氯硝柳胺对钉螺酚氧化酶活性的影响

目的  探讨氯硝柳胺对钉螺体内酚氧化酶活性的影响。方法  利用酶生物化学技术，以邻 苯二酚为底物，测定并比较经0.1、0.5 mg/L和1．O mg/L的氯硝柳胺浸泡O、12、24、48 h后的钉螺 体内酚氧化酶的活性，并设无氯清水浸泡作为对照组。结果经O.l、0.5 mg/L和1．O mg/L的氯硝 柳胺浸泡o、12、24、48 h后的钉螺体内酚氧化酶的活性分别为181. 60±4.39、150.  43±3.52、102. 07 ±2. 12、73. 77±1.98 U/g,178. 17±2.37、128.  13±2.54、86.5±1.35、48. 63±2.32 U/g和181. 60 ±2. 09、105. 07±3.89、66. 07±2.54，33. 53±2.34 U/g。清水对照组浸泡O、12、24、48 h后的钉螺体 内酚氧化酶的活性分别为183. 47±3.25、182. 07±2.27、182.  63±4.91 U/g和182.  10±2.95 U/g。 经统计学分析，清水对照组各时间段及各组Oh间比较，差异均无统计学意义(P均>0.05)。各组分 别与同时间段清水对照组比较以及各组不同时间段与本组O h活性间比较，差异均有统计学意义 (P均<0.05)。结论氯硝柳胺杀灭钉螺的作用机制之一可能与降低钉螺体内酚氧化酶活性有关。     

钉螺不同季节及不同螺龄酚氧化酶活力研究

目的对钉螺不同季节及不同螺龄酚氧化酶活力进行研究。方法将钉螺分为不同季节组及成、幼螺组。钉螺去壳,取软体组织通过匀浆、离心分别获取粗制酶液,以邻苯二酚为底物用比色法测定各组酶活力,结果进行方差分析。结果不同季节组(春季、夏季、秋季、冬季)钉螺体内酚氧化酶活力差异明显(P0.01),分别为383.32±3.09、271.43±4.16、351.34±2.89、237.37±5.05(U/g)。成、幼螺体内酚氧化酶活力差异明显(P0.01),分别为271.43±4.16、473.31±6.13(U/g)。结论钉螺酚氧化酶活力在不同季节及不同螺龄均有差异。     

EDTA与金属离子对钉螺酚氧化酶活性的影响

目的探讨EDTA与金属离子对钉螺酚氧化酶活性的影响。方法将钉螺软体匀浆、离心获取粗制酶液,再经盐析、透析及凝胶过滤层析得到部分纯化的酚氧化酶制剂。以在测活系统中分别加入不同浓度的EDTA、NaCl、KCl、Na2SO4、K2SO4、CuSO4、CaSO4、ZnSO4及MgSO4,以邻苯二酚为底物测定PO活性,计算相对活力。结果Na 和K 对钉螺酚氧化酶活性既无抑制作用也无增强效应;各浓度的EDTA对钉螺酚氧化酶活性均有明显抑制作用;Zn2 对该酶活性亦有抑制作用,但较EDTA弱;Mg2 和Ca2 有增强酶活性作用,低浓度Cu2 可提高酶活性,高浓度Cu2 则可降低酶活性,其IC50为0.57 mmol/L。结论EDTA及多种金属离子均可影响钉螺酚氧化酶活性,为研发以该酶为靶标的新型灭螺剂提供了理论基础。     

湖北钉螺酚氧化酶组织化学定位进一步研究

目的观察酚氧化酶（PO）在日本血吸虫中间宿主湖北钉螺体内的组织学分布。方法湖北钉螺成螺采自芜湖江滩,解剖后取无损伤软体组织整体,用冰冻切片定位法作连续切片,置于含25mmol／L邻苯二酚的磷酸盐缓冲液（pH6．8）中,温箱37℃孵育30rain后系统观察酚氧化酶与底物反应后的产物在螺体内的分布情况。结果光学显微镜下显示在钉螺体内的肝脏、外套膜、头足部、触角、腮叶等处都出现酶组织化学反应的黑色阳性颗粒。结论钉螺体内存在酚氧化酶,其分布于钉螺的肝脏、外套膜、头足部、触角、腮叶等组织。     

湖北钉螺体内酚氧化酶及其组织学定位

目的 了解湖北钉螺体内是否存在酚氧化酶（P0），并观察其在钉螺体内分布情况。方法 酶组织化学染色法：湖北钉螺成螺（雄螺和雌螺）采自芜湖江滩，解剖后，将软体组织置含25mmol／L邻苯二酚的磷酸盐缓冲液（pH6．8）中，37℃孵育，体视显微镜下观察PO与底物反应后的产物在螺体内的分布情况。荧光组织化学染色法：解剖后的湖北钉螺成螺软体组织置含25mmol／L邻苯二酚的磷酸盐缓冲液（pH6．8）中，37℃孵育30min，吸去邻苯二酚，加入0．05％戊巴比妥钠溶液，5min后置荧光显微镜下观察PO催化产生的荧光物质在螺体内的分布情况。结果 酶组织化学染色法显示钉螺的肝脏初为淡浅灰色，5min时呈现浅灰色，15min时呈现灰色，30min时呈现黑色。荧光组织化学染色法显示钉螺的肝脏表面呈现荧光反应。结论 湖北钉螺体内存在PO，雌、雄螺体内的PO均定位于肝脏。     

钉螺酚氧化酶活性的初步研究

目的初步探讨日本血吸虫惟一中间宿主钉螺体内酚氧化酶的生化活性。方法解剖健康成年钉螺,剔除外壳,将其分为雄性组、雌性组及雌雄混合组(雌雄重量相等),匀浆离心取上清为待检酶液。以邻苯二酚为底物通过比色法检测钉螺酚化酶在pH6.8、28℃条件下三组酶活力并予比较;用同法分别测定三组在不同pH(恒温28℃)及不同温度(pH6.8)下的酚氧化酶活力,绘制变化曲线,确定该酶活性最适pH和最适温度。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法和Arrhenius公式求得各组酶活化能并以比较。结果在pH6.8、28℃条件下,雄性组、雌性组及混合组的酶活力分别为188.2±5.7、183.8±5.5及185.2±6.7(U/g),经方差分析,三组酶活力无显著差异。三组酚氧化酶的活性在不同pH及温度下的变化趋势无显著差异;pH为6.0、温度为40℃时,三组的酚氧化酶活性均最高。三组活化能分别为32.6±5.1、31.7±2.9及32.1±3.3(kJ/mol),经方差分析亦无显著差异。结论钉螺酚氧化酶活性及活化能均无性别差异,其催化邻苯二酚的最适pH及最适温度分别为6.0和40℃。     

湖北钉螺与中华圆田螺体内酚氧化酶活力比较

目的 比较湖北钉螺及中华圆田螺体内酚氧化酶活力差异。方法 以螺软体组织制备粗制酶液,以邻苯二酚为底物,测定肋壳钉螺、光壳钉螺和中华圆田螺体内酚氧化酶活力。结果 光壳钉螺、肋壳钉螺、中华圆田螺体内酚氧化酶活力值分别为（25.72 ± 2.27）、（14.56 ± 1.24） U/mL和（13.72 ± 1.06） U/mL,光壳钉螺体内酚氧化酶活力值高于肋壳钉螺（q = 21.46,P < 0.05）及中华圆田螺（q = 12.00,P < 0.05）,中华圆田螺与肋壳钉螺体内酚氧化酶活力值差异无统计学意义（q = 1.62,P > 0.05）。结论 湖北钉螺及中华圆田螺体内酚氧化酶活力存在差异,可能与螺的生活环境有关。     

经氯硝柳胺浸泡后湖北钉螺肝脏超微结构变化

本文用透射电镜观察了湖北钉螺肝脏内颗粒细胞和棒状细胞的超微结构。经氯硝柳胺浸泡后，钉螺肝脏的超微结构发生改变，颗粒细胞和棒状细胞内的分泌颗粒显著减少，次级溶酶体增多，粗面内质网和线粒体由变性至坏死，这为阐明氯硝柳胺的灭螺机制提供了有用的资料。     

经氯硝柳胺浸泡后湖北钉螺脑神经节的超微结构变化

用透射电镜进一步观察了湖北钉螺脑神经节的纤维鞘、神经节胞体区和神经纤维网的超微结构，并且在神经纤维网部位首次发现了两个典型突触。经氯硝柳胺浸泡后，钉螺脑神经节的超微结构发生改变，神经纤维、神经胶质细胞和神经细胞内的线粒体由变性至坏死，神经细胞体内的糖原含量显著减少，神经纤维网也发生变性坏死，这为阐明氯硝柳胺的灭螺机制提供了有用的资料。     

中国大陆钉螺对氯硝柳胺敏感性的测定

目的　了解中国大陆钉螺对氯硝柳胺的敏感性。　方法　运用分层随机抽样方法 ,兼顾我国钉螺孳生地类型 ,抽取了 10省 (市 )、33个县 37个点的钉螺 ,氯硝柳胺用脱氯自来水配成有效浓度为 1.0 0 0 0、 0 .5 0 0 0、0 .2 5 0 0、0 .12 5 0、0 .0 6 2 5、0 .0 313和 0 .0 15 7mg/L的药液 ,在 2 5℃室温下分别进行浸泡杀螺实验。　 结果　 1.0mg/L氯硝柳胺浸泡钉螺 2 4h死亡率达 10 0 % ,各点钉螺的LC50 为 0 .0 32 0～ 0 .16 89mg/L ,均值为 0 .0 92 0mg/L。 0 .5mg/L氯硝柳胺浸泡钉螺 48h死亡率达 10 0 % ,各地区钉螺的LC50 为 0 .0 2 99～ 0 .1114mg/L ,均值为 0 .0 6 2 7mg/L。不同点间钉螺对氯硝柳胺敏感性差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　不同点间钉螺对氯硝柳胺敏感性存在差异 ,但 1.0mg/L氯硝柳胺可有效浸杀我国所有地区的钉螺。     

湖北钉螺酚氧化酶的部分纯化及酶学特征

目的制备并纯化钉螺酚氧化酶,探讨该酶最适pH、最适温度及其底物专一性等特征。方法利用匀浆、离心等方法制备粗制酚氧化酶酶液,用盐析、凝胶层析进行酶液纯化;在不同pH、不同温度下测定该酶比活力,寻求最适pH、最适温度;根据测定不同底物(邻苯二酚、L-多巴、焦没食子酸)对该酶的酶促反应米氏常数(Km),判定其底物专一性。结果经纯化后酶活力提高了13.62倍。该酶对邻苯二酚、L-多巴和焦性没食子酸的Km值分别为5.66±0.84mmol/L、4.72±0.45mmol/L和20.64±2.36mmol/L(前两者比较P>0.05,分别与后者比较P均小于0.05)。酚氧化酶在pH6.0、40℃时活性最高。结论通过盐析、凝胶过滤层析等方法纯化可使酶活性明显提高;钉螺酚氧化酶对邻苯二酚的亲和力近似于L-多巴,两者均高于对焦性没食子酸的亲和力。     

氯硝柳胺乙醇胺盐粉粒剂杀钉螺效果

目的 目的 评价氯硝柳胺乙醇胺盐粉粒剂杀钉螺效果。方法 方法 分别在实验室和滩涂湿地采用撒 （喷） 施法进行4% 氯硝柳胺乙醇胺盐粉粒剂杀钉螺试验, 同时以4%氯硝柳胺乙醇盐粉剂作对照, 用单盲法进行质量控制。实验室试验比 较两种杀螺剂对钉螺的校正死亡率和半数致死浓度 （LC50 ）; 洲滩湿地现场试验比较钉螺校正死亡率和活螺密度下降 率。结果 结果 实验室施药后1 d粉粒剂4.0 g/m2 钉螺死亡率为96.67%, 粉剂2.0 g/m2 钉螺死亡率即达100%, 各剂量组钉螺死 亡率粉剂显著高于粉粒剂 （t1 d = 3.60, P < 0.01）; 施药后1、 3、 7 d对钉螺的LC50值亦显示粉剂优于粉粒剂。现场试验施药 后3、 7、 15、 30 d粉粒剂组钉螺校正死亡率分别为91.71%、 92.91%、 90.57%和85.33%, 粉剂组分别为71.09%、 90.11%、 90.13%和85.26%, 经统计现场施药后3、 7 d 粉粒剂杀螺效果优于粉剂 （c2 3 d = 731.57, c2 7 d = 25.90, P均< 0.01）; 施药后15、 30 d则无显著差异 （c2 15 d = 0.53, c2 30 d = 0.01, P均> 0.05）。结论 结论 4%氯硝柳胺乙醇胺盐粉粒剂既具有粉剂的吸附性, 又具 有颗粒剂的穿透性, 现场机械喷施杀螺效果与粉剂相当, 但药粉漂移仍未有效控制, 尚需进一步研究改进。     

铜和镉离子对湖北钉螺体内保护酶活力的影响

目的探索不同浓度Cu^2+和Cd^2+对湖北钉螺体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活力的影响。方法按照Cu^2+、Cd^2+质量浓度分别设置7个浓度梯度组,每组放入15只钉螺。24 h后解剖去壳,匀浆,取上清液,分别测定各组钉螺体内SOD、CAT和POD活力。结果随着Cu^2+浓度逐渐升高,钉螺体内SOD活力呈先上升后下降的趋势,CAT活力呈下降-上升-下降趋势,POD活力呈先上升后下降的趋势。随Cd^2+浓度逐渐升高,钉螺体内SOD活力呈先上升再下降的趋势,CAT活力呈下降-上升-下降的趋势,POD活力呈下降-上升-下降趋势。结论在相同作用时间下,高浓度Cu^2+和Cd^2+均可使钉螺体内SOD、CAT、POD活力下降。     

杀螺胺乙醇胺盐不同"干"施剂型江滩现场灭螺效果

目的 了解杀螺胺乙醇胺盐不同“干”施剂型江滩现场灭螺效果。方法 选择南京市浦口区有螺江滩为试验现场,分别用杀螺胺乙醇胺盐粉剂、粉粒剂和颗粒剂对有螺环境进行喷粉法灭螺,比较3种杀螺胺乙醇胺盐剂型的现场灭螺效果。结果 杀螺胺乙醇胺盐粉剂、粉粒剂和颗粒剂在江滩现场施药后3、7 d,钉螺死亡率分别为66.67%、67.24%、66.87%和75.36%、79.73%、73.97%,差异均无统计学意义（[χ2] = 0.006、0.895,P均 > 0.05）;施药后15 d,钉螺死亡率分别为86.92%、72.86%、71.43%,差异有统计学意义（[χ2] = 9.709,P < 0.01）,粉剂组钉螺死亡率显著高于粉粒剂组和颗粒剂组。粉剂组钉螺校正死亡率和活螺密度下降率曲线呈稳定上升,而粉粒剂组和颗粒剂组则在15 d时出现下降。结论 杀螺胺乙醇胺盐粉剂在江滩现场喷粉灭螺效果较稳定,不同剂型尚需进一步研究完善。     

丹阳市不同环境药物灭螺效果

目的 目的 评价在有螺江滩、 河道、 渠道连续使用氯硝柳胺乙醇胺盐后的灭螺效果。方法 方法 选择丹阳市后巷镇北魏 江滩、 陵口镇肖梁河、 云阳镇老庙渠道作为研究现场, 采用4%氯硝柳胺乙醇胺盐粉剂50 g/m2 和26%四聚杀螺胺 （2～4） g/m2 实施灭螺。综合利用历史资料和现场调查资料, 评价连续应用灭螺药物后的效果。结果 结果 至2013年, 北魏江滩、 肖梁河、 老庙渠道钉螺面积较首次复现时分别下降了82.80%、 63.14%和70.00%, 钉螺面积与钉螺密度均呈显著正相关 （r = 0.931、 0.975、 0.916, P均＜0.05）; 灭螺后活螺平均密度较首次复现时下降了92.34%、 87.91%和97.66%。灭螺后钉螺校正死亡率 与次年活螺平均密度均呈负相关（r = -0.998、 -0.999、 -0.970）; 活螺密度下降率与次年活螺平均密度均呈负相关 （r = -0.997、 -0.998、 -0.868）。结论 结论 药物灭螺在压缩钉螺面积、 降低钉螺密度、 控制血吸虫病传播等方面效果明显。     

50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿粉剂冬季浸杀钉螺效果观察

目的 在冬季对50%氯硝柳胺乙醇胺盐可湿粉剂（wettable powder of niclosamide ethanolamine salt,WPNES）的浸杀灭螺效果进行观察,以探索冬季开展药物灭螺工作的可行性。方法 于冬季设置室外观察组（-2～10℃）和室内对照组（19～25℃）观察50%WPNES浸杀灭螺效果,2组均包含6个浓度的施药组（按照有效含量从高到低分别为1.000 0、0.500 0、0.250 0、0.125 0、0.062 5、0.031 3 mg/L）和1个脱氯水空白对照组。观察并计算各组24、48和72 h的钉螺死亡率和半数致死浓度（LC50）。结果 室外观察组各浓度浸杀24、48和72 h钉螺死亡率均低于室内对照组,但随着时间延长,两组LC50差距逐渐缩小。1.000 0 mg/L50%WPNES浸杀72 h时,室外观察组钉螺死亡率达到100.00%,LC50为0.153 3 mg/L,符合中华人民共和国农业行业标准《农药登记用杀钉螺剂药效试验方法和评价》（NY/T 1617—2008）要求。结论 冬季低温条件下50%WPNES浸杀灭螺具有可行性,但其现场条...     

氯硝柳胺悬浮剂对钉螺影响的酶组织化学观察

目的观察氯硝柳胺悬浮剂对钉螺体内酶活性的影响,以研究其杀螺机制。方法实验钉螺采集于江苏省镇江市丹徒区有螺江滩,分为2组:用药组钉螺采用25%氯硝柳胺悬浮剂,按2.0g/(L·m2)进行喷洒,对照组钉螺采用蒸馏水喷洒。钉螺去壳后分离出软体,置冰冻切片机切片,按常规进行细胞色素C氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、胆碱酯酶(CHE)和一氧化氮合酶(NOS)的酶组织化学染色、制片,显微镜下观察着色反应结果,采用显微图像分析系统定量测定并比较灰度值。结果用药组钉螺CCO、LDH、SDH、CHE和NOS定位口囊、肌纤、表膜、神经节、肝脏、咽管等部位的酶活性明显低于对照组。结论氯硝柳胺影响钉螺体内神经介质传递和能量供应障碍,导致钉螺的各项生理功能紊乱和丧失,是引起钉螺死亡的原因之一。     

丹阳市不同环境药物灭螺效果

目的 目的 评价在有螺江滩、 河道、 渠道连续使用氯硝柳胺乙醇胺盐后的灭螺效果。方法 方法 选择丹阳市后巷镇北魏 江滩、 陵口镇肖梁河、 云阳镇老庙渠道作为研究现场, 采用4%氯硝柳胺乙醇胺盐粉剂50 g/m2 和26%四聚杀螺胺 （2～4） g/m2 实施灭螺。综合利用历史资料和现场调查资料, 评价连续应用灭螺药物后的效果。结果 结果 至2013年, 北魏江滩、 肖梁河、 老庙渠道钉螺面积较首次复现时分别下降了82.80%、 63.14%和70.00%, 钉螺面积与钉螺密度均呈显著正相关 （r = 0.931、 0.975、 0.916, P均＜0.05）; 灭螺后活螺平均密度较首次复现时下降了92.34%、 87.91%和97.66%。灭螺后钉螺校正死亡率 与次年活螺平均密度均呈负相关（r = -0.998、 -0.999、 -0.970）; 活螺密度下降率与次年活螺平均密度均呈负相关 （r = -0.997、 -0.998、 -0.868）。结论 结论 药物灭螺在压缩钉螺面积、 降低钉螺密度、 控制血吸虫病传播等方面效果明显。     

湖北钉螺不同季节和螺龄溶菌酶活力研究

目的 目的 探索湖北钉螺 （Oncomelania hupensis） 体内溶菌酶活力与季节变化的关系, 及不同螺龄钉螺体内溶菌酶活 力差异。方法 方法 采用钉螺软体组织匀浆, Tris?HCl?TritonX?114 缓冲溶液抽提, 经超滤浓缩获得粗制溶菌酶液, BCA法测定 蛋白质含量, 浊度法测定溶菌酶活力。分析不同季节、 不同螺龄钉螺体内溶菌酶活力差异。结果 结果 春、 夏、 秋、 冬季钉螺溶 菌酶活力分别为 （71.33±4.16）、（93.67±7.10）、（150.33±10.01）、（358±35.38）U/mg, 冬季活力最高, 差异有统计学意义 （F = 144.455, P ＜ 0.01）, 成螺和幼螺溶菌酶活力分别为 （93.67±7.10）U/mg和 （69.33±5.03）U/mg, 差异有统计学意义 （t = 4.845, P＜0.05）。结论 结论 湖北钉螺成螺体内溶菌酶活力随季节变化而改变, 成螺溶菌酶活力高于幼螺。