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1.
目的 探究细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1, CDK1)和细胞周期蛋白B1(cell cycle-related proteins cyclin B1, CCNB1)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法 采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测患者HCC肿瘤组织和癌旁正常组织中CDK1与CCNB1的相对表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线评估CDK1和CCNB1以及两者并联模型在HCC中的诊断价值以及和病理分期的相关性。随访5年,评估患者CDK1和CCNB1表达水平对患者无进展生存期(progression-free survival, PFS)和总生存期(overall survival, OS)的影响。结果 CDK1、CCNB1在HCC组织中表达显著上调,二者间呈正相关(r=0.769,P<0.01),且均与HCC病理分期显著正相关(r=0.828、0.726,P<0.01)。CDK1和CCNB1诊断HCC的曲线下面积(AUC)分别为0.817和0.... 相似文献
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目的 探讨细胞周期蛋白B1(CCNB1)和自噬标记蛋白Beclin1在宫颈癌组织中的表达及意义。方法 选取2018年1月—2021年6月在台州市第一人民医院妇科住院的60例宫颈癌患者的标本,采用实时荧光定量PCR(RTPCR)法检测60例宫颈癌组织及60例癌旁组织CCNB1 mRNA和Beclin1 mRNA,采用免疫组织化学(SP)法检测宫颈癌组织及癌旁组织中的CCNB1和Beclin1,用SPSS 22.0软件对结果进行统计学分析。结果 与癌旁组织相比较,宫颈癌组织中CCNB1 mRNA表达水平升高(P<0.05),Beclin1 mRNA表达水平降低(P<0.05)。宫颈癌组织CCNB1阳性率高于癌旁组织(P<0.05),Beclin1阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。分化程度越低、有淋巴结转移、TNM分期越高、浸润深度越深的CCNB1表达越高(P<0.05),Beclin1表达越低(P<0.05)。结论 CCNB1在宫颈癌组织中表达上调,Beclin1在宫颈癌组织中表达下调,与宫颈癌的发生发展有关。 相似文献
3.
目的 探讨肝细胞癌变过程中cyclinB1的异常表达及其意义.方法 用0.05%的2-乙酰氨基芴(2-AAF)诱导Wistar大鼠建立肝癌动物模型,应用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肝脏在癌变过程中cyclinB1的蛋白和mRNA表达.结果 正常组8只中cyctinB1蛋白和mRNA表达均正常,肝硬化组16只中有12只cyclinB1蛋白和mRNA过表达,肝癌组11例中有4只cyclinB1蛋白和mRNA过表达.结论 在3组中cyclinB1蛋白和mRNA表达一致,差异无统计学意义.肝硬化组和肝癌组的cyclinB1异常表达均高于正常组,而且肝硬化组的cyclinB1异常表达高于肝癌组. 相似文献
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目的 探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞(HELF)中AP-1/细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)通路在细胞周期改变中的作用.方法 建立稳定转染空载体PXJ的HELF系(HELF-PXJ)及空载体PXJ与反义cyclin D1质粒或反义细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4)质粒分别共转染的HELF系(简称anti-D1和anti-K4),将HELF-PXJ、anti-D1和anti-K4细胞分为对照组和石英刺激组(共6组),各对照组不加任何处理,石英刺激组用200 μg/ml石英处理细胞24h.检测AP-1对石英诱导的cyclin D1、CDK和E2F-4表达改变的影响.AP-1的化学抑制剂姜黄素(curcumin) 20μmol/L预处理细胞1h后,200 μg/ml石英刺激24 h,将HELF分为4组,分别为HELF对照组、HELF+石英组、HELF+curcumin对照组、HELF+curcumin+石英组.用免疫印迹(Western blot)法和免疫荧光法检测cyclin D1、CDK4和E2F-1/4蛋白表达;运用反义RNA技术证明通路的上下游关系;用流式细胞术检测细胞周期变化.结果 200 μg/ml石英处理HELF细胞,cyclin D1和CDK4蛋白表达升高,E2F-4蛋白表达明显降低,而E2F-1蛋白的表达没有明显改变.HELF-PXJ+石英组G1期细胞所占比例下降,S期细胞所占比例升高,与HELF-PXJ对照组的差异有统计学意义(P<0.05).抑制cyclin D1或CDK4表达后,与对照组比较,anti-D1+石英组和anti-K4+石英组G1期细胞和S期细胞百分比无明显变化.抑制AP-1活性,与HELF+石英组比较,HELF+curcumin+石英组cyclin D1和CDK表达均减低,E2F-4表达增多.结论200μg/ml石英可诱导cyclin D1和CDK4蛋白表达增高,E2F-4蛋白表达减少,并通过AP-1/cyclin D1通路诱导细胞周期改变. 相似文献
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目的:对制备的LETMD1-C末端单克隆抗体进行免疫特性鉴定,并将其应用于肝细胞癌的临床诊断研究。方法:使用ELISA,细胞免疫荧光及Western blot等免疫学技术对所制备的单克隆抗体进行免疫特性鉴定;以鉴定的抗体为工具,检测肝癌组织中LETMD1编码产物表达情况。结果:免疫学鉴定结果验证了制备的单克隆抗体具有较高的使用效价和良好的特异性。检测肝组织标本中LETMD1编码产物表达情况,发现其在正常组织中不表达,在肝癌组织表达明显高于癌旁组织。结论:制备了抗-LETMD1-C末端的单克隆抗体,经鉴定具有较高的效价和良好的特异性,可以应用于LETMD1癌基因的功能研究和肝细胞癌的临床诊断研究,为深入研究LETMD1蛋白的生物学功能和建立新的肝细胞癌早期诊断方法奠定了可靠基础。 相似文献
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目的 观察人肝细胞(L02)氧化应激模型中热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, Hsp90α)和相关底物蛋白细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的蛋白水平变化,以及Hsp90α表达下调后对Cyclin B1表达的影响,明确Hsp90α对Cyclin B1功能的影响,为氧化应激相关的肝脏疾病防治提供新思路。方法 以200μM H2O2建立氧化应激L02细胞损伤模型;通过CCK-8法观察氧化应激对细胞存活的影响,比色法测定细胞内谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测氧化应激对细胞内Hsp90α及Cyclin B1蛋白水平的影响。结果 随着氧化应激刺激时间的延长,GSH含量逐渐减少,抗氧化能力不断降低。从6 h开始,胞内GSH水平较对照组明显下降(均P<0.05);H2O2对L02细胞增殖的抑制程度增强;氧化应激后细胞周期检测点G2/M期阻滞明显;氧化应激导致胞内Hsp90α蛋白水平先增加后降低,在刺激24 h时Hsp9... 相似文献
8.
细胞周期蛋白(Cyclins)是细胞周期调节的核心分子,与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CKIs)等组成细胞周期调控网络系统。细胞周期调控机制的异常与肿瘤的发生发展密切相关,细胞周期蛋白的异常表达与CDKs结合形成的复合物,将导致细胞周期紊乱、细胞增殖失控,最终促使多种细胞癌变。Cyclins在多种恶性肿瘤中高表达,并在肿瘤的治疗中发挥重要作用。 相似文献
9.
目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在肝细胞癌(HCC)中表达的意义。方法:收集HCC手术切除标本42例,采用免疫组化法检测MMP-9及TIMP-1的表达。结果:正常对照组中MMP-9、TIMP-1的表达均为阴性。MMP-9及TIMP-1在HCC中表达的阳性率分别为73.8%和69.0%,两者的阳性表达与患者年龄、性别、AFP是否阳性、HbsAg是否阳性、肿瘤大小、病理分级无关(P〉0.05)。有癌栓组MMP-9阳性率为100%,无癌栓组阳性率为63.3%,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。包膜完整组MMP-9阳性率为33.3%,包膜不完整组阳性率为84.8%,组间差异有统计学意义(P〈0.01)。TIMP-1在以上2组间差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论:MMP-9和TIMP-1的表达与HCC关系密切,检测HCC中两者的表达,可作为判断HCC侵润转移的指标。 相似文献
10.
目的探讨PTEN基因与肝细胞癌发生、发展,侵袭转移的关系及其临床病理意义。方法肝细胞癌手术切除标本46例,采用免疫组化SABC法染色检测。结果肝细胞癌患者PTEN基因阳性率为65.2%(30/46),癌旁组织中阳性率为90.9%(30/33),两者表达与患者年龄,性别,肿瘤大小及AFP,HBsAg是否阳性无关,与肝细胞癌病理分级,包膜及癌栓的有无关系密切。其中高分化组(I+Ⅱ级)阳性率为80%(20/25),低分化组(Ⅲ+Ⅳ级)阳性率为47.6%(10/21)(P〈0.05),包膜完整者阳性率为88.2%(15/17),无或包膜不完整者阳性率为51.7%(15/29),有癌栓者38.4%(5/13),无癌栓者75.8%(25/33)(P〈0.05)。结论PTEN基因在肝细胞癌发生、发展、侵袭转移过程中起抑制作用。 相似文献
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《中国妇幼保健》2017,(16)
目的探讨Yes相关蛋白(YAP)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)在宫颈癌前病变与宫颈鳞癌中的表达。方法收集100例患者宫颈病变组织,其中宫颈鳞癌35例、CIN48例、正常宫颈组织17例,以免疫组织化学法检测以上组织标本中YAP、Cyclin D1的表达。结果宫颈鳞癌组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和正常宫颈组织中YAP阳性表达率分别为65.71%、41.67%、11.76%,Cyclin D1阳性表达率分别为60.00%、33.33%、0.00%,阳性表达率在不同组织中比较差异有统计学意义(P0.05),YAP、Cyclin D1阳性表达率宫颈鳞癌组织均高于CIN组织及正常宫颈组织(P0.05),CIN组织高于正常宫颈组织(P0.05);宫颈鳞癌临床分期III-IVYAP、Cyclin D1阳性表达率为80.00%、75.00%高于Ⅰ~Ⅱ期者46.67%、40.00%(P0.05),有淋巴结转移者YAP、Cyclin D1阳性表达率为78.26%、73.91%高于Ⅰ~Ⅱ期者41.67%、33.33%(P0.05);CINⅢ期者YAP、Cyclin D1阳性表达率为55.56%、48.15%高于Ⅱ期者23.81%、14.29%(P0.05)。结论 YAP、Cyclin D1在宫颈癌前病变与宫颈鳞癌中的表达均有上调,并与病情发生及发展密切相关。 相似文献
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目的研究Notct/1、P21^WAF1/Cip1及活化caspase3在肝细胞癌中表达的相关性。方法利用免疫组织化学检测60例肝细胞癌(HCC)和15例正常肝组织中Notchl、P21^WAF1/Cip1及活化caspase3的表达。结果HCA2中Notch1、P21^WAF1/Cip1及活化caspase3的阳性率和阳性表达强度显著低于正常肝组织(P〈0.01);Notch1、P21^WAF1/Cip1及活化caspase3的表达强度与HCC分级和肿瘤大小密切相关,肿瘤分化愈差和肿瘤直径愈大,3种蛋白表达愈弱(P〈0.01);在HCC中,P21^WAF1/Cip1和活化caspase3的表达强度与Notch1表达强度呈显著正相关(r分别为0.76和0.71)。结论提示Notch1信号通路可能是通过影响细胞周期和细胞凋亡在HCA2发生发展过程中发挥负性调控作用。 相似文献
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目的 探讨MMP-9在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床病理意义.方法 应用EnVisionTM二步染色免疫组化法,检测67例HCC手术切除的新鲜标本和16例正常肝组织中MMP-9的表达情况.利用鼠抗人MMP-9单克隆抗体对组织切片进行染色.应用x2检验,t检验和秩和检验,对MMP-9在HCC中的表达及其与临床病理特征的关系进行研究.结果 MMP-9在HCC组织中的阳性率明显高于正常肝组织(58.21% vs 12.5%,x2=10.80,P<0.01),MMP-9在有转移的HCC组织中表达的平均秩明显高于无转移的HCC组织中表达的平均秩(40.18 vs 26.38,P<0.01).结论MMP-9在HCC组织中表达明显升高,有转移的HCC组织中MMP-9表达较无转移的HCC中明显升高,可能与它破坏靠近HCC细胞表面的细胞外基质和基底膜有关,进而促进HCC的侵袭与转移. 相似文献
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目的 探讨DNA依赖性蛋白激酶(DNA dependent protein kinase,DNA-PK)在石英诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中细胞周期蛋白E(CyclinE)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)蛋白表达及细胞周期改变中的作用.方法 200μg/ml石英处理阴性对照细胞(H-NC)及采用RNAi技术分别抑制DNA-PKcs和Ku80蛋白表达的细胞系(H-PKcs和H-Ku80)0、3、6、12、24 h,采用流式细胞术检测石英刺激24 h不同细胞系的细胞周期变化情况,免疫印迹(Western blot)技术检测不同细胞系各时间点CyclinE、CDK2蛋白的表达水平,并用Image-Pro plus 6.0软件对条带光强度进行半定量分析.结果 石英刺激H-NC,G1期细胞所占比例从83.53%±2.24%下降到69.11%±3.12%;石英刺激H-Ku80,石英诱导的G1期细胞的比例进一步减少,从85.16%±3.73%下降到59.92%±3.31%;石英刺激H-PKcs,G1期细胞比例也显示进一步减少,从75.06%±2.23%下降到58.32%±1.35%,差异均有统计学意义(P<0.05).石英刺激H-NC,CyclinE和CDK2蛋白表达随时间延长有增高趋势,并在12 h达峰值;石英刺激H-Ku80,H-PKcs和CyclinE蛋白表达水平在各时间点均低于H-NC,差异有统计学意义(P<0.05),CDK2蛋白的表达水平变化不明显.结论 DNA-PK参与石英诱导的细胞周期改变,对CyclinE的表达呈正性调节作用.Abstract: Objective To study the roles of DNA dependent protein kinase (DNA-PK)in silicainduced cell cycle changes and expressions of CyclinE and CDK2 in human embryo lung fibroblasts (HELF).Methods The expressions of Ku80 and DNA-PKcs proteins were inhibited by siRNA plasmids, respectively.Flow cytometry was used to detect the distributions of cell cycle and western blot assay was used to determine the expression levels of CyclinE and CDK2 after cells were exposed to 200 μg/ml silica for 0,3,6,12,24 h.Results The proportion of G1 phases in negative control cells decreased from 83.53%±2.24% to 69.11%±3.12%after exposure to silica; the proportion of G1 phases in H-Ku80 and H-PKcs cells exposed to silica decreased from 85.16%±3.73% to 59.92%±3.31% and from 75.06%±2.23% to 58.32%±1.35%, respectively (P<0.05).The exposure to silica resulted in the increasing protein expression levels of CyclinE and CDK2 in negative control cells, and the expression levels of CyclinE were obviously suppressed in H-Ku80 and H-PKcs as compared with control cells. However, the expression level of CDK2 protein did not change significantly.Conclusion DNA-PK might play a role in silica-induced alternations of cell cycle and regulate silica-induced overexpression of CyclinE in human embryo lung fibroblasts. 相似文献
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目的:探讨细胞周期素D1、P16蛋白在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化法(SP法)检测CyclinD1、P16蛋白在52例子宫内膜癌和26例正常子宫内膜中的表达,并对比两者在子宫内膜癌不同的病理分级、肌层浸润、临床分期中的表达差异。结果:CyclinD1基因在子宫内膜癌组织中阳性表达率为55.8%(29/52),显著高于对照组的11.5%(3/26)(P<0.01)。子宫内膜癌CyclinD1阳性表达患者的肿瘤细胞分化程度低且多有肌层浸润。P16蛋白在内膜癌组阳性表达率为57.7%(30/52),显著低于对照组的88.5%(23/26),其在子宫内膜癌不同组织分化程度、不同临床分期及有无淋巴转移组间表达阳性率比较有统计学差异(P<0.05)。内膜癌组CyclinD1与P16协同异常表达率为30.8%,协同正常表达率为32.7%。经等级相关分析,CyclinD1与P16表达未见相关关系。结论:子宫内膜癌组织中P16蛋白和CyclinD1的表达异常,检测结果有助于分析子宫内膜癌的分化程度、转移侵蚀及预后。两者协同异常表达表明肿瘤发生是多因素、多步骤、多阶段、多种癌基因和抑癌基因参与的复杂病理过程。 相似文献
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《现代医院》2017,(5):718-721
目的探讨ELMO1蛋白在肝细胞癌中的表达情况及其对肝癌细胞株迁移能力的影响。方法利用Western blot技术检测ELMO1蛋白在肝癌组织和不同肝癌细胞株中的表达。构建过表达ELMO1的质粒及合成靶向抑制ELMO1表达的siRNA,分别转染至人肝癌细胞株SK-Hep-1中,利用Western blot技术检测ELMO1蛋白的表达及细胞Rac1的活性,用Transwell法检测细胞的侵袭能力。结果 ELMO1在正常肝细胞株LO_2和转移潜能最弱的HepG2中表达最低,在转移潜能最强的SK-HEP-1中表达最高。ELMO1在肝癌组织中的表达均高于癌旁组织。与转染空载体的SK-Hep-1细胞相比,转染ELMO1表达质粒的SK-Hep-1细胞中ELMO1的表达明显上调,细胞Rac1活性明显增强,Transwell穿过膜的细胞明显增多(P<0.05)。与转染阴性对照siRNA的SK-Hep-1细胞相比,转染ELMO1 siRNA的细胞中ELMO1的表达明显下调,细胞Rac1活性明显减弱,Transwell穿过膜的细胞数明显减少(P<0.05)。结论 ELMO1在肝细胞癌中的表达明显升高,促进细胞的迁移。 相似文献
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Objective To study the roles of DNA dependent protein kinase (DNA-PK)in silicainduced cell cycle changes and expressions of CyclinE and CDK2 in human embryo lung fibroblasts (HELF).Methods The expressions of Ku80 and DNA-PKcs proteins were inhibited by siRNA plasmids, respectively.Flow cytometry was used to detect the distributions of cell cycle and western blot assay was used to determine the expression levels of CyclinE and CDK2 after cells were exposed to 200 μg/ml silica for 0,3,6,12,24 h.Results The proportion of G1 phases in negative control cells decreased from 83.53%±2.24% to 69.11%±3.12%after exposure to silica; the proportion of G1 phases in H-Ku80 and H-PKcs cells exposed to silica decreased from 85.16%±3.73% to 59.92%±3.31% and from 75.06%±2.23% to 58.32%±1.35%, respectively (P<0.05).The exposure to silica resulted in the increasing protein expression levels of CyclinE and CDK2 in negative control cells, and the expression levels of CyclinE were obviously suppressed in H-Ku80 and H-PKcs as compared with control cells. However, the expression level of CDK2 protein did not change significantly.Conclusion DNA-PK might play a role in silica-induced alternations of cell cycle and regulate silica-induced overexpression of CyclinE in human embryo lung fibroblasts. 相似文献
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目的 研究上皮钙粘附素 (E -cadherin)在肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)中的表达情况 ,并探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测 4 9例HCC病人手术后的存档石蜡切片组织中E -cadherin的表达情况 ,分别与肿瘤大小、癌灶数目、病理分级、甲胎蛋白、肝硬化、包膜、门脉瘤栓、乙肝表面抗原等临床病理指标对比 ,并分析其表达与术后无瘤生存时间的关系。结果 5 7 14 % ( 2 8/ 4 9)的HCC病例E -cadherin的表达减弱 ,4 2 86% ( 2 1/ 4 9)的病例E -cadherin的表达正常。E -cadherin的表达与肿瘤大小、病理分级有相关性 (P <0 .0 5 ) ,而与癌灶数目、甲胎蛋白、有无肝硬化、包膜情况、癌栓、乙肝表面抗原等无关 (P >0 .0 5 )。E -cadherin正常表达组术后无瘤生存时间 (月 )显著高于表达减弱组 ( 2 0 .3 8± 2 .97vs 10 .4 3± 2 .2 3 ,P <0 .0 5 )。结论 E -cadherin减弱表达可能对HCC浸润转移起促进作用 ;E -cadherin的表达与HCC预后有关 ,可能是反映HCC生物学行为及预后的重要标志物 相似文献
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目的探讨分析MicroRNA-342(miR-342)和FOXP1 mRNA在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR分别检测58例HCC患者的肿瘤和癌旁组织中miR-342及FOXP1 mRNA的表达水平,比较其差异并作相关性分析。结果肿瘤组织中miR-342表达水平明显低于癌旁组织,FOXP1 mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤组织中miR-342与FOXP1 mRNA的表达水平呈负相关(P<0.05)。结论在HCC中,miR-342表达下降,而FOXP1 mRNA表达升高,miR-342可能在HCC发展中发挥抑制作用。 相似文献
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目的检测重型乙型肝炎患者中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达变化,并探讨其相关的临床意义。方法收集2009年6月-2013年6月医院传染科收治的重型乙型肝炎患者82例,另取40例慢性乙型肝炎病毒感染者和40名健康体检者作为对照,根据患者病毒载量分为低病毒载量组(HBV-DNA拷贝数<104/ml,21例)和高病毒载量组(HBV-DNA拷贝数>106/ml,61例);根据预后将患者分为两组存活组52例和死亡组30例;HMGB1表达的测定使用ELISA法。结果对照组、慢性HBV感染组和重型乙型肝炎组HMGB1的表达分别为(12.47±1.84)、(32.65±5.79)和(76.61±8.56)μg/L,各组间差异有统计学意义(P<0.01);低病毒载量组HMGB1的表达显著低于高病毒载量组(P<0.01);存活组与死亡组入院时HMGB1的表达差异无统计学意义,入院后7d时存活组HMGB1表达显著升高(P<0.01),但到14d时又比入院后7d时显著减低(P<0.01),并低于入院时(P<0.01);死亡组HMGB1的表达入院后7d以及14d HMGB1表达呈逐渐持续减低的趋势(P<0.05)。结论重型乙型肝炎出现了HMGB1的异常高表达,动态监测HMGB1表达的变化有利于患者预后的评估。 相似文献