CD34~+细胞在急性髓细胞白血病骨髓组织中的表达研究

目的:探讨CD34+细胞在急性髓细胞白血病骨髓组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法,检测急性髓细胞白血病患者初发未治及标准化疗后完全缓解时骨髓组织中CD34+细胞的表达情况。结果:急性髓细胞白血病初发未治组骨髓组织中CD34+细胞阳性表达率与完全缓解组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD34+细胞与急性髓细胞白血病的发生、发展及预后存在一定关联。     

H-2半相合CD34+细胞和TK+T细胞对移植物抗白血病效应的研究

移植物抗白血病 (graft versus leukemia,GVL)效应是异基因造血干细胞移植免疫清除白血病细胞和防止复发的主要机制 ,对异体造血干细胞移植治愈白血病起着十分重要的作用。单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 /丙氧鸟苷 (HSV TK/GCV)系统在治疗移植物抗宿主病 (GVHD)的同时能否保留GVL效应是一个值得研究的问题 ,我们对此作了初步探讨。一、材料与方法1 主要试剂和仪器 :小鼠白介素 2 (mIL 2 )购自晶美公司 ,GCV为罗氏公司产品 ,分离小鼠CD34+ 细胞的单抗采用加拿大StemCell公司产品。2 携带TK基因和标记基因 (neo、GFP)的逆转录病毒上…     

CD34及HLA - DR对急性早幼粒细胞白血病诱导缓解率的影响

目的：探讨CD34及HLA—DR对急性早幼粒细胞白血病诱导缓解率的影响。方法：对50例急性早幼粒细胞自血病患者应用流式细胞术进行免疫分型后选用全反式维甲酸＋柔红霉素的方案进行诱导化疗,观察其诱导缓解率。结果：CD34及HLA—DR在大多数急性早幼粒细胞自血病中不表达,少数表达。CD34＋组与CD34-组急性早幼粒细胞自血病的诱导缓解率之问差异无统计学意义（P〉0．05）,HLA—DR＋组与HLA—DR一组急性早幼粒细胞白血病诱导缓解率之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：CD34的表达对急性早幼粒细胞白血病诱导缓解率无明显影响,HLA—DR的表达可降低急性早幼粒细胞白血病诱导缓解率。     

CD2+急性早幼粒细胞白血病的临床特点分析

目的:探讨CD2+急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床特点.方法:采用流式细胞术(FCM)对19例APL的免疫表型进行检测,根据检测结果分为CD2+组及CD2-组,对2组的临床表现、实验室检查、治疗效果等方面进行比较.结果:19例患者中,CD2+ 4例,CD2- 15例;CD2+组发病时外周血WBC高于CD2-组(P<0.05),纤维蛋白原浓度降低(P<0.05),而2组在发病时血小板计数和治疗达到完全缓解时间差异均无统计学意义(P>0.05);4例CD2+ APL患者均伴有CD34表达,治疗后均完全缓解;15例CD2- APL患者中,伴有CD34表达者1例,治疗完全缓解14例.结论:CD2+APL病例发病时往往伴有高WBC,具有更高的并发严重出血的风险,可作为APL的预后不良指标及微小残留病变监测指标.     

B系急性淋巴细胞性白血病患儿外周血中CD4+、CD8+、CD19+细胞的观察

目的：分析诱导疗程前、疗程中及缓解期三个时期内B系急性淋巴细胞性白血病患儿外周血中CD4^ ,CD8^ ,CD19^ 细胞阳性率的变化情况及比例关系。方法：应用流式细胞仪（FCM）分析。结果：在B系急淋未经治疗的情况下，CD19^ 细胞的阳性率显著升高，CD4^ ,CD8^ 细胞的阳性率比例显著降低。且CD4^ /CD8^ 的比例倒置。在诱导疗程后期，CD19^ 细胞阳性率下降，CD4^ ,CD8^ 细胞阳性率比例升高。CD4^ /CD8^ 比例升高至正常水平。结论：在B系急淋患儿未经治疗时，肿瘤负荷较重，CD4^ ,CD8^ 细胞DNA增殖受到抑制。细胞免疫水平低下，在诱导疗程后期，肿瘤负荷下降，细胞免疫水平仍然低下，在缓解期，细胞免疫水平恢复。     

霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34+造血细胞的干预作用

目的：研究新型免疫抑制剂霉酚酸酯对哮喘小鼠骨髓CD34^＋造血细胞生物活性的影响。并与糖皮质激素比较．探讨其潜在的治疗哮喘的机制及可能性。方法：以卵白蛋白（OVA）致敏并激发BALB／c小鼠建立哮喘模型。连续激发2周期间分为3组，每组6只，分别给予生理盐水（对照，A组）、泼尼松（B组）及霉酚酸酯（C组）灌胃．末次激发后24h分别取支气管肺泡灌洗液（BALF）、外周血及骨髓，测定BALF、外周血中有核细胞的分类计数及骨髓中有核细胞总数：ELISA方法测定外周血中IL-5水平；流式细胞仪测定外周血及骨髓中CD34^＋造血细胞、CD4^＋T淋巴细胞占有核细胞的比例：免疫组化结合原位杂交法检测骨髓内表达白细胞介素5（IL-5）受体α链mRNA的CD34^＋造血细胞（CD34^＋IL-5Rα mRNA^＋细胞）计数。结果：B、C组哮喘小鼠BALF中细胞总数、EOS计数，外周血中CD34^＋造血细胞计数及外周血中IL-5水平均低于A组相应指标．且差异有显著性（均P〈0．05）；C组BALF及外周血巾EOS计数、骨髓中CD34^＋造血细胞计数及CD34^＋IL-5RαmRNA＋细胞计数与B组相应指标比较，差异有显著性（均P〈0．05）。结论：霉酚酯酸（MMF）可能抑制嗜酸粒细胞（EOS）、T淋巴细胞的肺内浸润，抑制CD34^＋造血细胞从骨髓迁移至外周血，它可能主要通过抑制淋巴细胞增殖，减少IL-5的产生．来影响骨髓EOS祖细胞的分化。     

人脐血基质细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的作用

目的研究人脐血基质细胞(hUCBSCs)对脐血CD34+细胞体外扩增的促进作用. 方法应用MACS磁珠分离系统分离脐血CD34+细胞,按照DEXTER法行脐血基质细胞培养,观察hUCBSCs的生长状态及细胞表面分子的表达情况.建立以hUCBSCs为滋养层的脐血CD34+细胞体外扩增体系,并对脐血CD34+细胞短期扩增后行集落形成单位(CFU)-GM、CFU-E和CFU-Mg半固体培养. 结果脐血基质细胞为混合细胞群,包括CD68(+)、Fn(+)、CD31(+)和CD34(-);以hUCBSCs为滋养层的体外扩增体系对脐血CD34+细胞具有明显的扩增作用,体外液体扩增后的脐血CD34+细胞集落形成能力明显高于对照组,其中细胞因子(SCF+IL-3+EPO+TPO+GM-CSF)联合hUCBSCs体系的扩增作用最强,hUCBSCs在促进CFU-Mg集落形成的作用中具有明显优势. 结论hUCBSCs具有体外支持造血作用,与细胞因子联合对促进脐血CD34+细胞扩增作用更加明显.hUCBSCs对促进巨核细胞扩增可能具有特殊的意义.     

丙氧鸟苷对亚致死量照射H-2半相合小鼠CD34+细胞植入的影响

①目的探讨丙氧鸟苷(GCV)对亚致死量照射H-2半相合小鼠CD34+细胞移植的影响.②方法从亲代雄性供鼠骨髓分离CD34+细胞,同时取脾脏T细胞转染TK基因.雌性F1受鼠60Co亚致死量照射7.0 Gy后随机分为4组,第1组输入1×105 CD34+细胞,其他3组输入1×105 CD34+细胞和5×105 TK+ T细胞.第3、4组分别于移植后0和7 d给予GCV治疗,然后观察各组移植物抗宿主病(GVHD)发生情况和生存情况.③结果单纯输入CD34+细胞组小鼠未能植活,但自体造血恢复.输入CD34+和TK+ T细胞组小鼠出现急性GVHD,表现为体质量下降;自小鼠外周血扩增出Y染色体片段.输入CD34+和TK+ T细胞后应用GCV组小鼠未发生急性GVHD;0 d应用GCV组80%小鼠未扩增出Y染色体片段;7 d应用GCV组80%小鼠扩增出Y染色体片段.7d应用GCV组植入率与未应用GCV组相比差异无显著性(χ2=0.89,P>0.05);7d应用GCV组植入率高于0d应用组(χ2=2.64,P<0.05).④结论移植后1周应用GCV对CD34+细胞植入影响较小.     

rHuEPO对慢性肾衰患者外周血CD+34细胞及网织红细胞的影响

目的观察慢性肾衰患者外周血造血原始细胞(CD+34细胞)和网织红细胞百分数(Ret%)、成熟度(FLH)变化及重组人红细胞生成素(rHuEPO)对其的影响.方法用流式细胞仪检测正常人、非肾性贫血患者、肾性贫血患者及应用rHuEPO后外周血CD+34细胞和ret%、FLH的变化.结果慢性肾衰患者CD+34细胞和Ret%,均低于非肾性贫血患者(P＜0.05)和正常时照组无显著意义差异.两组贫血患者FLH均高于正常对照(P＜0.05),用rHuEP0后,最先是Ret%升高,其次CD+34细胞升高,然后是FLH降低.结论慢性肾衰患者CD+34细胞增殖受抑制,rHuEPO促使CD+34细胞增殖、网织红细胞释放和成熟.     

再生障碍性贫血患者骨髓CD34~+和Fas~+细胞Fas抗原的表达

采用流式细胞术检测再生障碍性贫血 (AA ,以下简称再障 )患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原的表达 ,采用体外短期液体培养的方法研究干扰素γ(IFN γ)对AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原表达的影响 ,以探讨Fas介导的凋亡在AA发病中的作用。正常对照骨髓CD34 + 细胞表面Fas抗原的表达率为 ( 1 0 .0 2± 2 .33) % ,重型再障组(SAA)和慢性再障组 (CAA)分别为 ( 38.2 8± 9.0 1 ) %和 ( 2 6 .6 6± 4 .2 7) % ,SAA组和CAA组与对照组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ;SAA组与CAA组比较也有显著性差异 (P <0 .0 5 )。正常骨髓单个核细胞在含SCF、IL 3、GM SCF和EPO细胞因子组合的液体培养体系中培养 ,加入IFN γ时 ,CD34 + 细胞表面Fas抗原表达稍增高 ,AA患者骨髓在上述相同的条件下 ,CD34 + 细胞表面Fas抗原表达与正常对照骨髓比较显著增高 (P <0 .0 5 ) ,且SAA组明显高于CAA组 (P <0 .0 5 )。实验结果表明 ,AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas的表达明显高于正常对照 ;AA患者骨髓单个核细胞体外培养时 ,IFN γ促使骨髓CD34 + 细胞表面Fas的表达作用较正常对照明显增强。结果提示 ,AA患者骨髓CD34 + 细胞表面Fas的异常表达可能与AA的发病有关。     

愈障汤对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD_(34)~+细胞bcl-2表达的影响

目的　探讨愈障汤治疗慢性再生障碍性盆血 (CAA)的作用机制。方法　对愈障汤治疗的 39例CAA患者分别于治疗前后采用磁式细胞分选器 (MACS)分离纯化骨髓CD3 4+ 细胞 ;采用SABC亲和细胞法和CMIAS系列多功能真彩图像分析仪检测骨髓CD3 4+ 细胞bcl 2的表达 ,并与 2 6例健康对照组比较。结果　CAA患者骨髓CD3 4+ 细胞bcl 2蛋白表达的阳性率和OD值治疗前均较健康组减低 (P <0 .0 1) ,治疗后显著升高 (P <0 .0 1) ,bcl 2蛋白表达与临床疗效呈正相关。结论　愈障汤治疗CAA的作用机制可能是通过上调凋亡抑制基因bcl 2的表达 ,从而阻抑了骨髓CD3 4+ 细胞的过度凋亡。     

愈障汤对慢性再生障碍性贫血患者骨髓CD34^＋细胞bcl—2表达的影响

目的探讨愈障汤治疗慢性再生障碍性盆血(CAA)的作用机制.方法对愈障汤治疗的39例CAA患者分别于治疗前后采用磁式细胞分选器(MACS)分离纯化骨髓CD34+细胞;采用SABC亲和细胞法和CMIAS系列多功能真彩图像分析仪检测骨髓CD34+细胞bcl-2的表达,并与26例健康对照组比较.结果CAA患者骨髓CD34+细胞bcl-2蛋白表达的阳性率和OD值治疗前均较健康组减低(P＜0.01),治疗后显著升高(P＜0.01),bcl-2蛋白表达与临床疗效呈正相关.结论愈障汤治疗CAA的作用机制可能是通过上调凋亡抑制基因bcl-2的表达,从而阻抑了骨髓CD34+细胞的过度凋亡.     

急性早幼粒细胞白血病中白血病细胞CD_(117)的表达

为观察CD117分子在急性早幼粒细胞白血病 (APL)中的表达及探讨其意义 ,采用三色流式细胞术对 2 2例APL骨髓白血病细胞表面CD117的表达进行分析。结果 :CD117在APL中的表达率为 1 9/2 2 ,在急性粒细胞白血病(AML M1)和AML M2 中的表达率分别为 2 /2和 1 8/2 1。 1 9例CD117+ 的APL患者中 ,1 8例CD34 - 、HLA DR- ,1例部分细胞HLA DR+ 。提示 :APL患者有较高水平的CD117表达 ,CD117与CD34 、HLA DR联合进行多色流式细胞术分析 ,可用于APL微小残留病灶的检测。     

硫化砷对急性早幼粒白血病细胞PNAS-2基因表达的影响

目的探讨硫化砷诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞凋亡的分子机制。方法应用基因表达谱芯片、RT-PCR技术，检测硫化砷作用前后NB4细胞、APL原代细胞PNAS-2基因表达的变化。结果基因表达谱芯片杂交显示，硫化砷作用于NB4细胞后，PNAS-2基因表达下调；RT-PCR结果发现，NB4细胞在硫化砷作用后PNAS-2表达有明显下调，并呈时间依赖性；APL原代细胞经硫化砷作用后，PNAS-2表达也呈下降趋势。结论硫化砷能够下调PNAS-2基因在NB4细胞株和APL原代细胞中的表达，推测PNAS-2基因可能是硫化砷治疗APL的靶基因之一。     

硫化砷对急性早幼粒白血病细胞PNAS-2基因表达的影响

目的探讨硫化砷诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞凋亡的分子机制.方法应用基因表达谱芯片、RT PCR技术,检测硫化砷作用前后NB4细胞、APL原代细胞PNAS-2基因表达的变化.结果基因表达谱芯片杂交显示,硫化砷作用于NB4细胞后,PNAS-2基因表达下调;RT PCR结果发现,NB4细胞在硫化砷作用后PNAS-2表达有明显下调,并呈时间依赖性;APL原代细胞经硫化砷作用后,PNAS-2表达也呈下降趋势.结论硫化砷能够下调PNAS-2基因在NB4细胞株和APL原代细胞中的表达,推测PNAS-2基因可能是硫化砷治疗APL的靶基因之一.     

Liposome-mediated Functional Expression of Multiple Drug Resistance Gene in Human Bone Marrow CD34＋ Cells

Myelosuppressionisanimportantdose limitingfactorformostofchemotherapeuticagentsinclinicalpractice.OverexpressionofP glycoprotein (P gp)encodedbyMDR1geneisaccompaniedbyfunctionaldrugresistance.TheexpressionofP gpisconsistent lylowinnormalbonemarrowcells,an…     

白血康治疗急性早幼粒细胞白血病34例体会

目的观察白血康治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）的疗效及毒副作用。方法对34例APL患者给予白血康应用，行诱导缓解治疗；白血康与化疗交替应用行维持缓解治疗，并观察治疗中的毒副作用及防治方法。结果34例APL均获完全缓解（CR），有不同程度的胃肠道反应。结论白血康治疗APL疗效显著，副作用小。     

生长抑素对白血病患者骨髓细胞CD34抗原表达的影响

目的研究生长抑素八肽类似物奥曲肽(Octreotide,SMS;商品名善得定)对白血病患者骨髓单个核细胞CD34抗原表达的影响,探讨生长抑素对白血病细胞的调控作用.方法采用细胞培养、免疫细胞化学技术及图像分析系统,随机计数CD34阳性细胞数,观察分析SMS在白血病患者骨髓单个核细胞中CD34抗原表达的分布和含量.结果在相差倒置显微镜下,加入SMS组与对照组比较,细胞碎片增多,基质细胞减少;CD34抗原主要表达于细胞膜和核膜;SMS组阳性细胞数显著少于对照组(P＜0.01);图像分析光密度值(OD值)SMS组明显低于对照组(P＜0.01).结论在体外SMS可减少造血干/祖细胞特异抗原(CD34)的表达.提示SMS对白血病细胞的生长具有负性调控作用.