乳制品中三聚氰胺的新型磁性分子印迹聚合物快速萃取法

目的建立磁性分子印迹技术联用高效液相色谱定量检测乳制品中的三聚氰胺。方法制备以氧化石墨烯/多壁碳纳米管修饰的Fe_3O_4(Fe_3O_4-r GO/MWNT)为磁性组分,三聚氰胺为模板分子,多巴胺为功能单体的磁性分子印迹聚合物研究其对三聚氰胺的吸附性能,探讨吸附等温线及分子识别性,并应用于实际样品中分离富集三聚氰胺。结果所制备的磁性分子印迹聚合物具有高吸附容量(56.60 mg/g)及显著的吸附选择性。以其作为新型磁性固相萃取材料,结合高效液相色谱检测,在0.01～0.50 mg/L内线性关系良好,相关系数R~2为0.998 0,检出限为2μg/L。对样品中的三聚氰胺进行分离、纯化和检测,加标回收率为90.0%～112.0%。结论磁性分子印迹聚合物快速萃取法简单快速,可应用于样品中非法添加的三聚氰胺的定量检测。     

纳米金信号放大分子印迹电化学传感器用于雌二醇的检测

目的构建分子印迹聚合物修饰的具有高灵敏度和选择性的电化学传感器,实现对雌二醇(E2)小分子的快速检测,并为农药残留及环境污染物的检测提供依据。方法以对氨基苯硫酚作为印迹聚合功能单体,通过Au-S共价键连接在用于信号放大的纳米金颗粒表面,并利用氢键与模板分子雌二醇连接形成单层膜,最后将上述电极在含有雌二醇和对氨基苯硫酚的溶液中进行电聚合,形成具有大量印迹位点的聚合物膜。用电化学循环伏安法和电化学阻抗谱对修饰电极进行表征。结果在电极表面自组装制备了含E2印迹位点的聚合物膜,用计时电流法测量溶液中E2在1.0×10-8~1.0×10-12mg/ml范围内呈线性(R2=0.9989),最低检测限为1.51×10-12mg/ml,相同条件下制备的6支电极具有良好的重复性(相对标准偏差为2.44%,n=6)。结论纳米金信号放大的分子印迹电化学传感器可以快速灵敏地对雌二醇进行检测。     

莠去津磁性分子印迹材料的制备及在蔬菜检测中的应用

目的建立基于流动注射系统磁性分子印迹技术联用气相色谱法快速测定蔬菜中莠去津的检测方法。方法磁性分子印迹材料以壳聚糖包裹的四氧化三铁(Fe_3O_4-CS)为载体,莠去津为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂制备所得。蔬菜样品经乙酸乙酯提取,自制磁性分子印迹固相萃取柱净化富集,用甲醇洗脱目标化合物随后进入气相色谱仪进行定量测定。结果通过静态吸附实验考察磁性分子印迹材料对莠去津的最大吸附容量为52.0 mg/g。在本实验条件下,莠去津在5～100μg/L范围内线性良好,相关系数(R~2)0.9976,样品加标时,方法回收率为81.5%～107.7%(n=6),检出限为0.6μg/kg。结论本方法净化效果较好,可以用于蔬菜样品中莠去津残留检测。     

孔雀石绿分子印迹聚合物微球的制备

目的:改良微悬浮聚合法制备孔雀石绿分子印迹聚合物微球(M IPs)。方法:采用分子印迹技术,以孔雀石绿为模板,优化单体、乳化剂等反应条件,观察孔雀石绿M IPs的检测性能。结果:AM和MAA两种功能单体等量混合,模板与单体的比例为1:8、EGDMA为交联剂、AIBN为引发剂,吐温-80为乳化剂,制备的M IPs对孔雀石绿吸附性强,重复性好,检测限为0.63±0.07μg/m l。结论:利用分子印迹技术制备的孔雀石绿M IPs检测效果基本达到我国国家标准方法的水平,同时具有可再生、操作方法简便快速、易于推广等优点。     

邻苯二甲酸二丁酯分子印迹聚合物的合成及其应用研究

目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)分子印迹聚合物的合成.方法 以邻苯二甲酸二丁酯为模板分子,α-甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,在氯仿中采用本体聚合法制备分子印迹聚合物并应用于气相色谱-质谱分析.结果 模板分子、功能单体、交联剂的物质量比为1:6:30时所得的印迹聚合物对邻苯二甲酸二丁酯吸附量最大;扫描电镜表征显示聚合物表面具有多孔疏松结构;热重差热分析显示聚合物有良好的热稳定性.将聚合物用做固相萃取柱填料对DMP、DEP等5种邻苯二甲酸酯检测,方法的r2为0.9899～0.9941,检出限为0.013～0.022 μg/ml,回收率为75.8％～106.4％,RSD为2.41％～10.11％.结论 应用该聚合物的方法具有较好的回收率和检出限.     

检测水发或水产品中甲醛的快速定性检测试纸的实验研究与应用

[目的]研究快速有效地鉴定水产品、水发制品是否人为添加甲醛的方法。[方法]2003年,研制水产品或水发产品中甲醛的定性快速检测试纸,进行试纸检测灵敏度和抗干扰分析,并与我国卫生部在2001年推荐的乙酰丙酮分光光度法同时进行样品检测。[结果]试纸检测甲醛下限1×10-3mol/L(30×10-6kg/L);试纸检测甲醛时间不超过3min;试纸检测甲醛具有抗干扰性。[结论]本发明试纸已于2005年取得中国发明专利(专利号:ZL 03 1 78350.3)。     

用于农药残留检测的分子印迹技术研究进展

农药残留问题引起了人们的普遍关注 ,发展快速准确的检测方法势在必行。本文综述了分子印迹原理、聚合物制备方法及其在农药残留快速检测中的应用。     

两类三聚氰胺分子印迹聚合物性能比较研究及应用

目的:比较两类三聚氰胺分子印迹聚合物的性能及应用。方法:以三聚氰胺为模板分子,分别以α-甲基丙烯酸和丙烯酰胺为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,60℃聚合24 h,制备了两种分子印迹聚合物。比较研究了它们对三聚氰胺的特异识别作用和氢键作用力大小;同时研究了印迹聚合物固相萃取柱的应用。结果:研究发现,两类分子印迹聚合物对三聚氰胺都存在一类等价结合位点,都具有特异性的识别作用;用α-甲基丙烯酸单体合成的印迹聚合物对模板分子的氢键作用力和结合能力更强;用该分子印迹聚合物作固相萃取柱,其液相色谱检测回收率>90%。对奶粉和液态奶提取液的加标回收率分别为90.4%~95.8%、91.5%~92.7%。结论:自制印迹聚合物固相萃取柱对牛奶样品预处理,试剂用量少,萃取回收时间短,检测牛奶样品中三聚氰胺,结果满意。     

高效液相色谱-三重四级杆质谱法同时测定水产品中6种苯二氮卓类镇静剂残留

目的 建立高效液相色谱-三重四级杆质谱法同时测定水产品中6种苯二氮卓类镇静剂残留的方法。方法 样品用乙腈提取后经C₁₈固相萃取柱净化,待测液经Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测模式检测,内标法定量。结果 6种苯二氮卓类镇静剂在1.0～50.0μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数r均>0.9990,检出限和定量限分别为0.3和1.0μg/kg,在3个浓度加标水平下的平均回收率为74.2%～108.0%,相对标准偏差为1.1%～6.7%(n=6)。结论 该方法简便快捷、灵敏度高、结果准确,可用于水产品中6种苯二氮卓类镇静剂残留的同时检测。     

肇庆市副溶血性弧菌血清型、毒力基因和脉冲场凝胶电泳分子分型研究

目的 通过副溶血性弧菌血清型、毒力基因和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型研究,建立肇庆市副溶血性弧菌DNA指纹图谱基因库。方法 对肇庆市食物中毒分离出的28株副溶血性弧菌和食品安全风险监测的各类水产品分离的17株副溶血性弧菌进行血清分型,耐热直接溶血素相关基因(trh)和耐热直接溶血素基因(tdh)PCR检测,对45株副溶血性弧菌进行PFGE分子分型。结果 食物中毒分离的28株副溶血性弧菌,血清型以O₄:K₈(32.14%)和O₃:K₆(25.00%)为主,17株水产品分离的副溶血性弧菌,血清型以O₁:K_UT(42.11%)为主;21株(46.67%)为tdh⁺trh^-菌株,23株(51.11%)为tdh^-trh^-菌株,1株(2.22%)为tdh^-trh⁺。45株副溶血性弧菌的PFGE相似值为3.9%~100.0%,被分为36种不同的PFGE型别,带型100%相同的菌株几乎都出现在同一年代相近的时间点,但也出现了跨年代菌株。结论 肇庆市食物中毒的副溶血性弧菌以O₄:K₈和O₃:K₆血清型为主,多数菌株携带tdh基因。PFGE结果提示肇庆市流行的副溶血性弧菌存在多克隆来源。     

农药抑芽丹分子印迹聚合物的识别机制与特性

目的阐述农药抑芽丹分子印迹聚合物的识别机制,并分析聚合物的识别特性。方法以甲醇为溶剂,利用热引发聚合方法,以甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂合成抑芽丹的分子印迹聚合物材料,利用紫外光谱技术对其亲和机制进行分析。结果表明在甲醇中1个抑芽丹与2个甲基丙烯酸通过氢键形成复合物。分子印迹聚合物对抑芽丹表现出高的亲和性,分子印迹聚合物的最大吸附量可达到546.35μmol.g-1,明显高于空白印迹聚合物的最大吸附量(1.42μmol.g-1),并具有很好的选择吸附特性。结论该材料有望用于植物组织中痕量抑芽丹农药残留的分离富集和分析,特别是有望在样品待测组分固相微萃取中得到应用。     

一种新型检测乙型肝炎病毒核酸方法的建立

目的:建立一种新型快速检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的方法。方法:根据乙肝病毒S保守区设计3对引物进行乙肝病毒DNA切口酶核酸恒温扩增,产物在密封装置中进行试纸条的显色反应,根据显色深浅进行定量。结果:恒温扩增试纸条技术检测血清HBVDNA的特异性100%,敏感度达到100拷贝/毫升。结论:恒温扩增试纸条法检测时间短,不受接收标本时间限制随时可以检测,特异性强,敏感度高,不需昂贵的定量PCR检测仪,便于更多医院检验科的开展。     

原奶中氨基糖苷类抗生素残留快速检测试纸条的研制

目的:研究开发用于现场检测原奶样本中氨基糖苷类残留的快速检测试剂条。方法:采用胶体金免疫层析技术,通过利用不同缓冲体系和添加不同表面活性剂处理过的样品垫进行实验,研制出适合于现场检测原奶中氨基糖苷类快速检测的试纸条。结果:成功制备出原奶中氨基糖苷类抗生素残留快速检测试纸条,庆大霉素检测条和卡那霉素检测条的检测灵敏度为100 ng/ml、链霉素和双氢链霉素检测条的检测灵敏度为200 ng/ml。结论:该试纸条操作简便、快速、检测灵敏度高,并采用消线法进行结果判定,实验结果一目了然,可作为氨基糖苷类药物在原奶中残留检测的有效筛检手段。     

嗜肺军团菌核酸等温扩增快速检测技术研究

目的建立一种嗜肺军团菌的核酸等温扩增试纸条及pH显色快速检测方法,从而实现对空调冷却水样中嗜肺军团菌的快速现场检测。方法基于嗜肺军团菌特异性mip基因设计引物,建立环介导等温扩增体系,并结合反应产物横向流动试纸条和pH显色检测技术,进而验证方法的灵敏性、特异性,并对浙江省不同地区的中央空调冷却水水样进行检测。结果环介导的等温扩增试纸条及pH显色检测方法灵敏度可高达3 cfu/μl,特异性好,且检测时间仅需40 min左右。检测的灵敏度与荧光定量PCR的方法基本一致,对外环境空调冷却水的检测阳性率与荧光定量也相符。结论建立的嗜肺军团菌试纸条与pH显色快速检测方法,灵敏度高,特异性好,适合现场快速检测。     

淮南市O139霍乱疫情3种快速检测方法的应用比较及菌株相似性分析

目的通过建立霍乱弧菌的快速检测方法,提高霍乱疫情应急检测的速度和检出率,溯源可疑的传染源。方法将细菌分离鉴定,实时荧光PCR快速检测,胶体金免疫层析快速试纸法同时用于检测霍乱疫情处置期间所采集的患者水样便、外环境水质、食品及水产品,并对其结果进行比较分析;将分离到的O139霍乱弧菌进行脉冲场凝胶(PFGE)电泳分型分析。结果 3种检测方法中实时荧光PCR快速检测和胶体金免疫层析快速试纸法阳性率较高,常规细菌分离鉴定阳性率较低,3种方法各有优势及缺点;PFGE分子分型分析提示本次O139霍乱疫情传染源为水产市场中甲鱼带菌,污染病人食用食物所致。结论荧光PCR快速检测和胶体金免疫层析快速试纸法是菌株分离培养方法的有效补充;PFGE对不同来源的霍乱弧菌遗传同源相关性分析有较好的分辨能力。     

乙型肝炎病毒表面抗原胶体金试纸快速检测法与固相放射免疫检测法的应用比较

为了比较用于检测乙型肝炎 (乙肝 )病毒表面抗原 (HBsAg)的胶体金试纸快速检测法和固相放射免疫检测法(SPRIA) ,2 0 0 2年大同市采用配对比较的方法检测了 0～ 7岁健康儿童的血清 30 9份。结果显示 :胶体金试纸快速检测法 ,阳性检出率为 0 97% ,RIA法的阳性检出率为 3 2 4 %。两种方法阳性检出率的差异有显著的统计学意义(χ2 =5 14 ,P <0 0 5 )。两种方法用于检测HBsAg一致性好 ,但胶体金试纸快速检测法灵敏度较低。采用SPRI A法检测的 30 9份健康儿童血清HBsAg阳性率为 3 2 4 % ,≤ 3岁儿童的血清HBsAg阳性率为 0 ,>3岁儿童的血清HBsAg阳性率为 4 93% ,两组差异有非常显著的统计学意义 (χ2 =6 2 5 ,P <0 0 1)。随着年龄的增加 ,HBsAg阳性率升高。     

生食水产品中7种磺胺类药物残留的液相色谱-串联质谱测定法

目的 建立生食水产品中7种磺胺类药物残留的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,包括磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺噻唑、磺胺多辛.方法 试样中加入C1s填料后研磨均匀,磺胺类药物用乙腈-水在微波辐照辅助下进行提取,用乙腈饱和的正己烷液分配净化,用LC-MS/MS法测定.使用电喷雾离子化源(ESI),在正离子条件下以选择离子监测(SRM)方式进行扫描,外标法定量.结果 该法线性范围为10～100 μg/kg,以加标样品计算,在各浓度水平下各被测物的方法回收率均为70％～100％,各被测物的检出限为3μg/kg.结论 该法灵敏、快速、准确,可用于生食水产品中磺胺类药物残留的检测.     

试纸-光电检测仪快速测定食品中亚硝酸盐的研究

目的利用检测试纸条和光电检测仪联用的方法 ,实现对食品中亚硝酸盐的现场快速定量检测。方法通过检测试纸与亚硝酸盐显色反应的原理 ,将显色的试纸条在光电检测仪的感应窗里测定 ,并分别通过多次实验 ,确定各种优化的实验条件。结果本方法的优化实验条件包括 :(1)显色剂的浓度为N - (1-萘基 ) -乙烯二胺 15g·L 1、对氨基苯磺酸 2 0g·L 1;(2 )样品pH为 3.5～ 5 .5 ;(3)反应时间为 6 0s ;(4 )稳定剂的浓度为酒石酸 5 0g·L 1;(5 )试纸材料为中速定量滤纸。亚硝酸盐浓度在 1.5～ 75 μg·mL 1范围内的线性关系良好 (r =0 .996 ) ;方法的检出限为 0 .4μg·mL 1。对火腿肠、香肠等样品中亚硝酸盐的含量测定 ,其相对标准偏差均 <5 % ,并与国家标准方法测定结果一致。结论试纸 -光电检测法用于亚硝酸盐的现场定量检测具有简便、快速、携带方便等特点 ,值得推广应用。     

一种现场测定餐(饮)具消毒水余氯量的快速试纸法

水中有效氯释放出新生态氧 ,氧化隐血试纸中的指示剂系统 ,使邻联甲苯胺变色【1】。且在低浓度范围内 (0——— 6 0 0ｍｇ/Ｌ)有效氯浓度的高低与其颜色的深浅成正相关。经过实验 ,观察到隐血试纸在不同浓度余氯下所显颜色如表一所示。在余氯浓度 <6 0 0ｍｇ/Ｌ时 ,显色与该试纸原附标准色板一致。为此 ,将其应用于水中余氯的测定 ,并用此法 (下称试纸法 )与碘量法对 32份餐具消毒水样品作平行对照测定 ,结果试纸法具有快速、简便、可替代碘量法用于现场监测等优点。1　方法1.1　试纸法 :取有效隐血试纸一条 ,将试纸一端在正在使用的含氯消…     

胶体金免疫层析法检测水产品中O1群霍乱弧菌方法的建立与优化

〔目的〕研究了O1群霍乱弧菌免疫层析试纸的制备方法,通过对试纸材料的处理达到优化胶体金免疫层析体系的目的。〔方法〕建立了快速检测食品中O1群霍乱弧菌的胶体金免疫层析方法,并应用该方法对弧菌属、假单胞菌属及其他常见肠道致病菌,共29株进行检测,同时对180份水产品进行了样品添加试验,并用《出口食品中霍乱弧菌检验方法》(SN/T1022-2001)进行确证,全面评估了该方法的灵敏度、特异性、准确性等。〔结果〕该方法检测食品中O1群霍乱弧菌的灵敏度为105cfu/ml,与食品中常见的致病菌无交叉反应。该方法检测水产品中O1群霍乱弧菌的假阳性率为6.25%。〔结论〕该方法操作简便,灵敏度高,特异性强,准确性高,适用于食品的快速检测。