利用质谱技术直接检测阳性血培养瓶中假丝酵母菌属

目的研究利用质谱技术直接检测阳性血培养瓶中假丝酵母菌属的试验方法,为假丝酵母菌属所致血流感染提供快速诊断手段。方法将临床分离假丝酵母菌属97株及标准菌株2株,按一定浓度加入血培养瓶中后放入全自动血培养仪孵育模拟临床送检阳性血培养标本,仪器报警阳性后取出培养瓶,采用离心-分离的手工操作方法对标本进行处理,直接上质谱仪进行检测,评价该方法的准确性。结果离心-分离的手工操作方法对标本进行处理后,质谱技术直接检测阳性模拟血培养标本中检测假丝酵母菌属的准确率为91.9%,其中检测白色假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌的准确率分别为100.0%、100.0%、92.9%、89.5%、72.2%;菌落计数法测定该方法检测血培养中假丝酵母菌的最低浓度为105 CFU/ml。结论采用离心-分离的手工操作方法可以直接检测阳性血培养瓶中假丝酵母菌属,对于不同的菌种,其检测的准确性差异有统计学意义,该方法简单易操作、准确性较高,可将假丝酵母菌属所致血流感染常规试验室诊断时间缩短24⁴8h,值得临床实验室推广使用。     

血培养阳性标本病原菌分布与药敏性分析

目的了解医院2009-2012年血培养标本培养阳性病原菌分布以及药敏性,为临床合理用药提供实验室依据,指导临床合理使用抗菌药物。方法回顾性分析2009-2012年4 847份血培养标本,采用法国生物梅里埃公司BacT/ALERT3D全自动血培养仪,分离菌株鉴定和药敏试验采用VITEK-60全自动细菌鉴定药敏仪。结果 4 847份血培养标本中检测阳性标本897份,阳性率18.5%;共检出病原菌897株,其中革兰阳性菌343株占38.2%,革兰阴性菌497株占55.4%,真菌57株占6.4%;主要革兰阳性菌对利奈唑胺、万古霉素敏感率均为100.0%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对亚胺培南和美罗培南的敏感率为100.0%;而铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌则显示较高的耐药性。结论引起患者血流感染的主要病原菌以革兰阴性菌为主,临床医师应高度重视血培养,根据药敏结果合理使用抗菌药物,减少多药耐药菌株的出现,预防控制医院感染。     

通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统直接快速鉴定阳性血培养

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在临床微生物实验室的应用,为阳性血培养中微生物鉴定提供了革命性的新方法,我们报告一种改良的利用MALDI-TOF质谱直接鉴定阳性血培养的方法。方法 2011年10月-2012年10月共收集312瓶阳性培养物,细菌分别属于12个不同属和32个种,MALDI-TOF质谱鉴定的细菌同时进行了常规生化法鉴定,其中不符合的部分通过序列分型明确。结果 200株革兰阳性菌中,161株(80.5%)准确鉴定到属以上水平,121株(60.5%)准确鉴定到种;112株革兰阴性菌中,101株(90.2%)准确鉴定到属以上水平,81株(72.3%)准确鉴定到种水平;MALDI-TOF质谱鉴定革兰阴性菌,在属以上水平和种水平上,准确率均高于革兰阳性菌。结论通过这种方法能在1h内快速、鉴定阳性血培养中的常见细菌,如果将此项技术常规应用于临床,将显著增加菌血症患者在24h内得到最佳抗菌药物治疗的比例。     

通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统直接快速鉴定阳性血培养北大核心CSCD

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在临床微生物实验室的应用,为阳性血培养中微生物鉴定提供了革命性的新方法,我们报告一种改良的利用MALDI-TOF质谱直接鉴定阳性血培养的方法。方法 2011年10月-2012年10月共收集312瓶阳性培养物,细菌分别属于12个不同属和32个种,MALDI-TOF质谱鉴定的细菌同时进行了常规生化法鉴定,其中不符合的部分通过序列分型明确。结果 200株革兰阳性菌中,161株(80.5%)准确鉴定到属以上水平,121株(60.5%)准确鉴定到种;112株革兰阴性菌中,101株(90.2%)准确鉴定到属以上水平,81株(72.3%)准确鉴定到种水平;MALDI-TOF质谱鉴定革兰阴性菌,在属以上水平和种水平上,准确率均高于革兰阳性菌。结论通过这种方法能在1h内快速、鉴定阳性血培养中的常见细菌,如果将此项技术常规应用于临床,将显著增加菌血症患者在24h内得到最佳抗菌药物治疗的比例。     

两种品牌血培养瓶抗生素吸附能力对比研究

目的比较美国BD Bactec树脂需氧瓶和溶血素厌氧瓶与法国梅里埃BacT/Alert树脂血培养瓶的抗生素吸附能力。方法选用临床常用抗生素:亚胺培南、万古霉素、氨苄西林、头孢曲松、甲硝唑、美罗培南、米卡芬净,按照一定浓度与标准菌株和无菌羊血混合,同时接种于2种品牌血培养瓶,记录不同血培养瓶五天内的阳性报警情况及检出时间,对比各血培养瓶的抗生素吸附能力。结果需氧瓶组:氨苄西林BMX-FA与BD-FA瓶检出率相同,均为100%,且BMX-FA较BD-FA瓶检出时间长(11.04±0.24 h vs 10.45±0.45 h),差异有统计学意义(t=2.59,P<0.05);含亚胺培南及头孢曲松组中,2种血培养瓶均未检出;含万古霉素组,BD-FA 比BMX-FA瓶的检出率低,分别为40%和100%,且BMX-FA 比BD-FA瓶的检出时间更短(15.70±0.76 h vs 21.50±0.71 h)差异有统计学意义(P<0.05);含米卡芬净组,BD-FA 比 BMX-FA瓶的检出率低,分别为60%和100%,且BMX-FA比BD-FA瓶检出时间更短(61.06±10.42 h vs 94.20±1.74h),差异有统计学意义(t=12.49,7.01,P<0.05)。厌氧瓶组:含亚胺培南、万古霉素、氨苄西林、甲硝唑、美罗培南的BD-FN瓶均未检出,BMX-FN瓶检出率均为100%;含头孢曲松组,2种血培养瓶均未检出。结论法国梅里埃BacT/Alert树脂血培养瓶的抗生素吸附能力总体上优于美国BD Bactec树脂需氧瓶和溶血素厌氧瓶,临床可根据抗生素使用情况选择合适的血培养瓶。     

血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏分析

目的：对血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏进行分析。方法研究我院收治的发热合并全身感染患者86例,在专用接种水中混掺患者的血培养标本,并在鉴定板上接种,通过直接法鉴定,同时把阳性标本转种平板进行分离培养,根据常规法对分纯后的菌落实施上机鉴定及药敏实验,然后进行对比。结果在86例样品当中,直接法和常规法符合率：细菌鉴定总符合率为96.4%,其中革兰阴性菌95.8%,革兰阳性球菌97.1%;两种方法的细菌结果均有着较高的准确率,细菌鉴定准确率在95.7%以上。结论血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏实验能够准确的早期诊断菌血症患者,值得推广。     

83例新生儿血培养阳性结果与临床分析

目的 探讨某院1999年1月-2004年12月6年来新生儿血流感染的临床和细菌学特征。方法 回顾分析6年该院血流感染新生儿的临床资料。结果 83例住院的新生儿血流感染以革兰阳性（G^＋）球菌为主，占78．31％（65／83）；革兰阴性（G^-）杆菌占19．28％（16／83）；未检出真菌。在需氧和厌氧配对培养的83例阳性新生儿中，需氧和厌氧培养均生长细菌者34例（40．96％）；仅需氧培养长菌者21例（25．30％），仅厌氧培养长菌者28例（33．73％）。非正常分娩是新生儿血流感染的重要易感因素。结论 应加强妇婴围产期保健工作及医院感染的监控力度，以减少新生儿血流感染的发生。同时做需氧和厌氧配对培养，可减少漏检。     

血浆凝固酶试验直接鉴定血培养阳性金黄色葡萄球菌

目的:利用血浆凝固酶试验快速鉴定血培养阳性瓶中的金黄色葡萄球菌。方法:血培养仪阳性报警后,立即采集血培养阳性标本进行革兰染色,涂片结果判断为葡萄球菌的标本进行血浆凝固酶试验,同时按常规方法进行分离培养,挑取纯培养菌落用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定。结果:2010年3月-2010年6月份共收集100份血培养阳性涂片疑似为葡萄球菌标本,进行血浆凝固酶试验,其中血浆凝固酶阳性的有23份,菌种经VITEK 2Compact仪器鉴定均为金黄色葡萄球菌,血浆凝固酶阴性的有77份,菌种经鉴定均为血浆凝固酶阴性葡萄球菌。血浆凝固酶试验最快1h即可出现阳性结果。结论:直接对血培养瓶原液进行血浆凝固酶试验可用于金黄色葡萄球菌的鉴定。     

成套血培养模式对提高培养阳性率的效果分析

目的:了解成套血培养模式对血流感染病原菌检出率的影响。方法:采用自动血培养仪对2011年全年送检的4855瓶血液标本进行培养,对阳性的标本进行病原菌统计分析。结果:成套血培养瓶送检率为23.5%,阳性率为11.7%;比单瓶阳性率提高了5.6%,差别有统计学意义(P<0.05);成套和单瓶血培养阳性标本检出率最高的均为凝固酶阴性葡萄球菌,分别为23.9%和33.9%,其次均为大肠埃希氏菌,分别为17.9%和25.3%。结论:成套血培养模式具有提高培养阳性率和一定鉴别污染的能力,需常规开展成套血培养送检工作。     

3644瓶阳性血培养病原菌分析及双份血培养意义评价

目的了解阳性血培养的病原菌分布和双份血培养对病原菌分布及检出率的影响。方法采用自动血培养仪对2004年1月~2008年6月送检的36 689瓶标本进行培养,对阳性的标本进行病原菌统计分析。结果共检出阳性标本3644瓶2977株,最多见的病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌563株(18.9%),其次分别为大肠埃希菌320株(10.7%)、金黄色葡萄球菌252株(8.5%)、肺炎克雷伯菌154株(5.2%)、酿脓链球菌153株(5.1%);检出的真菌共284株(9.5%),其中白色假丝酵母菌最为常见,占37.7%;共送检双份血培养9118瓶,检出阳性1080瓶,检出率为11.8%,双份血培养的病原菌检出率高于单份血培养的检出率,差异有统计学意义(P0.05);双份血培养均阳性和双份血培养中单瓶阳性的病原菌分布也有明显的差异。结论血培养中革兰阳性球菌是最常见的细菌,真菌作为血流感染病原菌的机会增多,需予以重视,鉴于双份血培养具有提高培养检出率和一定鉴别污染的能力,需常规开展双份血培养送检工作。     

BACTEC FX全自动血培养仪阳性结果分析及应用评价

目的对美国BD公司BACTEC FX全自动血培养仪进行血培养结果分析,并对其临床应用进行评价。方法收集2011年10月-2012年11月医院收治怀疑血流感染患者的血液标本,血培养及鉴定采用美国BD公司BACTEC FX全自动血培养仪和BD Phoenix l00自动细菌鉴定仪。结果 2 590份血液标本中实际检出阳性标本264份,阳性率10.2%,假阳性率0.15%;264株病原菌中,最快检出时间为2.7h,有26.9%在12h内检出,51.1%在24h内检出,86.0%在48h内检出,95.8%在72h内检出;有40.5%标本厌氧瓶先报警、需氧瓶后报警,34.5%标本需氧瓶先报警、厌氧瓶后报警,11.8%标本需氧瓶先报警、但厌氧瓶不报警。结论美国BD公司BACTEC FX全自动血培养仪操作简便、灵敏度高,提高了细菌检出的阳性率及种类,检出速度更快捷、更准确,为治疗患者赢得了宝贵的时间。     

4018份血培养中厌氧血培养的价值分析

目的 了解送检厌氧血培养瓶对病原菌检出率及阳性结果报告时间的影响.方法 对2011年1月-2012年3月送检的4018份疑似血流感染患者的血培养结果进行统计学分析.结果 同时送检需氧瓶和厌氧瓶的检出率达14.11％,高于仅送检需氧瓶的9.26％,差异有统计学意义(P＜0.05);厌氧瓶中大肠埃希菌和肠球菌属的阳性结果报告时间(306、630min)明显短于需氧瓶(612、810 min)(P＜0.05);同时送检需氧瓶和厌氧瓶的病份中,厌氧瓶阳性而需氧瓶阴性者占2.42％,厌氧瓶培养可增加血流感染病原菌检出率达17.11％.结论 增加厌氧瓶培养可以提高阳性率并缩短阳性结果报告时间,临床上要加强厌氧血培养瓶的送检.     

血培养阳性患者降钙素原、白细胞介素6的差异性分析

目的分析血培养阳性患者降钙素原(PCT)、白细胞介素6(IL-6)的变化情况。方法回顾性分析2015年1月-2016年6月184例血培养阳性住院患者的临床资料,比较革兰阴性菌(104例)、革兰阳性球菌(69例)、真菌(11例)血流感染患者PCT及IL-6检测结果的差异。结果将革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌血流感染后患者PCT、IL-6进行均值比较,PCT、IL-6的升高情况为革兰阴性菌高于革兰阳性菌;将革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌血流感染后患者PCT、IL-6进行对数转换后为lgPCT、lgIL-6,进行独立样本t检验,革兰阴性菌与革兰阳性菌血流感染后患者lgPCT比较差异有统计学意义(P<0.05);lgPCT在革兰阴性菌与可疑污染菌(凝固酶阴性葡萄球菌及酿脓链球菌)、阳性致病菌(除外凝固酶阴性葡萄球菌及酿脓链球菌的其他革兰阳性菌)的比较中有显著性差异(P<0.05);lgIL-6在革兰阴性菌、真菌与可疑污染菌的比较中有显著性差异(P<0.05),而与阳性致病菌的比较并无显著性差异;lgPCT与lgIL-6存在正相关性,相关系数r=0.422(P<0.01)。结论 IL-6和PCT的联合检测可及早发现感染,辨识感染与污染,为临床菌血症的诊疗、抗菌药物的应用提供依据。     

医院血培养常见病原菌的耐药性分析

目的调查住院患者血培养常见病原菌分布及耐药性,为临床抗菌药物合理使用提供依据。方法采用法国梅里埃公司BACT/ALERT 3D全自动血培养仪对2014年6月-2016年12月某三级甲等医院血培养标本进行鉴定,西门子WalkAway 96Plus全自动微生物鉴定和药敏试验分析系统对细菌进行鉴定和耐药性分析。结果共检出病原菌1 027株,病原菌以革兰阴性菌为主,共650株占63.29%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率较高,均>85.00%;鲍氏不动杆菌对哌拉西林、头孢菌素类、氨基糖苷类和亚胺培南等耐药率均较高>60.0%,铜绿假单胞菌对大部分抗菌药的耐药率较低,<30.00%,金黄色葡萄球菌对氨苄西林的耐药率达96.7%。结论血培养病原菌以革兰阴性菌为主,应加强对可引起血流感染的细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物,对控制医院感染具有重要意义。     

血培养阳性报警时间对新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的诊断研究

目的评价血培养阳性报警时间(TTP)对新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的诊断价值,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2007年1月-2012年12月血培养凝固酶阴性葡萄球菌阳性的346例新生儿,分为血流感染组145例和血培养污染组201例;对所有新生儿进行血培养分析,比较血流感染患者与血培养污染患者TTP的差异,计算TTP对血流感染组与血培养污染组鉴别诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果共调查1 345例新生儿,其中346例新生儿血培养凝固酶阴性葡萄球菌阳性,阳性率为25.72%;血流感染组新生儿的TTP为(9.35±4.53)h,血培养污染组新生儿的TTP为(17.45±7.69)h,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论血培养阳性报警时间是很好的辅助诊断新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的方法,以TTP≤12h为折点,可有效的鉴别诊断新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染和血培养污染。     

2010-2014年血培养检出病原菌分布与耐药特征

目的回顾性分析医院2010年2月-2014年2月送检血培养阳性分离菌的临床分布以及耐药特征,以提高疾病治愈率。方法采用血培养瓶采样,Bact/Alert 3D全自动血培养仪进行培养,VITEK-2Compact对所有菌株进行鉴定与药敏试验,参照CLSI2013年版判读结果,使用WHONET5.6软件进行统计分析。结果 4年中临床送检6 261份非重复患者血培养标本,分离出661株病原菌,分离率为10.6%,包括革兰阴性菌452株占68.4%、革兰阳性菌190株占28.7%、真菌19株占2.9%;肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌检出率分别列前4位,总体污染率为4.2%;亚胺培南对革兰阴性菌仍有较好的抗菌活性;葡萄球菌属中未检出对利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀和万古霉素耐药株。结论医院临床血流感染以肺炎克雷伯菌为主,但真菌感染的机会增多,鉴于双份血培养具有提高培养检出率和一定鉴别污染的能力,应提高双瓶双侧血培养送检率。     

血清降钙素原与血培养联合检测对血流感染的诊断价值

目的分析血清降钙素原(PCT)与血培养联合检测对血液感染的诊断价值,为临床诊断治疗提供参考。方法选取2013年1-6月医院收治的120例肺炎发热患者为观察组,80例肿瘤发热患者为对照组,入院后对两组患者进行血清PCT测定及血培养,对比检测结果;对观察组患者分别在发热后12、24、48h检测血清PCT并进行血液培养,对比结果。结果首次采血检测,血清PCT检测观察组阳性67例、对照组阳性8例,差异有统计学意义(χ2=43.02,P<0.01),血培养观察组阳性12例、对照组1例,差异有统计学意义(χ2=6.05,P<0.05);观察组患者发热后12、24h,血清PCT阳性61、68例,阳性率50.8%、56.7%,血培养阳性16、31例,阳性率13.3%、25.8%,差异均有统计学意义(P<0.01);发热后48h,血清PCT阳性71例,阳性率59.1%,血培养阳性68例,阳性率56.6%,差异无统计学意义。结论血清降钙素原联合血培养对于诊断血流感染有一定的价值,应在临床工作中加以推广。     

2008-2011年495份血培养标本病原菌分布及其耐药性

目的 了解血培养分离菌的临床分布特征及耐药性.指导临床合理使用抗菌药物.方法 回顾性分析2008年1月-2011年12月医院血液培养及K-B纸片法的药敏试验结果.结果 6621份血培养送检标本中共分离出病原菌649株,培养阳性率为9.80％;剔除重复株后阳性菌株为495株,其中革兰阳性球菌及革兰阴性菌分别占58.59％、37.37％,真菌占4.04％;科室分布以ICU及新生儿科较高;常见病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、不动杆菌属等;MRCNS及MRSA分离率分别为72.77％、39.4％,大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率分别为49.3％和31.4％;凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、喹奴普汀/达福普汀、夫西地酸高度敏感(90.91％～100.00％);大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及阴沟肠杆菌对第三代头孢菌素的耐药率在42.00％～77.00％,对碳青霉烯类抗菌药物耐药率仍较低≤4.00％;铜绿假单胞菌对阿米卡星及美罗培南的耐药率相对较低为12.50％.结论 医院血液标本细菌检出以革兰阳性菌株为主,集中在≤14及≥60岁患者,以ICU及新生儿科较多,MRCNS及MRSA的分离率较高,肠杆菌科菌株对碳青霉烯类尚保持较高敏感性.     

24141份血培养病原菌的分布及耐药性分析

目的 了解医院2009年1月-2011年12月血培养阳性标本检出的病原菌分布及耐药性,为临床血流感染的诊断、治疗提供依据.方法 采用BacT/Alert 3D全自动血培养仪进行血培养,VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定,用K-B纸片法进行体外药敏试验,应用WHONET 5.4软件对结果进行统计分析.结果 从24141份血液标本中培养分离病原菌1289株,检出阳性率为5.3％,革兰阴性菌667株,占51.7％,包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌等,分别占15.2％、7.4％、6.9％、5.5％,革兰阳性菌447株,占34.7％,包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等,分别占7.7％、5.6％、3.5％、3.2％,真菌133株,占10.3％,包括白色假丝酵母菌、热带假丝酵母菌,分别占3.2％、2.3％;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对亚胺培南、阿米卡星高度敏感;铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌对各类抗菌药物的敏感率普遍较低;革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉林和喹奴普汀/达福普汀高度敏感;真菌对伏立康唑、两性霉素B、氟康唑高度敏感.结论 引起血流感染的病原菌的菌种复杂、耐药率高,临床应加强血流感染病原菌耐药性监测,合理使用抗菌药物.     

57株深部真菌感染血培养阳性结果分析

目的 分析血培养真菌阳性标本,寻找深部真菌感染特点。方法 血培养使用Bact/Alert血培养仪,分离使用沙保弱培基,真菌和细菌鉴定使用VITEKAMS－60自动微生物分析仪,HCMV检验使用PCR和RT－PCR方法。结果 血培养阳性57株,以念珠菌属为主92．08％;阳性结果时间平均35．06h,72h内获得结果者53株占92．98％;65％患者从血以外的其他标本获得真菌阳性结果,真菌感染多见于免疫低下者,本组40例患者中各种肿瘤占33例（82．5％）。结论 真菌血培养阳性是患者真菌感染的确证依据,多系统真菌感染为临床致死原因;部分患者还可在标本中同时检出其他疫原微生物。