（PBMCs）,以抗-CD3、抗-CD28刺激培养48h,刺激培养前后收取细胞,以流式细胞术（FCM）检测CD4+和CD8+T细胞中CTLA-4+细胞比例,并分析其与SLE疾病活动性指数（SLE Disease Activity Index,SLEDAI）和肾损害的关系。再以ELISA法检测培养上清中游离的CTLA-4水平。 结果：SLE患者刺激前的CD4+和CD8+T细胞中、主要是CD25+T细胞中CTLA-4+细胞的比例较正常人显著增高,且与SLEDAI呈正相关;而其CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞比例也显著高于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性;经抗-CD3、抗-CD28抗体刺激后,其CD4+CD25+T细胞、CD8+CD25+T细胞或CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例却显著低于正常人,但与SLEDAI之间无显著相关性,仅在活动性SLE患者中有肾损组的CD8+CD28- T细胞中CTLA-4+细胞的比例显著低于非肾损组;而且经刺激培养后SLE患者PBMC上清中游离的CTLA-4水平也显著低于正常人。结论：SLE患者新鲜分离的T细胞（CD4+及CD8+）中CTLA-4表达异常增高,反映T细胞异常活化和疾病活动;另一方面,SLE患者T细胞又存在CTLA-4诱导性表达障碍,可能与SLE T细胞体外再活化的能力减弱有关。     

Changes and significances of dendritic cells in peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血浆细胞树突状细胞(PDC)和髓样树突状细胞的(MDC)的比例以及细胞因子干扰素α(IFN-α)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化及意义.方法 选择38例SLE患者(SLE组)、15例健康志愿者(正常对照组).采用流式细胞术检测PDC、MDC占淋巴细胞的比例,ELISA法检测外周血IFN-α、IL-6、TNF-α水平.结果 ① SLE组外周血PDC、MDC比例均显著低于正常对照组.②疾病活动期SLE患者外周血PDC比例显著低于稳定期患者;SLE蛋白尿组外周血PDC比例显著低于非蛋白尿组患者;抗ds-DNA 阳性组SLE患者外周血PDC比例显著低于抗ds-DNA阴性组.③ PDC比例与血沉、SLE疾病活动指数评分呈负相关,与C3呈正相关.④ SLE组与正常对照组相比IFN-α、TNF-α、IL-6水平均增高.结论 SLE患者外周血PDC、MDC比例显著降低,且PDC水平与SLE疾病活动及狼疮肾损害有关.     

系统性红斑狼疮患者外周血树突状细胞的变化及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血浆细胞树突状细胞(PDC)和髓样树突状细胞的(MDC)的比例以及细胞因子干扰素α(IFN-α)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化及意义。方法选择38例SLE患者(SLE组)、15例健康志愿者(正常对照组)。采用流式细胞术检测PDC、MDC占淋巴细胞的比例,ELISA法检测外周血IFN-α、IL-6、TNF-α水平。结果①SLE组外周血PDC、MDC比例均显著低于正常对照组。②疾病活动期SLE患者外周血PDC比例显著低于稳定期患者;SLE蛋白尿组外周血PDC比例显著低于非蛋白尿组患者;抗ds-DNA阳性组SLE患者外周血PDC比例显著低于抗ds-DNA阴性组。③PDC比例与血沉、SLE疾病活动指数评分呈负相关,与C3呈正相关。④SLE组与正常对照组相比IFN-α、TNF-α、IL-6水平均增高。结论 SLE患者外周血PDC、MDC比例显著降低,且PDC水平与SLE疾病活动及狼疮肾损害有关。     

The Gene Expression Patterns of Peripheral Blood Mononuclear Cells in Patients with Systemic Lupus Erythematosus

This study examined the gene expression patterns of peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) in patients with systemic lupus erythematosus(SLE) by using serial analysis of gene ex-pression(SAGE) technology.Following the construction of serial analysis of gene expression(SAGE) library of PBMCs collected from 3 cases of familial SLE patients,a large scale of tag sequencing was performed.The data extracted from sequencing files was analyzed with SAGE 2000 V 4.5 software.The top 30 expressed genes of SLE patients were uploaded to http://david.niaid.nih.gov/david/ease.htm and the functional classification of genes was obtained.The differences among those expressed gene were analyzed by Chi-square tests.The results showed that a total of 1286 unique SAGE tags were identified from 1814 individual SAGE tags.Among the 1286 unique tags,86.8% had single copy,and only 0.2% tags had more than 20 copies.And 68.4% of the tags matched known expressed sequences,41.1% of which matched more than one known expressed sequence.About 31.6% of the tags had no match and could represent potentially novel genes.Ap-proximately one third of the top 30 genes were ribosomal protein,and the rest were genes related to metabolism or with unknown functions.Eight tags were found to express differentially in SAGE li-brary of SLE patients.This study draws a profile of gene expression patterns of PBMCs in patients with SLE.Comparison of SAGE database from PBMCs between normal individuals and SLE pa-tients will help us to better understand the pathogenesis of SLE.     

系统性红斑狼疮患者外周血CXCL9表达水平及其临床意义

目的：检测系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中CXCL9表达水平并探讨其临床意义。方法采用ELISA法检测20例SLE患者（试验组）和20例健康对照者（对照组）外周血CXCL9表达水平。比较CXCL9在两组血清中表达的差异,分析CXCL9与SLE患者年龄、病程及SLE病情活动指数（SLEDAI）的相关性。结果试验组和对照组外周血CXCL9水平分别为（1549．14±362．74）pg／L和（602．54±83．70）pg／L。经统计学分析,试验组外周血CXCL9水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．01）;试验组外周血CXCL9水平与SLEDAI评分呈正相关（r＝0．892,P＜0．01）。结论 CXCL9可能参与了SLE的发病过程。     

系统性红斑狼疮患者外周血P-选择素的表达及意义

目的 探讨P -选择素在系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血中的表达及意义。方法 用流式细胞仪检测43例SLE患者以及20例健康对照者的外周血P -选择素水平。观察P-选择素与SLE疾病活动及肾脏损害的关系。结果 43例SLE患者外周血P -选择素水平高于正常对照组(P<0.05)。29例活动期与14例稳定期SLE患者P -选择素水平无差别(P>0.05)。18例伴肾脏损害SLE患者外周血P -选择素水平高于无肾脏损害患者(P<0.05)。并且43例SLE患者外周血P -选择素水平与血沉、ANA滴度、C3和SLE病情活动指数评分无关(P>0.05) ,而与24h尿蛋白定量呈正相关(r=0.411,P<0.05)。 结论 P -选择素可能参与SLE发病 ,外周血P -选择素水平可作为监测SLE肾脏损害的一个指标。     

Abnormal expression of CD43 in patients with systemic lupus erythematosus and its clinical significance

Background  Previous studies indicate that CD43 plays a role in regulating the adhesion of lymphocytes, cell mutation and activation, however, little is known about its effect on systemic lupus erythematousus (SLE). This study was designed to explore the clinical significance of CD43 in SLE patients.

Methods  We used microarray and real-time PCR to detect the mRNA and protein expression of magnetic bead sorted T cells and B cells from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of SLE patients, and analyzed the relationship between CD43 and the clinical indexes.

Results  Both microarray and real-time PCR results showed that CD43 mRNA was significantly decreased in PBMCs of SLE patients compared with healthy controls (P <0.001). There were no significant differences between lupus nephritis and non-lupus nephritis patients, and neuropsychiatric and non-neuropsychiatric patients. CD43 mRNA expression was significantly reduced in T cells but not in B-cells in SLE patients compared to healthy controls (P <0.01). Compared with healthy controls, the percentage of CD43⁺ cells in the PBMCs of SLE was significantly decreased (P=0.004), and the CD43 fluorescence intensity in CD3⁺/CD43⁺ cells and CD19⁺/CD43⁺ cells was also significantly weaker than in healthy controls (P=0.039 and 0.003). There was no significant difference in the percentage of CD3⁺/CD43⁺ cells, CD19⁺/CD43⁺ cells between the two groups. The CD43 fluorescence intensity in CD3⁺/CD43⁺ cells was inversely correlated with the levels of IgG and IgM (r= –0.8 and –0.6).

Conclusions  Compared to healthy controls, both CD43 mRNA and protein expressions were reduced in T cells from patients with SLE, and were inversely correlated with IgG.

     

系统性红斑狼疮患者静脉血BCMA和CD138+浆细胞的研究

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者和健康者静脉血B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)表达和CD138+浆细胞数量的差异.方法 将40例SLE患者血液标本作为SLE组,30例健康人血液标本作为对照组,采用荧光定量实时聚合酶链反应及酶联免疫吸附测定(ELISA)技术检测BCMA的表达,流式细胞技术检测静脉血CD138+浆细胞数量.结果 SLE组患者静脉血中BCMA mRNA水平、蛋白含量以及CD138+浆细胞的数量明显高于对照组(P<0.05).结论 SLE患者中浆细胞数量的增多可能与BCMA高表达相关.